母犬产前接种疫苗对犬细小病毒抗体效价的影响

犬细小病毒病（CPV）具有感染率高、发病急、病程短、死亡率高等特点,已成为目前危害我国养犬业的主要疫病之一。目前针对犬细小病毒,尽管大量采用疫苗进行免疫,但免疫失败现象屡有发生,许多国家均有犬群免疫后暴发CPV的报道．引起了世界各国的重视。其主要原因极有可能与毒株发生变异有关,尤其是2003年以来CPV地方变异的问题日益突出。     

犬细小病毒黑龙江株(CPV-YN)的分离、鉴定及致弱的研究

为研制犬细小病毒(CPV)致弱疫苗,本研究通过将犬的组织样品接种CRFK细胞进行病毒分离,并对分离毒株进行了一系列鉴定。鉴定结果显示,分离的病毒在CRFK细胞上可产生明显的细胞病变(CPE),并且电镜下可以观察到典型的细小病毒粒子;HA效价可达到1∶256。回归动物试验显示该分离株可导致犬出现明显的CPV感染症状,PCR鉴定也进一步确定所分离的病毒为CPV(命名为CPV-YN株)。将CPV-YN株接种CRFK细胞连续传代至110代,在传代过程中,病毒的滴度逐渐提高,由初始的105.5 TCID50/0.1 mL逐渐增加到107.1 TCID50/0.1 mL。同时,CPV对犬的致病力逐渐降低。免疫效力试验结果表明,CPV-YNR可以对用同源强毒攻击的犬提供免疫保护作用,可作为理想的疫苗候选病毒株。     

犬细小病毒PCR诊断方法的建立及对大熊猫粪便的检测

根据GenBank中登录的犬细小病毒(CPV) VP2基因序列,设计合成1对特异性引物;以CPV疫苗株为模板,建立了一种快速检测CPV的PCR检测方法,并应用于CPV诊断.结果显示,以此对引物进行PCR扩增能得到与理论设计值大小一致的342 bp的特异性条带,对犬瘟热病毒(CDV)、犬冠状病毒(CCV)、狂犬病病毒(RV)、新城疫病毒(NDV)和猫泛白细胞减少症病毒(FPV)扩增结果均为阴性;最低可检出约1.4 pg的病毒核酸;重复性试验结果表明,其检测重复性好;对45份临床宠物犬病料进行检测,并与免疫胶体金抗原检测拭纸捡测结果进行比较,吻合率为90.0％.将此方法初步应用于大熊猫粪便中细小病毒的检测,结果表明,从熊猫基地采集的52份正常大熊猫粪便样品中有8份为细小病毒阳性,阳性率为15.3％.大熊猫是通过自然感染还是弱毒苗感染细小病毒的机制还不清楚.     

犬发生细小病毒性肠炎的综合疗法

<正>犬细小病毒简称(CPV)是由犬细小病毒引起的一种急性传染病,临床上以出血性肠炎和心肌炎为特征,且以肠炎型多见。其主要发病原因是由于自然感染了犬细小病毒或潜伏期内注射了几种疫苗所致,发病率较高。目前,由于对本病尚无特殊疗法,致     

犬发生细小病毒性肠炎的综合疗法

<正>犬细小病毒简称(CPV)是由犬细小病毒引起的一种急性传染病,临床上以出血性肠炎和心肌炎为特征,且以肠炎型多见。其主要发病原因是由于自然感染了犬细小病毒或潜伏期内注射了几种疫苗所致,发病率较高。目前,由于对本病尚无特殊疗法,致     

犬细小病毒VP2蛋白特点及病毒样颗粒疫苗制备研究进展

犬细小病毒病危害犬的健康,传统疫苗不能有效保护犬免受病毒的侵扰,寻求新的疫苗是当前研究和关注的热点。VP2蛋白是犬细小病毒(Canine parvovirus, CPV)的主要保护性抗原蛋白,在决定宿主范围和入侵过程中起重要作用。此外,VP2蛋白在N-端结构域和环结构域中含有几个重要的B细胞表位,可在CPV感染过程中诱导产生有效的中和抗体。因此,在开发CPV基因组亚单位疫苗中,VP2蛋白可作为候选抗原的首选。病毒样颗粒(VLPs)与天然病毒相似,但不具备天然病毒的复制功能引起机体发生感染,故近几年来利用不同的表达系统组装VP2蛋白一直是研究者们研究的重点。笔者着重对CPV VP2蛋白的特点及构象进行分析,通过特点分析得知CPV衣壳的主要成分中含有VP2,不但具有血凝活性,还与CPV的宿主范围和抗原性密切相关,因此,有活性的VP2蛋白在CPV基因工程亚单位疫苗的开发中极其重要。通过构象分析得知CPV VP2蛋白环状结构(Flexible loop)具有更大的灵活性,这可能是CPV感染宿主范围不断扩大的分子基础。同时笔者对VLPs疫苗的制备方法及优缺点进行讨论,以期为CPV疫苗的研究制备提...     

犬细小病毒流行病学调查诊断研究

犬细小病毒病是由犬细小病毒(CPV)引起的一种发病急、死亡率高、高度传染性疾病,临床主要表现为出血性肠炎和心肌炎两种类型,对养犬业和宠物犬行业造成较大危害,目前该病主要通过接种疫苗进行免疫预防。犬细小病毒病感染率与犬的年龄、品种、免疫情况、环境、季节等因素密切相关,本文主要阐述犬细小病毒的病原学特征、临床症状、常见检测方法、防治措施等。     

季节因素对犬细小病毒易感性影响的研究报告

犬细小病毒病是兽医临床较为常见且危害较大的传染病,其病原为犬细小病毒(Canine Parvovirus,CPV)。为更好地防控犬细小病毒病,降低病毒感染率及其对养犬业造成的危害,笔者统计2015年5月-2018年5月一定区域内不同月份(季节)感染CPV犬的病例信息,分析季节因素对CPV发病率的影响,以期为兽医临床防治CPV及犬只的科学饲养和免疫提供指导。     

青岛地区3株犬细小病毒全基因组分析

为了探明青岛地区免疫过犬细小病毒(CPV)疫苗的犬因犬细小病毒感染死亡的原因，本研究采用全基因序列测定、系统进化树构建、基因分型和氨基酸分析的方法，对从临床发病犬中分离的3株CPV进行分析。结果显示，本实验室于2012年和2015年分离到的2株病毒(CPV-QD12和CPV-QD15)为new CPV-2a型，本研究分离到的1株病毒(CPV-QD20)为CPV-2c型；3株CPV在VP2的第5、267、297、324、370、426、440位氨基酸，NS1的第60、544、545、572、624、630位氨基酸发生了非同义替代。目前广泛使用的进口CPV弱毒活疫苗的基因型为原始的CPV-2型，与CPV流行毒株的基因型存在差异，这可能是造成CPV临床免疫失败的重要原因。因此，为了提升CPV疫苗的保护效率，建议使用CPV流行毒株研发CPV疫苗。     

犬细小病毒抗体效价监测与疫苗免疫效果分析

正近几年,伴随着犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)毒力、宿主嗜性(犬、猫)等生物学特性的变化,免疫犬感染不同亚型病毒的报告屡见不鲜,尤其在规模化犬场内,CPV的感染比例仍居高不下,一段时期内甚至会出现急剧增高的趋势,为调查这些异常的流行病学状况,我们在本地区多个养殖场内随机选择了514头犬进行了抗体效价监测,并结合其免疫日龄、疫苗种类等因素,从血清学角度分析了首免时间、疫苗品质对免     

浅谈中西药结合治疗犬细小病毒病

<正>犬细小病毒病是由犬细小病毒(CPV)引起的急性致死性传染病,对养犬业危害极大,其特征是非化脓性心肌炎或出血性肠炎。临床治疗主要是出血性肠炎细小病毒     

乙酰谷氨酰胺辅助治疗犬细小病毒病的体会

正犬细小病毒病是由犬细小病毒(CPV)引起的犬的一种急性、烈性、高度传染性传染病。CPV感染主要分为肠炎型和心肌炎型,临床上以肠炎型为主。1岁以下未免疫的幼犬易感性较高,主要以呕吐、腹泻甚至便血、脱水为主要症状。肠炎型细小病毒主要侵害胃肠道。而胃肠黏膜细胞修复及功能的尽早恢复是细小病毒病犬康复过程中是重要的环节。谷氨酰胺是一种非必需氨基酸,但在促进免疫功能、维持小肠黏膜上皮细胞形态功能方面有着极其重要的作用。现笔者把将乙酰     

规模化制备驴抗犬细小病毒免疫球蛋白(CPV-Ig) 最佳《免疫程序》的试验报告

免疫血清 (Immuneserum)是一类含有特异性抗体用于诊断疾病或鉴定微生物的生物制剂 ,驴抗免疫球蛋白 (CPV -Ig)亦属生物制剂。它主要来源于血清中 ,可从免疫动物血液中提取。免疫球蛋白是抗感染免疫的主力 ,具有抗菌、抗病毒和抗外毒素等多种活性[1]。犬细小病毒免疫球蛋白(Ig)经实验室试验 ,和本中心两个宠物门诊临床治疗以及在全国各地防治犬细小病毒性肠炎的临床应用 ,收效显著。是目前防治该病较理想的生物制剂。1材料与方法1.1材料1.1.1抗原犬细小病毒弱毒株(简称CPV -XN1)和犬细小病毒强毒株 (简称CPV -XN931)均由第四军医大学…     

犬细小病毒病的诊疗

犬细小病毒病是由犬细小病毒(CPV)引起的一种急性传染病,又称犬传染性出血性肠炎。该病的发生主要与气候变化,个体抵抗力大小,是否接种犬细小病毒疫苗有着密切的关系。2008～2009年,利用动物医院诊疗的55例病例,开展了CPV病诊疗方法的研究,使该病的治愈率由不到50%提高到90%。就该病的一些主要症状与治疗方面进行了介绍。     

犬细小病毒基因疫苗单克隆抗体的制备

为获得可用于犬细小病毒(CPV)感染的治疗和快速诊断的单克隆抗体,从病料中分离了1株犬细小病毒,经PCR扩增VP1全基因并进行序列分析,确定为CPV-2 a型。再将VP1基因克隆到真核表达质粒pc DNA3中,构建了基因疫苗pc DNA3-VP1。用该基因疫苗免疫BALB/c小鼠3次后,取抗体效价高的两只小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,经间接ELISA检测,结果获得了3株杂交瘤细胞株,该3株单抗与犬、猫细小病毒能发生反应,均不与犬瘟热病毒、流感病毒和犬腺病毒发生反应,诱生的腹水可体外中和犬细小病毒,其中两株单抗的中和效价为1∶256,1株单抗腹水的中和效价低于1∶128。结果表明,该CPV VP1基因疫苗可制备具有一定中和效价的CPV单克隆抗体。     

犬细小病毒多重PCR检测方法的建立和临床应用

<正>犬细小病毒病是由犬细小病毒(Canine paryovirus,CPV)引起的多发生于幼犬的致死性传染病,主要表现为出血性肠炎和心肌炎[1]。CPV属于细小病毒科细小病毒属猫细小病毒亚群,其基因组为单股负链DNA。该病毒最早由美国学者A.K.Eugster等[2]于1977年从患肠炎的病犬中分离获得。此后,世界各国均有CPV感染家养犬及野生犬科动物的报道[3-4]。田克恭等[5]建立了CPV分型鉴定的PCR方     

犬细小病毒感染的诊断与防治

犬细小病毒感染又称犬传染性出血性肠炎,是由犬细小病毒(CPV)引起的一种以出血性肠炎综合征和心肌炎综合征为特征的高传染性、高死亡率的疫病,对犬的危害极大。1发病特点犬细小病毒主要感染犬,猫虽感染,但无临床症状。CPV对不同品种、年龄的犬,一年四季都可感染发病,但寒冷、阴     

用无针注射器接种犬细小病毒疫苗免疫效果研究

为了研究无针注射器接种犬细小病毒疫苗的免疫效果,试验将15只42～45日龄健康拉布拉多寻回犬和15只金毛寻回猎犬随机分成3组,每组10只(每个品种5只),分别为有针注射1头份组(含犬细小病毒抗原NL-35-D株)、无针注射1头份组和无针注射1/2头份组。有针注射1头份组采用有针注射器接种1头份卫佳伍疫苗,无针注射1头份组和无针注射1/2头份组采用无针注射器分别接种1头份、1/2头份。首免后第14,28天采用同样的方法进行二免和三免。免疫后观察犬的临床反应;分别于首免、二免和三免后第14天采血、分离血清,用犬细小病毒(CPV Ab)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒检测抗体浓度,根据产生的抗体浓度判断免疫效果。结果表明：无针注射1头份和1/2头份组犬没有出现炎症反应和其他不良反应,疼痛明显降低;各组试验犬二免后第14天抗体水平均能达到保护作用;首免、二免和三免后第14天三组比较,无针注射1头份组和无针注射1/2头份组抗体水平均略高于有针注射1头份组,但差异不显著(P>0.05)。说明采用无针注射器接种犬细小病毒疫苗免疫效果确实、安全。     

白细胞介素 2对犬细小病毒疫苗免疫效果的影响

为研究白细胞介素 2（IL-2）对犬细小病毒疫苗免疫效果的影响,选择40只幼犬,随机分成试验组和对照组,试验组按0.5 ml/头份加入犬用IL-2与犬细小病毒疫苗一起皮下注射,对照组单独使用犬细小病毒疫苗,注射后分别在接种前、接种后7 d和14 d使用金标试纸条检测其抗体效价,并进行组间抗体效价差异的t检验。试验结果表明,接种疫苗前试验组与对照组犬细小病毒平均抗体效价之间差异不显著;接种疫苗后7 d,试验组与对照组犬细小病毒平均抗体效价差异极显著(P<0.01);接种疫苗后14 d,试验组与对照组犬细小病毒平均抗体效价差异极显著(P<0.01)。试验表明：IL 2可明显提高幼犬对犬细小病毒疫苗的抗体应答能力,是一种良好的犬细小病毒疫苗候选佐剂。     

白细胞介素-2对犬细小病毒疫苗免疫效果的影响

为研究白细胞介素-2(IL-2)对犬细小病毒疫苗免疫效果的影响,选择40只幼犬,随机分成试验组和对照组,试验组按0.5 ml/头份加入犬用IL-2与犬细小病毒疫苗一起皮下注射,对照组单独使用犬细小病毒疫苗,注射后分别在接种前、接种后7 d和14 d使用金标试纸条检测其抗体效价,并进行组间抗体效价差异的t检验。试验结果表明,接种疫苗前试验组与对照组犬细小病毒平均抗体效价之间差异不显著;接种疫苗后7 d,试验组与对照组犬细小病毒平均抗体效价差异极显著(P<0.01);接种疫苗后14 d,试验组与对照组犬细小病毒平均抗体效价差异极显著(P<0.01)。试验表明:IL-2可明显提高幼犬对犬细小病毒疫苗的抗体应答能力,是一种良好的犬细小病毒疫苗候选佐剂。