奉化大芋艿脱毒苗的组培快繁研究

组织培养试验表明,培养在MS 6-BA 2 mg/L NAA 0.2 mg/L上的奉化大芋艿茎尖,不定芽诱导率可达75%,月增殖系数为4倍。若在上述培养基中添加芋头汁、椰子汁等有机物则可实现不定芽继代繁殖和诱导生根一步完成,0.5~1 mg/L的三十烷醇在壮苗过程中的应用进一步提高了芋苗的根数、根长、苗高和鲜重。     

日本芋品种茎尖离体快繁技术研究

以从日本引进的名优芋品种石川早生、虾籽芋、叶用芋为材料,进行了茎尖离体快繁技术研究.结果表明:茎尖大于 05mm,成活率超过 80%.激素种类及浓度对芋芽分化、试管苗复壮和生根起着关键作用,在 MS NAA 02mg/L基本培养基中,附加 TDZ 01mg/L或 BA 10mg/L,叶用芋芽分化效果好, TDZ 05mg/L或 BA 20mg/L时有利于虾籽芋快繁,而 TDZ 05mg/L或 BA 40mg/L浓度下石川早生不定芽月增殖系数最高.添加 KT,可明显减缓试管苗的分化速度,但适合于芋试管苗生根和复壮.在 KT 10、20、40mg/L不同浓度下, 3种芋40d的生根率均可达100%.经大田移栽,成活率 100%, 3种试管植株均生长旺盛,保持了原有的优良品质和特性.     

大花萱草不定芽直接诱导和植株再生的研究

本研究旨在不通过愈伤途径，直接诱导大花萱草不定芽，并建立相应的植株再生技术体系。实验以大花萱草‘32-1’幼芽为外植体，配制不同激素和活性炭的培养基，考察各因素对大花萱草植株再生的影响。结果表明：不同激素配比对大花萱草‘32-1’初代培养、继代增殖和生根培养影响差异显著。最适初代培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 2.0 mg/L，启动率和增殖系数分别是100.00%和5.60，可直接诱导出不定芽；最适增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L，增殖系数为3.47；最佳生根培养基为1/2MS+NAA 1 mg/L+AC 2 g/L。     

大蒜不定芽的诱导及其增殖系数的调节

为获得白皮大蒜组培繁殖体系，以其茎尖为材料，通过BA和NAA不同激素配比试验研究，结果表明：诱导愈伤组织的最适培养基为：MS+BA 0.2mg/L + NAA 0.5mg/L，诱导率达60%；诱导不定芽的最适培养基为：MS +BA 1.0mg/L + NAA 0.1mg/L，丛生芽繁殖系数高达80%。同时，为建立扩繁最佳体系，分别研究了激素、pH、谷氨酸钠三因素对不定芽增殖系数的调节效果，研究表明：添加0.5mg/L的GA3使增值系数提高到13.8；pH5.8最利于不定芽增值；添加10mg/L谷氨酸钠能在多次继代培养中保持较高的增值系数。     

‘北林雄株1号’和‘北林雄株2号’叶片再生体系的建立

为了解决白杨杂种三倍体‘北林雄株1号’和‘北林雄株2号’无性繁殖困难问题,以白杨杂种三倍体‘北林雄株1号’和‘北林雄株2号’的半木质化嫩枝为材料,对外植体消毒方法以及不同激素组合对叶片诱导不定芽的效果进行研究。结果表明：（1） ‘北林雄株1号’和‘北林雄株2号’启动培养最佳的消毒处理方法为20%浓度的84消毒液处理20 min;（2）激素6-BA以及TDZ对‘北林雄株1号’叶片不定芽再生率以及再生系数的影响显著,NAA对叶片不定芽再生率影响不显著,对再生系数的影响极显著,筛选出‘北林雄株1号’叶片再生的适宜培养基为MS+ 0.2 mg/L 6-BA+ 0.1 mg/L NAA+ 0.005 mg/L TDZ;（3）激素6-BA、NAA以及ZT对‘北林雄株2号’叶片再生率和再生系数的影响均达到了显著水平,筛选出‘北林雄株2号’叶片再生的适宜培养基为MS+ 1.0 mg/L 6-BA+ 0.05 mg/L NAA+ 1.2 mg/L ZT。‘北林雄株1号’与‘北林雄株2号’高效叶片再生技术体系建立,为该品种的规模化无性繁殖以及后续的基因工程育种等研究提供了技术基础。     

草莓组织培养与快速繁殖技术

以"红颜"草莓的匍匐茎尖为外植体,选择附加不同激素组合的MS培养基为诱芽培养基和继代培养基,以1/2MS为生根培养的基本培养基,对"红颜"草莓的组织培养及快繁进行研究。结果表明:草莓茎尖在MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L培养基上能很好地诱导不定芽形成,其诱导率高达80%;继代增殖培养基为MS+6-BA2.0 mg/L+IBA0.5 mg/L+IAA0.5 mg/L+GA1.0 mg/L时增殖系数较高;生根培养基为1/2MS+IAA0.5 mg/L时生根率可达99%,移栽至田间后,成活率高且匍匐茎繁殖能力强。     

桃叶卫矛茎段愈伤组织诱导及不定芽再生体系的建立

为完善及优化桃叶卫矛组培繁殖再生体系,解决以腋芽萌发为再生途径进行组培增殖时增殖系数小的问题,以桃叶卫矛幼嫩茎段为材料,分别用20%的次氯酸钠和0.10%的升汞进行消毒处理,处理时间分别为8、10、12 min获取其消毒最佳方案;以桃叶卫矛茎段为材料,通过调节6-BA和NAA浓度,诱导桃叶卫矛茎段产生愈伤组织;以桃叶卫矛愈伤组织为材料,采用6-BA和NAA正交试验诱导产生不定芽;以桃叶卫矛不定芽为材料,调节6-BA和NAA浓度,提高继代增殖系数;以桃叶卫矛继代增殖苗为材料,调节IBA和NAA浓度,获取桃叶卫矛生根苗。研究结果表明：（1）桃叶卫矛幼嫩茎段消毒最佳方案为20%的次氯酸钠处理12 min,污染率2%;（2）茎段愈伤组织诱导最佳培养基为1.0 mg/L 6-BA+ 0.10 mg/L NAA,诱导率80.00%;（3）不定芽诱导最佳培养基为0.5 mg/L 6-BA+ 0.10 mg/L NAA,诱导率91.11%;（4）继代增殖最佳培养基为MS+ 1.0 mg/L 6-BA+ 0.10 mg/L NAA,增殖系数6;（5）生根培养最佳培养基为1/2MS+ IBA 0.3 mg/L,生根条数平均为5条。本研究利用桃叶卫矛无芽茎段诱导出愈伤组织,并将继代增殖系数提高至6,且完成了桃叶卫矛组培再生体系的优化。     

‘蕲山药’离体再生及试管微块茎的形成

为解决生产上‘蕲山药’脱毒种药供不应求的问题,以其茎节为试验材料,研究不同植物生长调节剂配比对‘蕲山药’不定芽再生的影响以及不同碳源对试管微块茎形成的影响,建立‘蕲山药’的离体再生体系及高效形成试管微块茎的方法。结果表明,在不同植物生长调节剂配比对‘蕲山药’诱导不定芽分化的影响中,MS+ 6-BA 0.5 mg/L+ NAA 0.1 mg/L或MS+ ZT 0.2 mg/L+ NAA 0.2 mg/L对‘蕲山药’不定芽分化较好,形成不定芽频率分别达到81.33%、82.67%;MS+ 6-BA 0.2 mg/L + NAA 0.02 mg/L对‘蕲山药’不定芽增殖效果最好,增殖系数高达4.7;MS+ NAA 0.02 mg/L适合‘蕲山药’不定芽生根,生根率高达96.32%。150 mg/L PVP能有效降低‘蕲山药’组织培养的褐化现象。试验还发现,MS+ BA 0.5 mg/L+ NAA 0.05 mg/L+ 60 g/L蔗糖,最有利于‘蕲山药’试管微块茎的形成与生长,其微块茎形成率最高,达到了97.50%;其60、120天微块茎质量分别达到了0.18 g和0.39 g。     

黑木相思优良无性系(SR17)组培苗茎段再生体系建立

为建立黑木相思(Acacia melanoxylon R.Br.)茎段高频率再生体系,以优良无性系(SR17)组培苗茎段为外植体,研究培养基中添加TDZ及TDZ与IAA组合使用、不同浓度Ag NO3以及茎段部位对愈伤组织诱导和不定芽再生的影响。结果表明:当TDZ质量浓度为0.05 mg/L时,愈伤诱导率、不定芽分化率和不定芽数最高,IAA 0.05 mg/L配合TDZ使用可使不定芽分化率高达89.4%。同时发现不同质量浓度Ag NO3对不定芽分化率影响不显著,当Ag NO32.5 mg/L时,诱导的愈伤和不定芽容易产生玻璃化。另外发现组培苗中部茎段最有利于不定芽分化。因此选择组培苗中部茎段为外植体,在WPM+TDZ 0.05 mg/L+IAA 0.05 mg/L的诱导培养基上培养30 d,转入MS+6BA 0.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L的分化培养基上培养30 d获得最高的不定芽诱导率,且平均每个外植体形成14.3个不定芽。将经过伸长生长的不定芽转入生根培养基1/2 MS+IAA 2.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L时,生根率高达95.8%。生根培养10 d,炼苗培养20 d后获得可供移植的组培苗。本研究为黑木相思遗传转化和分子育种提供理论参考。     

基于再生不定芽的蝴蝶兰继代扩繁体系建立

为降低蝴蝶兰通过再生原球茎途径频繁继代培养可能出现的变异及玻璃化风险、减轻继代培养中的褐化,以蝴蝶兰花梗茎段再生的营养芽为试验材料,进行基于再生不定芽的继代扩繁及抗褐化研究。结果显示,以5节花梗的中间腋芽茎段为材料,在VW+ 6-BA 5 mg/L+ NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L培养基上进行启动培养,能获得最高的营养芽诱导率。继代培养中,TDZ促进再生不定芽的效果比6-BA强。茎芽经过“切叶”处理,在培养基VW+ TDZ 1 mg/L+300 mg/L柠檬酸+10 g/L蔗糖+15%椰汁,或培养基VW+ 6-BA 5 mg/L+ NAA 0.1 mg/L+ 300 mg/L柠檬酸+10 g/L蔗糖+15%椰汁上进行继代培养,能获得最佳的继代扩繁效果。笔者研究认为初步建立了基于再生不定芽的蝴蝶兰继代扩繁体系。     

垂枝桦的组培快繁

以垂枝桦(Betula pendula Roth.)具节茎段为外植体,对其组培快繁体系进行了比较系统的研究。结果表明,将垂枝桦茎段外植体在MS+6-BA 0.5 mg/L+KT 1.25 mg/L+NAA 0.1 mg/L+3%Sucrose+0.7%Agar(p H 5.8)培养基上培养,不定芽萌发率最高;将其不定芽在MS+6-BA 0.75 mg/L+KT 0.75 mg/L+NAA 0.1 mg/L+3%Sucrose+0.7%Agar(p H 5.8)培养基上继代培养一个月左右,不定芽继代增殖系数可达到5.0~7.0;垂枝桦试管苗在1/2MS+KT 0.05 mg/L+NAA 0.3 mg/L+1.5%Sucrose+0.7%Agar(p H 5.8)培养基上,生根率为96.7%;经驯化、移栽后,垂枝桦生根试管苗成活率可达到90.0%以上。     

人参果‘长丽’叶片再生体系的建立

为了建立人参果遗传转化再生体系,以‘长丽’品种试管苗叶片为材料,研究了培养基种类、pH对人参果试管苗生长和激素组合对人参果叶片不定芽再生的影响。结果表明：培养基pH 5.7~6.0时,MS培养基有利于人参果试管苗的生长,培养24天时平均株高达8.5 cm;GS培养基有利于试管苗生根,培养24天试管苗的生根量达到13.8个/株。6-BA与TDZ配合使用,可显著提高叶片不定芽的再分化能力,在MS+6-BA 2.0 mg/L+TDZ 0.5 mg/L培养基上叶片的再分化率达到83.3%,再分化系数达8.5。本试验研究发现人参果叶片不定芽再生的适宜培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+TDZ 0.5 mg/L。     

青葙高效再生体系的建立

以青葙茎段为外植体建立高频再生体系,探讨不同激素配比对青葙不定芽诱导、继代增殖和不定根诱导的影响。结果表明:青葙茎段外植体诱导培养基为MS+6-BA(2mg/L)+IBA(0.5mg/L),诱导率为100%;继代增殖培养基为MS+6-BA(2mg/L)+IBA(0.01~0.02mg/L),不定芽增加3~5个;不定根诱导培养基为1/2MS+NAA(0.5mg/L)+IBA(0.5~1.0mg/L),诱导率高达100%;组培苗移植到盛有细沙的花盆中,成活率为100%。     

苎麻体细胞植株再生体系优化研究

旨在探索苎麻体细胞植株再生体系的优化方案,为苎麻组织培养及品种改良提供理论与技术依据。本试验以‘湘苎3号’为试材,优化苎麻愈伤诱导植株再生体系,再将此优化的再生体系应用于其他4个种质材料,得出5个种质的愈伤诱导率、芽诱导率、再生苗生根率,来比较不同基因型之间的体细胞植株再生率差异。结果表明,‘湘苎3号’最佳愈伤诱导培养基为附加2,4-D (0.1 mg/L)和6-BA (2.5 mg/L)的MS培养基;‘湘苎3号’、‘咸丰大叶绿’、‘A’、‘B’、‘中苎1号’的愈伤诱导率分别是：83.3%、80.0%、76.7%、70.0%、53.3%。‘湘苎3号’最佳芽诱导培养基为附加TDZ (0.5 mg/L）、2,4-D (0.02 mg/L)和IAA (0.03 mg/L)的1/2MS培养基,‘湘苎3号’、‘咸丰大叶绿’、‘A’、‘B’、‘中苎1号’的芽诱导率分别是：28.4%、21.2%、12.8%、8.9%、4.9%。‘湘苎3号’最佳生根培养基为附加TDZ (0.02 mg/L)+NAA (0.05 mg/L)+IAA (0.02 mg/L)的MS培养基,‘湘苎3号’、‘咸丰大叶绿’、‘A’、‘B’、‘中苎1号’的生根率都是100%。     

‘凤丹’离体快繁工厂化技术研究

杨山牡丹‘凤丹’(Paeonia ostii T.Hong et J.X.Zhang var.lishizhenii B.A.Shen)抗逆性强,适应性广,主要用作观赏、药用和新型油料作物。‘凤丹’种子繁殖的个体差异大,组织培养不定芽增殖系数低,生根困难,移栽驯化难以成活,严重制约良种繁育和新品种培育。本研究以‘凤丹’鳞芽探究鳞芽表面消毒最佳方式;生长调节剂、蔗糖浓度、继代周期、防褐化剂对不定芽扩繁的影响;不定芽珍珠岩基质容器化扦插生根、活性炭(AC)-吲哚丁酸(IBA)集成诱导不定根发生和移栽驯化。初步建立组织培养工厂化育苗技术体系,鳞芽以有效氯1%的二氯异氰尿酸钠水溶液处理20 min,去污染成活率高达66.0%;不定芽在6-苄氨基嘌呤(6-BA)0.5 mg/L、吲哚-3-乙酸(IAA)0.05 mg/L的改良WPM培养基上增殖系数最高达2.73;蔗糖浓度为20 g/L、继代周期为35 d有利于不定芽分化;培养基中添加维生素C(VC)15 mg/L、核黄素(VB2)20 mg/L抗褐化效果最佳。AC-IBA集成诱导不定芽生根,AC 0.5 g/L、AC培养时间为15 d、IBA 15 mg/L诱导生根率53.3%,小植株移栽驯化成活率26.7%;不定芽珍珠岩基质容器化扦插,IBA 20 mg/L诱导生根率40%,驯化成活率97.8%。优化的‘凤丹’组织培养体系为工厂化良种繁育奠定技术基础。     

海州常山组培再生体系的建立

为建立高效的海州常山组培再生体系,以海州常山扦插苗的叶片为外植体,对叶片愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、壮苗培养及生根培养过程的主要因素进行探讨。研究结果表明,叶片愈伤组织诱导和分化的最适培养基为1/2MS+0.5 mg/L TDZ+0.05 mg/L NAA,诱导率为86.67%,不定芽增殖系数为2.34,苗高增长量为1.41。壮苗的最适培养基为1/2MS+0.2 mg/L TDZ+0.1 mg/L NAA,不定芽增殖系数为1.84,苗高增长量为1.82;诱导试管苗生根的最适培养基为：1/2MS+1.6 mg/L IBA,生根率为100.00%,平均每株试管苗生根7.86条,平均根长2.22 cm,并且植株生长良好,利于后期栽培。     

KT和TDZ对药用植物山乌龟组织培养的影响

为了快速获得药用植物山乌龟完整植株,优化组织快繁技术,本研究以山乌龟嫩茎段为实验材料,研究激动素(kinetin, KT)和噻苯隆(N’-phenyl-N’-1,2,3-thidiazol-5-yl-urea, TDZ)对山乌龟不定芽诱导、增殖和生根培养的影响,以获得最佳的培养条件。结果表明,0.2%次氯酸钠(NaClO)浸泡15 min为最适合山乌龟嫩茎段消毒的方法,污染率仅为8.31%;最有利于山乌龟不定芽萌发的培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.2 mg/L+KT 0.5 mg/L+聚乙烯吡咯烷酮(polyvinyl pyrrolidone, PVP) 1 g/L+琼脂7 g/L+蔗糖30 g/L,诱导不定芽数为8.42;不定芽增殖最佳培养配方为MS+KT 0.8 mg/L+NAA 0.5 mg/L+活性炭1 g/L+琼脂7 g/L+蔗糖30 g/L,增殖系数10.87;最适生根配方为1/2MS+KT 0.2 mg/L+IBA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+琼脂7 g/L+蔗糖15 g/L。本研究优化了山乌龟组培快繁技术,提高了繁殖系数,对其规模化生产...     

观赏性小苹果“特丽”的组织培养及快速繁殖技术

以MS为基本培养基，以观赏性小苹果“特丽”的茎段为外植体，建立了无菌培养体系，研究了不同的激素配比和不同茎段类型对增殖培养的影响以及不同的生长素组合对试管苗生根的影响。结果表明：MS+BA0.5 mg/L~2.0mg/L+NAA0.1mg/L均为适合的芽萌发培养基；MS+BA1.5mg/L+IBA0.1mg/L是最适合的茎段增殖培养基；继代增殖培养取留顶芽无侧芽和去顶芽带有1~2个侧芽两种类型的茎段有利于提高增殖系数；1/2MS+0.2mg/L IAA是最佳生根培养基。试管苗增殖系数达到5.6，生根率达91.9%。     

‘黑珍珠’番茄植株再生体系的研究

为了研究‘黑珍珠’番茄植株再生,以‘黑珍珠’番茄幼嫩叶片为外植体诱导愈伤组织,通过愈伤组织诱导培养、愈伤组织分化培养、不定芽增殖培养、生根培养和试管苗移栽,建立高效快速的‘黑珍珠’番茄再生体系。结果表明：最适宜的诱导叶片愈伤组织的培养基为MS+ 1.0 mg/L 6-BA+ 0.1 mg/L NAA,叶片外植体愈伤组织诱导率最高可达98.2%;诱导出的愈伤组织在MS+ 1.5 mg/L 6-BA+ 0.2 mg/L IBA培养基上能很好的分化出不定芽;MS+4.0 mg/L KT+ 0.01 mg/L IBA 培养基可实现不定芽芽增殖;最适宜的生根培养基为1/2MS+ (0.05~0.08) mg/L NAA,试管苗移栽成活率达92%。     

白皮松组织培养研究

为建立高效的再生体系,以白皮松成熟胚,子叶为外植体,经过初代培养和继代增殖培养,研究了不同植物生长调节剂种类及浓度、活性炭、GA3在组培各阶段的作用。结果表明：适合子叶诱导芽的培养基为MS+6-BA 3 mg/L+NAA 0.1 mg/L+TDZ 0.01 mg/L,适合胚诱导芽的培养基为MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.1 mg/L;适宜的继代培养基为MS+NAA 0.05 mg/L;以预处理胚（切除下胚轴）为外植体适宜生根培养基为1/2MS+IBA 0.3 mg/L;活性炭对芽增殖无显著作用,随活性炭浓度提高增殖系数有下降趋势;适量的活性炭和GA3可有效促进芽伸长。