昆虫中肠生理与病理研究进展

昆虫中肠作为分泌消化酶和其它酶类的主要部位,起着消化食物和吸收养分的重要艇,也是病原微生物,农药和各种毒素的作用靶标,其生理与病理研究日渐广泛和深入。就昆虫中肠部分酶类的主要特性及有关物质的代谢特点、昆虫中肠病变的多种致病因素及昆虫中肠分泌物与转基因抗虫植物的关系进行了综述。     

术中肠扭转的防治

目的：总结术中肠扭转的诊治经验及教训。方法：对8例术中肠扭转的病因、临床特点及诊疗结果进行回顾性分析。结果：8例均在术中得到明确诊断及治疗，其中6例术后胃肠功能恢复好，l例术后胃肠功能恢复慢，l例术后第7天出现粘连性肠梗阻需要再次手术。结论：术中肠扭转是腹部手术并发症之一，病因有病人方面因素亦有医源性因素．诊疗要点是必须在术中发现，术中及时处理。     

甜菜夜蛾肠粘蛋白cDNA基因的分子克隆与序列分析

【目的】围食膜（peritrophic membrane,PM）是衬托于昆虫中肠内的一种无脊椎动物特有的几丁质—蛋白复合结构,它能够促进食物消化,保护消化道免受微生物入侵。昆虫肠粘蛋白（IIM）是其重要组分之一。因此,作为中肠防御系统的PM已成为害虫生物防治的新靶标。分离和鉴定甜菜夜蛾肠粘蛋白基因cDNA。【方法】以甜菜夜蛾（Spodoptera exigua）中肠为材料,依据stratagene公司试剂盒方法,构建甜菜夜蛾中肠cDNA表达文库。依据现代免疫学原理,利用粉纹夜蛾肠粘蛋白特异性多克隆抗体（anti-IIM antiserum）筛选该文库。【结果】cDNA表达文库滴度为8.51×106pfu/ml,重组率为99.97%。筛选文库得到一个编码甜菜夜蛾肠粘蛋白的cDNA克隆SeIIM-8。核酸序列分析显示,该cDNA长为2 234 bp,在polyA末端上游24 bp处有一个多聚腺苷酸信号序列AAATTA。最长读码框（ORF）编码714个氨基酸,与粘虫肠粘蛋白（Mamestra configurata intestinal mucin）序列相似性为42%。结构域分析表明,它具有5个几丁质结合功能域;一个富含苏氨酸类粘蛋白结构域,重复序列为TTTQAPTTT,高度O-联糖基化;一个天冬氨酸富集区,序列DDDKPGCNGNCPE重复达12次,该区域在已知的昆虫肠粘蛋白中属首次发现。与已知肠粘蛋白比较,推测其5′端还应包括信号肽序列和几丁质结合功能域的未知序列。SeIIM-8基因在GenBank登录号为EU047712。【结论】从本研究构建的高质量甜菜夜蛾中肠cDNA表达文库中筛选得到一个新的围食膜蛋白基因SeIIM-8。     

应用DNA分子进行真菌分类的原理及方法

系统介绍现代分子生物技术RFLPs,PCR,RAPDs,ALFPs和SAPs技术在真菌分类上的价值以及在某些方面已取得的成就,并详细介绍其分类原理和操作方法。     

分子遗传标记及其分析技术的研究进展

分子遗传标记是近年来现代遗传标记学发展最快的领域之一。系统地论述了RFLP、DNA指纹、RAPD及微卫星DNA等分子遗传标记的研究概况及其分析技术的研究进展。并针对目前的研究现状及存在的问题探讨了今后的研究趋向和发展。     

基因体外定向分子进化技术在农业中应用的研究进展

农业生物工程在农业生产中发挥着重要的作用,已经在除草剂抗性,抗虫,抗病和饲料添加剂 等方面取得了良好的成绩。体外定向分子进化技术是改造基因的有效手段,通常可以用来提高酶的比 活,改变酶动力学特征,产生新的底物特异性,产生新的产物和改变酶的最适条件。该技术已经成功的 应用在农业的各个领域。主要从除草剂抗性,抗虫,抗病和饲料添加剂4个方面对基因体外定向分子 进化技术在农业中的应用作一综述。     

家蚕中肠特异启动子BmAPN的克隆及活性分析

【目的】克隆和鉴定1个家蚕中肠特异启动子,为研究家蚕的免疫应答和应用研究提供新的工具。【方法】从家蚕品种大造中提取基因组总DNA,用PCR方法克隆家蚕中肠特异表达基因BmAPN（GenBank登录号：BAA33715.1）的上游调控序列。利用此序列构建以EGFP为报告基因的转基因表达载体pBac[BmAPN-EGFP-SV40,3×P3-DsRed],通过显微注射获得转基因家蚕,在个体水平上检测启动子的活性。【结果】所克隆的BmAPN启动子长度为1 598 bp,其驱动的EGFP仅在转基因家蚕中肠特异表达,与内源基因BmAPN的表达特征一致。该启动子在家蚕幼虫时期活性相对较高,且在起蚕期的活性要明显高于眠蚕期,推测该启动子中的特异元件受激素调控。【结论】经克隆获得的BmAPN启动子为有活性的启动子,且为家蚕中肠特异启动子。     

不同肠球菌基因组DNA提取方法对PCR鉴定的影响

为研究肠球菌基因组DNA的不同提取方法对16SrRNA基因序列PCR、种属多重PCR、RAPDPCR等肠球菌鉴定结果的影响,分别采用6种基因组DNA提取方法(水煮法1、水煮法2、常规酚/氯仿抽提法、chelex-100法1、chelex-100法2和试剂盒法),对1株肠球菌标准菌株ATCC29212基因组DNA进行提取,以这些分别提取的DNA为模板在相同的扩增条件下进行PCR检测.结果表明,在16SrRNA基因序列PCR和种属多重PCR检测中以水煮法1进行肠球菌DNA的提取最适宜,而试剂盒法在RAPDPCR检测中效果最佳.     

药物单克隆抗体的制备及在药物分析中应用

概述了药物(含激素类药物)半抗原合成人工免疫原方法以及采用B-淋巴细胞杂交瘤技术制备药物单克隆抗体的要点，着重介绍了药物单克隆抗体作为几种免疫分析方法的核心试剂，在临床药理学研究及生物样品的药物残留分析中的应用，并对其进行了评述，以期了解药物单克隆抗体的应用现况及前景。     

基于Web of Science数据库的犬猫肠道菌群研究热点的可视化分析

为全面、客观分析犬猫肠道菌群研究的发展脉络和热点方向,本研究采用文献计量学方法,检索Web of Science核心数据库近20年关于犬猫肠道菌群的文章,应用软件Citespace、VOSviewer和Microsoft Excel对发文量、发文时间、发文国家和机构、发文作者、发文期刊、文献共被引频次和关键词进行分析。结果表明：1）在犬猫肠道菌群领域,近20年Web of Science共发表相关文献413篇,且发文量呈逐年上升趋势。2）美国得克萨斯A&M大学是发文最多的机构,形成了以学者Suchodolski和 Swanson为核心的学术共同体;PLOS ONE是发文量最多的期刊。3）研究方向可分为4方面,分别是营养素对犬猫肠道菌群的影响、益生菌对犬猫肠道菌群的影响、疾病和犬猫肠道菌群紊乱的相关性以及肥胖和犬猫肠道菌群的相关性。犬猫食物补充剂如何通过调控肠道菌群进而提高健康水平是未来研究的关注重点。综上,近年来犬猫肠道菌群相关研究正逐步受到研究者的关注,本研究为改善犬猫的健康水平和生活质量提供重要的参考依据。     

抗体酶研究新进展

催化抗体也叫抗体酶,是具有催化活性的免疫球蛋白,由于它兼具抗体的高度选择性和酶的高效催化性,因而催化抗体制备技术的开发预示着可以人为生产适应各种用途的,特别是自然界不存在的高效催化剂,对生物学、化学和医学等多种学科有重要的理论意义和实用价值。文章总结了催化抗体的结构、性质、产生方法、筛选方法、酶学特征及研究的最新进展。     

斜带石斑鱼幼鱼消化道与养殖水体中可培养菌群的研究

利用海水琼脂、TCBS和MRS培养基对斜带石斑鱼Epinephelus coioides幼鱼消化道和养殖水体中的细菌进行分离纯化,采用生理生化鉴定结合16SrRNA基因测序进行细菌鉴定,探讨了幼鱼消化道中的菌群与养殖水体中菌群的关系。结果表明：幼鱼消化道中可培养细菌总数（9．0×106cfu／g）高于养殖水体中可培养细菌总数（5．4×105cfu／mL）,幼鱼消化道中细菌种类也明显多于养殖水体;在幼鱼消化道和养殖水体中均检测到副溶血弧菌、哈维氏弧菌、短小芽孢杆菌、克劳氏芽孢杆菌、鲍氏不动杆菌、嗜冷杆菌和洋葱伯克霍尔德菌等7种细菌。细菌系统进化分析结果表明,这些细菌隶属于β-变形杆菌纲、γ-变形杆菌纲和芽孢杆菌纲。幼鱼消化道和养殖水体的优势菌中均有芽孢杆菌和嗜冷杆菌,提示芽孢杆菌和嗜冷杆菌能通过养殖水体很好地进入消化道。3种乳酸菌（乳酸乳球菌、干酪乳杆菌和屎肠球菌）仅见于幼鱼消化道,且仅占消化道菌群数量的0．70％。弧菌在消化道和养殖水体中所占比例均很小,分别仅占细菌总数的1．07％和0．10％。     

冬种马铃薯稻草包芯栽培技术对比试验

马铃薯稻草包芯栽培技术是福建省主推的马铃薯高产栽培技术。为进一步探讨冬种马铃薯稻草包芯栽培技术的增产增收效果,2008年冬至2009年春通过设立不同栽培技术的对比试验,应用回归分析和通径分析方法,对影响马铃薯产量的因素进行研究。结果表明,马铃薯大薯重对产量影响极显著、中薯重对产量影响显著;与常规栽培相比,稻草包芯栽培技术能显著提高马铃薯中、大薯重,进而极显著提高产量,产量增15.4%,产值增15.4%,利润增18.0%,其抗晚疫病能力也较强。     

改进型中草药921合剂结合α-酮戊二酸对断奶大鼠肠道免疫的影响

研究了改进型中草药921合剂结合α 酮戊二酸(α ketoglutarate,AKG)作为饲料添加剂对体重为40.0±5g18日龄断奶大鼠小肠上皮淋巴集结数量、面积和十二指肠肠液中IgA的含量进行了测定。纯系断奶大白鼠被随机分为对照组、中草药组和中草药加AKG组,每组10只,分别饲喂1～2周,然后对上述内容进行研究。结果为:饲喂1周后,对照组、中草药组和中草药加AKG组小肠上皮淋巴结数量分别为16.4±1.23,14.2±0.63,15.1±0.68个(P>0.05);3组间十二指肠肠液中IgA含量分别为0.844±0.020,0.921±0.039,1.236±0.131g·L-1(P<0.01)。饲喂2周后对照组、中草药组和中草药加AKG组小肠上皮淋巴结数量分别为15.6±0.50,16.4±0.94,15.6±0.99个(P>0.05);3组间前段肠上皮淋巴集结面积分别为27.7±2.02,44.8±4.34,42.4±1.93mm2(P<0.01);中段分别为28.1±1.10,40.5±5.68,55.4±2.28mm2(P<0.01);后段分别为37.6±4.57,63.6±4.94,59.0±5.35mm2(P<0.01);3组间十二指肠肠液中IgA含量分别为0.256±0.015,0.493±0.030,0.601±0.047g·L-1(P<0.01)。中草药组和中草药加AKG组十二指肠IgA含量均显著高于对照组。研究表明:中草药结合AKG可以通过增加小肠上皮淋巴集结面积,增加肠道IgA的分泌,从而快速有效的改善肠道的生长和发育及黏膜     

棉花黄萎病菌gDNA提取方法和不同单孢的RAPD分析

选用棉花黄萎病菌代表性的菌系Ｖａ（Ｖｅｔｉｃｌｌｉｕｍａｌｂｏａｔｒｕｍ的一个菌株）和Ｖｅｔｉｃｉｌｌｉｕｍｄａｈｌｉａｅ的落中型菌系ＶＤ－８,Ｔ９及非落 叶型菌系Ｊｙ,以Ｋｅ作为实验对象,研究了ＣＴＡＢ和氯化苄２种提取方法的优劣。     

单克隆抗体在水产病原微生物检测中的应用

随着水产养殖集约化程度的提高,病原微生物对水产养殖的危害日益严重,主要以细菌和病毒的危害性最大。单克隆抗体的出现,对生物学各个领域产生了巨大而深远的影响,其在水产养殖中也发挥了巨大的作用。对近几年来单抗在水产病原微生物检测中的应用进行了概述。     

抗沙门氏菌O_4、O_(12)抗原特异单克隆抗体的产生及其特性鉴定

用鼠伤寒沙门氏菌的热灭活全菌和热酚—水抽提脂多糖抗原免疫BALB/c小鼠,取脾脏淋巴细胞与SP_2/O细胞融合,获得稳定分泌抗沙门氏菌O_4和O_(12)抗原的特异单克隆抗体的杂交瘤细胞系7个,分别命名为AG24-1、AG90-5、BG1-8、BG17-12、BG66-10、BG78-15、EG19-11。小鼠腹水中的单抗直接凝集滴度为10~2-10~4,间接免疫荧光滴度为10~3-10~6。与沙门氏菌和肠杆菌科中其他细菌的反应性试验表明,BG78-15是O_(12)因子特异单抗,其他6种为对O_4因子的特异单抗。     

分子技术在柱花草上的应用研究进展

综述了近年来国内外将分子标记技术应用于柱花草理论和生产中的研究进展,其中包括分子遗传图谱的构建、遗传多样性与种质鉴定、分子标记辅助选择、基因克隆等在柱花草上的应用研究进展,以及目前所存在的问题和将来的发展方向。