A型产气荚膜梭菌类毒素疫苗与全菌灭活疫苗的安全性和免疫效力的比较研究

制备了六批兔A型产气荚膜梭菌类毒素疫苗和其全菌灭活疫苗,并且对其安全性和免疫效力进行了比较研究。结果表明,类毒素灭活疫苗无毒副作用,局部刺激小,安全性好于全菌灭活疫苗。免疫效力结果二者无明显差异,两种疫苗的攻毒保护率均不低于4/5,免疫期均在6个月以上。     

宁夏家畜产气荚膜梭菌病病原诊断和疫苗免疫研究

１９９０年宁夏泾源县暴发了以牛急性死亡为特征的传染病,以后疫区逐年扩大,发病数与死亡数日趋增多,１９９７年镀流区扩大到１０余个县,死亡牛２０００多头,同时驴和骡也出现发病,死亡,这种病因不明的“猝死症”已给当地的畜牧业生产造成了较大损失。现已查明,引起以牛为主发生急性死亡的疫病是由产气荚膜梭菌引起的肠毒血症,经用产气荚膜梭菌抗毒素对小白鼠进行中和试验,鉴定出Ａ,Ｃ和Ｄ型肠毒素。     

仔猪产气荚膜梭菌肠毒血症病原分离及疫苗研究Ⅵ.疫苗的本动物免疫效力试验及保存期试验

用实验室制备的仔猪产气荚膜梭菌肠毒血症A型疫苗、C型疫苗和AC型二价疫苗各3批,分别免疫接种初产或无特异性中和抗体的经产怀孕后期妊娠母猪36头.免疫母猪所产仔猪在其采食初乳后,分别攻击致死量的产气英膜梭菌毒素.试验结果表明,3种疫苗对免疫母猪所产仔猪的保护率分别为100%、100%和96.63%.疫苗保存期试验表明,疫苗在2～8℃条件下保存3年,其效力保持不变.     

腐败梭菌α毒素和产气荚膜梭菌ε毒素的 共表达及其免疫效力评价

为获得腐败梭菌α毒素和D型产气荚膜梭菌ε毒素的共表达产物,并鉴定其致死活性和反应原性,评价其免疫保护效力,利用PCR扩增腐败梭菌α毒素和产气荚膜梭菌ε毒素基因Gcsa和Gcpe并克隆至pETDuet-1质粒,转化E.coli BL21(DE3),自诱导培养基诱导这2段基因共表达;用SDS-PAGE和Western-blot以及小鼠毒性试验、抗毒素血清中和试验对表达产物进行鉴定;将诱导后的大肠杆菌灭活,制成铝佐剂疫苗1 m L/只皮下注射免疫家兔2次,测定免疫血清中和抗体效价,用1 MLD的腐败梭菌毒素和D型产气荚膜梭菌毒素分别攻击。结果显示,所构建的E.coli BL21(pETDuet-Gcsa-Gcpe)可以同时表达Gcsa和Gcpe,表达产物能够与腐败梭菌和D型产气荚膜抗毒素血清反应;且具有小鼠致死毒性,只有用2种抗毒素一同作用,才能将其毒性中和;制成灭活疫苗免疫家兔,免疫血清对腐败梭菌毒素的中和抗体效价为2 MLD/0.1 m L,对D型产气荚膜梭菌毒素的中和抗体效价≥50 MLD/0.1 m L;用2种毒素攻击,免疫组家兔全部保护,对照组全部死亡,达到《中华人民共和国兽药典》(2015版)效力检验标准。结果表明,所构建的表达载体可以实现α毒素和ε毒素的活性共表达,本研究为腐败梭菌和产气荚膜梭菌的多联基因工程灭活疫苗的研究提供了实验基础。     

产气荚膜梭菌ε毒素及其疫苗研究进展

产气荚膜梭菌病是由产气荚膜梭菌引起的一种重要的人兽共患传染病,可导致山羊、绵羊等动物的肠毒血症或坏死性肠炎,并且可引起动物脑、心、肺和肾组织的水肿.B型和D 型产气荚膜梭菌所产生的ε毒素是引起动物上述病理变化和死亡的重要因素之一.虽然甲醛灭活的毒素疫苗能对动物产生保护性抗体,但是,灭活苗潜在的安全性原因使其在应用上受到限制.因此,基于ε毒素基因的重组疫苗和弱毒疫苗就成为人们研究的目标.     

重组产气荚膜梭菌α毒素对家兔的安全性和免疫效力评价

为探究重组产气荚膜梭菌α毒素对家兔的安全性和免疫保护效力,本研究构建了含产气荚膜梭菌α毒素基因的重组质粒p VL1393-CPA,并通过BD BaculoGold TM转染试剂盒转染Sf9细胞后,经噬斑纯化获得单克隆重组病毒,将其感染High 5细胞进行表达,表达的重组蛋白经SDS-PAGE和western blot检测,结果显示均获得了45 ku的目的蛋白,即为重组α毒素。将重组α毒素用0.1%甲醛溶液灭活脱毒后与ISA 206 VG佐剂乳化制备亚单位疫苗(抗原含量为20μg/m L),以40μg/只肌肉注射体质量1.5 kg～2.0 kg的家兔,同时设PBS对照组,注射后连续观察7 d,结果显示实验兔临床观察无异常,该疫苗对家兔的安全性良好。随后以20μg/只肌肉注射家兔,免疫21 d后以相同剂量加强免疫一次,同时设佐剂对照组和α毒素对照组,首免21 d、二免14 d时采血分离血清,采用ELISA方法检测免疫兔血清Ig G抗体效价,同时进行二免血清小鼠体内毒素中和试验以及家兔攻毒免疫保护试验,以评价该疫苗对家兔的免疫保护效力。结果显示,疫苗免疫组家兔血清Ig G抗体效价比佐剂对照组...     

犬猝死症--产气荚膜梭菌与肉毒梭菌二联灭活疫苗的研制与应用

近年来在我国军警犬及其它各类犬中 ,出现了一种奇怪的疾病 ,一些经多种病毒弱毒疫苗免疫过的成年健壮犬突然发病死亡 (猝死 )。患犬发病急 ,死亡快 ,多在死前 1h狂燥不安 ,嚎叫 ,四处撞壁 ,转圈运动 ,口吐白沫 ,呼吸急促 ,发抖抽搐 ,卧地不起 ,不时呻吟 ,四肢划动 ,角弓反张 ,     

鸡传染性鼻炎双价灭活疫苗的安全性和免疫效力试验

鸡传染性鼻炎(Infection Coryza,IC)是由副鸡嗜血杆菌(Haemophilus paragallinarum,Hpg)引起鸡的一种快速传播的上呼吸道疾病,育成鸡和产蛋鸡均可发病,可造成育成鸡生长停止,淘汰率增加,产蛋鸡产蛋量减少,从而给养鸡业带来重大经济损失.笔者先后从青岛地区及山东、江苏、河北等省市送检的发病鸡中分离到副鸡嗜血杆菌数十株,所有菌株都经过鉴定,部分菌株进行过定型,多数为A型,少数为C型.为了控制本病的流行和减少养鸡户的经济损失,应用当地分离株研制了鸡传染性鼻炎氢氧化铝胶佐剂双价(A、C型)灭活疫苗和油乳剂灭活疫苗,两种疫苗都获得了满意的免疫效果.     

Duration of immunity in dogs vaccinated against leptospirosis with a bivalent inactivated vaccine

Duration of immunity in dogs induced with current commercial inactivated leptospirosis vaccines and evaluated against experimental infection, to date, has hardly been documented. The purpose of the present work was to assess the duration of immunity in dogs that is attainable with a commercial inactivated bivalent leptospirosis vaccine. For this purpose, young dogs were vaccinated twice followed by challenge with either Leptospira interrogans serovar canicola or L. interrogans serovar icterohaemorrhagiae 5 weeks, 27 weeks or 56 weeks after the second vaccination. For assessment of the duration of immunity, titres of agglutinating serum antibodies were measured before and after challenge, and the effects of challenge on a variety of parameters were determined including reisolation of challenge organisms from blood, urine and kidney. Both challenge strains induced a generalised infection in control dogs, the canicola strain being most virulent. From the results with different parameters it appeared that the two vaccinations induced a high rate of protection from generalised infection with canicola and icterohaemorrhagiae at 5, 27 and 56 weeks after the second vaccination. In addition, after 56 weeks, still a high level of immunity against renal infection with sv. canicola and, as a consequence, urinary shedding of sv. canicola bacteria, was demonstrated. It was, therefore, concluded that with this vaccine, using this vaccination schedule, a duration of immunity of 1 year can be attained against infection with both serovars.     

新支二联苗种毒联合培养和联合免疫的研究

用不同毒株鸡传染性支气管炎病毒(F3株、肾型J株、H120-28/86株、H52、H120株)分别按不同浓度(100倍、400倍、700倍和1000倍)与100倍稀释的Lasota鸡新城疫病毒联合接种到10日龄鸡胚尿囊腔，同时设单独培养作对照，96h后收取尿囊液，用对流免疫电泳法检测鸡传染性支气管炎病毒效价，用血球凝集试验检测尿囊液鸡新城疫病毒效价。结果表明.以NDV100倍和IBV1000倍稀释混合作用后联合培养对二者病毒效价均无明显影响，NDV血凝效价可达1b11，IBV对流免疫电泳沉淀效价可达1b11，效果最佳。然后将上述培养液，用福尔马林溶液对其进行灭活，通过常规途径制备鸡新支二联油乳刑灭活苗。将此苗接种于21日龄雏鸡，接种后0，7，14，21，28，35，42，49d分别检测雏鸡NDV抗体和IBV抗体，检出的抗体平均值分别为2，3.6，4.8，5.8，6.2，6.5，6.8，6.5和2，3.3，4.6，5.9，6、2，6.4，6.6，6.4；攻毒保护率为100％。实验证明。以NDV100倍与IBV1000倍稀释混合作用后联合培养的尿囊液制得的鸡新支二联油乳荆灭活苗可以预防鸡新城疫和鸡传染性支气管炎。     

猪链球菌多价灭活疫苗安全性和免疫原性试验

猪的链球菌感染已成为世界性的猪传染病。在国外 ,多由 D群链球菌的某些血清型特别是 2型猪链球菌 (Streptococci suis)引起猪的败血型和脑炎型链球菌病 [2、3、6、7、8]。而在国内对猪链球菌致病菌的研究证实 ,以 C群的兽疫链球菌为主 ,D群较少[1、4、5] ,E群链球菌则引起慢性链球菌病的关节炎和淋巴结炎 (脓肿 ) [2 ] 。近几年来我们发现 ,有些猪场对各类猪群均进行过链球菌苗的接种 ,但仍然大批发生链球菌病 ,造成大量死亡 ,后来经过对分离的致病菌作分群鉴定 ,同时对发病猪群采血检测群特异性抗体 ,结果发现免疫的疫苗抗原的菌群与当…     

猪蓝耳病灭活疫苗与弱毒疫苗免疫后的抗体水平比较

为比较猪蓝耳病灭活疫苗与弱毒疫苗的免疫抗体水平,本试验在惠城区某猪场随机选取100头仔猪,分成两组,分别免疫猪蓝耳病灭活疫苗与弱毒疫苗,采用ELISA方法检测血清中的抗体水平,并对两组抗体的S/P值进行比较。结果表明,猪蓝耳病弱毒疫苗产生的抗体水平比灭活疫苗高,灭活疫苗免疫效果较差,且抗体持续时间短。本研究为猪场蓝耳病的防控及免疫程序的制定提供参考依据。     

猪细小病毒-伪狂犬病病毒二联油乳剂灭活疫苗的研制

猪细小病毒(Porcine paruovirus，PPV)和伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus，PRV)均是导致母猪发生繁殖障碍性疾病的主要病原，它们在世界范围内广泛分布，造成了巨大的经济损失，严重制约了养猪业的健康发展，已经成为猪病研究的热点。     

猪流感(H_1N_1H_3N_2亚型)二价灭活疫苗试制报告

猪流行性感冒(swine influenza,SI)是由猪流行性感冒病毒(SIV)引起的猪的一种急性、热性和高度接触性的呼吸道传染病,其临床上以突发高热、咳嗽、呼吸困难、衰竭和死亡为特征[1].     

牛用口蹄疫AsiaI—O型双价灭活苗与猪用口蹄疫O型灭活苗对猪的免疫效果比较试验

使用牛用口蹄疫AsiaI-O型双价灭活苗与猪用口蹄疫O型灭活苗分别接种50d商品猪和怀孕90d种猪,免疫前和免疫后的3w及7w进行抗体水平检测。O型口蹄疫采用正向间接血凝试验、AsiaI型口蹄疫采用液相阻断ELISA检测。同时对接种猪进行免疫应激观察。结果显示：猪使用牛用口蹄疫AsiaI—O型双价灭活苗3w后口蹄疫AsiaI的抗体水平十分低,最高只有5％,口蹄疫O型抗体合格率在35％以上;而注射猪用口蹄疫O型灭活苗的O型抗体水平合格率只有35％。而牛用口蹄疫AsiaI-O型双价灭活苗两次接种后,AsiaI和O型抗体水平均达到大于70％的要求。