硫酸铜蓄积对日本4种组织细胞超微结构的影响观察

通过蓄积毒性试验,研究了安全质量浓度(0.5mg.L-1)下硫酸铜(CuSO4.5H2O)对日本(Charybdisjaponica)4种组织细胞(肌肉、鳃、肝胰脏和心脏)超微结构的影响。结果表明,铜离子(Cu2+)蓄积主要损伤的组织是鳃和肝胰脏,其次是心脏和肌肉。鳃细胞的损害表现为鳃丝水肿,细胞器溶解,角质层变薄,线粒体、内质网的肿胀、解体;肝胰脏细胞的主要损害特征为肝管微绒毛减少,线粒体水肿解体,内质网扩张,细胞核空泡化,核膜水肿和脂肪滴增加;心脏细胞的毒理变化为线粒体内嵴肿胀、瓦解,肌原纤维不规则,内质网溶解。0.5mg.L-1的CuSO4.5H2O经过16d蓄积后虽然没有导致日本死亡,但已经对其体内组织细胞的超微结构产生了不同程度的影响。     

漂白粉蓄积对日本昭示(虫寻)4种组织超微结构的影响

根据急性毒性试验确定了漂白粉对日本的安全质量浓度为0.6mg/L,采用透射电镜技术研究了该质量浓度下漂白粉蓄积对日本4种组织细胞(肌肉、鳃、肝胰脏和心脏)超微结构的影响。试验结果表明:漂白粉主要损伤日本的鳃和肝胰脏,其次是心脏,肌肉基本无损害。鳃细胞的损害表现为鳃丝水肿,细胞器溶解,角质层变薄,线粒体、内质网的肿胀、解体;肝胰脏细胞的主要损害特征为肝管微绒毛减少、线粒体水肿解体、内质网扩张、细胞核空泡化、核膜水肿、脂肪滴增加;心脏细胞的毒理变化为线粒体内嵴肿胀、瓦解,肌原纤维不规则,内质网溶解。安全质量浓度的漂白粉经16d蓄积后,虽没有导致日本死亡,但已对其体内的鳃、肝胰脏、心脏等组织细胞的超微结构产生了不同程度的影响。     

漂白粉蓄积对日本蟳4种组织超微结构的影响

根据急性毒性试验确定了漂白粉对日本蟳的安全质量浓度为0．6mg／L，采用透射电镜技术研究了该质量浓度下漂白粉蓄积对日本蟳4种组织细胞(肌肉、鳃、肝胰脏和心脏)超微结构的影响。试验结果表明：漂白粉主要损伤日本蟳的鳃和肝胰脏，其次是心脏，肌肉基本无损害。鳃细胞的损害表现为鳃丝水肿，细胞器溶解，角质层变薄，线粒体、内质网的肿胀、解体；肝胰脏细胞的主要损害特征为肝管微绒毛减少、线粒体水肿解体、内质网扩张、细胞核空泡化、核膜水肿、脂肪滴增加；心脏细胞的毒理变化为线粒体内嵴肿胀、瓦解，肌原纤维不规则，内质网溶解。安全质量浓度的漂白粉经16d蓄积后，虽没有导致日本蟳死亡，但已对其体内的鳃、肝胰脏、心脏等组织细胞的超微结构产生了不同程度的影响。     

中华绒螯蟹肝胰腺白化症组织病理变化

采用常规石蜡切片技术和透射电镜技术,对患有肝胰腺白化症的中华绒螯蟹病变组织和细胞进行观察。发现病蟹肝胰腺、鳃、肌肉等组织细胞发生了不同程度的病变,其病理特征为肝细胞水肿、变性、坏死,细胞中脂肪颗粒锐减,线粒体水肿、嵴消失、形成空泡,内质网、溶酶体解体成小泡。鳃组织增厚,上皮细胞微绒毛排列疏松、不规则,部分线粒体嵴消失,出现膜性退化。坏死的肝细胞和鳃上皮细胞中出现细菌颗粒。肌细胞的病变主要表现为细胞核固缩,肌丝松驰、水肿、断裂、肌质网溶解形成小泡。中华绒螯蟹具有重要生理功能的肝胰腺、鳃组织发生了严重病变,使其功能损伤,不耐运输;而肌肉的松驰、肝胰腺脂肪的锐减影响了中华绒螯蟹的品质。同时,病变组织和细胞中未见病毒等生物病原,表明该病为非生物性疾病。图2表0参12     

三唑磷蓄积对日本[虫寻]体内保护酶系统的影响

首先根据急性毒性试验确定了三唑磷对日本蟳的安全浓度为0·27mg·L-1,然后研究三唑磷蓄积对日本蟳体内5种组织保护酶系统的影响。结果表明:(1)日本蟳体内的保护酶系统由SOD和CAT组成,在所有检测的组织中都没有发现POD的存在。(2)SOD和CAT的活性显示出高度的组织特异性,按SOD活性从高到低排列的顺序为:心脏>鳃和肌肉>性腺和肝胰脏,CAT活性大小顺序为:性腺>肝胰脏>心脏>鳃>肌肉。(3)日本蟳体内的保护酶在三唑磷作用下发生了相应的变化,低水平的胁迫能对酶产生一定的刺激作用,而高度的胁迫会抑制酶的活性。(4)不同组织对药物的敏感性不同,鳃、肝胰脏和性腺的敏感性大于心脏和肌肉。     

久效磷对中国对虾细胞超微结构的影响_I_对肝胰脏和肌肉的毒性效应

通过对０．１０ｍｇ／Ｌ久效磷处理的中国对虾细胞超微结构的透射电镜观察，结果表明：１．中毒的肝胰脏细胞内质网严重水肿、扩张、囊泡化，片层结构水肿；线粒体内嵴局部瓦解；肝管微绒毛出现空缺区域及药物中毒的退化结构；脂滴电子密度不匀。２．中毒的肌肉细胞肌原纤维萎缩、间隔增大，肌浆网水肿、扩张，部分肌浆网膜破裂，线粒体内嵴膨胀，细胞质中出现中毒坏死巢。     

久效磷对中国对虾细胞超微结构的影响：Ⅰ.对肝胰脏和肌肉的毒性效应

通过对０．１０ｍｇ／Ｌ久效磷处理的中国对虾细胞超微结构的透射电镜观察，结果表明：１中毒的肝胰脏细胞内质肉严重水肿、扩张、囊泡化，片层结构水肿；线粒体内嵴局部瓦解；肝管微绒毛出空缸区域及经物中毒的退化结构；脂滴电子密度不均。２中毒的肌肉细胞肌原纤维萎缩、间隔增大，肌浆网水肿、扩张、部分肌浆网膜破裂，线粒体内嵴膨胀，细胞质中出现中毒坏死巢。     

纯化病毒复制中华绒螯蟹“颤抖病”的组织病理观察

采用石蜡切片及超薄切片技术，对人工感染纯化病毒后具典型颤抖症状的中华绒螯蟹进行病理学观察。结果显示：人工感染“颤抖病”病毒发病与自然发病的病理变化相似，病蟹的肝胰脏、鳃、心脏及腹神经节等组织器官发生了病变，其病理特征主要表现为细胞浊肿、变性、坏死，某些细胞的细胞核固缩、碎裂或崩解；超薄切片电镜下可见细胞内存在病毒样颗粒，线粒体内嵴受损严重。病变严重的区域，组织细胞坏死，结构崩解。提示肝胰脏、鳃、心脏及神经组织是病毒感染主要靶器官。     

－18℃冷冻条件下中国对虾肌细胞线粒体超微结构的变化

通过对冷冻（－１８℃）条件下保存４００ｄ的中国对虾肌细胞线粒体超微结构变化的透射电镜观察，结果表明：内嵴肿胀，外膜破裂、溶解，线粒体变形膨胀，严重者解体，其中外膜破坏快于内嵴。肌细胞线粒体的变化可分为３个时期（初冻期、稳定期和解体期）。     

镉对罗氏沼虾组织转氨酶活性及组织结构的影响

对罗氏沼虾（Ｍａｃｒｏｂｒａｃｈｉｕｍｒｏｓｅｎｂｅｒｇｉｉ）成虾六种组织的谷丙转氨酶（ＧＰＴ）和谷草转氨酶（ＧＯＴ）活性正常值作了测定，其中心脏和绿腺的ＧＰＴ和ＧＯＴ活性较高，鳃和肝胰脏次之，卵巢和肌肉较低。不同镉离子浓度（０．３７、０．７４和１．４８×１０－６）对罗氏沼虾的急性中毒试验表明，受水中０．７４和１．４８×１０－６Ｃｄ２＋影响，心脏、鳃和肝胰脏的ＧＰＴ和ＧＯＴ活性显著降低；绿腺的ＧＰＴ和ＧＯＴ活性在０．７４×１０－６组显著升高。组织学观察显示，Ｃｄ２＋中毒引起鳃丝增粗，鳃丝血腔扩大；肝小管严重萎缩，肝细胞解体；绿腺细胞解体，迷路结构消失。     

高铜饲料对凡纳滨对虾生长、肌肉和肝胰脏铜积累的影响

采用在实用饲料(含铜11.68 mg/kg)中分别添加铜(以分析纯CuSO4.5H2O为铜源)了0 mg/kg(对照组),25 mg/kg(适量组),50、100、200、400 mg/kg(高铜组)(编号为C0、C25、C50、、C100、C200、C400)的6组饲料,喂养凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)(0.49±0.03 g)8周,研究了高铜饲料对凡纳滨对虾生长、肌肉和肝胰脏铜积累的影响。结果显示:饲料铜含量过高具有毒性,C100~C4003组存活率显著低于其它组(P<0.05),分别为51.11%、37.78%、14.81%;随饲料铜水平的增加,增重率、饲料效率、特定增长率先升高后降低,C50组的增重率和特定生长率显著高于其他组(P<0.05),C25、C50组的饲料效率显著高于其他组(P<0.05);随饲养时间的延长,肌肉、肝胰脏铜积累增加,试验末期各组肌肉、肝胰脏铜积累显著升高(P<0.05),试验期间肌肉铜积累在3.10~11.08 mg/kg之间,而肝胰脏铜积累则在10.89~449.48 mg/kg之间,同组对虾肝胰脏铜积累量远高于肌肉;饲养8周肌肉铜积累小于50 mg/kg,符合食品安全,而肝胰脏除C0组外均大于50 mg/kg。     

十二烷基苯磺酸钠对奥尼罗非鱼免疫毒性的研究

用5种浓度的十二烷基苯磺酸钠（sodium dodeeyl benzene sulfonic,SDBS）浸泡刺激奥尼罗非鱼（Tilapianilotica♀×raurea♂）8周,每2周采血样1次,测定免疫指标。0．05和0．10mg·L^-1组对奥尼罗非鱼的氯化硝基四氮唑兰（nitro blue tetrazolium,NBT）阳性细胞和IgM含量无影响。0．40mg·L^-1组在第8周时,IgM含量显著下降,而NBT阳性细胞突然急剧下降,与对照组相比差异极显著。0．70mg·L^-1组从第4周起,NBT阳性细胞和IgM含量开始减少,第6周时差异显著。1．00mg·L^-1组NBT阳性细胞数在第2周时量就已经有减少,但与对照组相比差异不显著,到第4周时差异极其显著;在第4周时IgM含量有显著差异,第6周后差异极显著。攻毒试验表明,0．40、0．70和1．00mg·L^-1组的死亡率均高于对照组。以上结果表明,当SDBS浓度大于0．40mg·L^-1时,奥尼罗非鱼免疫功能不同程度受到抑制,对NBT阳性细胞和IgM的影响存在着时间与剂量效应。     

饲料中Pb和Cd在中华绒螯蟹体内的吸收与释放特性

为获知饲料中重金属与中华绒螫蟹各组织间的富集与释放特性,应用生物富集双箱动力学模型,模拟中华绒螫蟹分别在Pb含量为10.21、22.01、40.81 mg/kg,Cd含量为1.78、2.80、4.48 mg/kg的饲料驯养过程中,其鳃、肝胰腺和肌肉对Pb和Cd的生物富集与释放特性,为Pb与Cd在中华绒螫蟹体内的分布、富集和迁移提供理论依据,为中华绒螫蟹安全生产提供指导。同时通过非线性拟合得到中华绒螫蟹对饲料中Pb和Cd的富集速率常数k_1、排出速率常数k_2、生物富集系数BCF、生物半衰期B_(1/2),富集平衡时生物体内Pb和Cd含量CAmax等动力学参数。结果显示:①中华绒螫蟹对饲料中的Pb和Cd具有明显的富集,蟹鳃、肝胰腺和肌肉中Pb的含量与富集时间和饲料中Pb的添加量表现出了很好的正相关,在富集的第48天,各组织器官中Pb的含量达到最大,在鳃中的含量分别为0.18、1.14、1.27和1.91 mg/kg;肝胰腺中含量分别为1.00、2.17、2.33和3.50 mg/kg;肌肉中含量分别为0.18、0.73、1.00和1.35 mg/kg。鳃和肝胰腺对饲料中Cd的吸收与Pb情况类似,在富集的第48天,4个饲料组蟹鳃中的浓度值均达到最高,分别为0.026、0.073、0.107和0.154mg/kg;肝胰腺除了在C组实验的第24天含量达到最高,为1.90mg/kg外,其他3组实验,在富集的第48天含量达到最高分别为0.33、1.05和1.24 mg/kg,C组在第48天的含量有所降低,为1.76 mg/kg。但是肌肉中Cd含量没有明显的规律。②中华绒螫蟹对Pb和Cd的生物富集和释放都较缓慢。达到平衡状态时,鳃、肝胰腺、肌肉各组织器官中Pb含量分别为1.07~1.69、4.87~4.95、0.79~1.28 mg/kg,鳃、肝胰腺中Cd含量分别为0.06~0.14和1.25~2.66 mg/kg。Pb和Cd在组织器官中的生物富集系数(BCF)范围分别为0.03~0.48和0.03~0.87,中华绒螫蟹对Cd的富集能力明显高于Pb;Pb和Cd在各组织器官的生物学半衰期(B_(1/2))范围分别为9~67 d和8~48 d。中华绒螫蟹对Pb的排除能力明显低于Cd。③Pb和Cd在中华绒螫蟹组织器官中的富集具有选择性,在经不同含量Pb和Cd的饲料驯养后得到统一含量分布规律:肝胰腺鳃肌肉。     

亚硝态氮胁迫下凡纳滨对虾体内亚硝态氮的积累与能量代谢响应

为探究亚硝态氮胁迫下凡纳滨对虾[体长为(6.8±0.3) cm,体质量为(4.0±0.6) g]体内亚硝态氮的时空分布与能量代谢相关酶活性的响应,实验设置0(对照组)、0.8、4.0和8.0 mmol/L 4个处理组,进行持续96 h的亚硝态氮胁迫实验和12 h的恢复实验。结果显示,凡纳滨对虾死亡率与胁迫浓度呈现显著的正相关性。胁迫6 h内,亚硝态氮在凡纳滨对虾鳃、血淋巴、肠道、肝胰腺和肌肉组织中明显积累,且积累量与胁迫浓度呈现正相关。相同胁迫浓度组,亚硝态氮在对虾鳃中积累最多,肌肉中最少,鳃中的积累量约为肌肉的3倍。Na~+-K~+-ATP酶活性在0.8和4.0 mmol/L组对虾肝胰腺和肌肉中显著升高,而在8.0 mmol/L组的肌肉中显著降低。胁迫各组对虾肝胰腺AMPK活性显著上升,且与胁迫浓度呈现正相关性。恢复期间,除血淋巴(8.0 mmol/L组)外,各组织中亚硝态氮1 h恢复效率均超过50%,且肝胰腺和鳃的恢复效率最高,达到74%以上。血淋巴、鳃、肠道中亚硝态氮恢复到对照组水平的时间最短,均在6 h以内,而水体中亚硝态氮含量显著升高。以上研究表明,胁迫下亚硝态氮会在对虾组织中迅速积累,并引起能量代谢进程的加快;胁迫解除后,积累在体内的亚硝态氮能够迅速排出体外,以减轻毒性影响。本研究结果将为缓解亚硝态氮对养殖对虾毒性效应的研究提供参考。     

4种水产药物对蓝点笛鲷幼鱼急性毒性试验

采用半静水法生物测试,以蓝点笛鲷（Lutjanus rivulatus）幼鱼为受试生物,研究了甲醛、苯扎溴铵、聚维酮碘和高效氯氰菊酯对其的急性毒性。结果表明,毒性大小依次为高效氯氰菊酯〉聚维酮碘〉苯扎溴钱〉甲醛。甲醛、苯扎溴铵和聚维酮碘为低毒物质,安全质量浓度（SC）分别为19．8800mg·L^-1、7．5710mg·L^-1和2．8429mg·L^-1;高效氯氰菊酯为剧毒物质,SC为0．0028mg·L^-1;甲醛、苯扎溴铵、聚维酮碘和高效氯氰菊酯对蓝点笛鲷幼鱼的24h半数致死质量浓度（LC50）分别为81．3240mg·L^-1、40．7619mg·L^-1、15．2077mg·L^-1和0．0153mg·L^-1;48hL C50分别为75．9587mg·L^-1、34．7413mg·L^-1、12．9894mg·L^-1和0．0129mg·L^-1。根据试验结果,建议菊酯类不宜作为蓝点笛鲷育苗药物使用,聚维酮碘和苯扎溴铵要慎用。     

患“白体病”罗氏沼虾腹部肌肉病变的超微结构

取患“白体病”罗氏沼虾 (Macrobrachiumrosenbergii)腹部的病变组织及其鳃、心肌、肝胰腺、生殖腺等器官和组织 ,经光镜和电镜制样观察 ,未发现病原体 ,表明该病为非病原体引起的疾病。光镜下的病变组织结构与正常组织相比无明显异常。但在电镜下 ,病变主要表现为肌肉细胞的线粒体和肌质网的变性、坏死。线粒体肿胀、空泡化 ,肌质网增多且形成许多内陷小泡 ,表明细胞处于缺氧和钙代谢紊乱状态 ,这可能与虾生存的环境和养殖条件有关。根据超微病理与组织学观察结果 ,认为“罗氏沼虾白体病”更确切的命名应为“罗氏沼虾肌肉细胞线粒体坏死症”