4种化合物对离体培养二色胡枝子组织分化的影响

以BADH基因为选择标记基因进行遗传转化最适宜的选择剂、抑菌剂种类和浓度,通过不同浓度NaCl、甜菜碱醛、PEG及甜菜碱醛和NaCl的不同组合等进行胡枝子子叶节分化,茎段增殖以及生根培养,发现NaCl和甜菜碱醛都能抑制二色胡枝子的子叶节分化、茎段增殖和生根,可作为遗传转化中的选择剂。培养基中添加0.8g/L NaCl就能完全抑制二色胡枝子子叶节和茎段增殖,可作为遗传转化过程中子叶节和茎段增殖阶段的选择剂浓度。培养基中添加0.5g/L NaCl能抑制生根,适合作为离体培养生根阶段的选择剂浓度。随着培养基中甜菜碱醛浓度的增加,子叶节分化能力下降,当甜菜碱醛达到1.5g/L时子叶节不再分化,这可作为以甜菜碱醛为选择剂时子叶节分化阶段的最佳筛选。培养基中同时添加NaCl和甜菜碱醛时,NaCl 0.7g/L+甜菜碱醛0.3g/L就抑制了离体培养过程中茎段增殖和生根,比较适合二色胡枝子离体培养时茎段增殖和生根的筛选浓度。对头孢霉素的研究发现:培养基中添加200~300mg/L头孢霉素对离体培养的二色胡枝子子叶节分化影响不大,培养基中添加100mg/L的头孢霉素对离体培养的二色胡枝子茎段增殖和生根无显著影响。     

二种化合物对二色胡枝子形态分化的影响

试验以组织培养为试验手段,以二色胡枝子播种得到的无菌苗作为试验材料,以头孢霉素、氯化钠2种化合物为添加剂,设置不同的浓度梯度,分别添加于二色胡枝子子叶节分化、茎段增殖、茎段生根培养基。结果表明:子叶节分化能力大于茎段,较低浓度的化合物对子叶节分化的影响不大,子叶节分化能力随化合物浓度增大而减弱。2种化合物对茎段增殖抑制作用明显,但随浓度变化不明显。2种化合物对茎段生根的抑制作用较子叶节分化、茎段增殖强。     

二色胡枝子黄酮体外抗氧化活性

通过二色胡枝子黄酮(Lespedeza bicolor flavonoids ,LBF)清除羟自由基、超氧阴离子的效果及抑制猪油、菜油和亚油酸的自氧化来研究其体外抗氧化作用.结果表明:二色胡枝子黄酮对清除自由基有显著作用,且清除率随黄酮浓度的增加而增大;能够明显地抑制猪油、菜油、亚油酸的自氧化,抑制作用随浓度的增大而增强.作为天然的抗氧化剂,二色胡枝子黄酮具有一定开发利用价值.     

二色胡枝子种子硬实特性的研究

二色胡枝子种子硬实性与种子形态差异有明显相关。黑色种子粒级大，千粒重高，种子硬实率达６０．０％，褐色种子粒级小，千粒重低，种子硬实率为２５．３９％。采用多种方法解除硬实效果表明，９０℃热水浸泡种子３０ｍｉｎ左右能起到解除硬实，提高发芽率的效果，硬实解除后黑色种子发芽率（９５．０％）高于褐色种子发芽率（８５．０％），初步认为，种子颜色差异是种子成熟度不同造成的，或者是色素在种皮中的堆积度不同造成的。     

二色胡枝子黄酮抗氧化活性的研究

通过二色胡枝子黄酮(Lespedeza bicolor flavonoids,LBF)清除羟自由基、超氧阴离子的效果及抑制猪油、菜油、和亚油酸的自氧化来研究二色胡枝子黄酮的抗氧化活性.其研究结果表明,二色胡枝子黄酮对清除自由基有显著性作用,且清除率随黄酮浓度的增加而增大;能够极显著地抑制猪油、菜油、亚油酸的自氧化(P＜0.01),抑制作用随浓度的增大而增强.作为天然的抗氧化剂,二色胡枝子黄酮具有一定的开发利用价值.     

二色胡枝子扦插繁殖育苗技术研究

为了推广二色胡枝子的优良无性系,对其扦插繁殖育苗技术进行了研究.结果表明:嫩枝扦插是二色胡枝子无性繁殖的主要方式.春末夏初选择当年生枝条的稍部作为插穗,100 mg·L-1NAA处理插穗2 h,扦插过程在自动间歇喷雾条件下进行,二色胡枝子嫩枝扦插成活率可达87以上.二色胡枝子硬枝扦插较为困难,清水处理的插穗成活率为0,采用NAA 200 mg·L-1处理插穗,成活率达到40.     

张家口地区二色胡枝子优良种源选择及栽培技术研究

[目的]筛选出适合张家口地区种植的二色胡枝子种源。[方法]以引自美国乔治亚州（A1）和河北宣化县（A2）的二色胡枝子为试材,通过播种栽培试验筛选出了适宜当地栽种的二色胡枝子。[结果]8月中旬后A1生长迅速,其株高超过A2。A1在试验地区的株高生长表现好于A2。无论是A1还是A2,间作1行和间作2行的株高和地径生长差异不显著。无论是间作1行还是间作2行,年底时A1的株高生长优于A2,但其地径生长差异不明显。A1间作1行的单丛叶生物量最高,达85.9g。A1间作1行和2行的单位面积叶生物量分别为286.5和464.9kg/hm2,A2的分别为148.1和257.7kg/hm2。与间作1行相比,A1间作2行的叶产量提高了62%。A1和A2的粗蛋白和能量含量差异不显著。[结论]在冀西北地区利用二色胡枝子发展饲料生产,目前最宜于选择的种源是美国乔治亚州种源。     

二色胡枝子总黄酮提取及富集工艺研究

[目的]研究二色胡枝子黄酮的最佳提取工艺与富集参数。[方法]选取分布于内蒙古自治区的二色胡枝子为试验材料,通过单因素试验研究乙醇浓度、料液比、提取时间和提取温度对其总黄酮提取的影响,通过L16（4^4）正交试验确定该黄酮的最佳提取工艺。采用SP700大孔吸附树脂对其进行纯化与富集,通过L9（3^3）正交试验确定该黄酮的最佳富集参数。[结果]二色胡枝子叶中黄酮含量高于茎中黄酮的含量。影响黄酮提取率的因素大小依次为乙醇浓度〉料液比〉温度〉时间。该黄酮的最佳提取工艺为40％乙醇、温度70℃、料液比1：30、时间3．0h。提取率为5．228％。该黄酮的最佳富集参数为进样速度1．5ml／min、80％乙醇洗脱、洗脱速度2．0ml／min。[结论]该研究为进一步开发二色胡枝子资源提供参考依据。     

添加乳酸菌和纤维素酶对二色胡枝子青贮品质的影响

【目的】探讨适宜添加剂及其用量对二色胡枝子青贮发酵品质的影响,扩大冬季缺草季节优质饲草料来源。【方法】以二色胡枝子(Lespedeza bicolor)为原料,添加不同量乳酸菌(2.5,5.0和7.5 g/t)、纤维素酶(活性16 950 U/g,添加量分别为3 200,6 400和9 600 U/t)及纤维素酶和乳酸菌混合物(2.5 g/t+3 200 U/t,5.0 g/t+6 400 U/t和7.5 g/t+9 600 U/t)进行塑料袋真空青贮,青贮后进行化学分析。【结果】所有处理组二色胡枝子中茎叶结构保持完整,添加乳酸菌或纤维素酶后,青贮料中中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)含量都低于对照,乳酸菌和纤维素酶混合添加对青贮料中NDF和ADF影响不明显。与对照组相比,添加剂均不同程度地降低了二色胡枝子青贮料的pH值,且氨态氮含量也明显降低(P<0.05),其中5.0 g/t乳酸菌组降低效果最明显。从对营养成分及有机酸的影响来看,3 200 U/t纤维素酶处理组干物质损失率在所有处理组中最小;5.0 g/t乳酸菌+6 400 U/t纤维素酶处理组青贮料中粗蛋白含量和真蛋白含量均高,表明其对青贮料蛋白保存率高。9 600 U/t纤维素酶处理组总酸含量显著高于对照组(P<0.05),丁酸含量最高,发酵品质较差。【结论】乳酸菌、纤维素酶及两者混合添加均不同程度地改善了二色胡枝子青贮发酵品质,其中乳酸菌的效果最好。而纤维素酶添加量较高时产生丁酸较多,乳酸菌和纤维素酶混合添加不利于干物质保存,对二色胡枝子青贮发酵品质改善不明显。     

短梗胡枝子的组织培养研究（摘要）

[目的]研究短梗胡枝子（Lespedeza cyrtobotrya）的组织培养。[方法]以短梗胡枝子种子为材料,对其组织培养进行了系统研究。[结果]2.1%次氯酸钠灭菌8min,发芽率较高,且污染率为0;在初代培养中,基础培养基为MS,6-BA对分化系数影响达到显著水平,适宜的增殖培养基为MS＋1.00mg/L6-BA＋0.10mg/LNAA＋0.01mg/L2,4-D,分化系数可达6.69;在继代培养中,适宜的培养基为MS＋1.00mg/L6-BA＋0.05mg/L2,4-D;在生根培养中,IBA浓度为0.50mg/L时,生根率和平均生根数都最佳。[结论]为进一步开展胡枝子基因工程遗传改良提供了理论依据。     

短梗胡枝子的组织培养研究

[目的]研究短梗胡枝子（Lespedeza cyrtobotrya）的组织培养。[方法]以短梗胡枝子种子为材料,对其组织培养进行了系统研究。[结果]2.1%次氯酸钠灭菌8 min,发芽率较高,且污染率为0;在初代培养中,基础培养基为MS,6-BA对分化系数影响达到显著水平,适宜的增殖培养基为MS＋1.00 mg/L6-BA＋0.10 mg/LNAA＋0.01 mg/L2,4-D,分化系数可达6.69;在继代培养中,适宜的培养基为MS＋1.00 mg/L6-BA＋0.05 mg/L2,4-D;在生根培养中,IBA浓度为0.50 mg/L时,生根率和平均生根数都最佳。[结论]为进一步开展胡枝子基因工程遗传改良提供了理论依据。     

二色补血草组织培养快速繁殖技术研究

对二色补血草组培快繁技术进行研究,结果表明,以MS培养基中加入6-BA1.0mg/L、NAA0.2mg/L的激素组合处理后的叶丛增殖倍数最大,达2.94。生根培养时以采用不含IBA的培养基为宜,生根率可达80%。经强光直射炼苗的二色补血草试管苗的移栽成活率达到82.5%,显著高于未经强光炼苗的试管苗移栽成活率。     

水肥耦合对辽西北沙地胡枝子苗木生物量的影响

采用312-D最优饱和设计,在辽西北典型的半干旱沙地地区开展了水肥耦合试验,研究了不同水肥处理对章古台地区1年生胡枝子幼苗生物量的影响,建立了胡枝子生物量的水肥回归数学模型.结果表明:不同水肥耦合对胡枝子生物量有显著影响,生物量最高值(43.47 g)出现在高水中氮次低磷组合,即土壤含水率17.52%,施氮量266.8...     

二色补血草的组织培养和离体快繁研究

[目的]为二色补血草的快速繁殖技术提供科学指导。[方法]以二色补血草的子叶与胚轴作为外植体,建立快速繁殖体系,研究不同激素浓度对诱导愈伤组织、不定芽以及生根率的影响。[结果]不同激素浓度的培养基均能使外植体不同程度地生成愈伤组织及不定芽;生根培养基中只有A、B、H、I组有不定根产生,其余组均无不定根产生。[结论]以子叶为外植体,愈伤组织和不定芽的最佳诱导培养基分别为：Ms＋O．7mg/L6-BA＋0.1mg/L NAA、MS＋0．5mg／L6-BA＋0．1mg／LNAA;以胚轴为外植体,愈伤组织和不定芽的最佳诱导培养基为：MS＋0．3mg／L6-BA＋0．5mg／LNAA。诱导不定根的最佳培养基为：MS0。