不同发育阶段圭山山羊胚胎常规冷冻保存研究

采用常规冷冻法冷冻保存圭山山羊桑椹胚、囊胚、扩张囊胚期胚胎,解冻后体外发育率分别为41.94%、67.50%、84.09%,桑椹胚与囊胚、扩张囊胚间差异显著(P<0.05),囊胚和扩张囊胚间虽无显著性差异(P>0.05),但扩张囊胚体外发育率高于囊胚.在胚胎的冷冻-解冻过程中,桑椹胚、囊胚、扩张囊胚的透明带受损伤率分别为6.45%、20.00%、31.82%,透明带受损的桑椹胚、囊胚、扩张囊胚体外发育率分别为0%、50.00%、78.57%.初步说明发育程度越高的胚胎,在冷冻-解冻过程中其透明带越易受到损伤,但随发育程度的加深,胚胎生长发育时对透明带的依赖程度也变得越来越弱,表明圭山山羊早期扩张囊胚最适宜进行冷冻保存.     

影响山羊胚胎冷冻效果因素的研究

分别用浓度为1.5 mol/L的乙二醇(EG),1.5 mol/L 1,2-丙二醇(PROH)和1.5 mol/L甘油为冷冻保护液对山羊胚胎进行常规冷冻保存,结果三者对山羊胚胎的冷冻保护效果无显著差异,其中以1.5 mol/L EG的冷冻保护效果为佳。以EFS40为玻璃化液对山羊胚胎进行细管法和OPS法玻璃化冷冻,其结果与常规冷冻间差异不显著,表明常规冷冻法、玻璃化细管法和OPS法均可用于山羊胚胎的冷冻保存。采用25℃和37℃水浴对常规冷冻和玻璃化冷冻后的山羊胚胎进行解冻,从解冻后的发育效果看,二者间无显著差异,但37℃水浴解冻后的胚胎发育效果略好于25℃。还比较了玻璃化液EFS40中添加FCS和BSA后与不添加其他成分的EFS40对胚胎冷冻保护效果的影响,结果表明添加BSA的EFS40的冷冻保护效果显著地高于不添加其他成分的EFS40,但与添加FCS的EFS40间不存在统计学上的差异。     

山羊卵母细胞冷冻保存技术的研究进展

阐述了卵母细胞冷冻的方法、机理、抗冻保护剂种类及发展过程.目前卵母细胞冷冻的研究中,玻璃化冷冻技术发展迅速,越来越受到科学工作者的青睐.山羊是畜牧业生产中的重要品种,因此山羊卵母细胞冷冻越来越受到科学研究者的重视,但是目前这方面的研究还处于初步阶段,研究报道很少,冷冻效果不尽人意.本文通过目前卵母细胞冷冻的发展情况作一综述,为山羊卵母细胞冷冻保存的研究提供一定的参考.     

大鼠胚胎冷冻保存技术及研究进展

随着大鼠基因序列测序的完成和基因敲除技术的发展,通过对大鼠进行基因注入和基因敲除后建立的人类疾病模型日渐增多,建立一种完善的大鼠胚胎冷冻保存技术体系保存这些遗传资源至关重要。本综述系统介绍了大鼠胚胎冷冻技术的发展进程及研究现状,并根据其研究现状分别介绍了各类冷冻保护剂的特点及其组合,常用冷冻保存方法的比较及解冻方法;分析了目前大鼠胚胎冷冻保存技术面临的一些难题;介绍了大鼠胚胎冷冻保存技术的应用前景。     

动物胚胎冷冻保存技术研究进展

胚胎冷冻保存一般指0~-80℃的温度下保存胚胎,而超低温冷冻保存则是在极低的温度(液氮-196℃、液氦-269℃)下保存动物胚胎。处于超低温下的胚胎,其新陈代谢几乎完全暂时停止,因而可以达到长期保存的目的。朱等(1998)对小鼠扩张囊胚在液氮中冷冻保存1h、1年和2年,解冻后的囊胚恢     

早期胚胎玻璃化冷冻保存技术研究进展

本综述阐明了胚胎玻璃化冷冻原理，比较了玻璃化冷冻技术各种方法及其优缺点，分析了胚胎玻璃化冷冻的影响因素，展望了玻璃化冷冻技术的应用前景。     

切割取样后胚胎的冷冻保存技术的研究

研究了切割取样后小鼠胚胎和牛胚胎冷冻-解冻的技术方法。结果表明：（1）分别以10％甘油、10％乙二醇作为冷冻液以及在以上两种冷冻液中分别添加10％葡聚糖＋0．1mol／L蔗糖作为冷冻液常规方法冷冻切割后的小鼠胚胎，冷冻-解冻后体外培养72h总发育率分别为56．9％（259／455）、81．8％（604／738）、84．8％（540／637）和59．5％（308／518）。（2）取样后胚胎体外短暂培养（0-4h）并不能提高切割取样后小鼠胚胎冷冻-解冻体外培养发育率。（3）切割取样小鼠胚胎在25％甘油＋0．25mol／L蔗糖＋20％的血清为冷冻液，在-100～-110℃左右熏蒸2min快速冷冻后体外培养发育率为73．3％（33／45），切割取样牛胚胎快速冷冻-解冻移植妊娠率为57．1％（4／7）。     

山羊精液冷冻保存研究进展

精液的冷冻保存可使精液长期保存和运输,扩大精液的使用范围,使配种不受时间、地域、种畜生命的限制。充分利用优秀种公畜的遗传资源,加快育种工作进程,提高优良公畜的配种效率和种用价值。随着养羊业的迅速发展,冷冻山羊精液亟待应用于生产。山羊精液的冷冻保存是一个复杂的过程,为了获得理想的保存效果,需要平衡多种因素。从山羊精液冷冻保存剂成分、冷冻解冻的过程、冷冻过程的影响因素等方面予以综述,旨在为今后的精液冷冻保存研究工作提供一定的参考依据。     

牛胚胎玻璃化冷冻保存研究初报

传统的胚胎冷冻方法需诱发结晶,按一定速率降温,不仅程序复杂费时间（需几小时）,而且还得使用价值昂贵的胚胎冷冻仪。为此,１９８５年Ｒａｌｌ等人首先发明了玻璃化冷冻法［１］,不使用冷冻仪,将冷冻时间缩短（约为３０ｍｉｎ）。但他们选用的是以大约７ｍｏｌ／Ｌ二甲基亚砜为主的抗冻剂,因其化学毒性大,对胚胎的存活带来一定影响［２,３］。１９８６年Ｓｃｈｅｆｆｅｎ等人,利用丙三醇及丙二醇为抗冻保护剂,因化学毒性仍较大,冷冻保存后的胚胎成活率仍不稳定［４］。针对化学毒性问题,１９９０年Ｋａｓａｉ等人利用化学毒性…     

波尔山羊冷冻精液的研究与试制

于1998年在华亭县神峪波尔山羊繁育场开始波尔山羊冷冻精液的试验与制作。试验筛选的冷冻精液稀释液A配方组成为8%葡萄糖76.5mL，卵黄21mL，甘油2.5mL，对精液保护效果好。所制波尔山羊冷冻精液（颗粒型）解冻活力达0.45，总存活时间8.23h。输配试验表明，情期受胎率达67.05%，总受胎率达79.19%。     

波尔山羊冻精解冻方法效果的分析

针对影响冻精配种受胎率的各种因素,总结分析了几年来在波尔山羊冻精配种中,采用不同解冻方法 解冻冻精对精子活力、存活时间、顶体完整率、死活染色率以及受胎率几方面的影响,结果表明：８０℃高温干解冻优于４０℃低温湿解冻;干解冻效果与温度呈正相关关系,以８０℃－０．４,存活时间１２￣１８ｈ;８０℃高温干解冻优于４０℃低浊湿解冻;干解冻效果与堇 正相关关系,以８０℃为最好,湿解冻与温度呈负相关关系,以４０℃     

黄淮白山羊孤雌胚胎的体外培养

采用离子霉素和6-DMAP对黄淮白山羊体外成熟卵母细胞进行联合激活,分别在不同的培养体系进行体外培养,观察孤雌胚胎的发育情况。培养体系分别为:无共培养条件下,M199(10?S)、CR1aa和HTF P1;颗粒细胞共培养条件下,CR1aa、HTF P1和SOFaa。结果发现,无共培养条件下,CR1aa和HTF P1组孤雌胚胎的卵裂率显著高于M199组(P<0.05),但3组均未有囊胚;共培养条件下,HTF P1组的卵裂率显著高于CR1aa和SOFaa组(P<0.05),而CR1aa组的囊胚率却显著高于其他2组(P<0.05)。综合试验结果说明,CR1aa联合颗粒细胞共培养能够获得较好的培养效果,适用于山羊孤雌胚胎的体外培养。     

温州水牛最佳冷配时间研究

利用巴基斯坦尼里水牛冻精与 2 12头温州水牛进行不同发情时段的人工授精试验 ,观察其情期受胎率。结果发现 :温州水牛在发情结束至结束后 12小时内输精 ,其情期受胎率高达 5 4 3 8% ,较发情持续期内二次输精的受胎率高 10 3 4个百分点 ,差异极显著 (P <0 0 1) ;同时检验发情结束后至 12小时内的组间情期受胎率无明显差异 (P >0 0 5 ) ;通过对不同年龄不同时段的输精试验结果进一步证明 ,温州水牛的冷配适宜时间亦符合“老配早、少配晚、不老不少配中间”的家畜繁殖配种规律     

波尔山羊超排和胚胎移植的研究

波尔山羊(Boergoat)是优良的肉用山羊品种,原产南非,该品种具有早期生长速度快,繁殖率高,肉质好,产肉量高,杂交效果好等特点[1]。目前,利用波尔山羊作为终端父本,与当地山羊品种进行经济杂交,已经取得了十分理想的效果[2]。我国山羊品种资源丰富,存栏量大,但平均胴体体重较低。     

山羊早期胚胎发育相关基因的克隆

用单胚构建的mRNA差异显示技术,对体外培养的山羊早期2、4、8～16细胞期胚胎的基因表达进行了研究,并筛选到了1条在8～16细胞期胚胎特异表达的条带进行分析。结果表明,该片段与犬细胞周期蛋白B3（CCNB3）基因具有82%的同源性。该基因作用和调控细胞的分裂活动,是羊早期胚胎发育过程中的重要影响因素。     

奶山羊精液冷冻稀释液配方筛选

为了筛选适合我区生产上使用的奶山羊冷冻精液稀释液配方,设计5个奶山羊冷冻精液稀释液配方,渗透压1 070～1 720 mmol/kg,pH值5.97～6.99,挑选5只健康成年种公羊,调教采精、制冻。结果显示:1号配方与对照组(5号配方)的保护效果存在一定差异,但差异不显著(P>0.05);2号配方和4号配方与对照组存在显著差异(P<0.05);3号配方与对照组存在极显著差异(P<0.01)。2号、3号和4号3种配方的稀释液对奶山羊精液冷冻后的保护效果都较好,可以在生产上推广使用。