HPLC法测定白龙散中龙胆苦苷和小檗碱的含量

建立反向高效液相色谱法检测白龙散中龙胆苦苷和小檗碱含量的方法。试验采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以0.5%三乙胺水溶液(用85%磷酸调p H值至3.0)-甲醇(60:40,v:v)为流动相,流速为1.0 m L/min,柱温为30℃;进样量为10μL;检测波长为270 nm;龙胆苦苷和小檗碱的含量测定范围分别为4.09~102.2μg/m L(R=0.999 7),3.93~98.26μg/m L(R=1.000 0);加样平均回收率分别为98.63%,97.78%;RSD分别为0.96%,1.23%;该方法方便、准确、可靠,适用于测定白龙散中龙胆苦苷和小檗碱的含量。     

HPLC同步检测四味穿心莲散中绿原酸和芦丁的含量

为建立HPLC方法同步测定四味穿心莲散中绿原酸和芦丁的方法,本实验以甲醇为提取溶剂,乙腈-0.1%磷酸水为流动相进行梯度洗脱,C18色谱柱分离,355 nm波长检测。结果显示：绿原酸、芦丁浓度在0.1 ~ 0.9 mg/L内呈良好的线性关系,加样回收率分别为98.41%、98.12%|重复性良好,相对标准偏差＜1%。可见本方法适用于四味穿心莲复方中绿原酸和芦丁含量测定。[关键词] 高效液相色谱|四味穿心莲散|绿原酸|芦丁     

催情散中总多糖、总黄酮及4种活性成分的含量测定

目的：建立催情散中总黄酮、总多糖含量测定方法,并建立同时测定朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷有效成分含量方法,为催情散的质量控制提供全面的依据。方法：运用比色法测定催情散中总多糖和总黄酮的含量,应用高效液相色谱法(HPLC)分析催情散中主要成分并测定其含量。结果：不同生产厂家的催情散中主要化学成分的含量存在一定差异,催情散中总多糖平均含量为3.35 %,总黄酮平均含量为1.30 %,催情散中总黄酮中朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和淫羊藿苷的平均含量分别为0.0137 %、0.0131 %、0.1106 %、0.0764 %。结论：建立了催情散中总多糖、总黄酮及4种活性成分测定方法,此方法具有较好的稳定性和重复性,可以作为催情散质量控制的标准。     

高效液相色谱法测定兽药龙胆泻肝散中龙胆苦苷、栀子苷和黄芩苷的含量

建立测定兽药龙胆泻肝散中龙胆苦苷、栀子苷和黄芩苷的高效液相色谱分析方法。样品经50%甲醇水溶液超声提取,C18色谱柱分离,254 nm波长下检测,外标法定量。龙胆苦苷在0.400～3.203μg范围内线性关系良好,r=0.9998,平均回收率为91.5%,RSD为0. 77%,栀子苷在0.252～2.012μg范围内线性关系良好,r=0.9999,平均回收率为90.2%,RSD为1. 58%,黄芩苷在0.500～3.981μg范围内线性关系良好,r=0.9999,平均回收率为94.6%,RSD为1.74%。该方法简单、快速、准确度高、重复性好,可以用于兽药龙胆泻肝散的质量控制。     

UPLC-MS/MS测定动物源性食品中3种二苯乙烯类激素残留

建立了动物源性食品中二苯乙烯类激素己烯雌酚、己烷雌酚和双烯雌酚残留的超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）测定法。样品均质后,采用β-葡萄糖醛酸酶/芳基硫酸酯酶酶解,叔丁基甲基醚提取,硅胶固相萃取柱净化。采用UPLC-MS/MS多反应监测（MRM）模式检测,内标法定量。方法对己烯雌酚、己烷雌酚和双烯雌酚的检出限均为0.1μg/kg,定量限均为0.5μg/kg;在1.0、1.5、2.0μg/kg三个浓度添加水平,总体平均回收率为75.8%-110.0%,总体相对标准偏差为3.3%-13.2%。本法分析速度快,灵敏度高,重现性好,各项技术指标均满足国内外相关法规要求,可用于各种动物源性食品中二苯乙烯类激素己烯雌酚、己烷雌酚和双烯雌酚残留的快速检测。     

HPLC方法同步测定四黄止痢复方中黄芩苷和小檗碱的含量

本实验旨在建立HPLC同步测定四黄止痢复方中黄芩苷和小檗碱的方法,四黄止痢复方中草药经甲醇提取,以甲醇-0.1%磷酸水为流动相进行梯度洗脱,C18色谱柱分离,278 nm波长检测。结果表明:在0.01～0.12 mg/L浓度呈良好的线性关系,加样回收率分别为(98.058±0.897)%、(98.401±0.882)%;重复性良好,相对标准偏差<1%。因此本法适用于四黄止痢复方中黄芩苷和小檗碱含量测定。     

银翘解毒口服液中有效成分绿原酸、牛蒡苷含量的高效液相色谱测定方法

检测银翘解毒口服液中有效成分绿原酸和牛蒡苷。采用高效液相色谱法(HPLC)对其含量测定方法进行研究,并进行了方法学考察。结果在波长327nm、10.4～166.4μg/mL范围内,绿原酸浓度与峰面积呈良好的线性关系,RSD为0.67%,平均回收率为107.0%;在波长276 nm、12.3～196.8μg/mL范围内,牛蒡苷浓度与峰面积呈良好的线性关系,RSD为1.16%,平均回收率为100.2%。试验表明,所建立的测定方法精确性、稳定性、重复性良好,阴性对照无干扰,实现了在同一色谱条件、不同检测波长下,通过一次进样同时对样品中2种成分绿原酸和牛蒡苷含量的测定,大大提高了检测效率。     

HPLC法同时测定和评价“黔中金荞麦”中4种成分含量

“黔中金荞麦”是贵州省农业科学院畜牧兽医研究所选育的优质牧草(品种登记号：2019581),为建立同时测定该药材中表儿茶素、原花青素B₂、芦丁和槲皮素的检测方法,考察其含量多样性,采用高效液相色谱法测定并分析其含量与野生金荞麦的差异。C₁₈柱(250×4.6 mm, 5μm),乙腈-0.4%磷酸水梯度洗脱,进样量10μL,流速0.7 mL/min,检测波长254 nm,温度30℃;原花青素B₂、表儿茶素、芦丁和槲皮素分别在5～85(r²=0.9998)、5～80(r²=0.9998)、0.5～8(r²=0.9996)、0.125～2.0μg/mL(r²=0.9999)范围内呈现良好线性关系,加样回收率高;黔西和麦坪的“黔中金荞麦”4种成分总含量高达1189.70、1108.01μg/g,其中原花青素B₂、芦丁和槲皮素含量最高,丹寨野生金荞麦表儿茶素含量最高。结果表明,本法准确可靠,适合“黔中金荞麦”的内控质量监测...     

血浆中连翘酯苷高效液相色谱检测方法的建立

为建立测定血浆中连翘酯苷含量的高效液相色谱方法,将血浆样品经去蛋白处理,以乙腈-水-醋酸(18∶82∶0.41)为流动相,流速为1 mL/min,检测波长为332 nm,柱温为25 ℃,进样量为10 μL,经Angilent ZORBAX SB-C18(5 μm×4.6 mm×250 mm)色谱柱分离,进行色谱分析。结果表明,本方法连翘酯苷的血浆浓度在0.05~200 μg/mL内线性关系良好,精密度和重复性试验RSD均小于5%。本方法简便、灵敏、重现性高,可用于连翘酯苷的药动学和相对生物利用度的研究。     

黄芩水煎液中黄芩苷的HPLC测定及其抗内毒素作用

通过HPLC法分析黄芩水煎液中黄芩苷含量,采用显色基质法鲎试验进行相关单体成分的抗内毒素定量测定。结果表明,黄芩水煎液中含量最多的单体成分为黄芩苷,显色基质法鲎试验结果表明,不同浓度(50、25、12.5、6.25、3.125μg/mL)的黄芩苷溶液对内毒素的破坏率分别为45.08%、54.39%、57.45%、61.78%和82.80%,其破坏率呈浓度依赖性,可知黄芩水煎液中含量最多的成分黄芩苷具有灭活内毒素的作用。     

芩黄清肺散的质量标准研究

为建立芩黄清肺散的质量标准,采用显微鉴定和薄层色谱法(TLC)对方剂中黄芩、大黄、枇杷叶和甘草进行定性鉴别。采用高效液相色谱法(HPLC)对黄芩苷进行含量测定,色谱柱为依利特C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2);流速1mL/min;检测波长280nm;柱温40℃;进样量20μL。显微鉴定结果表明,韧皮纤维单个散在或数个成束,梭形,长60μm~250μm,壁厚,孔沟细(黄芩);草酸钙族晶,直径60μm~140μm(大黄);非腺毛为单细胞,常弯曲(枇杷叶);木纤维成束,周围薄壁细胞含草酸钙方晶,形成晶鞘纤维(甘草)。TLC结果表明,供试品中,在与对照品或对照药材色谱相应的位置上显示相同颜色的斑点,阴性对照无干扰。HPLC结果显示,黄芩苷在0.241μg~1.208μg(r=0.999 9)具有良好的线性范围,精密度、稳定性、重复性的RSD3.0%,加样回收率为100.49%(RSD=1.71%,n=9)。该研究所建立标准可用于芩黄清肺散的质量控制。     

猪肉中SM2的残留检测HPLC方法的研究

本试验采用高效液相色谱法(HPLC)测定猪肉中的SM2残留量。试验采用AgilentHP1100系统,Agilent ODS C18(150mm×4.6×5)柱,流动相选用乙腈—0.017 mol/L磷酸(3 2);检测波长为267 nm;进样量为20μl;柱温:室温。提取溶剂为二氯甲烷,该方法样品前处理简单,药物的线性关系好,相关系数达0.99999以上。检测限为0.01μg/g,平均回收率在85%以上,变异系数均小于7.0%。该法前处理简便,灵敏度高,结果准确、可靠。     

HPLC法检测水牛血浆中吡喹酮的研究

建立了一种简便、灵敏、可重复的高效液相色谱法检测水牛血浆中吡喹酮(Praziquantel,PZQ)的含量。吡喹酮在C18(250 mm×4.0 mm,5μm)柱中可以很好地与杂质峰分离开。其保留时间、紫外检测波长、流动相、流速、色谱柱温度分别为10.6 min、220 nm、甲醇∶水(70∶30,V/V)、0.8 mL/min和40℃。水牛血浆样品(0.5 mL)经乙酸乙酯(6 mL)两步提取后,采用旋转蒸发仪蒸干,1 mL流动相溶解定容,取上清滤液20μL进样做HPLC分析。吡喹酮的血浆药物浓度在0.062 5~8 mg/L范围内,呈现良好的线性关系,相关系数r0.999。在0.062 5、1、16 mg/L的3个药物浓度水平下,吡喹酮的平均回收率均在90%以上。日内和日间变异系数小于5%。PZQ的LOD可达0.01 mg/L,LOQ为0.03mg/L。该方法的专属性强、灵敏度高,适用于水牛血浆中PZQ的药动学检测。     

小柴胡散中黄芩苷含量测定HPLC法研究

建立了测定小柴胡散中黄芩苷含量的高效液相色谱法.采用Hypersil BDS C18柱(5 μm,4.6 mm×200 mm),以甲醇-0.025%磷酸溶液(55∶ 45,V/V)为流动相,紫外检测器检测波长为280 nm.对照品在0.038 6～0.617 0 μg/mL的浓度范围内呈现良好的线性关系(R2=0.998 5),黄芩苷加样平均回收率为 98.61%,RSD为 2.64%.该方法简便、准确、快速,适合于小柴胡散的质量控制检测.     

猪鸡组织中左旋咪唑残留的HPLC检测方法研究

建立了猪、鸡组织中左旋咪唑残留检测的高效液相色谱法。组织试样在碱性条件下先用乙酸乙酯提取,然后用0.1 mol/L盐酸反萃取,萃取的样液用混合型阳离子固相萃取小柱净化,采用C18(5μm,250 mm×4.6 mm i.d.)色谱柱,用高效液相色谱仪(带紫外检测器)在220 nm波长处测定,外标法定量。在此条件下,左旋咪唑的保留时间为12～14 min。左旋咪唑浓度在10～1 000μg/L时,与峰面积呈良好的线性关系,线性方程为y=196.37x+81.599(r=0.999 9)。结果表明,左旋咪唑在在猪、鸡的肌肉、脂肪和肾脏中的检测限为2μg/kg,定量限为5μg/kg;在猪、鸡的肝脏中的检测限为2μg/kg,定量限为10μg/kg。在添加不同浓度水平测定下,平均回收率在70%～110%,批内变异系数在10%以内,批间变异系数在15%以内。     

高效液相色谱法测定去滞散中柚皮苷和新橙皮苷的含量

为了测定去滞散中枳壳的含量,采用C18柱（4.6×150mm,5μm）,在室温下,以乙腈-水（20：80,用磷酸调节pH值至3）为流动相,283nm为检测波长,流速为1.0ml?min-1,建立了反相高效液相色谱（RP-HPLC）测定方法。结果显示,柚皮苷在0.08～4μg范围内线性关系良好,R2 = 0.999 9,回收率为94.4% ~101.7%,RSD为2.23%;新橙皮苷在0.08～4μg范围内线性关系良好,R2 = 0.999 5,回收率为90.6% ~100.0%,RSD为2.85%。本方法简便、准确、快速,可用于控制去滞散中枳壳的含量。     

牛组织中氨丙啉残留的HPLC检测方法研究

建立了牛组织中氨丙啉残留检测的高效液相色谱法.试样中的氨丙啉经乙腈提取后旋转蒸干,用磷酸盐缓冲液溶解,过HLB固相萃取小柱净化,高效液相色谱法进行测定.结果表明,在0.20～20.0 μg/mL范围内,氨丙啉浓度与峰面积呈良好线性关系(r2=0.9999);在牛的肌肉、肝脏、肾脏和脂肪中,氨丙啉的检测限为100 μg/kg,在牛的肌肉、肝脏、肾脏中定量限为250 μg/kg,在牛的脂肪中定量限为200 μg/kg.在不同添加浓度下测定,氨丙啉的平均回收率为60％ ～ 110％,批内和批间变异系数均在15％以内.本方法可快速测定牛组织中氨丙啉残留量,且操作简单、灵敏度高、结果准确性高,能满足日常检测需要.     

止痢散、杨树花口服液中非法添加盐酸小檗碱检测方法的建立

建立止痢散、杨树花口服液中非法添加盐酸小檗碱的HPLC-PDA检测方法,采用十八烷基键合硅胶为填充剂,乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调pH值至3.0)(25∶75)为流动相,等度洗脱,流速为1.0 mL/min,二极管阵列检测器,提取波长为345 nm。采用峰纯度检查和光谱相似度检查辅助对照品比对方法,对非法添加药物进行确证。按外标法以峰面积计算,盐酸小檗碱在止痢散和杨树花口服液中的平均回收率分别为99.8%和99.7%,RSD分别为0.3%和0.4%;线性方程为Y=41435X-15904,R²=0.9999;检测限分别为0.2 g/kg, 0.2 g/L。该检测方法专属型强,灵敏度高,操作简便,准确可靠,可用于测定止痢散、杨树花口服液中非法添加的盐酸小檗碱。     

大豆异黄酮酶解物中活性成分的薄层鉴别及含量测定

采用GF254薄层色谱鉴别方法对大豆异黄酮酶解产物中的大豆苷元和染料木素进行快速鉴别,同时用HPLC法对其活性成分进行了含量测定。结果表明,在同一薄层板上与标准大豆苷元、染料木素荧光斑点对应的位置．大豆异黄酮酶解物有色泽相同的荧光斑点,Rf分别为0．3、0．6,该方法斑点明显、重现性好、专属性强,能对转化结果进行准确的定性判断。采用HPLC法测定活性成分的含量,在一定的浓度范围内,标准样品的浓度和吸收峰面积呈良好的线性关系（r值均大于0．99）,HPLC图谱清晰、峰形稳定,保留时间较为理想,各个组分间的分离度均大于1．5,且精密度高,加标回收率在99％以上,能同时测定大豆异黄酮4组分的含量。大豆异黄酮酶解物中大豆苷、大豆苷元、染料木苷、染料木素的含量分别为：0．129％、4．101％、0．028％、1．442％。     

麻杏石甘口服液、杨树花口服液中非法添加黄芩苷HPLC-PDA检测方法的建立

为建立麻杏石甘口服液、杨树花口服液中非法添加黄芩苷的测定方法,采用十八烷基键合硅胶为填充剂,甲醇-水-磷酸(V∶V∶V=45∶55∶0.2)为流动相,等度洗脱,流速为1.0 mL/min,二极管阵列检测器,提取波长为278 nm。采用峰纯度检查和光谱相似度检查辅助对照品比对方法,对非法添加药物进行确证。在此液相色谱条件下,黄芩苷与其他物质峰分离良好。按外标法以峰面积计算,黄芩苷在麻杏石甘口服液和杨树花口服液中的平均回收率分别为99.6%和100.2%,RSD分别为0.6%和0.8%。结果表明该检测方法简便、准确、可靠,可用于测定麻杏石甘口服液、杨树花口服液中非法添加的黄芩苷。