茶叶中儿茶素的提取研究

[目的]为了研究溶剂萃取法提取茶叶中儿茶素的优化条件。[方法]以乙醇为浸提液,采用香草醛-盐酸法测定茶叶中儿茶素的含量,并通过正交实验确定提取茶叶中儿茶素的最佳工艺条件。[结果]儿茶素溶液的最大吸收波长为505 nm。儿茶素浓度与吸光度间的回归方程为:A=0.017 5X+0.044 7(R2=0.999 7)。正交实验结果表明,儿茶素的最佳提取和纯化条件为:以80%的乙醇为溶剂浸提2次,60℃下浸提35 min,料液比为1∶13。影响儿茶素含量的因素依次为:乙醇浓度>浸提时间>提取温度>料液比。[结论]该研究为儿茶素的应用奠定了基础。     

湖南茶叶中儿茶素含量水平评价

概述了茶多酚的生物性质、研究动态以及湖南茶叶儿茶素的含量情况．从茶树进化角度阐述湖南茶叶儿茶素含量的特殊性。     

茶叶中没食子酸、儿茶素类和生物碱的 HPLC检测方法研究

比较 ZorbaxSB-C18与 TSKgelODS-100Z这2种色谱柱对12个组分的分离效果,从洗脱方式、流动相pH 值、柱温与流速等方面优化色谱条件,并对其进行方法学考查以及茶样测定应用,从而建立了一种同时测定茶叶中没食子酸（GA）、8种儿茶素类（GC、EGC、C、EGCG、EC、GCG、ECG、CG）与3种生物碱（可可碱、茶碱、咖啡碱）的高效液相色谱（HPLC）检测方法。确立的最优色谱条件为：采用 TSKgelODS-100Z （4．6mm×150mm,5μm）色谱柱,流动相为2‰甲酸水溶液（A 相）和甲醇（B相）,洗脱方式为83％A （0 min）→75％A （5min）→73％A （7min）→58％A （16min）→83％A （18min）,柱温为40℃,流速为1．0mL ·min－1,检测波长为280nm。茶叶中各组分回归方程的相关系数均在0．9990以上,保留时间与峰面积的精密度RSD 分别小于0．105％与4．076％,加标回收率在97．767％～104．766％。该方法具有良好的线性关系、精密度和回收率,对待测组分的分离效果好,适用于茶叶中没食子酸、儿茶素类及生物碱含量的准确测定。     

HPLC法同时测定茶叶中儿茶素类和咖啡因的含量

为茶叶产品的等级评价和质量控制提供科学依据,采用高效液相色谱发同时测定市售与种茶叶中没食子酸(GA)、表儿茶素(EC)、儿茶素(+C)、表没食子儿茶素(EGC)、没食子儿茶素没食子酸酯(GCG)、没食子儿茶素(GC)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和表儿茶素没食子酸酯(ECG)以及咖啡因(CAF)含量。结果表明:在Agilent C18色谱柱(4. 6 mm×250 mm,5μm),乙腈、甲醇、0. 5%乙酸溶液为流动相进行梯度洗脱,柱温30℃,UV检测波长为275 nm条件下检测,各目标物(GA、GC、EGC、+C、CAF、EGCG、EC、GCG和ECG)的重复性RSD为0. 41%～2. 12%;样品加标平均回收率为94. 68%～104. 40%,相对标准偏差(RSD)为0. 89%～5. 78%。该方法简单、快速、准确、重现性好,茶叶中各目标物均能得到较好的分离,可用于儿茶素类和咖啡因的定量检测。市售5种茶叶中咖啡因的含量均最高,为36. 15～87. 26 mg/kg,绿茶中的儿茶素类物质明显比红茶丰富。     

HPLC-PDA对茶叶中茶氨酸、儿茶素和生物碱的同时分离检测研究

采用高效液相色谱仪-二极管矩阵检测器(HPLC-PDA)建立茶叶中主要成分的色谱分析方法。该方法可以同时分离检测儿茶素(C)、表儿茶素(EC)、表没食子儿茶素(EGC)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、没食子儿茶素没食子酸酯(GCG)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)等6种儿茶素以及咖啡碱、茶叶碱、可可碱、茶氨酸、没食子酸(GA)等主要成分。采用C18色谱柱,以0.05%三氟乙酸水溶液为A相、乙腈为B相进行梯度洗脱,流速1 mL.m in-1,进样量5μL,柱温25℃,检测波长为190 nm和280 nm。在浓度范围内各组分的峰面积和浓度之间具有良好的线性关系,R2在0.9989~0.9997之间;加标回收率在96.31%~103.13%之间。本方法检测方便,定量准确,可用于茶叶及其提取物中多组分的同时分离检测。     

茶叶植物中儿茶素和嘌呤碱的高效液相色谱法分析

采用高效液相色谱法,对多种茶叶植物中的儿茶素和嘌呤碱进行了测定.结果表明,采用Partisil ODS色谱柱分离和测定儿茶素时,以水、甲醇、甲酸和二甲基甲酰胺作流动相,流量和浓度线性梯度洗脱;分离和测定嘌呤碱时,以甲醇∶水=40∶60(体积比)作流动相,等强度洗脱.在选定的色谱条件下每种成分在各自的浓度范围内均具有较好的线性关系,样品的回收率为93.65%～98.95%,相对标准差为0.69%～2.26%.     

茶叶多糖提取分离研究

报道了对等外绿茶中的多糖进行分离,纯化的方法,用温水浸提法粗提,过离子树脂分离得咖啡因,过大孔吸附树脂分离得茶叶黄酮,采用鞣酸除蛋白,用乙醇沉淀出复合茶多糖,纯度达60％以上,分子量在2－4万之间,由5种单糖组成的蛋白质复合多糖。该方法与传统的方法相比,具有生产流程简单,安全,无毒,成本低廉,产品纯度较高,对于充分开发茶叶这一丰富的生物资源有一定的意义。     

茶叶多糖提取方法的研究

经反复实践探索，找到了一种较为理想的从茶叶中提取多糖方法，成功地从茶叶中分离提取了茶叶多糖体，并做了初步理化分析。     

茶叶蛋白的提取工艺研究

为了提高茶资源的利用率,开展不同方法提取茶梗中蛋白的研究。结果表明,碱溶后再进行酶解的工艺提取茶蛋白效率最高。该工艺的最佳条件为:碱溶pH值12,温度75℃,时间50 m in,固液比1∶40;再次酶提的pH值9,温度30℃,时间60 m in,酶用量1500 U/g。在该条件下茶蛋白样品中蛋白质含量为60.4%,蛋白质提取率为81.83%。     

绿茶多酚和儿茶素提取与原料品质关系的研究

根据试验室研究和工厂大生产中原料收购的多年榆测结果,对绿茶多酚和儿茶素提取与原料含量进行了系统的统计分析与研究．结果表明,云南人叶种绿茶比小叶种绿茶具有较高的茶多酚和儿茶素总量,且在儿茶素组成上表现为较高的Ecg,EC和DL-C,而小叶种EGCg和EGC含量较高,同一绿毛茶原料筛分不同规格绿副茶、不同茶树品种绿副茶、商山与平地茶旧绿副茶的茶多酚、儿茶素总量、儿茶索组分含量均有明显的差异．由大叶种原料和小叶种原料提制的产品在儿茶素组成上存在差异,人叶种产品表现为较高的Ecg,EC,DL-C和较低的EGCg／ECg而小叶种产品有高含量的EGCg和较高的EGCg/ECg．原料中茶多酚和儿茶素的含量高,制备的产品中相应的成分含量也高,同时产品成本低。     

茶树叶片DNA提取、纯化与检测

对茶树叶片ＤＮＡ的提取、纯化与检测的方法进行了研究．对茶树叶片ＤＮＡ在提取过程中含色素太高等技术难题进行了处理，确定了聚乙烯吡咯烷酮（ＰＶＰ）在茶树叶片ＤＮＡ提取中的效用及应用方法，摸索出了一套较好的茶树叶片ＤＮＡ提取流程．     

稻叶半乳糖脂的分离纯化及脂肪酸组成分析

通过溶剂系统的选择，建立了用硅胶柱层析、薄层层析和反相高效液相色谱分离纯化稻叶中ＭＧＤＧ和ＤＧＤＧ的方法．该方法也适用于其它植物叶中半乳糖脂的分离纯化．硅胶柱层析在除去大量色素和中性脂方面效率较高，反相ＨＰＬＣ适于制备少量的标准ＭＧＤＧ和ＤＧＤＧ纯品．通过专一性脂肪酶水解和碱水解，并经ＨＰＬＣ分析，水稻ＭＧＤＧ和ＤＧＤＧ中α－亚麻酸（１８３脂肪酸）的含量占不饱和脂肪酸总量的９６％以上，不含有１６３脂肪酸，由此可以确定水稻属于１８３植物．在ＭＧＤＧ的甘油部分Ｃ－１位上总是连接α－亚麻酸，而Ｃ－２位上除大部分连接α－亚麻酸外，还连接有少量的１８２，１８１和１６１脂肪酸；在ＤＧＤＧ的Ｃ－１和Ｃ－２位除大部分连接１８３脂肪酸外，都还连接有少量其它脂肪酸     

满江红多胺氧化酶的抽提与初步纯化

报告了满江红（Azollaimbricata）多胶氧化酶抽提条件与初步纯化的研究结果．以0．1mol／L磷酸缓冲液为介质抽提该酶时的最适pH约为6．5,添加0．10－0．15mol／LNaCl和2％－4％（质量体积比）PVP可改善抽提效果．用硫酸铵沉淀法、PEG－6000沉淀法和丙酮沉淀法分别对酶抽提液进行初步纯化,发现丙酮沉淀法纯化效果最优,用1．2倍（体积比）冷丙酮（－15℃）沉淀时可提纯该酶8．92倍,产率达74．6％．     

油菜籽饼中单宁的提取,分离与纯化制备

油菜籽饼中单宁的提取、纯化工艺参数的研究表明：油菜籽单宁最佳提取条件为７０％的丙酮水溶液,温度３０℃,粒度为０．３ｍｍ以下,单宁回收率为８３％,此条件下饼粕中硫代葡萄糖苷只残留６．４７μｍｏｌ／ｇ,植酸几乎没有被提取。     

提高速溶茶品质的研究 Ⅰ. 酶法提取

针对速溶茶品质存在的几个主要问题,对红碎茶、绿茶的有效化学成分,纤维素酶、果胶酶和蛋白酶采用酶法提取.其使用浓度纤维素酶以0.3%为宜,水浸出物提取率分别比对照高20.5%与19.6%;果胶酶以0.1%为宜,水浸出物提取率分别比对照高5.4%与5.6%;蛋白酶分别以o.4%和o.6%较好,其氨基酸提取率分别比对照高105.6%和49.5%。试验表明纤维素酶与蛋白酶组合提取互作效果最好。同时还发现采用酶法提取,可以改善提取液的香气、汤色与清澈度。     

牛羊胆汁中甘氨胆酸提取纯化工艺研究

采用盐析、萃取、柱层析等生物化学方法,从牛、羊胆汁中提取出了有效成分甘氨胆酸,并采用薄层层析法及薄层扫描法进行定量、定性检测,测得甘氨胆酸的纯度可达98%以上,牛羊胆汁甘氨胆酸的回收率分别为64%和62%。     

樟树叶片抑菌化合物的分离纯化及其部分特性研究

以碱提取、酸沉淀的方法从樟树叶片中分离得到一种棕黑色粉末，该提取物主要为有色化合物Ａ和Ｂ的混合物，化合物Ａ的含量成倍高于化合物Ｂ；经ｓｉｌｉｃａｇｅｌ、Ａｌ＿２Ｏ＿３及ｓｅｐｈａｄｅｘＧ－２５柱层析分离纯化等步骤，得到纯化的红棕色化合物Ａ，经ＰＡＧＥ、ＰＬＣ及ＴＬＣ检测均为单一谱带或单一斑点；该化合物熔点为２８０．２９℃，λ＿（ｍａｘ）￣（ＫＯＨ）为２１３ｎｍ，Ｅ１ｃｍ１％为３４２．５，肩峰为２５７ｎｍ，ｐＩ为３．７，对大肠杆菌、金黄葡萄球菌、巨大芽孢杆菌、枯草杆菌及毛霉有较强的抑菌活性。     

一种快速简便的茶儿茶素高效液相色谱定量分析方法

采用茶样沸水浴浸提20min,SEP-PAK C18小柱净化试样的前处理方法和μBondapak C_(18)不锈钢柱,二甲基甲酰胺、甲醇、醋酸、水作流动相,流量、浓度线性梯度洗脱,柱温30℃等色谱条件,能使儿茶素组分在25min内得到理想分离。与前人研究结果比较,分辨率提高,分析时间缩短,稳定性好,灵敏度高,对于大量样品的分析有很好的适应性。     

赭曲霉毒素A,B的提取,分析与鉴定

用赭曲霉菌(也称棕曲霉菌)生产菌株,接种于无菌的混合饲料中培养。培养物用乙腈—石油醚—氯仿提取,用碳酸氢钠水溶液进行液液分配,水相酸化后再用氯仿萃取,经硅胶柱层析净化,用苯:冰醋酸(9:1)洗脱。紫外光下分别收集绿色萤光区带和兰色萤光区带,采用紫外分光光度计检测。选用波长333nm的赭曲霉毒素A(Ochratoxin A.简称OA)和波长318nm的赭曲霉毒素B(Ochratoxin B.简称OB)收集液,分别将收集液(OA和OB)浓缩,然后结晶。OA产品为无色针状晶体;OB为淡黄色颗粒状晶体。OA和OB的UV最大吸收峰分别为333nm和318nm。萤光最大激发波长分别为335nm和320nm,最大发射波长分别为465nm和456nm,通过UV、HPLC、NMR、IR谱图及TLC的R_f值证明产品是赭曲霉毒素A和B。