用CODEHOP设计简并引物克隆反刍月形单胞菌K6乙酸激酶基因片段

利用CODEHOP设计细菌乙酸激酶的简并引物,选用1对引物ACKSe以高效丙酸生成菌反刍月形单胞菌K6基因组DNA进行PCR,得到749 bp PCR产物,产物经pMD18-T载体克隆转化至DH5α大肠杆菌中,测序后经Blastx比对,此DNA产物与其他菌属来源的乙酸激酶蛋白序列具有相似性,所克隆的序列即为K6的乙酸激酶基因片段。用CODEHOP程序化设计的简并引物可信性强,阳性率高。该基因的成功克隆为丙酸生成菌K6乙酸代谢工程研究提供了依据。     

鹅CAT-4基因的简并引物设计及克隆

CAT-4是生物体内重要的氨基酸转运蛋白,通过CodeHop法来克隆鹅CAT-4基因片段,为今后对CAT-4基因的研究提供依据。结合BlockMaker、CodeHop、NCBI、Blastp、ClustalW2等生物信息学资源和DNAMAN、Oligo6.0等生物软件,设计鹅CAT-4基因的简并引物,对所涉及的CAT-4基因片段进行克隆。此次试验成功地克隆了鹅脑组织中的CAT-4基因,并且获得了CAT-4基因编码的cDNA部分序列,其长度为450 bp。结果表明,CodeHop法设计简并引物,能够提高引物特异性,减少假阳性率,有利于试验成功。     

CODEHOP法设计简并引物克隆鲫鱼肌钙蛋白C(TnC)基因及序列分析

本文结合生物信息学资源和生物软件的使用,针对特定的氨基酸序列设计简并引物,利用CODEHOP法设计简并引物克隆鲫鱼肌钙蛋白C(Tn C)基因,并构建系统进化树。证明该基因片段与其他鱼类Tn C基因具有较高的同源性,其中与斑马鱼同源性最高达到96%,与大西洋鲑、白斑狗鱼、虹鳟、斜带石斑鱼、斑点叉尾鮰的同源性分别为92%、92%、91%、91%、85%。研究表明,应用此种方法设计出的引物简并度相对较低,Tm值的修改较为灵活,产物特异性强。     

家蚕BmninaB基因引物非特异性扩增片段的克隆分析

家蚕类胡萝卜素加氧酶BmninaB基因是家蚕视觉形成的关键基因之一。实验以大造品系雌蛾卵巢的cDNA为模板,进行RT-PCR扩增,发现在扩增结果中总有一条非特异性的小片段。本研究对该非特异性小片段进行了克隆测序,并对其出现的原因进行了分析,同时也对家蚕类胡萝卜素加氧酶BmninaB基因的扩增条件进行了探索。     

利用益生菌发酵牧草生态养牛、羊、猪技术的探讨

利用益生菌发酵牧草生态养牛、羊、猪的技术能降低生产成本,有效解决了饲养牛羊猪的饲料问题,降低生产成本以及转换生态养殖模式能有效解决由传统养殖模式造成破坏生态环境的问题.     

木寡糖益生菌及益生菌对鸡免疫器官及蛋白含量的影响

将270羽1日龄仔鸡随机分为A、B、C 3组,每组3个重复,每个重复30只,以添加木寡糖益生菌及益生菌日粮饲养广东麻鸡,其中A组用普通日粮添加0.05%土霉素进行饲喂,作为对照组;B组日粮中添加0.3%益生菌;C组日粮中添加0.3%木寡糖益生菌。饲养至8周龄时,测定鸡的部分免疫器官指数,回、盲肠pH值和血清生化指标(血清尿素氮、总蛋白、白蛋白、球蛋白)。结果表明:与对照组比较,试验组仔鸡法氏囊指数、胸腺指数差异显著(P<0.05),血清尿素氮含量差异显著(P<0.05)。添加木寡糖益生菌和益生菌可以促进鸡部分免疫器官发育,降低血清尿素氮含量。     

益生菌在动物营养中的今天与明天

近日,在2011科隆Victam国际大会期间,欧洲益生菌协会（EPA）举办了一次会议,目的是探讨益生菌用作饲料添加剂的地位,以及益生菌为将来畜牧业生产的可持续性发展和盈利所带来的机遇。本文将简要介绍该会议探讨的主要议题。     

益生菌抗衰老功能的研究进展

本文针对益生菌的抗衰老功能,论述了体内、体外评价益生菌抗衰老功能的研究方法以及益生菌的抗衰老作用,并探讨了其发展前景,为今后的研究提出了方向。     

益生菌对宿主机体免疫调节作用研究进展

益生菌是一类对宿主机体健康有益的低致病性或无致病性微生物。大量研究表明,益生菌能够维持宿主肠道菌群平衡,作用于肠道黏膜免疫系统,引起体液免疫和细胞免疫应答,从而调节机体的免疫功能。就益生菌的免疫调节作用途径,及其对机体体液免疫和细胞免疫的影响进行了综述。     

益生菌对动物免疫机能的调节作用

益生菌是良好的免疫激活剂,可以提高内源宿主的防御机能,有效提高抗干扰素和巨噬细胞的活性,通过产生抗体提高噬菌作用活性等刺激免疫激发机体体液免疫和细胞免疫,并增强宿主对病原的非特异性免疫,辅助免疫清除,调节宿主对潜在病原的免疫调节作用,减弱宿主对过敏原的过敏性反应,增强机体的免疫力和抗病力。     

Cloning and Homology Analysis of HSP90 Gene of Carassius auratus by Consensus Degenerate Hybrid Oligonucleotide Primers

The purpose of this study was to analyze the conservative of heat shock protein 90(HSP90) gene, and provide theoretical data for the new HSP gene by exploring the application of HSP90.Using CODEHOP to design the degenerate primers, cloning Carassius auratus HSP90 sequence by PCR, and then the sequence was cloned into pMD18-T vector to construct clone vector after sequencing.Then sequencing homology were compared by BLAST and phylogenetic tree was constructed.The results showed that the homology was 99% between Carassius auratus and Cyprinus carpio; And the homology was 92% between Carassius auratus and Danio rerio.The degeneracy of primers designed in this study was low, the modification of Tm value was more flexible, and the product had high specificity.The study provided basis guarantee for research of Carassius auratus function genes, and laid the theoretical foundation for the study of heat shock proteins conservative in evolution.     

CODEHOP克隆鲫鱼HSP90基因及其同源性分析

本研究旨在分析热休克蛋白90(HSP90)基因的保守性,并为寻找新的HSP基因,探索HSP90的应用提供理论数据。利用CODEHOP设计简并引物,采用PCR方法克隆鲫鱼的HSP90序列,并将扩增的序列克隆到pMD18-T载体中构建克隆载体后进行测序,再将测序结果通过BLAST进行同源性比对并构建系统进化树。结果显示,鲫鱼与鲤鱼的同源性为99%;与斑马鱼的同源性为92%。本试验设计出的引物简并度较低,Tm值的修改较为灵活,产物特异性强,为研究鲫鱼的功能基因提供基础保障,并为热休克蛋白在进化上的保守性研究奠定理论基础。     

益生素在反刍动物生产中的研究进展

本文简要介绍了益生素对反刍动物的影响及作用机理,并对有待于继续研究的问题进行了探讨。     

饲料益生素及其作用效果

益生素是一种能改善畜禽消化道微生态环境,增强机体免疫能力,促进饲料营养成分消化吸收的微生物制剂,是一种无公害的饲料添加剂。文章就现有益生素的种类及其作用机理和效果、使用注意事项进行了综述,为益生素的深入研究及应用提供参考。     

益生素作用机理及其在现代畜牧生产中的应用

目前由细菌引起的疾病一般都通过抗生素来治疗,但是抗生素的滥用使得大部分细菌对其产生了不同程度的抗性,给疾病治疗及人类健康带来隐患。寻找有益的抗生素替代品已成为亟待解决的问题,而以菌治菌的方法正日益被人们接受。实践证明益生素是一种可直接饲喂动物并能促进动物肠道菌群平衡的微生态制剂,可部分替换抗生素作为饲料添加剂,有望解决抗生素残留问题及动物耐药问题,对畜牧业发展具有不可估量的作用。作者将就益生素菌种的选择、作用机理及提高其作用效果的措施等方面展开综述。     

利用蛋白质组学技术研究益生菌酸耐受应答过程中相关蛋白的变化

在发酵乳制品或消化道的酸性环境中,益生菌会产生酸耐受应答,进而发生代谢变化.蛋白质组学技术可以让人们更好地了解这些变化,深入揭示益生菌的酸耐受机制.本文就益生菌酸耐受应答过程中的蛋白质组学技术应用进展进行综述.     

紫花苜蓿光敏色素A基因片段的克隆及其RNA干扰载体的构建

苜蓿(Medicago sativa L.)的秋眠性是一种光周期效应。研究植物体内重要的光受体-光敏色素A(phyto-chromeA,phyA),可能揭示其调控苜蓿秋眠性的机理。为研究其与苜蓿秋眠性的关系,本研究根据RNA干扰(RNAinterference,RNAi)技术原理,以紫花苜蓿幼嫩叶片为材料,提取总RNA,选取基因cDNA序列同源性较低区域设计特异性引物,并引入相应的酶切位点,利用RT-PCR克隆phyA正、反向片段,经过3次亚克隆,构建了phyA的RNAi表达载体,制备了适合转染植物组织的农杆菌菌液,为获得缺失phyA植株创超了条件。     

益生菌对动物肠道微生物生态学影响的研究进展

益生菌是一种能够扶植正常微生物菌群，颉颃病原菌，把生态失衡调节为生态平衡的活的生物饲料添加剂。作者主要在益生菌对动物肠道微生态学的影响及其作用机制方面进行了综述。