中国传统发酵酱油中大豆异黄酮和大豆皂苷质量浓度测定及抗高血压功能

采用高盐稀态发酵法酿造酱油,以高效液相色谱法(HPLC)和紫外分光光度法(UV-Vis),对酱油中的大豆异黄酮和皂苷类物质进行测定。结果表明,大豆苷质量浓度为0.035 4 mg/m L,染料木苷质量浓度为0.000 5 mg/m L,大豆苷元质量浓度为0.006 6 mg/m L,染料木素质量浓度为0.000 6 mg/m L,大豆皂苷的质量浓度为8.942 4 mg/m L。在此工艺条件下发酵的酱油时间较短,并且样品中大豆异黄酮和皂苷的质量浓度较高,研究证明,中国传统发酵酱油对瘦素、脂联素和肾素具有积极调节作用。因此,酱油是一种具有功效成分的健康食品,酱油中有效成分的测定将为下一步确定酱油对高血压的调节机制提供重要参考。     

大豆异黄酮组分HPLC快速分析技术及其在豆腐加工中的应用

大豆异黄酮育种与大豆制品加工研究需要进行大批量样品12种异黄酮组分的快速定量分析。在前人研究基础上利用Agilent 1100高效液相色谱(HPLC)系统,以大豆品种南农95C-13为材料,研究大豆苷元,大豆苷,乙酰基大豆苷,丙二酰基大豆苷,染料木苷元,染料木苷,乙酰基染料木苷,丙二酰基染料木苷,黄豆苷元,黄豆苷,乙酰基黄豆苷,丙二酰基黄豆苷等12种标准品外标法快速定量技术。从样品制备与色谱条件对分析12种异黄酮组分的准确度和分离度入手,确定分析流程,以(科丰1号×南农1138-2)的184个重组自交系(NJRIKY)为材料,研究豆腐加工中总量和各组分的变化特点。(1)样品以80%甲醇水溶液50℃超声1 h提取;色谱条件为,检测波长254 nm, 柱温36℃,流速2.0 mL min^–1, 进样量 10 μL, 流动相0.1%(V/V)乙酸水溶液(A)和100%甲醇(B),0~2 min,27% B (V/V)→2~3 min,27%~38% B→3~10 min, 38% B→10~12 min,38%~39% B→12~14 min, 39% B→14~15 min, 39~27% B梯度洗脱;在15 min内将12个组分良好分离,各组分峰面积与其相应浓度均呈良好线性关系(R²为0.9976~0.9999);加标回收率均大于99%,变异系数低于2%。(2)NJRIKY群体籽粒、豆乳、豆腐异黄酮总量和组分的大量分析验证了HPLC快速技术的效果。籽粒异黄酮总含量(3 695.00 μg g^–1)在豆乳加工中平均85.15%转入豆乳 (3 146.12 μg g^–1),14.85% (548.88 μg g^–1)进入豆渣。传统豆腐加工通过硫酸钙絮凝,只有17.32% (639.89 μg g^–1)转入豆腐,67.83% (2 506.23 μg g^–1)留在黄浆水中。豆乳中12种组分含量比籽粒稍低,均以丙酰基染料木苷含量最高;而豆腐中乙酰基染料木苷和乙酰基黄豆苷缺失,以染料木苷元与大豆苷元含量较高。大豆科丰1号与南农1138-2杂交重组后家系间的异黄酮遗传变异增大,增加了对其遗传改良的潜力。     

绿豆皮黄酮的纯化工艺研究

以绿豆皮为原料,主要研究了绿豆皮黄酮的纯化工艺。首先比较了AB-8,LSA-10,HPD-100和ADS-7型4种大孔树脂对绿豆皮黄酮的吸附和解析特性,选择其中最好的树脂,对其吸附和解析条件进行了研究。结果表明,AB-8型是纯化绿豆皮黄酮较好的大孔树脂,其最佳吸附条件为上样速率1.98 m L/min,上样质量浓度0.045 9 mg/m L,上样量10 m L时,最大吸附率可达88.89%;其最佳解析条件为解析液乙醇体积分数70%,解析液洗脱流速1.98 m L/min,解析液用量25 m L时,解析率可达69.51%。绿豆皮黄酮的纯度由10.57%提高至72.19%,表明该纯化工艺具有较好的纯化效果,可为绿豆皮黄酮的纯化及进一步开发应用提供参考。     

正交设计优化大豆SSR-PCR反应体系及引物筛选

以大豆(Glycine max L.)为材料,研究了PCR反应体系的主要成分对大豆SSR扩增结果的影响,并确定影响SSR扩增结果的各因素的最佳用量.以CTAB法提取的大豆叶片DNA为模板,应用L16(44)正交设计对影响大豆SSR-PCR的主要参数进行优化,建立适合大豆SSR-PCR反应的最佳体系.结果表明:各因素不同水平浓度对PCR反应结果均有显著影响.大豆SSR-PCR优化反应体系为:2.0 μL 10×PCR Buffer,30 ng模板DNA,150μmol/L dNTP,0.4 μmol/LSSR引物,1.5 U Taq DNA聚合酶,2.0 mmoL/L Mg2+,加ddH2O至终体积20.0μL.优化的PCR扩增程序为:94℃预变性5 min.94℃变性30 s,50℃退火1 min,72℃延伸1 min,共35个循环,72℃延伸5 min,4℃保存.同时选用200对大豆引物对2份材料进行扩增,筛选出条带清晰,多态性好的引物74对,用于大豆SSR标记的进一步研究.     

大孔树脂纯化马尾松花粉总黄酮的工艺研究

以马尾松花粉为材料,筛选对马尾松花粉总黄酮吸附和解吸性能好的大孔树脂,并对大孔树脂纯化马尾松花粉总黄酮的工艺条件进行优化。结果表明,弱极性的DM-130大孔树脂对马尾松花粉总黄酮具有较好的吸附与解吸性能,其吸附率和解吸率分别达到84.24%和93.32%。DM-130大孔树脂纯化马尾松花粉总黄酮的最佳工艺参数为:上样质量浓度0.68 mg/m L,上样流速0.67 m L/min,上样体积为5倍柱床体积,洗脱溶剂为75%乙醇,洗脱流速0.67 m L/min,洗脱剂用量为6倍柱床体积。纯化后马尾松花粉总黄酮的纯度可达到50.4%。     

隧道式微波干燥处理对党参炔苷含量和菌落数的影响

采用隧道式微波干燥技术对党参进行灭菌处理,筛选适宜的灭菌工艺,并研究其对党参炔苷含量的影响。结果表明,微波干燥党参最优工艺为:料水质量比100∶15,传送带速度2.0 m/min,微波功率12 k W,载样量12.5 kg/m~2,党参灭菌工艺后菌落总数为3.1×10~3 CFU/g;高效液相色谱分析表明,隧道式微波灭菌技术对党参中有效成分党参炔苷无显著性影响。     

高效液相色谱法测定果蔬中的甲醛

通过振荡提取法提取果蔬中的甲醛,提取出的甲醛与2,4-二硝基苯肼进行衍生化反应,采用高效液相色谱法定量检测。结果表明,振荡提取法最佳提取条件为:提取温度60℃,提取时间40 min,振荡速度200 r/min;最佳衍生反应条件为:反应温度60℃,反应时间20 min,衍生剂加入量1.0 m L;该方法线性关系良好,线性范围为1.71~114 mg/kg,检出限为0.456 mg/kg,在3个不同浓度的添加水平下,回收率为72.1%~95.2%,相对标准偏差为2.0%~5.1%。该方法操作简便,实用性强,可准确测定果蔬中的甲醛含量。     

大孔树脂分离纯化南姜黄酮类化合物的研究

本文以大孔吸附树脂为吸附剂,研究其对南姜黄酮类化合物的吸附分离特性,选择FL-1、FL-2、FL-3、AB-8四种大孔吸附树脂,比较其对南姜黄酮类化合物的吸附率和解吸率,筛选出最佳树脂,并对其动力学曲线和静态吸附性能进行了考察。结果表明,FL-3树脂对南姜黄酮类化合物有较好的吸附和解吸效果。当上样液质量浓度为0.314 mg/m L,pH=4,上样液流速为1 m L/min时,FL-3树脂对南姜黄酮类化合物吸附量最大;以pH=5的80%乙醇为洗脱剂,洗脱液流速为1.5 m L/min时,解吸效果最好,达93.2%;经纯化后南姜黄酮类化合物纯度为40.3%,达到良好的分离纯化效果。     

果胶酶澄清石榴汁的工艺优化

以新疆石榴原汁为材料,在单因素试验的基础上,通过正交试验筛选果胶酶澄清石榴汁的工艺条件。结果表明,果胶酶澄清石榴汁最佳工艺为:果胶酶添加量64.32 U/100 m L,酶解时间35 min,酶解温度45℃,经该工艺条件澄清后石榴汁的透光率为91.39%,花色苷含量为89.74 mg/100 g。     

HPLC法同时测定安徽产野葛、粉葛中6种异黄酮成分

以安徽葛根主产区收集的6种样品(太湖野葛、岳西野葛、金寨野葛、宣城野葛、六安粉葛、亳州葛根)为试材,建立高效液相色谱法同时测定安徽野葛、粉葛中葛根素、大豆苷、染料木苷、大豆素、染料木素、刺芒柄花素6种异黄酮类成分的含量,样品前处理采用30%乙醇超声波提取,采用Phenomenex Column luna C18(2)100A(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱,流速为1 m L/min,柱温35℃,检测波长为250 nm。标准品在范围内呈良好线性关系,相关系数R2分别为0.999 3、0.999 4、0.999 4、0.997 8、0.997 4、0.998 6,最低检出限分别为0.562 7、0.453 4、0.283 0、0.234 0、0.256 0、0.261 0μg/m L,精密度、稳定性和重现性良好,平均加标回收率分别为100.5%、99.3%、104.2%、98.6%、97.1%、104.5%。安徽产区的野葛与粉葛中葛根素等6种异黄酮含量差别显著。该方法准确、快速,操作简单,分离效果好,可用于野葛、粉葛中葛根素、大豆苷、染料木苷、大豆素、染料木素、刺芒柄花素6种异黄酮含量的同时测定。     

桔梗茎总黄酮的纯化工艺及其抗氧化性研究

为探索大孔吸附树脂纯化桔梗茎总黄酮的工艺条件及其体外抗氧化活性,以总黄酮的比吸附量、吸附率及比洗脱量、洗脱率为考察指标,采用单因素试验对桔梗茎总黄酮的纯化工艺进行考察;采用分光光度法探索了桔梗茎总黄酮对DPPH·、亚硝酸盐、ABTS阳离子自由基、·OH的清除活性。结果表明,桔梗茎总黄酮纯化的较佳工艺条件为:桔梗茎浸提液采用石油醚脱脂,控制其总黄酮质量浓度1.1 mg/mL,桔梗茎浸提液的上柱体积与树脂质量比6∶1(mL/mg),吸附流速控制1.0 mL/min,洗脱液为70%乙醇水溶液,洗脱流速控制2.0 m L/min,洗脱液体积与树脂质量比7∶1(mL/mg)。在此纯化条件下,LX-36型树脂对桔梗茎总黄酮的比吸附量平均为5.933 mg/g、吸附率平均为89.89%,比洗脱量平均为5.627 mg/g、洗脱率平均为94.83%,干浸膏中总黄酮含量由6.35%提高到40%以上。研究结果表明,桔梗茎总黄酮对DPPH·、亚硝酸盐、ABTS阳离子自由基、·OH均具有清除活性,而且均随着其质量浓度的增加,清除活性均逐渐增强。该结果为桔梗茎的进一步开发利用提供了依据。     

山竹果皮总黄酮富集工艺研究

研究D101大孔树脂富集山竹果皮总黄酮的工艺。通过静态、动态相结合的方法,确定D101大孔树脂富集的最佳工艺参数。结果表明,D101大孔树脂对总黄酮动态解析附的效果好于静态,动态解析附的最佳条件为:以流速2 m L/min上样30 m L 2 mg/m L的提取物,且用60 m L 70%乙醇以2 m L/min的流速洗脱,此条件下提取物总黄酮含量由原先的57.8 mg/m L增加到174.2 mg/m L。     

大孔吸附树脂纯化瓦松总三萜成分的工艺

本研究以吸附率、解吸率为考察指标,采用静态吸附方法筛选出纯化效果最佳的LSA-21型树脂。考察各种因素对树脂吸附、解吸效果的影响,优化得到动态吸附最佳工艺条件为:上柱液浓度3.12 mg/m L,上样量203 m L,吸附速率3 BV/h,上柱液pH为6,解吸剂乙醇浓度70%,解吸剂用量180 m L。在此工艺条件下,吸附率及解吸率平均值分别为91.83%和91.41%,瓦松干浸膏中总三萜成分纯度从9.36%提高到40.56%,因此该工艺可以有效地纯化瓦松总三萜成分。     

聚酰胺吸附法分离纯化何首乌中二苯乙烯苷的研究

研究何首乌中二苯乙烯苷成分较佳的分离纯化工艺条件。采用层析柱分离法,选用聚酰胺为吸附剂,食用乙醇为洗脱剂,通过单因素试验和多因素正交试验,研究理想的分离工艺。二苯乙烯苷含量检测采用分光光度法。结果显示:二苯乙烯苷理想分离工艺条件为:食用乙醇体积分数为70%,食用乙醇洗脱流速为1.0 mL/min,洗脱柱高为70 cm,静置吸附时间为20 min。食用乙醇体积分数显著影响二苯乙烯苷的分离效果。聚酰胺柱层析可以较好地分离纯化何首乌中二苯乙烯苷成分。     

大孔树脂分离纯化无梗五加果中的多酚类化合物

从6种植物多酚纯化常用的树脂中筛选适宜无梗五加果多酚分离纯化的树脂,研究了影响树脂吸附的上样浓度、上样液pH、上样体积、上样流速和影响多酚解吸的解吸液浓度、p H、洗脱体积、解吸流速,并确定了适宜的工艺参数。结果表明,HPD700型大孔树脂是分离纯化无梗五加果中多酚较理想的树脂;动态吸附时最适上样浓度1.5 mg/m L,上样液pH 4.0,最大上样体积6 BV,上样流速为1.0 m L/min,此时平均吸附率为(92.04±0.35)%;动态解吸时最适解吸剂为pH 4.0的浓度70%的乙醇溶液,洗脱体积1.5 BV,解吸流速1.0 m L/min,该条件下的平均解吸率为(93.72±0.62)%。纯化后的无梗五加果多酚类化合物纯度达到(54.38±1.02)%。     

芒果苷的分离纯化及鉴定研究

优化由芒果皮和叶中提取芒果苷的分离纯化条件并对其进行鉴定。采用紫外分光光度法对芒果苷进行定量分析。不同的大孔树脂对芒果苷粗提液进行分离纯化,并利用薄层层析法对芒果苷进行定性分析。结果表明,供试的3种大孔树脂中D101型大孔树脂吸附、解析效果最优,70%乙醇对于芒果苷的洗脱效果最好。纯化后芒果皮和叶的芒果苷含量分别为1.537,1.981 mg/m L,与纯化前相比分别提高了1.43倍,1.51倍。纯化后的芒果苷薄层层析的谱带与芒果苷标准品的相符合。     

响应面法优化栀子中栀子苷的纯化工艺

采用正丁醇有机溶剂萃取法分离栀子中的栀子苷,考查萃取时间、萃取温度、栀子苷质量浓度、相比和pH值对栀子苷萃取率的影响。在单因素试验的基础上选取试验因素和水平,根据中心组合试验设计采用三因素三水平响应面分析方法,拟合试验因素与响应值的多元二次方程,对各个因素的显著性及交互作用进行分析,运用Design Expert 8.0.6优化试验条件。得到最佳工艺参数为萃取时间30 min,萃取温度45℃,栀子苷质量浓度3.0 mg/m L,相比为0.5∶1,pH值7.0,栀子苷萃取率为30.27%。     

生物质炭对水溶液中Pb2+的吸附性能研究

针对山西省土壤Pb2 +污染问题,为了选择一种环保及可循环利用的生物质材料。以农业废弃物小麦秸秆和花生壳制备而成的生物质炭为材料,通过平衡吸附法确定影响吸附的最佳条件。结果表明,当Pb2+初始浓度为200 mg/L时,生物质炭添加量为8 g/L,pH值3~7,25℃条件下震荡360 min,为最适吸附条件,吸附效果最好,吸附量达24.85 mg/g,去除率达99.38%。该种生物质炭对Pb2 +的吸附符合二级动力学方程和Langmuir等温吸附模型,R2分别达0.9994和0.9985。本研究表明,用小麦秸秆和花生壳制备而成的生物质炭在一定条件范围内对Pb2+具有良好的去除作用。     

豆渣中水溶性膳食纤维的提取

采用化学方法从大豆豆渣中提取水溶性膳食纤维,研究了碳酸钠溶液浓度、提取时间、提取温度和提取液用量4个因素,以及不同沉淀剂对水溶性膳食纤维提取量的影响,并确立了制备水溶性膳食纤维的最佳工艺条件为碳酸钠质量分数3%,浸提温度80℃,提取液用量25 m L/g,提取时间60 min。     

黑芸豆花色苷提取工艺技术研究

以东北黑芸豆为原料,研究超声提取黑芸豆中花色苷类物质的工艺和东北黑芸豆中花色苷类物质的结构初步鉴定。结果表明,超声波提取的最优参数为超声功率420 W,超声温度29℃,超声时间18.7 min,料液比1∶13(g∶m L),在此条件取得了较好的提取效果,为黑芸豆花色苷的提取加工及工业应用提供了依据。