西藏那曲市羊源大肠杆菌分离鉴定及耐药性研究

为了解西藏那曲市羊大肠杆菌的耐药情况，指导临床进行合理用药，本试验从那曲市采集羊新鲜无污染腹泻物92份，进行大肠杆菌显色培养基分离、革兰氏染色镜检、生化鉴定、分子生物学鉴定、致泻性大肠杆菌生化鉴定、药敏试验及耐药基因检测。结果显示，分离菌株在大肠杆菌显色培养基上呈蓝色菌落、革兰氏染色为粉红色的短杆菌，通过生化鉴定及23S rRNA的PCR检测得到26株羊源大肠杆菌，分离率为28.3%；其中25株符合致泻性大肠杆菌生化特性，致泻菌株分离率为27.2%。药敏试验结果显示，所得25株羊源大肠杆菌对氨苄西林的耐药性较高，耐药率为24.0%；对羧苄西林、卡那霉素的耐药性次之，耐药率为8%；对哌拉西林、头孢呋辛、庆大霉素、四环素、米诺霉素等药物耐药率为4%；对诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星等药物极为敏感，可作为临床用药。5种耐药基因检测结果显示，bla_TEM基因检出率为100%，表明分离菌均含有相应的耐药基因。以上结果表明，西藏那曲市羊源大肠杆菌对多种药物耐药，提示在临床实践过程中应注重合理用药、联合用药，减缓大肠杆菌耐药性的产生。     

羊源大肠杆菌血清型鉴定、毒力基因检测及耐药性分析

为分析内蒙古扎兰屯地区羊源大肠杆菌血清型分布、毒力基因及耐药性流行情况,采集患羊鼻腔拭子150份,分离大肠杆菌,并采用O血清型玻板凝集试验、PCR法和K-B药敏纸片法对分离的大肠杆菌致病菌株进行血清型、毒力基因及耐药性检测。结果显示, 45株大肠杆菌致病菌株分属10种血清型,以O111、O127、 O38为流行的优势血清型,分别占致病菌株的26.7%、22.2%和17.8%;分离菌株毒力基因irp2、fyuA、hlyA、hlyE、Ler、eaeA、Ehly检出率在33.3%以上,其他毒力基因检出率在4.4%～14.3%之间;分离菌株对氨苄西林、阿莫西林、新霉素9种药物耐药率在53.3%以上,对其他药物的耐药率在13.3%～26.7%之间。研究表明,内蒙古扎兰屯地区羊源大肠杆菌血清型复杂,携带多种毒力基因,耐药性严重。     

内蒙古地区羊源大肠杆菌耐药性研究

为确定内蒙古地区羊源大肠杆菌的耐药表型及其耐药基因的流行情况,本研究采用微量稀释法测定了内蒙古地区108株羊源大肠杆菌对13种临床常用抗菌药物的最小抑菌浓度。结果显示,分离菌株对阿莫西林、头孢噻吩、磺胺甲唑、黏菌素的耐药率最高,均达100.0%,对阿莫西林/克拉维酸、四环素、环丙沙星的耐药率在50%~80%之间,对头孢噻肟、美洛培南、新霉素的耐药率均低于10%,较为敏感。108株羊源大肠杆菌中耐7种以上药物的菌株占94.4%,其中15.6%菌株对13种抗菌药物耐药,只有1株菌对所有抗菌药物敏感。采用PCR方法对羊源大肠杆菌分离株所携带的6种相关耐药基因进行检测,结果显示,6种耐药基因中的4种耐药基因bla_TEM、proP-2、sul-Ⅰ、ampG检出率超过50%,耐药基因aph（3'）-Ⅰ携带率达40%,只有耐药基因aac（3）-Ⅱ检出率仅为5.5%。由此可见,内蒙古地区羊源大肠杆菌对13种抗菌药物产生了不同程度的耐药性,且存在严重的多重耐药情况,羊源大肠杆菌分离株携带aph（3'）-Ⅰ、sul-Ⅰ、ampG、bla_TEM、proP-2、aac（3）-Ⅱ耐药基因。     

包头地区仔猪源致泻性大肠杆菌进化分群、生物被膜形成能力及耐药性检测

为分析包头地区仔猪源致泻性大肠杆菌进化分群情况、生物被膜形成能力(BF)及耐药性情况。试验采用PCR法、结晶紫微孔板法和K-B药敏纸片法对48株仔猪源致泻性大肠杆菌进行进化分群、生物被膜形成能力及耐药性检测。结果显示,48株仔猪源致泻性大肠杆菌中以B2群和D群流行为主,分别占分离菌株的35.4%和25.0%;48株仔猪源致泻性大肠杆菌对氨苄西林、阿莫西林、新霉素等7种药物耐药率在58.3%以上,对其他药物的耐药率在11.9%～31.3%;48株仔猪源致泻性大肠杆菌中强形成膜能力菌株有20株、中形成膜能力菌株有16株、弱形成膜能力菌株有7株、不形成BF菌株的有5株,分别占分离菌株的41.7%、33.3%、14.6%、10.4%。经分析,48株仔猪源致泻性大肠杆菌的BF形成能力与多黏菌素、新霉素、磺胺间甲氧嘧啶、氟苯尼考、恩诺沙星、氨苄西林、阿莫西林7种药物耐药性存在一定的相关性。本试验为临床中合理用药及该病的防控提供科学依据。     

鸡源大肠杆菌的分离鉴定及耐药特性分析

为了分析鸡源大肠杆菌的耐药特性,对昆明地区3家养鸡场送检的疑似大肠杆菌病的200只鸡进行了剖检,从病鸡肝脏分离出77株病原菌,经常规生化特性鉴定和PCR分子鉴定,确定77株分离株均为大肠杆菌,利用PCR方法对分离株的耐药基因和耐药性进行了研究,同时进行了药敏试验。结果表明:在22种耐药基因中,除β-内酰胺类的OXA、SHV基因未检出外,有14种耐药基因的检出率为100%,其他耐药基因检出率在82.1%以上;在药敏试验中,分离株除对左氧氟沙星的耐药性较低外(48.1%),对试验所用其他药物均具有很强的耐药性(96.1%以上)。说明分离株对抗生素的耐药性更加严重了。     

致羔羊腹泻大肠杆菌血清型鉴定与耐药性分析

为了分析白城地区致羔羊腹泻大肠杆菌流行的血清型与耐药性,从采集的腹泻羔羊粪便样品127份中分离鉴定得到了56株为致病性大肠杆菌。采用玻板凝集法和K-B药敏纸片法分别检测56株致病性大肠杆菌分离株的血清型分布和耐药性情况。结果显示,56株致病性大肠杆菌分离株属于9个血清型,致病性大肠杆菌分离株以O119、O101、O24为流行的优势血清型;56株致病性大肠杆菌分离株且呈现多重耐药性,对头孢克肟、头孢曲松两种药物的耐药率最低,在12.4%~28.6%之间;对阿米卡星、新霉素、多西环素等7种药物的耐药率在50.0%~78.6%之间;对大观霉素、环丙沙星、氧氟沙星等5种药物的耐药率在82.1%~96.4%之间。     

鸡胚源大肠杆菌的分离鉴定及其致病性和耐药性分析

为了解鸡胚来源大肠杆菌的致病性和耐药性情况，本试验对山东省某白羽肉鸡孵化场6个不同批次种蛋孵化后随机抽检的174枚啄壳未出壳死胚的卵黄和胎粪进行了大肠杆菌分离。通过细菌培养、形态观察、生化试验方法鉴定大肠杆菌；通过小鼠攻毒试验和毒力基因PCR检测确定大肠杆菌分离株的致病性；利用纸片扩散法药敏试验检测大肠杆菌分离株的耐药性。结果显示，共分离鉴定大肠杆菌28株；小鼠攻毒试验结果显示，27大肠杆菌分离株对小鼠的致死率达到了50.0%以上，其中有24株超过了83.0%;在检测的14种毒力基因中，papA、papC、eaeA和vat四种基因未检出，fimC检出率最高(85.7%),另外9种毒力基因检出率介于3.6%～64.3%;菌株的致病性与携带的毒力基因数量大致呈正相关；耐药性检测结果显示，大肠杆菌分离株对10种抗菌药物具有不同程度的敏感性，耐药率介于17.9%～89.3%。结果表明，本试验分离的鸡胚源大肠杆菌绝大多数具有致病性，对临床常见抗菌药物存在不同程度的耐药。本试验结果为种鸡场加强大肠杆菌垂直传播的管理和控制以及临床用药的选择提供了参考依据。     

吉林地区乳房炎奶样中大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

为了解吉林省奶牛乳房炎中分离到的大肠杆菌耐药情况,本研究从全省15个奶牛场采集的300份乳样中分离革兰氏阴性菌144株,经生化鉴定获得60株大肠杆菌,药敏实验结果显示:60株大肠杆菌对阿奇霉素、头孢噻呋、阿莫西林、氨苄西林、链霉素、磺胺异噁唑、萘啶酸等完全耐药;95%以上的菌株对头孢西丁、头孢曲松钠、四环素和甲氧苄氨嘧啶耐药;60%的菌株对氯霉素耐药;45%的菌株对庆大霉素耐药;30%的菌株对环丙沙星耐药。研究发现在所有分离的革兰氏阴性菌中大肠杆菌检出率最高,占总检出率的41.67%,且不同奶牛场和不同标本中分离的大肠杆菌对常用抗菌药物的耐药性有着不同的特点。     

广东地区水禽源大肠杆菌对β-内酰胺类药物的耐药性及耐药基因检测

为了调查广东地区水禽源大肠杆菌对β-内酰胺类抗菌药的耐药性和耐药基因的流行情况,本试验于2012—2014年从广东地区患病水禽中成功分离鉴定243株大肠杆菌,采用琼脂二倍稀释法测定大肠杆菌分离株对4种β-内酰胺类药物的敏感性,并通过PCR方法检测耐药株的耐药基因blaCTX-M、blaTEM和blaOXA。药敏试验结果显示,广东各地区的分离株对氨苄西林和阿莫西林耐药率较高,耐药率为80.00%~100.00%;而对头孢他啶和头孢噻呋耐药率较低,耐药率为9.09%~50.00%。PCR检测结果显示,在4种药物的耐药菌株中,耐药基因blaCTX-M、blaTEM和blaOXA的检出率分别为88.46%~90.87%、67.21%~88.52%和51.28%~59.02%。结果表明,水禽大肠杆菌对β-内酰胺类药物普遍具有耐药性,其中青霉素类尤为严重。blaCTX-M、blaTEM和blaOXA基因为广东地区水禽源大肠杆菌携带的主要耐药基因,且耐药基因的普遍存在与临床日益严重的耐药现象有着很大的关系。     

新疆焉耆县羊源葡萄球菌耐药分析及耐药基因检测

为了对新疆焉耆地区羊源葡萄球菌耐药性及其携带的相关耐药基因情况进行检测,为该养殖场今后合理用药提供科学依据,采用微量肉汤稀释法对分离的275株葡萄球菌进行11种常用抗菌药物的药敏试验,并检测了部分相关耐药基因(cfr、fex A、mec A、tet K和tet M)。结果显示:分离的葡萄球菌对青霉素的耐药率高达90.4%,其次为苯唑西林,耐药率为69.1%,对其他被检药物的耐药率在1.4%~38.6%之间;基因检测显示,2株菌携带cfr基因(0.7%,2/275),14株菌携带fex A基因(5.1%,14/275),3株菌携带mec A基因(1.1%,3/275),5株菌携带tet K基因(1.8%,5/275),所有菌株均携带tet M基因(100%,275/275)。结果表明:新疆焉耆地区羊源葡萄球菌对青霉素和苯唑西林高度耐药,提示临床用药应根据药敏试验结果选用敏感药物,如庆大霉素、利福平等,缩短治疗周期和提高治疗效果;耐药基因的检出表明耐药性转移的风险增高,应加强对该地区养殖场的耐药监测。     

新疆部分地区生乳中金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药性分析

【目的】探明新疆部分地区生乳中金黄色葡萄球菌流行情况及耐药性,为该地区生乳中金黄色葡萄球菌的监测及保障生乳质量安全提供理论依据。【方法】试验随机从南北疆规模化奶牛场采集110份生乳样品。采用增菌培养、分离纯化、革兰氏染色、生化鉴定及PCR法对奶样中金黄色葡萄球菌进行分离鉴定,并利用微量肉汤稀释法及PCR方法对金黄色葡萄球菌进行16种抗菌药物的耐药表型及耐药基因分析。【结果】从110份奶样中分离出18株金黄色葡萄球菌,分离株呈浅黄色、光滑凸起的圆形菌落,革兰氏染色镜检呈紫色、短链状排列的革兰氏阳性菌,生化试验结果符合金黄色葡萄球菌生化特点,经16S rDNA及nuc基因PCR扩增鉴定为金黄色葡萄球菌,分离率为16.36%(18/110)。药敏试验结果显示,金黄色葡萄球菌分离株对氨苄西林、青霉素及磺胺异噁唑具有较高的耐药性,耐药率分别为100%、83.33%和77.78%,而对万古霉素、复方新诺明、苯唑西林、头孢噻吩、头孢噻呋、利福昔明及环丙沙星7种抗菌药物高度敏感,敏感率分别为100%、100%、94.44%、94.44%、94.44%、94.44%和94.44%。其中有14株金黄色葡萄球菌为多重耐药菌,多重耐药率为77.78%。耐药基因检测结果显示,大环内酯类耐药基因ermB检出率最高,为50.00%,其次为β-内酰胺类耐药基因mecA,检出率为27.28%,磺胺类耐药基因Sul1的检出率为22.22%。【结论】新疆奶牛场生乳中分离的金黄色葡萄球菌的流行及耐药情况仍较严重,且存在多重耐药现象,因此,对生乳中金黄色葡萄球菌耐药性的监测有重要意义。     

西藏牦牛源大肠杆菌主要耐药表型及耐药基因检测

对西藏6个不同地、市200株牦牛源大肠杆菌进行了氨基糖苷类、氟苯尼考和磺胺类药物耐药表型和耐药基因的PCR检测。结果显示:牦牛源大肠杆菌对氨基糖苷类药物耐药率分别为阿米卡星96%、链霉素94.59%、新霉素19%、庆大霉素23%、卡那霉素19%,耐药基因只检出rmtB基因,检出率为100%;氟苯尼考类药物耐药率为25%,耐药基因flor基因检出率25%;磺胺类药物耐药率为32%,耐药基因sul1基因检出率7%、sul2基因检出率7%、sul3基因检出率17%;且耐药表型与耐药基因检测结果基本一致,同时显示,西藏不同地区间牦牛大肠杆菌的耐药性存在差异,人口密集和流动较大的拉萨、林芝、日喀则市耐药现象较为严重,而阿里、山南和那曲地区相对较轻。以上耐药表型和耐药基因在西藏不同市、地区均有检出,同时存在多重耐药现象。结果表明,西藏牦牛源大肠杆菌存在耐药性,应引起重视,提示西藏地区要合理用药,减轻耐药性的产生。     

鸭源致病菌的分离鉴定及耐药性分析

从临床发病鸭中分离到的57株细菌进行了鉴定和药敏检测。通过常规培养和生化试验鉴定出11株大肠杆菌;通过16S rRNA基因的PCR扩增和测序确诊了13株沙门菌和33株鸭疫里默菌。纸片法药敏试验结果显示,分离菌株对20种抗菌药物有不同程度的耐药性。利用PCR方法检测了喹诺酮类、β-内酰胺类等耐药基因在分离株的分布情况,结果显示,纸片扩散法检测的菌株的耐药表型与耐药基因并非完全一致,耐药菌株中有60%以上的菌株能检测到相应的耐药基因。     

桂林地区致仔猪腹泻大肠杆菌血清型鉴定与耐药性分析

为了了解桂林地区致仔猪腹泻大肠杆菌血清型分布与耐药性,从桂林地区不同养猪场中采集患腹泻仔猪肝脏、肛拭子及粪便等病料中分离到67株大肠杆菌。致病性试验结果显示,在67株大肠杆菌中52株为致病性大肠杆菌。采用玻板凝集法和K-B药敏纸片法对52株致病性大肠杆菌进行血清型鉴定和耐药性分析,结果表明,52株致病性大肠杆菌共属于12个血清型,以O149、O109和O9为流行的优势血清型;52株致病性大肠杆菌呈现多重耐药,对阿莫西林、磺胺间甲氧嘧啶、新霉素3种药物的耐药率高达100%,对环丙沙星、恩诺沙星、氨苄西林等9种药物的耐药率在51.9%～98.1%之间;对其他药物的耐药率在23.1%～48.1%之间。本试验为该地区致仔猪腹泻大肠杆菌防控提供了参考依据。     

新疆某规模化牛场乳房炎金黄色葡萄球菌的分离鉴定及药敏试验

为了解新疆某规模化牛场奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的感染情况以及对常用抗生素药物的敏感程度。从该牛场采集50份乳样,采用细菌分离培养、16S rRNA鉴定、生化鉴定等方法对菌株进行分离鉴定;使用药敏纸片对已鉴定菌株进行药物敏感试验;从50份乳样中,分离出了16株金黄色葡萄球菌,分离率为32%;分离出1株大肠杆菌,分离率为2%。将16株金黄色葡萄球菌进行药敏试验。结果显示,氨苄西林的耐药率高达100%,庆大霉素和克林霉素也产生了较低的耐药性,其耐药率均为6.25%,而恩诺沙星、头孢噻呋、呋喃妥因、多西环素等具有较强的抗菌活性,其敏感率均高于80%,本试验为牛场预防乳房以及临床用药提供了科学依据。     

1株犬源大肠杆菌的分离鉴定与耐药性分析

为检测北京市某动物医院1例宠物犬顽固性腹泻的原因,通过采集肛门拭子进行细菌分离鉴定试验,分离出1株大肠杆菌,命名为37-Canine株。通过细菌形态学观察、生化鉴定、16S rDNA序列分析、大肠杆菌荧光PCR致泻型检测等方法对该病原菌进行分析,并采用K-B药敏纸片法及耐药基因PCR检测测定其耐药情况。结果表明:37-Canine株经PCR电泳试验,16S rDNA测序分析,与GenBank中大肠杆菌参考株16S rDNA基因序列的同源性达到99%,进化树显示与AP018488.1参考株被划为一支;经大肠杆菌致泻型荧光PCR检测为EIEC-EPEC-EHEC的杂合型菌株,具有致泻性;对临床常用药物头孢曲松钠、头孢噻肟、诺氟沙星3种药物敏感,对多黏菌素B、庆大霉素2种药物中度敏感,对阿莫西林、磺胺嘧啶、氨苄西林3种药物耐药;经耐药基因PCR检测显示,37-Canine株携带氨基糖苷类、四环素类、氯霉素类耐药基因,出现多重耐药。本试验为临床宠物犬顽固性腹泻病例合理使用抗生素及犬源大肠杆菌的防治提供了参考依据。     

乌蒙地区威宁黄牛的大肠杆菌耐药性分析

本研究旨在了解乌蒙地区威宁黄牛的大肠杆菌耐药性,从而为临床用药提供参考依据。在威宁县9个乡镇采集黄牛粪便735份,分离得到大肠杆菌菌株672份,分离率91.43%,其中正常粪便中分离到512份,分离率77%,腹泻粪便中分离到160份,分离率高达96%。药敏试验结果显示,在672株大肠杆菌中,磺胺类药物耐药率最为严重,高达55%。通过PCR检测菌株携带的耐药基因和毒力基因,结果显示,喹诺酮类耐药基因qnrA和qnrB的检出率分别是22%和36%;磺胺类耐药基因sul1、sul2和sul3的检出率分别为48%、50%和39%;四环素耐药基因tetM的检出率最低,仅为4%;毒力基因检出率24%,相对其他报道较低。研究结果表明,威宁黄牛大肠杆菌感染较为严重,且菌株耐药性严重,呈现出多重耐药。     

7株羊源大肠埃希氏菌的分离鉴定及相关耐药基因的研究

旨在了解四川某规模化养殖场羊源大肠埃希氏菌的耐药表型及耐药基因的携带情况。收集50份简州大耳羊源小肠内容物,采用细菌学方法对大肠埃希氏菌进行分离鉴定;采用K-B纸片法评价分离菌对常用抗菌药物的敏感性;对细菌携带的β-内酰胺类、氨基糖苷类、四环素类、喹诺酮类耐药基因的携带情况进行分析。结果显示,从50份样本中分离鉴定出7株羊源性大肠埃希氏菌;药敏试验及多重耐药试验结果显示,7株大肠埃希氏菌对阿莫西林表现出全部耐药;对氨苄西林、四环素、链霉素的耐药率分别为42.86%、71.42%和28.57%,且表现了一定的多重耐药性,其中3耐占42.86%。7株分离株对β-内酰胺类bla_TEM-1基因检测的携带率为100.00%,氨基糖苷类rmtB、rmtC、rmtD基因携带率均为14.29%,四环素类Tet(A)、Tet(C)、Tet(D)、Tet(E)、Tet(M)基因携带率分别为71.43%、14.29%、42.86%和42.86%、42.86%,喹诺酮类qnrD、qnrS、oqxA基因携带率分别为57.14%、71.43%和71.43%。研究结果表明,7株羊源大肠埃希氏菌...     

肠致病性大肠杆菌的分离鉴定和耐药性分析

为了给临床合理用药提供正确的指导,对江苏南京、扬州、镇江、泰州、盐城及安徽天长等地区送检的病死猪、羊、鸡、鹅等动物进行细菌分离和鉴定,调查肠致病性大肠杆菌对常用抗菌药物的耐药情况。结果分离出78株大肠杆菌,经过血清型鉴定,其中17株为肠致病性大肠杆菌,共属于8种血清型。通过对这17株肠致病性大肠杆菌进行耐药性分析,发现分离的肠致病性大肠杆菌对15种药物存在不同程度的耐药性。对多西环素、诺氟沙星、洛美沙星高度耐药,耐药率分别为100%、94.12%、94.12%,对头孢曲松钠、阿米卡星敏感性较高,敏感率分别为52.94%、41.18%。研究结果显示肠致病性大肠杆菌在动物感染的大肠杆菌病例中占有一定的比例,同时分离菌株的耐药性较为严重,给治疗增添了难度,因此应重视对肠致病性大肠杆菌的监测,根据药敏结果选用合适的药物进行治疗。     

广东省羊源肺炎克雷伯菌遗传进化与毒力基因及耐药性分析

旨在了解广东省羊源肺炎克雷伯菌毒力基因、耐药基因、耐药谱构成以及遗传多样性。本研究从广东省3个市的不同规模化羊场采集了150份羊鼻拭子样品，通过分离纯化、染色镜检等方式进行致病菌的分离鉴定，利用分子生物学以及依据CLSI手册的药敏试验等方法进行分离菌株的毒力基因、耐药性等生物学特性研究。结果显示：从样品中分离得到42株肺炎克雷伯菌，药敏试验结果显示，阿莫西林以及氧氟沙星耐药率高达100%,对其余药物均有不同程度耐药性；毒力基因检测结果显示，rmpA、kfuBC、ureA分别为88.0%、85.7%和83.3%;耐药基因检测结果显示，耐药基因aphA、qnrA、aacC4、aacC2的检出率为42.9%、40.5%、28.6%、23.8%,其余耐药基因检出率较低。ERIC-PCR分型结果显示，相似性>80%的可分为7个类群，其中，群体Ⅰ为优势群体，占比66.6%。本试验对广东地区羊源肺炎克雷伯菌的毒力基因、流行状况和耐药性进行分析研究，对羊源肺炎克雷伯菌的防治有一定的指导意义。