Raf蛋白在犬乳腺肿瘤中的表达及临床意义

目的:检测B-Raf和Raf1蛋白在犬乳腺肿瘤组织中的差异表达,明确其在犬乳腺肿瘤发生发展中的作用。方法:采用病理组织学技术对临床疑似肿瘤进行良恶性质鉴定,免疫组织化学技术检测犬乳腺肿瘤中Raf1和B-Raf蛋白的差异表达。结果:Raf1蛋白的阳性表达率为94.74%(18/19),B-Raf蛋白的阳性表达率为47.37%(9/19),两种蛋白在犬乳腺肿瘤中的表达呈显著性差异(P0.01)。不同性质的犬乳腺肿瘤中Raf1表达未见显著性差异,恶性肿瘤中导管内癌和浸润性乳腺癌Raf1蛋白的表达呈边缘显著性差异(P=0.072)。结论:Raf1蛋白和B-Raf蛋白对犬乳腺肿瘤的发生发展起促进作用,Raf1蛋白发挥着更为广泛和重要的促进肿瘤恶性变的作用。Raf1可作为兽医临床潜在的肿瘤检测指标。     

肿瘤坏死因子α诱导蛋白8、2和Caspase-8在乳腺肿瘤中的表达及临床意义

目的探讨乳腺肿瘤组织中肿瘤坏死因子α诱导蛋白8(TNFAIP8)、肿瘤坏死因子α诱导蛋白2(TNFAIP2)和半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶8(Caspase-8)的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学SP法检测45例乳腺癌及35例乳腺腺瘤组织中TNFAIP8、TNFAIP2、Caspase-8的表达并分析其相互关系和临床意义。结果 TNFAIP8、TNFAIP2在乳腺癌组织中的阳性表达率均高于乳腺腺瘤组织(P0.05),Caspase-8在乳腺癌组织中的阳性表达率低于乳腺腺瘤组织(P0.05)。乳腺肿瘤组织中TNFAIP8的表达与Caspase-8的表达呈负相关(r=-0.612,P0.05),TNFAIP2的表达与Caspase-8的表达呈负相关(r=-0.647,P0.05)。TNFAIP8、TNFAIP2、Caspase-8的表达水平与年龄、部位无关(P0.05),与癌细胞浸润、淋巴结转移相关(P0.05)。结论乳腺癌的发生发展可能与TNFAIP8、TNFAIP2的高表达及Caspase-8的低表达有关。     

缺氧诱导因子1α在急性心肌梗死中的研究进展

<正>急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)是临床上常见的高危心血管病急症,具有发病急、进展迅速、并发症多、病死率及致残率高等特点,严重危害人类健康。冠脉内粥样斑块形成、破裂,继而血小板黏附、聚集,在此基础上血栓形成,血管急性闭塞引起的急性心肌缺血、缺氧和坏死是AMI发生发展的主要病理机制。据统计,约1/3的AMI患者临床症状并不典型,从而延误最佳诊疗时机,引发一系列严重的心血管终点事件,因此,对AMI     

前列腺增生和前列腺癌中缺氧诱导因子-1α的表达

目的探讨前列腺癌及前列腺增生组织中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达情况。方法 CD34单克隆抗体免疫染色鉴别微血管;细胞质单克隆抗体染色识别血管内皮生长因子(VEGF)阳性细胞;细胞核单克隆抗体染色识别HIF-1α阳性细胞。结果前列腺癌组织中CD34、VEGF和HIF-1α染色率显著高于前列腺增生组织,CD34和HIF-1α、VEGF和HIF-1α及CD34和VEGF具有相关性。结论前列腺癌组织中MVD、VEGF与HIF-1α水平显著高于前列腺增生组织。     

核因子-kB与鼻息肉组织中缺氧诱导因子-1α表达的相关性研究

目的 观察核因子-kB（NF-kB）与鼻息肉组织中缺氧诱导因子-1a（HIF-1a）表达水平的相关关系，以探讨鼻息肉发病的可能机制。方法：运用免疫组化SP法检测鼻息肉组织中NF—kB、HIF-1a的表达水平，采用t检验和直线相关分析进行组间差异和相互关系的统计学分析。结果：鼻息肉组织中NF-kB、HIF-1a的表达水平明显高于下鼻甲黏膜（P〈0．001），鼻息肉组织中NF-kB与HIF—1a表达水平呈中度的正相关关系（r=0．628．P〈0．001）。结论，NF—kB、HIF—1a在鼻息肉组织中里阳性表达，其表达强度高于下鼻甲黏膜，与鼻息肉的发生发展相关：NF—kB可能通过上调HIF—1a的表达而作用于鼻息肉的形成过程。     

缺氧诱导因子2α在大鼠早期妊娠中的表达与调节

利用原位杂交、免疫组织化学、Western blot以及荧光定量PCR等试验技术,研究HIF-2α基因在大鼠早期妊娠1～9 d、激素处理、人工诱导蜕膜化及体外诱导人子宫基质细胞蜕膜化模型中表达情况。妊娠1～5 d子宫基质细胞中低表达;妊娠第6天在围绕着床位点子宫基质细胞中HIF-2α表达升高;妊娠第7～9天HIF-2α蜕膜中表达逐渐增强;24 h雌激素和孕酮处理HIF-2α在子宫中表达无变化。HIF-2α在人工诱导蜕膜化子宫中高表达。在体外诱导人子宫内膜基质细胞蜕膜化模型中,HIF-2α随诱导天数增加表达升高。体内体外试验结果表明,HIF-2α可能在早期妊娠蜕膜化过程中发挥作用。     

p63和Calponin蛋白在犬乳腺肿瘤中的表达及意义

为便于确定肿瘤的组织学来源,推测其在兽医临床诊断中的鉴别意义,研究p63和Calponin蛋白在20例犬乳腺肿瘤(canine mammary tumor,CMT)病例中的表达,采用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)SP染色方法和光学显微镜观察进行确诊。结果表明,鼠抗人单克隆抗体p63和Calponin可用于犬乳腺肿瘤病例中肌上皮的表达研究,在乳头状瘤、混合瘤及腺肌上皮瘤等犬良性乳腺肿瘤组织中p63与Calponin表达为阳性或强阳性;在乳头状癌、浸润性导管癌等恶性肿瘤组织中p63与Calponin蛋白表现为阴性或局灶阳性。选择p63与Calponin作为犬乳腺肿瘤组织基底和腺肌上皮细胞的标记物有一定的敏感性和特异性,对良、恶性乳腺肿瘤组织、乳腺肿瘤或癌旁组织的来源和临床诊断等具有鉴别和指导作用。     

核因子-κB与鼻息肉组织中缺氧诱导因子-1α表达的相关性研究

目的:观察核因子-κB(NF-κB)与鼻息肉组织中缺氧诱导因子-1α(H IF-1α)表达水平的相关关系,以探讨鼻息肉发病的可能机制。方法:运用免疫组化SP法检测鼻息肉组织中NF-κB、H IF-1α的表达水平,采用t检验和直线相关分析进行组间差异和相互关系的统计学分析。结果:鼻息肉组织中NF-κB、H IF-1α的表达水平明显高于下鼻甲黏膜(P<0.001),鼻息肉组织中NF-κB与H IF-1α表达水平呈中度的正相关关系(r=0.628,P<0.001)。结论:NF-κB、H IF-1α在鼻息肉组织中呈阳性表达,其表达强度高于下鼻甲黏膜,与鼻息肉的发生发展相关;NF-κB可能通过上调H IF-1α的表达而作用于鼻息肉的形成过程。     

低温诱发肉鸡腹水综合征过程中缺氧诱导因子-1α的动态表达

【目的】通过测定环境低温诱发AS发生发展过程中缺氧诱导因子-1α表达的动态变化,初步探讨HIF-1α与AS发生发展之间的关系。【方法】100只商品代肉公雏,15d时随机分为常温对照组(22~24℃)和低温组(9~11℃)。各组在22、29、36和43d随机选取6只鸡,测定mPAP、AHI和心、肺组织中HIF-1αmRNA的表达量,试验结束后统计腹水发生率。【结果】低温组AS发生率(22%)显著高于对照组(4%)(P0.05);低温组肉鸡mPAP和AHI显著或极显著高于对照组(P0.05,P0.01);低温组肉鸡心脏HIF-1αmRNA表达量显著或极显著(P0.05,P0.01)增加;肺脏HIF-1αmRNA表达量类似于同时间点的心脏。【结论】低温诱发AS发生过程中,肉鸡心脏和肺脏HIF-1α表达量明显增加,可能参与肉鸡AS的发生发展。     

乳腺肿瘤基质金属蛋白酶-13的表达及其临床意义

目的探讨乳腺肿瘤中基质金属蛋白酶（MMP）-13的表达及其与其他生物学指标和临床预后的关系。方法采用组织芯片及免疫组织化学SP法检测183例乳腺癌组织和30例乳腺良性疾病组织中MMP-13、ER、PR、HER2、MMP-2、MMP9、表皮生长因子受体（EGFR）、基质金属蛋白酶组织抑制因子TIMP-1、TIMP-2的表达并分析相互关系,同时分析MMP-13与肿瘤临床病理分期、淋巴结转移状态、组织学分级、肿瘤大小、年龄、月经状态、病理类型、雌孕激素受体状态以及临床预后等的关系。结果MMP-13的表达与TIMP-1、TIMP-2均呈负相关,与HER2的表达呈正相关,而与ER、PR、MMP-2、MMP-9、EGFR的表达水平不相关。MMP-13的表达与淋巴结转移和高组织学分级相关（均P〈0．01）。MMP-13低表达组10年生存率与高表达组10年生存率差异有统计学意义（98．4％vs68．3％,P〈0．01）。结论MMP-13蛋白与浸润性乳腺癌的侵袭和转移相关,可作为判断预后不良的指标。     

犬干扰素α1和胸腺肽α1融合蛋白在毕赤酵母GS115中的表达

为探索犬干扰素和胸腺肽融合蛋白的抗病毒活性,根据已知的基因序列,合成了犬干扰素(IFNα1)和胸腺肽(THYα1)的基因片段,通过一个连接肽将IFNα1和THYα1片段连接起来。将该基因克隆于pPIC9K载体中,构建重组质粒pPIC9K-IFNα1-THYα1,转化到感受态细胞毕赤酵母GS115受体菌中,30℃培养18h至菌体OD600nm值约为4时用甲醇诱导培养5d,使最终浓度维持1%,经SDS-PAGE和Western-blot鉴定证实,获得高纯度的重组蛋白。以MDCK/VSV抗病毒检测系统对目的蛋白进行体外活性检测,结果显示该蛋白具有抗病毒活性。     

Menin蛋白在甲状旁腺肿瘤中的表达及临床意义

目的：探讨menin蛋白在甲状旁腺肿瘤发生中的作用及临床意义。方法：27例标本包括正常甲状旁腺组织4例、甲状旁腺增生组织6例、甲状旁腺腺瘤组织17例，通过免疫组化法检测它们中menin蛋白的表达，并进行分组比较。结果：腺瘤组menin的表达明显低于正常组及增生组（P〈0．05），正常组同增生组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：menin蛋白的失活可能在甲状旁腺肿瘤的发生中起重要作用。     

子痫前期孕妇血清缺氧诱导因子-1α水平的变化及意义

目的观察子痫前期孕妇血清缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）水平的变化及意义。方法采用ELISA法检测58例子痫前期（子痫前期组,包括轻度28例,重度30例）,20例正常孕妇的血清HIF-1α水平。结果子痫前期患者血清HIF-1α水平为（129.6±23.3）pg/L,明显高于正常孕妇的（41.2±17.5）pg/L（P〈0.01）;随着病情的加重,患者血清HIF-α水平亦明显升高,轻度组HIF-α水平为（118.8±29.7）pg/L,重度组为（196.9±33.6）pg/L,两者比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论 HIF-1α参与了子痫前期缺氧的病理生理过程,且HIF-1α在子痫前期患者血清水平与子痫前期的严重程度有关。     

缺氧诱导因子调节的靶基因在宫颈癌组织中的表达

目的：探讨缺氧诱导因子在宫颈癌发生发展过程中的作用。方法：应用免疫组织化学SP染色法观察正常宫颈28例、宫颈上皮内瘤样变（CIN）32例、浸润性宫颈鳞癌98例中缺氧诱导因子-1a（hypoxia inducible factor-1a,HIF-1a）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、P糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp）的表达。结果：HIF-1a在正常宫颈、宫颈上皮不典型增生和浸润性宫颈癌组织中的表达分别为10.71%、37.50%、76.53%;VEGF的表达分别14.29%、46.88%、70.41%;P-gp的表达分别为21.43%、37.50%、54.08%。HIF-1a和VEGF随着宫颈病变的发展表达逐渐升高（从正常宫颈到宫颈上皮非典型增生再到浸润性宫颈鳞状上皮癌）,且各组间差异有显著性（P〈0.05）;P-gp的表达也逐渐升高,其在正常宫颈上皮的表达与浸润性宫颈癌组织中的表达差异有显著性（P〈0.05）,但其在正常组和CIN组以及CIN组和浸润性宫颈癌组中的表达差异较小,无显著性意义（P〉0.05）。相关分析表明,VEGF的表达与HIF-1a的表达显著相关（r=0.585,P〈0.01）,而P-gp的表达与HIF-1a的表达无相关性（P〉0.05）。结论：HIF-1a在宫颈癌组织中过度表达与宫颈癌的发生发展相关,这可能是通过调控VEGF的表达实现的。     

IL-24对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、细胞周期和缺氧诱导因子-1α表达的影响

目的观察IL-24对瘢痕疙瘩成纤维细胞（KF）的抑制效应及缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）表达的影响。方法建立KF组、携带绿色荧光蛋白表达质粒的KF组（pEGFP-KF组）、携带转染IL-24基因表达质粒的KF组（IL-24-pEGFP-KF组）,用噻唑蓝法及流式细胞术检测KF增殖、细胞周期变化。建立KF、pEGFP-KF、IL-24-pEGFP-KF细胞株裸鼠移植瘤模型,免疫组织化学检测KF中HIF-1α表达。结果 IL-24-pEGFP-KF组较pEGFP-KF组、KF组到达平台期延迟,IL-24明显抑制了细胞增殖（P〈0.05）。IL-24-pEGFP-KF组的G0/G1期比例明显高于pEGFP-KF组、KF组,而S、G2/M期比例明显降低（P〈0.05）。IL-24-pEGFP-KF组的HIF-1α表达明显低于pEGFP-KF组和KF组。结论 IL-24可抑制KF增殖和HIF-1α表达,阻止细胞周期于G0/G1期。     

PTEN、VEGF蛋白表达与犬乳腺肿瘤病理学特征的关系

为探讨犬的乳腺肿瘤组织中PTEN和VEGF蛋白表达与临床病理学特征关系的相关性,采用免疫组织化学SP染色法检测了32例乳腺肿瘤组织及6例正常乳腺组织中上述2种蛋白的表达。结果发现:1)PTEN蛋白在正常乳腺组织和良性乳腺肿瘤高表达率为100%,在恶性乳腺肿瘤组织中的高表达率为67%(8/12),两者比较差异极显著(P<0.01);乳腺肿瘤组织中PTEN蛋白表达与犬的年龄、肿瘤大小无关(P>0.05),而与淋巴结转移、组织学分级有关(P<0.01)。2)VEGF蛋白在正常乳腺组织中高表达率为33.3%(2/6),在乳腺肿瘤组织中高表达率为78%(25/32),两者比较差异极显著(P<0.01);乳腺肿瘤组织中VEGF蛋白表达与患病犬的年龄、肿瘤大小无关(P>0.05),而与淋巴结转移有关(P<0.05)。联合检测PTEN、VEGF表达可作为乳腺癌生物学行为和预后判断的重要指标。     

TNFAIP8和TNFAIP2在乳腺肿瘤中的表达及临床意义

目的探讨乳腺肿瘤组织中肿瘤坏死因子α诱导蛋白8(TNFAIP-8)和肿瘤坏死因子α诱导蛋白2(TNFAIP-2)的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学染色SP法检测46例乳腺癌及36例乳腺腺瘤组织中TNFAIP8、TNFAIP2表达,分析其与临床病理特征的关系。结果乳腺腺瘤组织中TNFAIP8、TNFAIP2的表达与乳腺癌中的表达比较差异有显著性(P0.05);TNFAIP8、TNFAIP2表达水平与年龄、患病部位无相关性(P0.05);与淋巴结转移相关,差异有统计学意义(P0.05)。结论TNFAIP8家族在乳腺癌发生、发展、转移中可能发挥重要作用,TNFAIP8、TNFAIP2有可能成为乳腺癌治疗的新靶点。     

犬α1干扰素在毕赤酵母中的分泌表达及其抗病毒活性研究

亚克隆犬α1干扰素(CaIFN-α1)成熟蛋白编码基因并克隆到表达载体pPICZα-A,构建转移重组载体pPICZα-A-CaIFN-α。pPICZα-A-CaIFN-α经SacⅠ酶切线性化后电转化导入毕赤酵母菌株X-33。转化子经PCR分析鉴定后利用甘油增菌和甲醇诱导,实现了CaIFN-α1在毕赤酵母系统中的分泌表达。SDS-PAGE检测结果表明表达产物相对分子质量约为2.7×104,比其推导结果(约1.9×104)大,推测可能是发生了糖基化。酵母分泌表达的CaIFN-α1具有较高的抗病毒活性,约为1.45×106U·mL-1,蛋白含量约为96mg·L-1,比活性为1.49×107U·mg-1。重组CaIFN-α1的生物学活性具有较强的种属特异性,在犬肾细胞(MDCK)上具有很高的抗病毒活性,在鸡胚成纤维细胞上活性较低,而在猫肾细胞(F81)和牛肾细胞(MDBK)上几乎没有抗病毒活性。进一步研究发现,重组犬α1干扰素对犬瘟热病毒和伪狂犬病毒在犬肾细胞中的增殖具有显著抑制作用。     

肝素结合蛋白在脑膜炎患者中的表达及其临床意义

目的 了解肝素结合蛋白(HBP)在脑膜炎中的表达情况及其临床意义.方法 选取急性细菌性脑膜炎患者27例、病毒性脑膜炎患者22例及非脑膜炎疾病患者20例,通过酶联免疫吸附法测定研究对象外周静脉血血清和脑脊液中HBP的含量.比较各组间血清和脑脊液中HBP的水平差异,分析HBP对脑膜炎早期诊断和鉴别诊断的效果评价.结果 细菌...     

犬IFNα1-THYα1融合蛋白的生物活性检测

用细胞病变抑制试验和E玫瑰花环形成试验检测犬IFNα1-THYα1融合蛋白的生物活性。结果表明,IFNα1-THYα1融合蛋白能够抑制病毒感染的DK细胞,提高玫瑰花环形成率,说明犬IFNα1-THYα1融合蛋白具有一定的犬干扰素α1(IFNα1)与胸腺肽α1(THYα1)的生物活性。