牛白细胞黏附缺陷病等位基因频率分析

为了解荷斯坦奶牛群中成母牛白细胞黏附缺陷病情况,抽取1 000头牛血样,采用RT-PCR方法对血样进行分析,并用TaqⅠ内切酶对RT-PCR产物进行消化,再用1.2%琼脂糖凝胶分析Taq Ⅰ限制性位点酶切片段.结果表明:1 000头荷斯坦奶牛中有19头BLAD基因携带者,1头BLAD基因纯合个体;BLAD基因携带者和纯合个体所占的比率分别为1.9%和0.1%;无BLAD和携带BLAD的基因频率分别为0.989 5和0.010 5.     

牛白细胞黏附缺陷病液相基因芯片检测方法的建立

从福建某奶牛场200头进口荷斯坦牛采血提取牛血液DNA,根据已知牛染色体上CD18编码基因序列383位基由A变为G而引起牛白细胞黏附缺陷症（BLAD）设计特异性野生型和突变型引物,建立液相基因芯片检测方法用于牛白细胞黏附缺陷症（BLAD）的检测,结果检出2头母牛为BLAD携带者,检出率为0．67％,没有发现患病牛。结果证明建立的液相基因芯片检测方法是一种敏感性和特异性很高的筛选奶牛BLAD有害基因的新方法     

北京地区荷斯坦牛BLAD遗传缺陷基因的分子筛查

牛白细胞黏附缺陷症(BLAD)是由常染色体上CD18基因单碱基突变(A→G)引起的隐性遗传疾病,隐性基因纯合时导致白细胞表面的β2整合素表达明显减少或缺乏而引起临床发病,患病牛的主要特征是机体免疫力降低、易患病,从而影响生产性能的表现,可严重影响奶牛场的经济效益。本研究利用PCR-SSCP方法对北京地区246头公牛样本和409头母牛样本进行了检测分析,研究结果表明,在所检测的样本中,荷斯坦种公牛(含后备公牛)和母牛BLAD携带率分别为0.81%和3.91%,BLAD基因频率分别为0.21%和1.95%,并通过系谱追踪发现,BLAD遗传缺陷可追溯到美国一头非常优秀的公牛Osborndale Ivanhoe(USA.1189870,BL),其后代在我国有一定的影响。通过剔除BLAD携带者公牛可以有效控制该遗传缺陷的传播,但是,我国部分BLAD携带者公牛冻精依然在商业化使用,所以,有效监控BLAD携带者在奶牛群中的状况对BLAD剔除计划是有益的。     

中国荷斯坦牛白细胞粘附缺陷病遗传分析

荷斯坦牛白细胞粘附缺陷病（BLAD）是一种遗传性免疫缺陷病，患病牛出生后，生长发育差，绝大多数在1年内死亡，且不具繁殖和哺育能力。该病的遗传基础为CD18基因编码区383位的A／G点突变导致白细胞表面的β2整合素表达缺陷。目前欧美等奶牛业发达国家都已经建立了完善的BLAD分子检测方法和跟踪监控体系。中国长期从国外进口荷斯坦公牛精液、胚胎或活体，由此可能引进了BLAD基因。本研究采用PCR—RFLP方法对116头可疑中国荷斯坦牛进行了检测．确定了2头BLAD携带者公牛和8头携带者母牛．未发现隐性纯合个体．     

沙尘暴应激对荷斯坦牛红、白细胞及红细胞黏附免疫功能的影响

在春夏之交沙尘暴多发季节,为初步了解沙尘暴对奶牛的影响,在沙尘暴期间和前后随机抽取6头荷斯坦牛,用经典红、白细胞计数、白细胞分类计数及红细胞黏附免疫功能检测方法,检测红、白细胞数及红细胞黏附免疫功能的变化。结果表明。沙尘暴期间红、白细胞总数有所增高;中性粒细胞极显著增多;淋巴细胞却显著下降;C3bR和ICR的受体花环率略有减少。说明沙尘暴所导致的环境低氧使奶牛增加红细胞数以应付缺氧的环境;中性粒细胞为吞噬沙尘颗粒清除异物极显著提高,而具有特异性免疫作用的淋巴细胞却显著下降;同时红细胞黏附免疫功能也有所下降。可见沙尘暴使炎症细胞聚集,特异性免疫细胞显著下降,很可能导致炎症发生。     

中国荷斯坦牛凝血因子XI缺陷症遗传分析

凝血因子XI缺陷症（FactorXIdenciency）是荷斯坦牛的一种常染色体单基因控制的隐性遗传缺陷。该病的遗传基础是由位于牛第27号染色体的凝血因子XI基因外显子12上发生的一段76bp序列插入。本研究采用PCR方法对我国13个主要公牛站的571头荷斯坦公牛的凝血因子XI基因进行了全面检测,未发现隐性有害基因携带者和纯合个体。     

牛白细胞黏附缺陷症(BLAD)的检测与单倍型分析

牛白细胞黏附缺陷症（BLAD）是由常染色体上CD18基因单碱基突变（A→G）引起的隐性遗传疾病,隐性基因纯合时导致白细胞表面的β2整合素表达明显减少或缺乏而引起临床发病,患病牛的主要特征是机体免疫力降低、易患病从而影响生产性能的表现,严重的影响了奶牛场的经济效益。本研究重点对牛白细胞黏附缺陷症（BLAD）的致病基因CD18基因第2外显子（exon2）进行检测分析,通过对样品进行PCR-SSCP分析,结果发现了4种单倍型：单倍型H1、H2、H3及H4,经测序发现,此扩增片段共存在2个SNPs位点,分别位于CD18基因exon2的C20T和A55G位点,其中C20T突变是首次发现,属于同义突变,而A55G突变即是引起BLAD的错义碱基突变,单倍型为H1、H2和H3的个体是正常牛,单倍型H4是BLAD携带者,从而建立了一种筛选BLAD有害基因的新方法-SSCP法。     

奶牛白细胞黏附缺陷症(BLAD)检测方法的研究进展

奶牛白细胞黏附缺陷症是近年新发现的一种常染色体单基因隐性遗传病,由常染色体上CD18基因单碱基突变(A→G)引起的隐性遗传疾病,隐性基因纯合时导致白细胞表面的β2整合素表达明显减少或缺乏而引起临床发病,患病牛的主要特征是机体免疫力降低、易患病从而影响生产性能,严重影响了奶牛场的经济效益。文章综述了该病检测方法的研究进展。     

北京地区荷斯坦青年牛繁殖性状影响因素分析

本研究利用北京地区23个奶牛场105头公牛的25705个女儿繁殖记录,对中国荷斯坦青年牛的4个繁殖性状,包括青年牛初配日龄（AFI）、青年牛妊娠日龄（AFP）、青年牛初产日龄（AFC）和输精次数（NS）,采用固定模型通过SAS9.1软件GLM过程进行统计分析。结果表明,牛场、出生年份、出生季节以及公牛等效应对青年牛繁殖性状具有显著（P〈0.05）或极显著影响（P〈0.01）。通过提高饲养管理水平,给母牛创造良好的生存环境,选用具有优秀繁殖性能的种公牛,可有效提高母牛繁殖效率。     

荷斯坦牛亲子鉴定检测方法的建立与应用

为了构建北京奶牛中心荷斯坦种公牛个体及亲子鉴定DNA数据库,本研究从联合国粮农组织(FAO)和国际动物遗传学会(ISAG)推荐的具有高度多态性的微卫星标记中选取11个常染色体微卫星标记(BM1824、BM2113、ETH3、ETH10、ETH225、INRA023、SPS115、TGLA53、TGLA122、TGLA126和TGLA227),采用荧光引物PCR和ABI3730XL遗传分析仪,对229头荷斯坦种公牛个体基因型进行了检测,并探讨其用于牛个体识别和亲子鉴定的可行性。研究结果表明,11个微卫星标记平均杂合度为0.733,平均多态信息含量为0.695,其中TGLA122标记平均多态信息含量最高为0.866,SPS115标记最低为0.506,均属于高多态性标记。11个标记累积个体识别能力为99.99%,累积非父排除率达到99.99%,随机个体一致性概率为1.59×10-17。研究结果表明上述11个微卫星标记进行个体识别和亲子鉴定的效力与可靠性均很高,同时初步建立了北京奶牛中心荷斯坦种公牛DNA数据库。     

ELISA检测荷斯坦牛粪便中轮状病毒抗原及临床意义

本文以秋冬季腹泻的荷斯坦牛为研究对象进行采样,应用轮状病毒单克隆抗体检测其抗原,以检测粪便中的轮状病毒,探讨荷斯坦牛轮状病毒检测的临床价值及本地轮状病毒在不同年龄段荷斯坦牛中的流行情况。结果表明,2月龄以内的犊牛阳性率最高(45%),其次是3～6月龄和6月龄以上的奶牛,分别为36%和17%。表明本地荷斯坦牛轮状病毒感染已普遍存在,主要集中在6月龄以内的犊牛,6月龄以上的奶牛感染率较低。本试验为该地区今后荷斯坦牛轮状病毒的临床检测及其流行病学调查提供参考。     

北京地区荷斯坦牛脊椎畸形综合征的调查研究

脊椎畸形综合征（Complex Vertebral Malformation,CVM）是由常染色体上SLC35A3基因单碱基突变（G→T）引起的隐性遗传疾病,该基因隐性纯合（CV/CV）时奶牛致死,但CVM携带者表现正常,所以CVM携带者公牛可以通过人工授精技术传播CVM缺陷基因。本研究利用PCR-SSCP方法对北京地区242头公牛样品和403头母牛样品进行了检测分析,研究结果表明,在所检测的样本中,荷斯坦种公牛和母牛CVM携带率分别为8.82%和5.71%,CVM基因频率分别为4.41%和2.85%。通过系谱追踪发现,CVM遗传缺陷的共同祖先是美国名牛＂Penstate Ivanhoe Star＂（USA.1441440,CV）。通过剔除CVM携带者公牛可以有效地控制CVM遗传缺陷的传播,但是,我国许多CVM携带者公牛冻精依然在商业化使用,所以有效地监控CVM携带者在奶牛群中的状况对CVM防控计划是有益的。     

进口荷斯坦牛生产性能的观察报告

1985年前后,黑龙江省内三个系统从美国、丹麦、西德引进荷斯坦青年妊娠母牛,进行纯种繁育以及改良中国荷斯坦牛,提高其生产性能,扩大荷斯坦牛群之目的,同时进行三个品种荷斯坦牛生产性能的比较,为今后引种提供参考。美国荷斯坦牛饲养在庆安县奶牛良种场,丹麦荷斯坦牛饲养在省山市种奶牛场,西德荷斯坦牛饲养在松花江奶牛场。在三场饲养管理条件基本相似     

中国荷斯坦种公牛BLAD遗传缺陷的分子检测及系谱分析

本试验运用限制性片段长度多态性聚合酶链式反应（RFLP-PCR）方法,检测我国荷斯坦种公牛白细胞粘附缺陷（bovine leukocyte adhesion deficiency,BLAD）基因的携带频率。共检测了来自全国14个公牛站的587头种公牛,发现BLAD携带者8头,携带率为1.36%。对现有公牛系谱信息分析显示,携带者公牛来自美国、加拿大和中国,其中6头携带者公牛可以追溯到共同祖先Osborndale Ivanhoe。此外,本研究还对我国荷斯坦牛遗传缺陷的控制和携带者公牛的利用提出建议。     

中国荷斯坦后备牛生长发育状况分析

对456头中国荷斯坦牛从初生到16月龄逐月测量体重、胸围和体高三个性状,统计各月龄牛的体重、胸围和体高,绘制累积生长曲线;统计各月龄牛的日增长量以及胸围和体高的月增长量,绘制绝对生长曲线;分析中国荷斯坦后备牛的生长发育状况。     

荷斯坦牛抗热应激分子标记S463的检测

本试验以S463为奶牛假定抗热应激的RAPD分子标记,在核心母牛场湖南省奶牛原种场测定不同世代的种母牛213头,在核心公牛场湖南省种公牛站,以及北京、上海、南京、安徽等地测定种公牛46头,共检测出具有S463分子标记的母牛26头,检出率为12.2%(26/213),公牛10头,检出率为21.7%(10/46).在湖南省奶牛原种场,有、无抗热应激分子标记的母牛在热应激期间的产奶量分别为1 724.53kg和1 531.62kg,产奶量下降率分别为3.47%和23.18%,产奶量差异不显著(P>0.05),但产奶量下降率差异显著(P<0.05),基本肯定了抗热应激分子标记在不同耐热牛群中的特异性.