鸡源弯曲菌的分离鉴定和耐药性检测

为了解弯曲菌在肉鸡养殖场中的流行和耐药情况,于2018年12月至2019年6月从广东省某肉鸡养殖场随机采集泄殖腔拭子140份,进行弯曲菌的分离鉴定、药敏试验和耐药基因的检测.结果共分离到75株弯曲菌,分离率为53.6％,其中结肠弯曲菌的分离率为30％,空肠弯曲菌的分离率为23.6％,结肠弯曲菌为优势弯曲菌.药敏试验显示...     

鸡源结肠弯曲菌耐药性分析

为了解江苏省鸡源结肠弯曲菌的流行情况和药物敏感性,对江苏省不同规模化养鸡场、农贸市场和超市的鸡泄殖腔样品和鸡肉产品进行结肠弯曲菌的分离及PCR鉴定;采用纸片扩散法测定分离株对17种抗菌药物的敏感性。结果显示,从750份样品(禽肉产品和泄殖腔棉拭子)中分离到81株结肠弯曲菌,分离率为10.8%。耐药性试验结果显示,80%以上菌株对头孢曲松、妥布霉素、诺氟沙星、环丙沙星、林可霉素和甲氧苄氨嘧啶耐药,其中甲氧苄氨嘧啶耐药率达99%,对美罗培南和氟苯尼考保持高度敏感。所有测试菌株出现多重耐药,优势耐药谱为LIN/CRO/CN/T/NOR/CIP。调查结果为结肠弯曲菌防控提供参考依据。     

肉鸡养殖加工中沙门菌和弯曲杆菌污染研究

为了解肉鸡屠宰前后携带沙门菌和弯曲杆菌情况和季节变化规律,评价肉鸡食源性致病菌污染风险,采用随机抽样的方法采集环境和肉鸡样本,按照国家标准检测养殖环境、活鸡肛拭子和肉鸡胴体的沙门菌和弯曲杆菌。结果:沙门菌总阳性率21.5%,其中鸡舍环境样本阳性率4.4%,活鸡肛拭子阳性率12.0%,屠宰后肉鸡胴体阳性率37.2%,主要为肠炎沙门菌和哈达尔沙门菌。弯曲杆菌总阳性率35.0%,其中活鸡肛拭子阳性率31.3%,肉鸡胴体阳性率38.7%,经鉴定空肠弯曲杆菌占63.7%,结肠弯曲杆菌占36.3%。不同样本沙门菌和弯曲杆菌月检出率趋势基本一致。结论:肉鸡沙门菌和弯曲杆菌污染均较严重,污染源于活鸡带菌,并于屠宰环节交叉污染后扩大,检出率随季节和温度出现规律性波动。     

江苏地区鸡源弯曲杆菌分离鉴定及耐药性研究

为了解江苏地区鸡源弯曲杆菌的流行和耐药状况,采集养殖场及农贸市场鸡泄殖腔棉拭子样品和超市鸡肉样品进行空肠弯曲杆菌、结肠弯曲杆菌的分离与鉴定,对分离菌株采用纸片扩散法检测其耐药情况。结果显示:泄殖腔棉拭子样品弯曲杆菌总分离率为38.68%(205/530),其中空肠弯曲杆菌和结肠弯曲杆菌阳性率分别为27.36%(145/530)和11.32%(60/530);鸡肉样品中弯曲杆菌总分离率为45.33%(68/150),其中空肠弯曲杆菌和结肠弯曲杆菌阳性率分别为30.00%(45/150)和15.33%(23/150)。所有样品空肠弯曲杆菌分离率极显著高于结肠弯曲杆菌(P0.01),就泄殖腔棉拭子样品而言,养殖场样品弯曲杆菌总分离率显著高于农贸市场样品(P0.05),泄殖腔棉拭子样品与鸡肉样品弯曲杆菌分离率无显著性差异(P0.05)。耐药检测结果显示,弯曲杆菌对9大类27种抗生素耐药率在80%以上的有6种,分别为头孢噻肟、头孢曲松、诺氟沙星、环丙沙星、甲氧苄胺嘧啶和克林霉素,所有菌株表现出多重耐药现象,耐药谱主要集中在12耐、13耐和14耐。研究表明,江苏地区鸡源弯曲杆菌流行普遍,分离菌株存在耐药现象且多重耐药情况较严重。     

禽源空肠弯曲杆菌ERIC-PCR分型及毒力因子研究

[目的] 通过对禽源空肠弯曲杆菌分子分型和毒力研究,了解禽源空肠弯曲杆菌在禽肉产品生产过程中的主要传播途径和携带的主要致病因子。[方法] 对从家禽养殖场、屠宰场等采集的720份泄殖腔拭子和禽肉表面拭子样品分离的311株空肠弯曲杆菌进行ERIC-PCR分型和16种毒力因子检测。[结果] 禽源空肠弯曲杆菌的分离率为43.19%;肉鸡生产链中空肠弯曲杆菌沿生产链传播,且有优势菌株型;90%以上分离菌株携带11种毒力基因。[结论] 肉鸡生产链中空肠弯曲杆菌存在水平传播现象,且没有外源性污染;16种毒力基因中,14种毒力基因的携带率均在50%以上。加强禽源空肠弯曲菌的监测是控制空肠弯曲菌的前提,对公共卫生具有重要意义。     

肉鸡空肠弯曲杆菌的监测与分析

本文对集约化肉鸡场空肠弯曲杆菌流行状况进行监测与分析。1 981份样品中,JM地区的肉鸡空肠弯曲杆菌阳性率为6.48%~7.48%,JZ地区的肉鸡空肠弯曲杆菌阳性率为9.45%~9.91%,JN地区的肉鸡空肠弯曲杆菌阳性率为14.6%~16.9%。17种抗菌药中,对36株肉鸡空肠弯曲菌分离株高度敏感的是:阿米卡星(86.1%)、链霉素(91.7%)、庆大霉素(94.4%)、卡那霉素(83.3%)、阿奇霉素(86.1%)、头孢噻肟(83.3%),另外有3种抗菌药对肉鸡空肠弯曲杆菌表现出较好的敏感性,分别是红霉素(61.1%)、氨苄西林(78.8%)、青霉素(69.4%),其它临床常用抗菌药对36株肉鸡空肠弯曲杆菌则表现出较强的耐药性。JM地区空肠弯曲杆菌分离株的耐药谱为7耐至10耐,JZ地区空肠弯曲杆菌分离株的耐药谱为8耐至12耐,JN地区空肠弯曲杆菌分离株的耐药谱为7耐至11耐。研究结果证明,不同地区肉鸡中空肠弯曲杆菌的流行和耐药状况呈现多样化。     

江苏某肉鸡屠宰场弯曲菌耐药性及aadE-sat4-aphA-3耐药基因簇分布分析

为了解江苏某肉鸡屠宰场弯曲菌分离株耐药性及氨基糖苷类耐药基因簇aadE-sat4-aphA-3的分布特点,本研究采用药敏纸片法对肉鸡屠宰场117株弯曲菌分离株进行9大类26种抗生素的耐药性检测。结果显示,117株菌对链霉素和卡那霉素耐药的菌株占93.2%(109/117),对头孢氨苄耐药菌株占96.6%(113/117),对氟喹诺酮类药物耐药菌株占比均大于89.7%(105/117),对碳青霉烯类及氯霉素类药物较为敏感,且94%(110/117)的菌株表现出多重耐药性。采用PCR方法检测氨基糖苷类耐药基因簇aadE-sat4-aphA-3的分布情况。结果显示,有90株弯曲菌(空肠弯曲菌17、结肠弯曲菌73)检出了aadE-sat4-aphA-3耐药基因簇。进一步采用琼脂稀释法测定了其中20株aadEsat4-aphA-3阳性菌对氨基糖苷类5种药物的最小抑菌浓度(MIC)。结果显示,20株aadE-sat4-aphA-3基因簇阳性弯曲菌中共有12株对庆大霉素耐药,MIC值最高为256μg/mL,共有11株对受试的5种氨基糖苷类药物均耐药,且大部分菌株对阿米卡星、妥布霉素的MIC值≥256μg/mL。表明aadE-sat4-aphA-3基因簇阳性弯曲菌对氨基糖苷类药物有较强的耐药性。综上所述,江苏某肉鸡屠宰场弯曲菌对氟喹诺酮类及氨基糖苷类部分药物耐药性较高且多重耐药现象严重,空肠弯曲菌与结肠弯曲菌中均有aadE-sat4-aphA-3耐药基因簇分布,且部分该耐药基因簇阳性菌株对氨基糖苷类药物耐药性较强。本研究为畜禽养殖临床用药指导提供了参考依据,并为弯曲菌氨基糖苷类药物耐药机理的进一步研究奠定基础。     

多重PCR-变性高效液相色谱检测食品中空肠弯曲菌和结肠弯曲菌

本研究应用多重PCR反应(mPCR)结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术建立食品中空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的快速检测方法.以编码嗜热弯曲菌属的16S rRNA基因、编码空肠弯曲菌的gyrA基因和编码结肠弯曲菌的cdt真基因为靶基因,选择3对引物,建立并优化了鉴别空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的mPCR体系,扩增产物分别为287 bp、159 bp和173 bp.采用22株细菌验证了该mPCR具有特异性.mPCR检测的灵敏度在DNA水平上达到空肠弯曲菌10pg/μL、结肠弯曲菌1 pg/μL;在人工模拟污染样品起始污染浓度为1.5个/mL时,42℃微需氧条件下培养24 h即可被检出.在随机采集的172份冷冻鸡肉类样品中,检出了18份样品为空肠弯曲菌阳性,7份样品为结肠弯曲菌阳性.本研究建立的mPCR-DHPLC方法可特异、灵敏地实现对空肠弯曲菌和结肠弯曲菌的快速检测.     

南非纳塔尔地区商品禽类空肠弯曲菌分离株抗菌药物耐药流行率调查

空肠弯曲菌分离自南非纳塔尔地区登记屠宰场的肉鸡和产蛋鸡,用琼脂稀释法,对从盲肠中取得的空肠弯曲菌进行8种抗菌药物的敏感性试验。共得到155株分离株,其中77株(肉鸡56株,产蛋鸡21株)鉴定为空肠弯曲菌,它们对四环素的耐药率最高:肉鸡分离株为98.2%,产蛋鸡分离株为100%;其次为头孢曲松:肉鸡分离株为96.4%,产蛋鸡分离株为100%;而对环丙沙星和庆大霉素的敏感性很高,环丙沙星敏感率:肉鸡分离株为91%,产蛋鸡分离株为76%;庆大霉素敏感率:肉鸡分离株为98%,产蛋鸡分离株为81%。肉鸡分离株对其它几种抗菌药物的敏感率分别为:红霉素50%,克拉霉素45%,氨苄西林68%,萘啶酸64%;产蛋鸡分离株对其它几种抗菌药物的敏感率分别为:红霉素57%,克拉霉素24%,氨苄西林43%,萘啶酸48%,肉鸡和产蛋鸡对萘啶酸48%。庆大霉素、环丙沙星和四环素的MIC50呈统计学显著差异(P<0.001),庆大霉素的MIC90也呈显著差异(P=0.01)。肉鸡和产蛋鸡分离株的多重耐药率分别为23%和43%。在畜牧业中大量药物治疗对空肠弯曲菌抗菌药物耐药性的发展有一定潜在的影响。     

空肠弯曲菌病的研究进展

空肠弯曲菌(Campylobader jejuni)是近十几年受到国内外学者广泛重视的一种人兽共患病原菌.该菌自1931年首次被发现并命名为空肠弧菌后,相继又称为"相关的弧菌"、肝弧菌、空肠弯曲菌、胎儿弯曲菌空肠亚种等,直到1984年才由Simbert等将其列为弯曲菌的一个独立种,称为空肠弯曲菌.早在1957年King就首次发现本菌与人类肠炎的关系,但直到1977年SKirrow和1979年Blaster分别建立了抑制肠道菌丛的培养基大大提高粪便中该菌的检出率后,世界各地关于空肠弯曲菌的报告才日益增多[1].