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聚合酶链反应检测绵羊肺炎霉形体的研究 总被引:5,自引:0,他引:5
参照基因库中已发表的绵羊肺炎霉形体Y98株的16SrDNA序列,设计合成了1对引物,建立了聚合酶链反应(PCR)检测绵羊肺炎霉形体的方法。结果显示,所建立的PCR能特异扩增绵羊肺炎霉形体的DNA,而对照的菌株均为阴性;其敏感性可达1Pg。经对绵羊肺炎霉形体分离株HD-1的扩增产物进行测序,并与绵羊肺炎霉形体标准株Y98的16SrDNA序列进行比较,发现有6个碱基的差异。 相似文献
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用绵羊肺炎霉素形体抗原免疫BALB/c小鼠,融合其脾细胞和SP2/O骨髓瘤细胞,筛选出6株分泌抗MO的单克隆抗体杂交瘤细胞系。用间接ELISA法对3株McAb特异性分析,该McAb只特异地与MO抗原发反应,而不与猪肺炎霉素形体、山羊无乳症霉形体抗原发生反应。 相似文献
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霉形体又称支原体 ,是一类缺乏细胞壁的原核微生物 ,分类学上属于软皮纲成员。在兽医学上是一类重要的病原微生物 ,对禽类等动物具有广泛的致病性。 2 0 0 2年 4月 ,西藏某些地区鸡发生一种以咳嗽 ,鼻炎 ,打喷嚏 ,呼吸有锣音等呼吸症状为主要特征的疾病。另外 ,还可见到鼻分泌物较多 ,部分鸡出现结膜炎 ,眼中伴有泡沫分泌物 ,产蛋量下降并有死亡现象。经血清学快速诊断为鸡毒霉形体。为了摸清鸡毒霉形体在藏鸡中的感染情况 ,我们应用血清学方法对西藏各地区的藏鸡进行霉形体检测。结果显示我区藏鸡的鸡毒霉形体感染率较高 ,对藏鸡的年龄、性… 相似文献
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绵羊肺炎支原体引起绵羊及山羊非典型肺炎,分布广泛,危害严重。本试验旨在研制绵羊肺炎支原体灭活疫苗。采用改良Thiaucourt's培养基对绵羊肺炎支原体临床分离株SC02进行培养,收集生长滴度达109 CCU/mL的培养物,浓缩20倍后灭活,制备油佐剂疫苗。选择绵羊肺炎支原体抗体阴性的6月龄健康山羊经颈部皮下接种该疫苗5.0 mL/只(2×1010 CCU/mL),免疫后21 d,试验组与对照组山羊经气管接种绵羊肺炎支原体强毒Y98株5.0 mL/只(≥2×1010 CCU/mL),测量体温、观察临床症状,并于攻毒后30 d剖检,观察肺脏病理变化。结果表明,试验组5只山羊均获得免疫保护,全部精神状况良好,临诊和剖检均未见异常;对照组5只山羊出现咳嗽、发热、流鼻涕等症状,剖杀后见肺脏组织有典型的肺炎病理变化。本研究结果表明,该疫苗对山羊有良好的免疫保护作用。 相似文献
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绵羊肺炎支原体分子致病机理研究进展 《畜牧与饲料科学》2022,43(2):124-128
绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae,MO)引起的支原体肺炎(Mycoplasma pneumonia)是严重危害养羊业的重要呼吸道疫病。绵羊肺炎支原体感染具有隐蔽性、持续性,造成患病羊生产性能下降,严重影响养羊经济效益。综合近期国内外关于绵羊肺炎支原体分子致病机制的文献报道,从绵羊肺炎支原体与呼吸道上皮细胞黏附、致下呼吸道损伤和引起机体免疫抑制三方面进行综述,以期为后续深入研究绵羊肺炎支原体致病机理、开发新型防控技术奠定基础。 相似文献
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为探索SPF鸡胚作为绵羊肺炎支原体实验室感染模型的可行性,本试验用不同浓度绵羊肺炎支原体(108、109、1010 ccu/mL)经由卵黄囊和尿囊腔两个部位接种7日龄SPF鸡胚,通过统计鸡胚死亡情况和不同鸡胚组织样品中绵羊肺炎支原体检测阳性率(PCR检测和支原体分离鉴定),确定绵羊肺炎支原体鸡胚感染方式、感染剂量和最佳分离部位,再用3株不同来源的绵羊肺炎支原体分离株感染鸡胚,观察其对鸡胚的致病力。结果表明,绵羊肺炎支原体感染鸡胚最佳接种途径为卵黄囊接种,感染剂量为109 ccu/mL、0.2 mL/只,最佳分离部位为卵黄液。3株支原体均能感染和致死鸡胚,并均能从卵黄液中分离到绵羊肺炎支原体,但对鸡胚的致病性存在一定差异:FL3株致鸡胚死亡率为45%,略高于MoGH3-3株(40%),二者均高于A3株(25%),但差异均不显著(P>0.05);FL3株鸡胚检测阳率为100%,高于MoGH3-3株(85%)及A3株(90%),但差异也不显著(P>0.05)。本试验初步确定了绵羊肺炎支原体可感染和致死SPF鸡胚,不同分离株对SPF鸡胚致病力有差异,表明SPF鸡胚可作为下一步建立绵羊肺炎支原体实验室感染模型的候选,为绵羊肺炎支原体致病性研究和疫苗研制奠定基础。 相似文献
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YUAN Ting HAO Huafang MA Lina CHEN Shengli YAN Xinmin WU Yaqin CAI Yating SUN Yanming CHU Yuefeng 《中国畜牧兽医》2007,47(9):2988-2996
In order to evaluate the SPF chicken embryos as a candidate of the experimental model of Mycoplasma ovipneumoniae (Mo) infection,the 7-day-old SPF chicken embryos were infected with different concentrations of Mo(108,109 and 1010 ccu/mL) by injection of vitelline fluid and allantoic cavity.The mortality and Mo detection rate (PCR detection and isolation) of infected chicken embryos were employed to evaluate the optimal inoculation route,dose and sampling site.Three different isolates of Mo were submitted to injection of chicken embryos for pathogenicity comparison.The results showed that the optimal inoculation route and dose were vitelline fluid injection with 0.2 mL (109 ccu/mL) Mo per embryo and the sampling site for detection was also vitelline fluid.Three Mo isolates revealed good infectivity and lethality to the chicken embryo.The chicken embryos mortality caused by FL3 strain (45%) and MoGH3-3 (40%) were both higher than that by A3 strain (25%),but with no significance (P>0.05).The detection rate of Mo from the chicken embryos in FL3 group (100%) was higher than that of MoGH3-3 strain(85%) and that of A3 strain (90%),but with no significance(P>0.05).This experiment preliminarily proved that the SPF chicken embryos could be infected and partially killed by Mo,and the virulence of different strains of Mo to the chicken embryos was different.The results provided the data for further establishment of the chicken embryo infection model of Mo,which would benefit the research on Mo pathogenicity and vaccine development. 相似文献
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为建立同时检测绵羊肺炎支原体(MO)和溶血性曼氏杆菌(Mh)的方法,本研究根据MO的hsp70基因和Mh的gcp基因分别设计引物,建立了同时检测这两种病原的双重PCR检测方法.实验结果显示该方法能够特异性的扩增MO (135 bp)和Mh (227 bp) DNA片段,其最低检出量分别为2.06×103拷贝/μL和6.37 c fu/mL,与单一PCR相同.该方法对常见的致病菌无交叉反应.对临床样本的检测结果显示MO和Mh的检出率分别为56.25%和52.50%,与单独PCR符合率为100%.研究结果表明,本研究所建立的双重PCR检测方法具有特异性强、敏感性高等特点,为临床上MO和Mh混合感染的快速检测、鉴定以及流行病学调查提供了方便、快捷、准确的方法. 相似文献