利用基于单链抗体的ELISA检测蔬菜中杀螟松残留

为建立蔬菜中杀螟松残留快速检测方法,首先测定前期通过核糖体展示筛选所获得的抗杀螟松单链抗体的亲和力以及该抗体与其他有机磷农药的交叉反应率,然后建立基于该抗体的酶联免疫分析(ELISA)测定实际蔬菜样品中杀螟松残留的方法。研究表明:单链抗体ScFv-AF132与杀螟松的解离平衡常数为2.66×10~(-10) mol/L,与其他有机磷农药的交叉反应率≤0.17%。测得3种重庆市市售蔬菜的杀螟松残留,分别为0.532、0.004 21、0.235 mg/kg。样本添加回收率试验显示,平均回收率介于90.3%～112.8%,RSD(相对标准差)≤2.26%,说明本方法可靠,能在实际蔬菜样品杀螟松残留的快速检测中得到应用。     

基于特异性对硫磷单克隆抗体的间接竞争酶联免疫吸附分析方法建立

[目的]制备特异性识别对硫磷(PA)的单克隆抗体,建立其间接竞争酶联免疫吸附分析方法(ic-ELISA),为实现对硫磷的农残快检提供技术支持.[方法]以化合物4-(二乙氧基硫代磷酸酯基)苯甲酸为半抗原,分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联制备人工抗原,免疫7周龄Balb/c雌性小鼠,取抗血清效价最高、特异性最优小鼠的脾脏细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,采用间接酶联免疫方法(i-ELISA)及ic-ELISA分别评价融合细胞株的阳性和特异性,通过有限稀释法筛选稳定分泌对硫磷抗体的单克隆细胞株.再通过棋盘格试验筛选出抗原抗体最佳工作浓度组合建立对硫磷ic-ELISA标准曲线,并基于对硫磷单克隆抗体与各结构类似物的交叉反应率,评估ic-ELISA的特异性.采购西红柿样品进行对硫磷的添加回收试验,运用气相色谱法(GC)验证ic-ELISA的准确性.[结果]成功合成对硫磷人工抗原PA-BSA和PA-OVA,经5次免疫后融合小鼠的血清效价为8×103;通过有限稀释法筛选获得灵敏度高、特异性最强的对硫磷单克隆细胞株4F11A10.以2μg/mL包被抗原PA-OVA、0.25μg/mL细胞株4F11A10分泌抗体为最佳抗原抗体工作浓度组合,建立对硫磷ic-ELISA及其标准曲线,其半抑制浓度(IC50)为50 ng/mL,检测范围(IC20~IC80)为2.34~300 ng/mL;所建立的对硫磷ic-ELISA与5种有机磷农药(丙溴磷、杀扑磷、倍硫磷、水胺硫磷和甲拌磷)均无交叉反应.对比ic-ELISA和GC测定西红柿样品中对硫磷的添加回收试验结果,发现ic-ELISA的添加回收率为84.86%~100.27%,GC的添加回收率为97.60%~106.40%,两种方法的检测结果一致性较好.[结论]建立的ic-ELISA可用于快速检测蔬菜、水果等农产品中的对硫磷残留.     

气相色谱法测定草莓中9种有机磷农药残留

研究了草莓中的9种有机磷农药(包括甲胺磷、乙酰甲胺磷、治螟磷、氧乐果、马拉硫磷、杀螟硫磷、对硫磷、丙溴磷、三唑磷)残留量的气相色谱测定方法。采用乙腈提取,DB-1701P柱色谱分离,FPD检测器检测,9种有机磷农药在17 min内获得良好的分离,线性相关系数r2为0.992 51~0.999 92,检测限可达0.01~0.04 mg/kg,当添加水平为0.4 mg/kg时,回收率范围为83.2%~102.8%。该法快速灵敏,且易操作。     

液相色谱-串联质谱法检测黄瓜中5种有机磷农药残留

建立液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)同时检测黄瓜中敌百虫、乐果、敌敌畏、杀螟硫磷、毒死蜱5种有机磷农药残留的方法。样品经过丙酮提取,弗罗里硅土净化,以甲醇-水(水相含0.1%甲酸)为流动相梯度洗脱,采用ZORBAX SB-C18(5μm×2.1 mm×150 mm)色谱柱分离,电喷雾离子化正模式(ESI+)离子化,多反应监测模式(MRM)下测定。结果显示:方法标准曲线线性良好,R2≥0.998;乐果与敌敌畏的定量限为0.002 mg.kg-1,敌百虫、杀螟硫磷和毒死蜱的定量限为0.01mg.kg-1;回收率为72%～98%,相对标准偏差(RSD)≤3.6%。表明:该方法可实现对5种有机磷农药的同时快速测定,目标农药的响应值高,检测限低,能够为生食蔬菜风险评估研究提供准确有效的数据支持。     

泉州地区蔬菜有机磷农药残留检测分析

2017年采用酶抑制率法对泉州12个县(市、区)的1 033个蔬菜样品进行有机磷农药残留情况检测,25个阳性样品再进行定性定量检测,有4个样品农药残留超标。结果表明:2017年泉州地区蔬菜中有机磷农药残留抽样检测合格率为99.60%,超标率为0.40%;有机磷农药残留超标比较严重的为叶菜类;造成蔬菜有机磷农药残留超标的几种化合物主要是杀螟硫磷、甲拌磷、丙溴磷和水胺硫磷,其中杀螟硫磷超标最严重。     

气相色谱同时测定大米中杀螟硫磷、对硫磷残留量的不确定度评定

对气相色谱(GC)法测定大米中杀螟硫磷、对硫磷测定结果的不确定度进行评定.并对不确定度来源进行分析与量化.研究结果表明,样品中杀螟硫磷残留M的合成不确定度和扩展不确定度分别为0.0030,0.0060 mg/kg (k=2),对硫磷残留物的合成不确定度和扩展不确定度分别为0.0022.0.0044 mg/kg (k=2...     

气相色谱法对茶叶中有机磷农药不同净化方法的研究

为研究茶叶不同前处理对气相色谱法检测有机磷农药的影响,将茶叶样品用乙酸乙酯-正己烷(1+1,体积比)溶液振荡提取有机磷,用ENVI-Carb法的线性范围为10～1000μg/L,样品加标浓度为50、100、500μg/kg 3个水平时,回收率敌敌畏为72.5%～101.6%、甲拌磷为80.3%～109.4%、甲基毒死蜱为85.6%～107.4%、毒死蜱为75.6%～102.7%、杀螟硫磷为75.4%～106.9%、对硫磷为73.5%～107.1%、水胺硫磷为76.5%～104.7%。该方法满足茶叶中有机磷农药的分析要求。     

毛细管短柱气相色谱法测定辛硫磷等有机磷农药残留

建立了简便、快速同时测定蔬菜、水果中辛硫磷与杀螟硫磷、水胺硫磷、倍硫磷有机磷农药残留量的气相色谱法。以乙腈为萃取溶剂,萃取净化,采用短毛细管柱（DB-XLB,10 m×0.25 mm×0.25μm）、气相色谱火焰光度法同时测定了油桃、大白菜、芹菜、甘蓝等几种水果、蔬菜中的辛硫磷与杀螟硫磷、水胺硫磷、倍硫磷农药残留。添加回收率在85.3%-122.7%,相对标准偏差为0.43%-5.0%,在0.04-4.0 mg/L时有良好的线性关系（r^2〉0.9915）,检出限为0.01-0.04 mg/kg,能满足常规检测及农产品安全分析测定要求。     

番茄中14种有机磷农药残留的毛细管气相色谱测定

建立了番茄中敌敌畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、氧乐果、乐果、毒死蜱、甲基对硫磷、马拉硫磷、杀螟硫磷、对硫磷、甲基异柳磷、水胺硫磷、杀扑磷共14种有机磷农药的毛细管气相色谱测定方法。样品经乙腈提取,DB-1701P柱色谱分离,FPD检测器检测,基质匹配外标法定量。14种有机磷农药在内0.05~1.00 mg/L范围内均具有良好的线性关系,相关系数不低于0.998 2,加标回收率为80.6%~109.5%,相对标准偏差为4.6%~11.3%。该方法具有简单、快速、灵敏度高和定性准确等优点,满足残留分析的要求。     

气相色谱法快速测定大米粉中毒死蜱和杀螟硫磷农药残留量

[目的]建立同时对大米粉中毒死蜱和杀螟硫磷残留量快速测定的气相色谱法(GC-FPD)。[方法]大米粉经过乙腈超声辅助提取后,加入氯化钠盐析,浓缩,取上清液过膜上机。[结果]毒死蜱和杀螟硫磷在0.01～0.40 mg/kg呈现出良好的线性关系,相关系数均可达0.999,检出限均为0.01 mg/kg。在此范围内,毒死蜱加标回收率在89.5%～105.7%,相对标准偏差(RSD)为6.96%,杀螟硫磷加标回收率在87.9%～104.8%,RSD为6.79%。通过参加辽宁出入境检验检疫局检验检疫技术中心、辽宁省检验检疫科学技术研究院组织的全国性大米粉中有机磷农药残留检测能力验证(CNAS),经组织方统计分析,毒死蜱和杀螟硫磷均为满意结果。[结论]该方法可准确定量测定大米粉中毒死蜱和杀螟硫磷残留量,应用于实际检测工作,效果很好。     

宁波市地产蔬菜5种重金属点风险评估

[目的]了解宁波市地产蔬菜重金属残留的风险水平。[方法]对宁波市2014—2015年地产蔬菜的843批次样品中铅、镉、铬、汞、砷5种重金属的残留量进行检测,并根据国家标准《GB 2762—2012食品安全国家标准食品中污染物限量》最大残留限量(MRL)和(FAO)/(WHO)食品添加剂联合专家委员会(JECFA)推荐的健康风险评价模型进行风险评价。[结果]膳食暴露评估表明,单一重金属风险从小到大依次为砷、汞、镉、铅和铬,其中铅、镉、汞、砷风险商≤100%,表示风险可以接受;铬的风险商为139%,表明有一定的风险,但考虑到铬的价态以及摄入量的规定,风险程度不高。[结论]比较MRL与膳食暴露评估方式,MRL直接快速,适合日常快捷使用,膳食暴露评估计算相对比较复杂,需要辅助其他参数,参数越精准,评价越可靠。     

渭南市市售蔬菜有机磷农药残留状况分析

[目的]了解陕西省渭南市市售蔬菜有机磷农药残留情况.[方法]采用随机与定点抽样的方法采集蔬菜14个品种共140份样品,按照GB/T 5009.20-2003方法进行10种有机磷农药残留检测.[结果]共检测出毒死蜱、甲胺磷、氧化乐果、甲拌磷、乙酰甲胺磷、对硫磷6种有机磷农药;蔬菜有机磷农药检出率为26.43％,超标率为20.71％.[结论]渭南市市售蔬菜存在有机磷农药残留问题,应加强农药使用的监管,确保农产品安全.     

湖北省蔬菜病毒病主要毒原种类检测

采用斑点酶联免疫吸附法(Dot-ELISA)和RT-PCR法对采自湖北省7个地区的966份疑似感染病毒的蔬菜样本进行黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt virus,TSWV)、番茄花叶病毒(Tomato mosaic virus,ToMV)、芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)、蚕豆萎蔫病毒(Broad bean wilt virus,BBWV)、黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)共7种病毒的检测。结果显示检出阳性样本695份,占总样本数的71.9%。其中,十字花科蔬菜上主要毒原为TuMV,检出率高达86.4%,其次为CMV,检出率为26.7%;茄科、葫芦科和豆科蔬菜上主要毒原均为CMV,检出率分别为34.3%、59.2%和56.2%。CMV几乎能侵染所有蔬菜,为湖北省蔬菜病毒病的主要毒原。在检出的6种病毒中,存在TuMV+CMV、TuMV+BBWV、TuMV+CMV+BBWV、CMV+BBWV、CMV+ToMV和CMV+BBWV+TSWV+TMV等6种复合侵染类型,其中TuMV+CMV为十字花科蔬菜上的主要复合侵染类型,复合侵染率为23.8%,其他蔬菜上主要侵染类型为CMV+BBWV,复合侵染率为28.0%。     

蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的调查分析

对经快速检测法检测为超标的200个蔬菜样品,利用气相色谱法进行了有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量分析。结果表明:蔬菜样品中检出了国家明令规定不得在蔬菜上使用的高毒农药,如甲胺磷、对硫磷、甲拌磷、克百威等。     

拟除虫菊酯农药在黄瓜、蕃茄、茄子和菜花上的残留降解

近两年来进行了拟除虫菊酯农药在黄瓜、蕃茄、茄子和菜花上的残留降解试验。四种农药在这些蔬菜上的起始残留浓度为74.7～354.0ppb,远低于在叶菜上的浓度,一般不超过所推荐的农药卫生标准。四种农药在这些蔬菜上的降解速度很快,其半衰期为0.50～3.51天,与在青菜和豇豆上的降解半衰期基本一致。虽然黄瓜、蕃茄和茄子属多次采收性蔬菜,但因起始残留浓度低和降解速度快,正常使用这些农药不会造成该类蔬菜(包括菜花)的显著污染而影响人体健康。     

云南通海蔬菜区土壤和蔬菜中重金属及农药残留分析

[目的]为云南省蔬菜安全生产和可持续发展提供科学依据。[方法]采用单因子指数法和综合污染指数法,分析云南省通海县蔬菜区土壤样品和蔬菜样品中重金属及农药残留,评价环境质量。[结果]蔬菜种植区大部分土壤中Pb、Hg、As、Cr含量在评价标准范围内,个别区域Cr含量在警戒线范围内。总体上,土壤Pb、Hg、As、Cr多因子综合污染指数为0.64,小于0.70,污染等级属于安全级别。土壤农药残留检出氯氰菊酯和氯氰戊酯浓度分别为0.063 6、0.017 4 mg/kg。蔬菜农药残留检出百菌清浓度0.037 mg/kg。蔬菜亚硝酸盐含量低于国家标准(4 mg/kg)。[结论]通海县蔬菜地土壤环境和蔬菜的农药残留情况较理想。     

2013年贵阳市蔬菜中农药残留情况

[目的]对贵阳市蔬菜农药残留量进行检测和分析,了解贵阳市蔬菜中农药残留情况.[方法]2013年1～ 12月在贵阳市的蔬菜生产基地、批发市场、农贸市场及超市随机抽取蔬菜共200份,按农业行业标准NY/T 761-2008《蔬菜和水果有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定》进行有机磷、有机氯及拟除虫菊酯类农药30项检测.依据GB 2763-2012《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》进行限量评价.[结果]200份蔬菜农药检出率和超标率分别为38.5％和4.5％.检出超标的农药有：氧乐果、毒死蜱、三唑磷、氯氟氰菊酯、三唑酮、甲氰菊酯和氯氰菊酯.农药中毒死蜱和腐霉利检出率最高,分别为5.5％和5.0％;菜的种类中叶菜类的检出率最高,为54.4％;四季度中第二季度的合格率最低,为93.8％;采样点中批发市场的合格率最低,为93.7％.[结论]贵阳市蔬菜中农药残留情况不容乐观,应采取有效措施,加强蔬菜的监督管理,加大蔬菜种植、销售环节的监测力度,确保市民食用蔬菜的安全.     

晋中市部分蔬菜中重金属含量及其健康风险

为研究蔬菜重金属污染状况和蔬菜安全水平,对晋中市10种蔬菜中Hg、Pb、Cd、Cr、As等5种重金属元素的含量进行了测定，并参照国际放射防护委员会（ICRP）给出的限定值为标准，对重金属含量超标的蔬菜进行了健康风险评价。结果表明：晋中市部分蔬菜中铅含量超过国家限定值（GB 18406.1-2001），风险评价结果表明存在Pb污染的蔬菜对人体的健康风险为1.271×10-7·a-1，低于国际放射防护委员会ICPR标准，表明食用蔬菜所引起的健康风险甚微,不会对暴露人群构成明显的危害。     

重庆涪陵区市售蔬菜硝酸盐和亚硝酸盐含量及食用安全性评价

为了了解重庆涪陵区蔬菜硝酸盐和亚硝酸盐含量状况,于2010年3～4月选取涪陵区5个主要蔬菜市场采集蔬菜样品,共5类24个品种120份样品。采用紫外分光光度法测定蔬菜中硝酸盐含量,采用GB/T15401-1994《水果、蔬菜及其制品中亚硝酸盐含量的测定》测定蔬菜中亚硝酸盐含量。结果显示：有5.8%的蔬菜样品受到硝酸盐轻度污染,有22.5%的蔬菜样品受到硝酸盐中度污染,有28.3%的蔬菜样品受到硝酸盐重度污染,有33.3%的蔬菜样品受到硝酸盐严重污染;蔬菜亚硝酸盐含量较低,合格率达95.9%;不同种类蔬菜硝酸盐含量差异较大,其硝酸盐含量依次为叶菜类〉根菜类〉茎菜类〉果菜类〉花菜类;不同品种蔬菜中硝酸盐含量存在差异,同一品种蔬菜不同的样品间硝酸盐含量也有差异。     

蔬菜中重金属含量及其评价

选取南昌市蔬菜批发市场中有代表性的3大类24品种243个蔬菜样本为监测对象,分析其中重金属Cu、Zn、Pb、Cd含量。结果表明,南昌市售蔬菜中均含有4种重金属,Cu、Zn含量较低,远低于食品卫生标准,部分样品存在Pb、Cd超标现象。在评价蔬菜中重金属含量对人体健康的影响时,不仅要正确评价重金属超标样品发生的可能性,还要评价多种重金属对蔬菜品质的安全程度。采用内梅罗指数对同一蔬菜品种中重金属含量进行表征,突出了最大超标样品的危害,能在一定程度上反映出重金属超标样品发生的可能性,较采用算术平均值表征其中重金属含量更为合理。同时,重金属污染土壤的评价方法(综合污染指数法)也能有效地反映蔬菜中多种重金属对其食用安全性的影响。评价结果说明,从食用蔬菜的安全角度考虑,多吃瓜果类蔬菜比吃叶菜和根茎类蔬菜更加安全。