鸭坦布苏病毒冻干高免卵黄抗体的研制

本研究用鸭坦布苏病毒病灭活苗三次免疫SPF蛋鸡,收取高免鸡蛋,制备成冻干高免卵黄抗体;用鸡胚中和试验和间接ELISA方法进行效价检测。试验结果显示,第3次免疫后2周,卵黄抗体中和效价为1∶103.5,4、5周达到最高值1∶104.5;间接ELISA方法检测冻干前后的抗体效价结果均为阳性;对鸭坦布苏病毒强毒的攻毒保护率达100%,可为鸭坦布苏病毒的防控提供一种有效的冻干高免卵黄抗体制剂。     

猪伪狂犬病-传染性胃肠炎二联高免血清最佳免疫程序及保存条件的初步筛选

为了获得高效价的猪伪狂犬病-传染性胃肠炎二联高免血清,试验采用冻融法制备猪免疫血清,ELISA阻断法、血凝试验及血凝抑制试验分别检测各组猪伪狂犬病病毒、猪传染性胃肠炎病毒血清抗体效价,比较试验组及空白对照组两种病原的血清抗体效价。将两种病原抗体效价最高组血清分别置不同温度保存不同时间检测其抗体效价,探讨最适保存条件。结果表明:S6组的两种病原血清抗体效价最高,猪伪犬病病毒血清OD630值为0.352、猪传染胃肠炎病毒血清抗体效价为1∶64;试验组与空白对照组之间、S6组与其他试验组之间抗体效价差异显著。说明S6组为此次探讨的猪伪狂犬病-传染性胃肠炎二联高免血清的最佳免疫程序,通过30 d的基础免疫及10~15 d的强化免疫能获得较高效价的猪伪狂犬病病毒、猪传染性胃肠炎病毒血清抗体。-20℃和4℃分别适合猪伪狂犬病-传染性胃肠炎二联高免血清抗体液的长期和短期保存。     

抗猪瘟高免血清抗体的制备与应用

通过对健康淘汰母猪采用猪瘟细胞苗与猪瘟耐热冻干保护剂活疫苗进行基础免疫和多次强化免疫的方法,制备了抗猪瘟高免血清抗体,并在8个不同规模的猪瘟病例猪场进行了临床应用,治疗606头,其中治愈579头,综合治愈率达到了95.5%。     

抗猪瘟高免血清抗体的制备与应用

通过对健康淘汰母猪采用猪瘟细胞苗与猪瘟耐热冻干保护剂活疫苗进行基础免疫和多次强化免疫的方法,制备了抗猪瘟高免血清抗体,并在8个不同规模的猪瘟病例猪场进行了临床应用,治疗606头,其中治愈579头,综合治愈率达到了95.5%。     

鸭坦布苏病毒冻干卵黄抗体的研制

将鸭坦布苏病毒尿囊液浓缩灭活后制备灭活疫苗,依据制定的免疫程序免疫产蛋鸡,第三次免疫后14天,抗体中和效价≥1∶256,收集高免鸡蛋制备冻干卵黄抗体,并对制备的冻干卵黄抗体进行质量评价。结果表明,制备的冻干卵黄抗体中和效价为1∶90,能有效中和鸭坦布苏病毒,对鸭坦布苏病毒的致病性有较好的预防作用,为鸭坦布苏病毒的预防和治疗提供了一种可行的途径。     

猪瘟-猪蓝耳病-猪圆环2型三联高免血清的制备

进行了制备猪瘟-猪蓝耳病-猪圆环2型三联高免血清的试验。试验采用三种疫苗对试验牛只进行多次免疫后,对其进行颈静脉采血和分离血清,并对所制备的高免血清进行无菌检验和安全性试验,通过间接ELSIA检测血清中的猪瘟、猪蓝耳、猪圆环病毒三种抗体的效价。结果显示,猪瘟、猪蓝耳、猪圆环病毒抗体效价分别达到1：2056、1：1280...     

鸡抗犬瘟热病毒高免卵黄抗体最佳免疫程序及检测方法的筛选

为了获得高效价鸡抗犬瘟热病毒高免卵黄抗体,试验通过设计免疫程序免疫试验蛋鸡和筛选的卵黄抗体效价检测方法对氯仿法提取的卵黄抗体液进行鸡抗犬瘟热卵黄抗体效价检测并比较,筛选鸡抗犬瘟热病毒高免卵黄抗体最佳免疫程序,并作无菌与保存条件的探讨。结果表明:血凝及血凝抑制试验可作为鸡抗犬瘟热卵黄抗体效价的检测方法;按照基础免疫、加强免疫、强化免疫均间隔9 d,免疫剂量分别为1 m L/次、2 m L/次、3 m L/次的免疫程序能获得1∶512的鸡抗犬瘟热病毒卵黄抗体血凝抑制效价,为此次探讨的鸡抗犬瘟热病毒高免卵黄抗体最佳免疫程序,-20℃保存温度适合长期保存氯仿法粗提的鸡抗犬瘟热病毒卵黄抗体液。     

抗猪瘟高免血清的制备及应用

1　抗猪瘟高免血清的制备　选取体况和健康状况一致的试验猪为供试猪进行首次免疫,将供试猪颈部肌注猪瘟兔化弱毒苗10头份/头猪,观察免疫后猪只的精神、食欲等变化。10天后耳静脉采血,Ｄｏｔ-ＥＬＩＳＡ诊断试剂盒测效价达1∶80。二免猪瘟兔化弱毒苗20头份/头猪,15天后采血测效价达1∶320。三免用猪瘟野毒强毒颈部肌注1∶10脾组织悬液10ｍＬ/头,20天后采血测效价达1∶1280。器械消毒准备完成后,颈总动脉放血致死,分离血清,加入2000ｉｕ/ｍＬ双抗,0.01%硫柳汞,即制成抗猪瘟高免血清,分装于-15℃冷冻保存备用。(见表1)表1　抗猪瘟高免血清的制…     

兔抗犬瘟热病毒高免血清的制备及反复冻融对其效价的影响

为制备犬瘟热病毒的高免血清及研究冻融次数对其效价的影响,笔者采用多次皮下免疫试验兔制备兔抗CDV高免血清,并将获得的血清反复冻融,以检测不同冻融次数对其中和抗体效价的影响。结果表明,按本试验的免疫程序获得的兔抗CDV血清中和抗体效价高且稳定;高免血清经反复冻融后浑浊度增加;当冻融次数达40次时,中和抗体效价出现明显下降。     

猪流行性腹泻病毒变异株疫苗免疫剂量和血清中和效价研究

为了研究猪流行性腹泻病毒变异毒株灭活疫苗的免疫剂量及免疫后抗体的中和效价,选择初产母猪于产前42 d首次免疫,后海穴注射,间隔21日以相同剂量和方法加强免疫,免疫剂量分别为0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL和4.0 mL,采集母猪血清和仔猪血清,采用变异强毒株、经典毒株CV777进行血清中和试验分析免疫抗体效价,ELISA抗体检测试剂盒检测血清IgG抗体效价。结果表明,2 mL、4.0 mL免疫剂量组血清抗体与变异毒株中和效价均≥1∶128,与CV777中和效价≤1∶64,二免后母猪血清IgG抗体S/P值均2.0,仔猪断奶时母猪血清抗体S/P≥1.4,0.5 mL、1.0 mL免疫组抗体中和效价、S/P值均较低。确定2 mL为最佳免疫剂量,加强免疫后血清抗体中和效价≥1∶128,对母猪损伤小,经济效益高。     

猪瘟高免血清的研制和初步应用

采集广东本地猪瘟病毒(CSF)强毒株接种基础免疫仔猪,制备特效高免血清.结果表明:高免血清CSF抗体效价高达1:1024.临床治愈率达96.3%,安全可靠,治疗效果显著,适合临床推广应用.     

猪繁殖与呼吸综合征高免血清的制备与临床治疗试验

为筛选免疫效价高的疫苗,获得高免血清并进行临床治疗观察。本试验选用3种猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫健康新西兰大白兔,免疫后分别采血和分离血清,并用猪蓝耳病毒抗体PPA-ELISA检测试剂盒检测血清抗体效价,筛选出抗体效价较高的两种疫苗;免疫猪,制得高免血清对自然发病仔猪进行高免血清治疗试验。免疫兔试验表明,猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(CH-lR株)免疫后血清抗体效价最低,高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(HuN4-F112株)血清(简称高致病疫苗血清)抗体效价比猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗(CH-la株)血清(简称灭活疫苗血清)低,用后两种疫苗免疫猪,血清抗体效价均能达到1∶1280。自然发病仔猪高免血清治疗试验显示,注射高致病疫苗血清对蓝耳病的治愈率为88%,灭活疫苗血清治愈率为76%。结果表明高免血清是无菌、安全的,所得两种血清可用于临床防治猪蓝耳病。     

百色市屠宰猪和市场销售仔猪猪瘟抗体监测报告

采用猪瘟正向间接血凝试验对百色市12个县区621份屠宰猪血清和9个县区84份市场销售仔猪血清进行猪瘟抗体监测。结果显示,621份屠宰猪血清中有551份检出猪瘟抗体,占检测数88.7%,其中有180份抗体效价≥1∶16,占检测数29.0%;84份市场销售仔猪血清中有58份检出猪瘟抗体,占检测数69.0%,其中有3份抗体效价≥1∶16,占检测数3.6%。     

犬细小病毒免疫血清的研制与初步应用

采集广东本地犬细小病毒 (CPV)强毒株接种基础免疫犬 ,制备特效高免血清。结果表明 ,高免血清CPV抗体效价高达 1∶2 3 0 4 0 ,临床治愈率达 94 4% ,安全可靠 ,无毒副作用 ,治疗效果显著 ,适于临床推广应用     

猪瘟细胞苗和脾淋苗免疫效果的对比试验

为了了解生产实践中猪瘟细胞苗和脾淋苗的免疫保护效果,试验将21日龄仔猪分成2组,32头/组,分别用猪瘟脾淋苗和猪瘟细胞苗在21日龄和56日龄时进行首免和二免,并检测首免、二免前1天及二免后42天的猪瘟抗体水平。结果表明:首免后,细胞苗组仔猪猪瘟抗体水平整齐度好于脾淋苗组,二免后两种疫苗组的仔猪猪瘟抗体效价均在1∶32以上。说明2种疫苗的免疫效果无显著差异。     

福建省肉兔体内猪瘟抗体水平的检测

以猪瘟正向间接血凝法对福建省内11个兔场、32群肉兔进行猪瘟抗体水平检测,检测肉免3321只,待检血清541份。结果表明:群体中半数以上待检血清抗体效价达到1∶4的群体有13个,占总群体数的40.6%;群体中半数以上待检血清抗体效价达到1∶8的群体有4个,占总群体数的12.5%;而抗体效价达到1:8的待检血清有62份,占总待检血清数的11.5%。其中有3个群体的部分待检兔血清猪瘟抗体效价达到1∶16和1∶32。表明本地区部分肉兔在饲养过程中,确实感染过HDV。     

不同年龄猪群中猪瘟抗体监测及免疫效果分析

为制订合理的猪瘟免疫程序,本研究采用正向间接血凝试验(IHA)对某规模化猪场进行猪瘟免疫监测和分析。结果表明:猪瘟母源抗体的合格率、抗体效价平均值均存在随着仔猪日龄的增长而呈逐渐下降的趋势;35 d～40 d仔猪母源抗体的合格率达78.79%、抗体平均效价为5.97 Log2;仔猪35 d～40 d实施猪瘟首免,其一免抗体合格率和抗体效价均比20 d首免有所提高;同一窝仔猪的猪瘟母源抗体,有11%窝次的猪差距在3个～8个滴度;母猪猪瘟免疫抗体的合格率,一胎母猪稍低,其它经产母猪基本接近;猪瘟抗体效价的平均值随胎龄增加而升高,并且抗体的离散度则随胎龄增加而缩小。因此,在母猪实施与仔猪同时免疫的猪场,40日龄左右是较佳的首免日期。     

猪瘟活疫苗(种毒)鉴别检验阳性血清制备

为制备猪瘟活疫苗(种毒)鉴别检验阳性血清,本实验将4头非免疫健康猪进行猪瘟活疫苗基础免疫和猪瘟石门强毒株反复强化免疫后,采血分离血清,过滤、分装、冻干、熔封,获得4批产品,并进行了检验和验证。结果显示:物理性状、无菌检验、安全检验、均一性检验、支原体检验、真空度测定均合格;剩余水分均小于4%;特异性检验表明,口蹄疫病毒、猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒、牛病毒性腹泻/粘膜病病毒抗体均为阴性;残余猪瘟病毒免疫荧光和套式RT-PCR核酸检测结果均为阴性;兔体中和效价分别为1∶800、1∶800、1∶800和1∶1 600;对猪瘟兔化弱毒种毒和5种猪瘟活疫苗的验证结果均良好。该4批血清可以用于猪瘟活疫苗(种毒)鉴别检验。     

残数法在猪瘟母源抗体代谢动力学研究中的应用

按日龄采集某场5窝免疫母猪所产仔猪血样259份,运用农业部规定的猪瘟正向间接血凝试验法检测猪瘟抗体效价,并以抗体效价对数对日龄作图。运用了残数法对猪瘟母源抗体代谢动力学进行了研究,建立数学模型,求算出该场哺乳仔猪猪瘟母源抗体代谢动力学参数 ka、k、t1/2（a）和 t 分别是2.2144/d、0.03887/d、7.5 h、和17.83 d。依据猪瘟母源抗体代谢动力学参数 t 为17.83 d,确定该场哺乳仔猪在28~30日龄进行首免,可获得满意的合格免疫率。     

羔羊小反刍兽疫母源抗体消长规律

为合理制定羔羊小反刍兽疫(PPR)的免疫程序,采用中和试验研究了羔羊母源抗体消长规律。结果表明:羔羊出生后7~45 d血清抗体水平较高(抗体效价≥1∶40血清比例均大于80%),抗体保护率达90%以上,其中7~14 d血清抗体水平最高(抗体效价≥1∶40血清比例均大于90%),抗体保护率达100%。14 d以后血清抗体水平开始降低,90 d时血清抗体保护率降到了60%。对于经免场PPR的最佳免疫时间应选择在断奶后30日龄左右,即60日龄断奶,90日龄免疫;90日龄断奶,120日龄免疫。