一测多评法在含生物碱类成分中药质量控制中的应用研究

生物碱(alkaloid)是广泛分布于中药中的一类含氮有机化合物,其显著的药理活性和疗效已被大量研究文献和临床应用证实。在全球抗微生物药物耐药性背景下,生物碱类中药凭借其良好的抗菌、抗病毒活性广受关注。一测多评(quantitative analysis of multi-components by single maker, QAMS)法是一种适用于中药多成分质量控制的检测方法,可在缺少对照品条件下实现对多个待测成分的同步分析检测,在中药质量控制和评价领域得到较好验证和发展。本文梳理近15年QAMS法在生物碱类中药质量控制中的应用情况,系统分析常见问题并提出解决方法,以期为QAMS法的正确应用提供一些参考。     

一测多评法同时测定麻杏石甘口服液中3种成分含量

建立麻杏石甘口服液中盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱和苦杏仁苷3种成分含量的一测多评方法。以盐酸麻黄碱为内参物,建立盐酸伪麻黄碱和苦杏仁苷与盐酸麻黄碱的相对校正因子,分别采用外标法与一测多评法测定3种成分的含量,比较两种方法测得结果的差异,验证一测多评方法的可行性。盐酸麻黄碱与盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷的相对校正因子分别为1.233和2.741,一测多评法与外标法测定结果无显著性差异,相对误差小于0.3%。一测多评法运用于麻杏石甘口服液的含量测定准确可行。     

一测多评法测定蓼博颗粒中4种有效成分的含量

建立中药复方制剂蓼博颗粒中4种有效成分一测多评的定量检测方法,以用于质量评价。以血根碱为内参物,建立白屈菜红碱、没食子酸与穿心莲内酯的相对校正因子,利用校正因子计算白屈菜红碱、没食子酸与穿心莲内酯的含量,实现一测多评;同时采用外标法测定以上4种成分的含量,比较两种方法的差异,验证一测多评法的准确性和科学性。蓼博颗粒中4种成分含量的计算值与实测值无显著差异。表明建立的只用1种对照品同时测定蓼博颗粒中4种有效成分的方法准确、可行,适合中药的多指标质量评价模式的要求。     

白头翁口服液质量标准研究

提高完善白头翁口服液质量标准。优化黄连及盐酸小檗碱的薄层色谱鉴别方法,简化前处理步骤,减小展开剂毒性对人体的伤害。建立白头翁口服液的高效液相色谱法,通过测定关键指标成分盐酸巴马汀及盐酸小檗碱的含量对白头翁口服液进行科学的质量控制。用提高后的标准对市售白头翁口服液质量进行再评价,结果表明,标准的提高有助于判断样品的真伪优劣。     

一测多评法同时测定不同产地淫羊藿提取物中的4种黄酮类成份

建立一测多评( QAMS) 法同时测定淫羊藿提取物中4种黄酮类化合物的含量,并验证了该方法的准确性和可行性。采用C18色谱柱,乙腈-水为流动相,检测波长270 nm,建立朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C与内标物淫羊藿苷的相对校正因子(RCF),比较分析QAMS法与外标法含量测定结果的差异性。结果显示,6批不同产地和批号的淫羊藿提取物中4种黄酮类成分采用一测多评法与外标法的实测值之间无显著性差异。     

HPLC法测定白头翁中皂苷B4含量及其中药材标准化研究

目的：建立HPLC测定白头翁药材中白头翁皂苷B4含量的方法,并比较不同产地、不同生长年份对白头翁皂苷B。含量的影响,以评价白头翁药材质量。方法：HPLC流动相：乙晴：水（28：72）;流速：1．0mL／min;分离柱采用ZORBAXSB—C1B（4．6mm×150mm,5μm）,反相填料;柱温：室温;检测波长：205nm。结果：皂苷B4进样量在0．3125—10μg范围内与吸收峰面积呈良好的线性关系（r=0．9995,n=6）,平均加样回收率为99．74％,RSD=3．28％（n=3）。结论：该方法简便、准确、重现性好,可用于白头翁皂苷B4的含量测定;白头翁中皂苷B4含量以安徽风阳产药材较高,可作道地药材。     

博落回中四种生物碱的薄层鉴别研究

建立博落回药材中四种生物碱的薄层色谱(TLC)鉴别方法。开展利用二甲苯-甲醇(5∶1)展开剂分离鉴别博落回中的原阿片碱、别隐品碱、血根碱和白屈菜红碱;利用氯仿-二甲苯-甲醇-氨水(50∶10∶1∶0.1)展开剂分离鉴别博落回中血根碱和白屈菜红碱;利用环己烷-丙酮(3∶2)展开剂分离鉴别博落回中原阿片碱和别隐品碱的系统研究。结果表明建立的薄层方法简便,准确和稳定,可以用于控制博落回药材的质量。     

UPLC-TUV同时测定双黄连口服液中3种有效成分

建立一种超高效液相色谱法同时测定双黄连口服液中黄芩苷、绿原酸、连翘苷的含量的方法。采用Acquity UPLC H-Class超高效液相系统,Acquity UPLC TUV紫外检测器,BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),柱温25℃,流动相乙腈-0.1%甲酸梯度洗脱,流速0.3 mL/min,进样体积4 uL,检测波长278 nm。结果表明,所检测的3种成分在测定的质量浓度范围内线性关系良好,r值均大于0.999,加样回收率在97%～103%之间,RSD均小于2.5%。试验精密度、重复性、准确性和稳定性良好。该方法简单、高效,灵敏度好,可用于双黄连口服液中3种成分的含量测定。     

新疆一枝蒿口服液的制备工艺优化研究

为了探究新疆一枝蒿口服液的最佳制备工艺,采用水提醇沉法提取新疆一枝蒿中的总黄酮,经单因素、响应面试验获取最佳的制备工艺参数,并通过薄层层析与含量限度测定对新疆一枝蒿口服液建立初步的质量控制。结果表明：新疆一枝蒿最佳制备工艺为料液比1:14,煎煮时间为1.5 h,醇沉浓度为50%。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,含量限度测定黄酮含量范围在28.67～29.59 mg/mL,平均值为29.10 mg/mL,最低限度为23.28 mg/mL。     

博落回中6种生物碱对大鼠和猪醌氧化还原酶2的作用研究

为了研究博落回中6种主要生物碱别隐品碱、原阿片碱、血根碱、白屈菜红碱、二氢血根碱和二氢白屈菜红碱对大鼠和猪肝胞液醌氧化还原酶2(NQO2)的影响,初步筛选出对大鼠或猪NQO2具有诱导或抑制作用的生物碱,探讨其在畜禽体内的代谢机制,建立了大鼠和猪NQO2体外孵育体系,以槲皮素为阳性对照,噻唑蓝(MTT)为底物,阳性对照物和待测化合物分别与空白组肝胞液孵育,初步筛选出具有诱导或抑制作用的生物碱。结果显示:博落回中的6种主要生物碱对大鼠和猪NQO2的抑制类型均是可逆性反竞争性抑制,其中原阿片碱和血根碱对大鼠和猪肝胞液NQO2具有较强的抑制作用;原阿片碱对雄性大鼠、雌性大鼠和猪NQO2的抑制常数分别为29.26、93.84和18.35μmol·L~(-1),半数抑制浓度(IC_(50))分别为(39.80±2.42)、(203.65±0.20)和(309.20±0.83)μmol·L~(-1);血根碱对雄性大鼠、雌性大鼠和猪NQO2的抑制常数分别为54.87、23.34和151.3μmol·L~(-1),IC_(50)分别为(160.67±5.77)、(148.00±6.62)和(118.25±0.11)μmol·L~(-1);别隐品碱和二氢白屈菜红碱对雌性大鼠NQO2无抑制作用,二氢血根碱对猪NQO2的抑制作用非常微弱。研究结果为博落回中原阿片碱和血根碱的临床应用提供了一定的理论基础。     

高效液相色谱法同时测定白头翁汤中秦皮甲素和小檗碱的含量

目的：建立同时测定白头翁汤中秦皮甲素和小檗碱含量的方法。方法：采用反相高效液相色谱法,色谱柱：Agilent ZORBOX SB-C18柱（5μm,4.6 mm×150 mm）,流动相：乙腈（A）-0.1%磷酸水溶液（B）,线性梯度洗脱[0-20 min,A-B（12∶88）→A-B（50∶50）],流速：1.00mL/min,柱温：30.0℃。检测器：紫外检测器,检测波长335.0 nm。结果：秦皮甲素和盐酸小檗碱的线性范围分别为0.14-1.12μg（r=0.999 8）、0.12-0.98μg（r=0.999 7）;平均加样回收率（n=9）分别为99.78%、100.18%。结论：本方法简捷快速,结果准确可靠,适用于白头翁汤的质量控制。     

HPLC测定白头翁散中盐酸小檗碱的含量

建立中兽药散剂白头翁散中盐酸小檗碱的含量测定方法,为其质量标准的制订提供实验依据。采用HPLC法测定,色谱条件,Eclipse XDB—C18柱（5μm,4．6mm×150mm）;流速,1．0mL/min;流动相,乙腈：0．05mol／L磷酸二氢钾=28：72;柱温,30℃;检测波长,348nm。盐酸小檗碱在进样量为0．05～0．50μg之间范围内呈良好的线性关系,r=0．9999;样品中盐酸小檗碱的平均含量为0．781％,RSD为0．86％。该方法简便,易行,专属性强,可以作为白头翁散中盐酸小檗碱的含量测定方法。     

HPLC法测定兽用白头翁颗粒中白头翁皂苷B4含量

为了建立兽用白头翁颗粒中白头翁皂苷B4的含量测定方法.利用HPLC法,采用HypersilC18柱（250 mm×4.6 mm,5μL）,以乙腈—0.1％磷酸（27∶73,V/V）为流动相,检测波长为205 nm,流速1.0 mL/min,柱温30℃.以白头翁皂苷B4对照为参比,在白头翁颗粒色谱图中,对白头翁皂苷B4的保留时间及峰面积的RSD进行分析.采用外标法测定3批白头翁颗粒中白头翁皂苷B4的含量.试验结果显示,白头翁皂苷B4在0.1～2.0 mg/mL范围内呈良好的线性关系,（r=0.9995,n=6）,平均含量为11.29mg/g,平均回收率为99.28％ （RDS=2.09％,n=9）.该方法操作简便、结果准确,重复性好,可用于兽用白头翁颗粒的质量控制.     

芪参口服液的毒理学研究

为评价芪参口服液临床用药的安全性,根据毒理学评价程序和方法对其进行了急性毒性试验和长期毒性试验。在急性毒性试验中,将40只昆明小鼠按体重随机分为2组,采用最大给药量法测定小鼠口服芪参口服液的最大耐受剂量;在长期毒性试验中,将80只Wistar大鼠按体重随机分为4组,3个剂量组分别按3.75、7.5、15 g/kg体重给大鼠灌胃,对照组给予同体积生理盐水,1次/d,连续4周。记录每日饮水量、饲料采食量及每周体重,检测给药4周及停药2周血液生化指标、血常规、脏器系数和组织病理学变化。试验结果显示,小鼠口服芪参口服液的最大耐受剂量为生药量40 g/kg,此剂量相当于临床日用量的40倍。部分给药组采食量和饮水量与对照组相比出现显著(P＜0.05)或极显著(P＜0.01)变化,但对平均周增重无显著性影响(P＞0.05);血常规的部分指标出现显著(P＜0.05)或极显著变化(P＜0.01),但停药2周后,所有指标与相应的对照组相比无显著性差异(P＞0.05);给药组血液生化和脏器系数的各项指标与对照组相比,无显著性变化(P＞0.05)。病理组织学检查无明显差异。试验结果表明,在本次试验条件下,该口服液安全无毒。     

芪楂口服液药渣发酵前后对断奶仔猪血浆生化参数和抗氧化能力的影响

为了探讨中药渣用于断奶仔猪养殖的可行性,比较研究了芪楂口服液药渣发酵前和发酵后对断奶仔猪血浆生化参数和抗氧化能力的影响。试验选用21日龄断奶仔猪120头,随机分为4组,分别为空白对照组(不添加抗生素和氧化锌)、芪楂口服液药渣组(添加5 kg/t芪楂口服液药渣)、发酵芪楂口服液药渣组(添加5 kg/t发酵芪楂口服液药渣)和阳性对照组(添加0.04 kg/t维吉尼亚霉素+0.2 kg/t硫酸黏杆菌素+3 000 mg/kg氧化锌),每组5个重复,每个重复6头仔猪。试验期28 d。分别于试验第7和28天采血并测定血浆生化参数和抗氧化指标。结果表明:试验第7天,发酵芪楂口服液药渣组血浆总蛋白(TP)和球蛋白(GLB)含量显著高于2个对照组(P0.05),白蛋白/球蛋白(ALB/GLB)值显著低于2个对照组(P0.05),天冬氨酸氨基转移酶活性显著低于空白对照组(P0.05),碱性磷酸酶活性显著低于芪楂口服液药渣组和阳性对照组(P0.05),甘油三酯含量显著高于阳性对照组(P0.05);试验第28天,芪楂口服液药渣组血浆TP、总胆固醇含量显著高于阳性对照组(P0.05),ALB/GLB值显著低于阳性对照组(P0.05),发酵芪楂口服液药渣组血浆高密度脂蛋白胆固醇含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性显著低于芪楂口服液药渣组(P0.05),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著低于芪楂口服液药渣组和空白对照组(P0.05)。与试验第7天相比,试验第28天芪楂口服液药渣组血浆过氧化氢酶活性、发酵芪楂口服液药渣组血浆TP和GLB含量以及GSH-Px活性显著降低(P0.05),2个对照组血浆TP、GLB和ALB含量均显著降低(P0.05),芪楂口服液药渣组血浆SOD活性、发酵芪楂口服液药渣组和阳性对照组的ALB/GLB值均显著升高(P0.05)。综上所述,饲粮添加芪楂口服液药渣可以提高仔猪免疫力,芪楂口服液药渣发酵前后均对肝脏无不利影响,可作为饲料添加剂用于养猪生产。     

烯丙孕素口服液调控母猪同期发情的研究进展

烯丙孕素口服液在国外已被广泛用于母猪同期发情,给药期间可抑制母猪发情,停止给药后重新释放天然激素,母猪会重返发情,以达到同步发情。详细阐述了烯丙孕素口服液的作用机制、药代动力学、临床应用、残留以及毒性,以期为其研究与开发提供一定的参考。烯丙孕素口服液在治疗性成熟母猪同期发情上有较好的应用前景。     

高效液相色谱法测定烯丙孕素口服液中烯丙孕素的含量

建立了烯丙孕素口服液中烯丙孕素含量测定的高效液相色谱分析方法及样品前处理方法。采用正相高效液相色谱法,前处理溶剂为异丙醇-正己烷(5:20),色谱柱为ZORBAX CN C18柱(250×4.0 mm,5μm),流动相正己烷-异丙醇(98:2),流速1.0 mL/min,柱温35℃,检测波长235 nm。该方法中烯丙孕素的定量限浓度为804.9 ng/mL,线性范围为0.401~0.601 mg/mL,平均回收率为100.3%,该方法前处理简单、准确度高,可适用于该制剂中烯丙孕素的定性定量测定。     

高效液相色谱法测定伊维菌素缔合胶体溶液的含量

建立了0.3%伊维菌素缔合胶体溶液中伊维菌素含量的HPLC测定方法。采用的流动相为乙腈-甲醇-水（60∶32∶8）,检测波长为254 nm。结果表明,伊维菌素H2B1a在6.795-217.4μg/mL浓度范围内线性关系良好（r=0.999 8）,平均回收率为99.7%。该方法准确可行,伊维菌素H2B1a与相邻峰分离完全,能排除溶剂和表面活性剂的干扰。     

毛细管气相色谱法测定巴胺磷溶液含量

建立了毛细管气相色谱法测定巴胺磷溶液含量的方法.试验采用6％氰丙基苯基-94％二甲基硅氧烷为固定相的毛细管柱,柱温240℃,进样口温度250℃,FID检测器温度250℃,载气为氮气,流速3 mL/min,进样量1μL,分流比15:1,内标物质为邻苯二甲酸二丁酯.在该色谱条件下,巴胺磷峰与内标物质峰分离度良好,方法平均回...