绿僵菌产孢研究

在ＰＤＡ培养基的基础上，加０．５％的蛋白胨、３．０％的蔗糖是多绿僵菌良好的产孢培养基。５０×１０＾－６的胆矾可显著提高菌株８５５０和３０１０４的产孢量，１００×１０＾－６的胆矾可显著提高８４０１的产孢量。     

绿僵菌生物农药的研制与应用

绿僵菌生物农药的生产目前普遍采用液固双相发酵工艺,其固体载体多为大米及稻壳等材料,国内外的研究多集中于培养参数的优化与选择,如培养基成分、温度、光照、pH值、含水量及接种量等。绿僵菌制剂的剂型主要有粉剂、可湿性粉剂、干菌丝和油剂,其助剂的成分及配比是当前的研究热点。在应用方面,全球已登记的绿僵菌商品有17个,应用效果较好,防治对象集中于直翅目的蝗虫类、蜚蠊目、同翅目的蚜虫、粉虱、叶蝉类以及鞘翅目的蛴螬等害虫。本文从工艺研究、剂型研发、商品化及应用等角度对绿僵菌生物农药现状进行综述,重点介绍近年来的研究进展和新兴技术。     

绿僵菌研究的新进展

绿僵菌研究的新进展高松（中国农科院生物防治研究所，北京１０００８１）ＣＵＲＲＥＮＴＳＴＡＴＵＳＯＦＳＴＵＤＩＥＳＯＮＭＥＴＡＲＨＩＺＩＵＭＳＰＰ．ＧＡＯＳｏｎｇ（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＣｏｎｔｒｏｌ，ＣｈｉｎｅｓｅＡｃａｄｅｍｙｏ...     

我国部分地区土壤中绿僵菌的物种多样性

绿僵菌是一种广泛存在且具有较高经济、生态价值的极具发展前景的绿色安全生物防治材料。为了更好地了解我国绿僵菌资源的生物多样性,本研究从13个省份不同生境中采集土壤样品,采用选择培养的方法对绿僵菌菌株进行分离纯化,通过形态学、分子生物学获取其ITS1和ITS4序列等方法鉴定菌株。在用MEGA软件依据邻接法（NJ）构建基于绿僵菌菌株ITS1和ITS4序列的系统发育树并进行同源性分析的基础上,采用香农-威纳指数、优势度指数和均匀度指数评价其多样性。结果表明,在607份土壤样品中,分离出绿僵菌属真菌共计222株,其中优势菌种金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae 130株,优势度指数为0.586;另有马昆德绿僵菌Metarhizium marquandii 83株、黄绿绿僵菌Metarhizium flavoviride 7株、罗伯茨绿僵菌Metarhizium robertsii 2株。林地的香农-威纳指数最高,为0.983,说明其物种丰富度最高。林地的均匀度指数最高,为0.709,说明其不同种间分配最均匀。     

绿僵菌感染白蚁生物测定新方法

白蚁是世界性害虫。不少种类对森林、房屋建筑、电讯设备、水库土坝等造成严重危害。利用金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)防治白蚁,已有不少研究。本文提出绿僵菌感染白蚁生物测定新方法,比以往的方法更省时。试验以象白蚁(Nasutitermes exitiosus)作供试昆虫,但也适用于对其它白蚁的研究。     

绿僵菌无纺布菌条制作工艺

在接种优良液体种子的基础上，以单位面积的产孢量为指标，筛选了制作多种蛀干害虫的病原——绿僵菌无纺布菌条的最佳营养组合及培养条件。结果表明，最佳营养条件为（g／L）：白砂糖20g、黄豆粉40g、蛋白胨6g；琼脂含量对产孢量无显著影响；最佳培养条件为：25℃下，相对湿度（RH）95％，产孢量可达3．6×10^8～3．7×10^8孢子／cm^2。     

绿僵菌治蝗研究进展

介绍了目前对防治多种蝗虫效果较好的虫生真菌--绿僵菌的种类、株系,以及绿僵菌对蝗虫的致病机理、 对环境的安全性等,并讨论了国内外应用绿僵菌防治蝗虫的田间试验效果、剂型研制、产业化和推广应用前景。     

18种化学农药与绿僵菌相容性研究

本文检测了18种常用低毒化学农药对生防真菌绿僵菌Metarhizium anisopliae孢子萌发、菌丝生长及产孢的影响,分析它们与绿僵菌的相容性。总体看,杀虫剂、植物生长调节剂和除草剂与绿僵菌的相容性好于杀菌剂。其中,氰戊菊酯与绿僵菌相容性最好,即使在10倍的推荐浓度下,对孢子萌发无影响,对菌丝生长速度和产孢量的抑制率只有25.13%和38.63%。高效氯氟氰菊酯和乐果与绿僵菌也有较好的相容性,在推荐的田间使用浓度下,孢子萌发抑制率为30%左右,对菌丝生长和产孢量基本没有抑制。溴氰菊酯、啶虫脒、吡虫啉、甲霜灵、氟乐灵、阿维菌素、敌百虫、毒死蜱和波尔多液与绿僵菌有一定的相容性。矮壮素、哒螨灵、多菌灵、甲基硫菌灵、代森锰锌和三唑酮与绿僵菌相容性很差。     

生物农药白僵菌杀虫剂的研发进展

生物农药在植物保护和生态维护中的作用越来越受到重视。白僵菌Beauveria spp.是昆虫病原真菌的典型代表,经长期大量地研究、发掘和试验,逐渐发展成为一类重要的生物杀虫剂。该文从研发白僵菌杀虫剂的角度,对其分类鉴别、菌种选育、大量培养与发酵生产、产品制剂化与规范化等方面的研究进展进行综述,提出研发过程中存在的问题,并从菌种基因层面及与植物互作角度对提升产品功效进行展望,以期为促进白僵菌杀虫剂的研发提供参考,也为其他杀虫真菌的研发提供有益借鉴。     

Factors in the Success and Failure of Microbial Agents for Control of Migratory Pests

Microbial control agents generally kill insects more slowly than chemical pesticides, and fast-moving migratory pests may not at first sight appear to offer the most promising targets for microbial control. Operators responsible for control may need to have recourse to chemical control agents. Nevertheless, there are many occasions when pests breed and feed outside the crop and a microbial control agent can be used. Similarly, immature stages may cause little damage and early treatment in the crop can avoid damage. Microbial control agents are particularly likely to be favoured if the pest breeds in a conservation area, and if a publicly-accountable agency is responsible for control.Other key points of importance are the IPM context, in particular detection, planning and forecasting of outbreaks and the role of natural enemies.With these points in mind, we identify several locust and grasshopper systems where microbial control is becoming established; additionally, Sunn pest of wheat and Armyworm are identified as promising situations forbreak microbials.     

虫尸表面罗伯茨绿僵菌产孢、致病力及其相关基因的表达特征

为明确绿僵菌在其致死害虫表面生长发育和致病力等相关分子机制,通过显微观察大蜡螟Galleria mellonella虫尸表面罗伯茨绿僵菌Metarhizium robertsii生长和产孢特性,并测定其致病力,分别对虫尸表面和PDA培养基上罗伯茨绿僵菌的菌丝生长阶段和大量产孢阶段进行高通量测序,对虫尸表面罗伯茨绿僵菌产孢及致病力通路相关基因进行系统分析,并采用荧光定量PCR技术对高通量测序结果进行验证。结果表明,PDA培养基上培养5 d后,罗伯茨绿僵菌开始大量产孢,培养14 d时产孢量最高,为4.6×10~7个/cm~2,大蜡螟幼虫注射罗伯茨绿僵菌4 d后,其体表出现菌丝,5.5 d后虫尸表面罗伯茨绿僵菌大量产孢,9 d后产孢量最高,为2.6×10~8个/cm~2。与PDA培养基上罗伯茨绿僵菌对大蜡螟幼虫的半致死时间(7.09 d和4.66 d)相比,体壁侵染法和显微注射法侵染的虫尸表面罗伯茨绿僵菌对大蜡螟幼虫的半致死时间(6.33 d和4.49 d)分别显著缩短和无显著变化。高通量测序结果显示,在菌丝生长阶段和大量产孢时期,虫尸表面罗伯茨绿僵菌中共有810个基因上调表达,452个基因...     

上海地区小菜蛾的抗药性及增效剂的作用

用FAO推荐的点滴法测定了上海、广州和江西等地小菜蛾(Plutella xylostetla L.)的抗药性。测定结果表明,上海和广州的小菜蛾(DBM)对现有的各类杀虫剂,如DDT、有机磷、氨基甲酸酯和拟除虫菊酯都发生了抗药性,其中以拟除虫菊酯的抗药性尤为突出,如溴氰菊酯(均>10414倍)、氰戊菊酯(2103和>3569倍)和氯菊酯(245和1533倍)。用浸渍法监测了上海地区小菜蛾对有机磷(1979-1987年)和拟除虫菊酯(1981-1987年)的扰药性。上海地区的DBM对敌敌畏、乐果和乙酰甲胺磷的抗性分别为8.1、10.1和16.6倍;从1981-1986年,DBM对氰戊菊酯,溴氰菊酯,氯菊酯、氯氰菊酯和氟氰戊菊酯的抗性分别为406.4、66.5、38.2、78.5和313.5倍,在1990年它们的抗性都有不同程度降低。各种解毒酶抑制剂TBPT,PB,TPP,DEM和DMC的活体测定表明,DBM的抗性涉及多功能氧化酶(MFO)、谷胱甘肽转移酶和酯酶,可能还涉及神经敏感度降低。     

杀虫剂对硃砂叶螨某些生物学特性的影响

溴氰菊酯、氧化乐果、杀虫脒和三氯杀螨醇对硃砂叶螨连续选择3代后,该螨对这些药剂的敏感度分别降低了6.23、1.16、1.23和2.24倍。而4种药剂12个轮换用药组合的敏感度则有不同程度的提高。组建雌性生命表表明,4种药剂对各螨态历期均有不同程度的缩短,Ro、γm、λ各值以溴氰菊酯最高,分别为23.191、0.213、1.139;氧化乐果LC₅₀处理组各数值亦略高于对照组,分别为21.548、0.204、1.226;杀虫脒、三氯杀螨醇处理组各数值略低于对照组。田间试验证实,连续用药3次的三氯杀螨醇、杀虫脒和氧化乐果的较高浓度处理区均能大大降低螨群数量,而溴氰菊酯处理区的螨群数量比对照区高出6.39和8.77倍,认为溴氢菊酯对叶螨的毒性低、刺激增殖、驱使分散和杀伤灭敌而诱使叶螨发生再猖獗。     

Effect of storage on the efficacy of powdered leaves ofAnnona squamosa for the control ofCallosobruchus maculatus on cowpeas(Vigna unguiculata)

Annona squamosa L. is widespread in Sri Lanka and its leaves are collected by some farmers to protect their stored cowpeas from predation by bruchids. Removal of the leaves during the dry season, when the fanners harvest their cowpeas, can decrease the yield ofA. squamosa fruit. This study investigated whether storing the leaves before they are used would reduce the insecticidal activity of the leaves. Overall, acetone and ethanol extracts made from fresh and stored leaves ofA. squamosa decreased the number of adultCallosobruchus maculatus (F.) emerging from cowpeas; however, in some bioassays the extracts from fresh leaves were more active than those from leaves stored for 6 months. Acetone extracts from fresh and stored leaves were toxic to adult beetles, whereas the ethanol extracts were not active. Acetone and ethanol extracts from fresh leaves had potent ovicidal activity when applied to 2-day-old eggs.     

杀虫剂混用或加增效剂对瓜-棉蚜增效作用及机制的研究

1987年,根据瓜-棉蚜(Aphis gossypii Glov.)对拟除虫菊酯和有机磷杀虫剂的抗性机制,研究了一些有机磷化合物或增效剂,对这两类杀虫剂的增效作用及增效机制。在试验的化合物中,马拉氧磷和虫螨磷对氰戊菊酯有明显的增效作用,其共毒系数分别为814.4和1067.2。有机磷杀虫剂对氰戊菊酯的增效程度与其对α-乙酸萘酯羧酸酯酶(α-酯酶)的抑制能力呈极显著相关。异稻瘟净对马拉氧磷,TPP对久效磷也具有明显的增效作用,而异稻瘟净对乐果,TPP对氧化乐果则没有增效作用。     

北京地区粘虫对5种杀虫剂的抗药性

采用浸叶法测定了北京地区6个粘虫Mythimna separata(Walker)田间种群对5种不同类型杀虫剂的抗药性。结果表明:与相对敏感品系相比,6个田间种群对5种杀虫剂均表现出不同程度的抗性水平。其中,对氯虫苯甲酰胺(抗性倍数为1.314~4.213)、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐(抗性倍数为1.000~4.385)和毒死蜱(抗性倍数为1.083~5.936)表现为敏感至低水平抗性;对虫螨腈(抗性倍数为1.355~20.80)和氯氟氰菊酯(抗性倍数为1.748~13.98)表现为敏感至中等水平抗性。因此,北京地区的粘虫防治应注重将氯虫苯甲酰胺、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和毒死蜱与虫螨腈或氯氟氰菊酯交替或轮换使用,以延缓抗药性的产生与发展。     

低剂量杀虫剂对星豹蛛捕食桃蚜功能模型的影响

为明确杀虫剂对捕食性天敌蜘蛛对蚜虫控制作用的影响,采用药膜法和点滴法测定了星豹蛛Pardosa astrigera和桃蚜Myzus persicae对4种杀虫剂的敏感性,并利用HollingⅡ捕食功能反应模型分析了杀虫剂作用下星豹蛛对桃蚜的捕食功能反应。结果表明:桃蚜和星豹蛛均对阿维菌素最敏感,其对应的LD₅₀和LC₅₀最低,分别为4.94×10^-4 μg/头和0.14 mg/L;吡虫啉和啶虫脒居中,毒死蜱最低;前三者的LD₅₀依次是毒死蜱的127.47、72.05和1.67倍,LC₅₀依次是毒死蜱的261.36、3.60和4.08倍。杀虫剂处理星豹蛛后对桃蚜的功能反应类型基本符合HollingⅡ模型;除3.0、4.5 mg/L啶虫脒处理外,不同杀虫剂作用下星豹蛛对桃蚜的处理时间长于对照组的0.016 d,最大日捕食量小于对照组的60.7头;同种杀虫剂作用下,随着浓度增加平均日捕食量逐渐降低,处理时间延长,瞬间攻击率下降;寻找效应随着桃蚜密度和杀虫剂浓度的增大而下降。表明低剂量杀虫剂处理星豹蛛后延长了其对猎物的处理时间,降低了瞬间攻击率,减少了日捕食数量,从而降低了对猎物的控制作用。     

辽阳地区稻水象甲对六种杀虫剂的敏感性及解毒酶活性测定

分别于2010和2011年采用点滴法测定了辽宁省辽阳地区张台子、柳壕和大石桥3个稻水象甲Lissorhoptrus oryzophilus Kuschel田间种群对吡虫啉等6种杀虫剂的敏感性。发现不同种群对同一药剂的敏感性相差可达4.2~49.4倍;2011年大石桥种群对阿维菌素等3种药剂的敏感性较2010年有所下降。通过室内毒力测定筛选出了5种可有效防治稻水象甲的药剂组合:阿维菌素和三唑磷、氯虫苯甲酰胺和三唑磷分别按质量比1∶1和1∶3组合,多杀菌素和辛硫磷按质量比1∶3组合。比较了3个种群稻水象甲成虫羧酸酯酶(CarE)、乙酰胆碱酯酶(AChE)和谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)的活性,初步探讨了其敏感性不同的可能机制。研究结果可为该地区稻水象甲的有效控制提供参考。