东方百合‘索邦’诱导小鳞茎发生过程中的细胞学观察

 以东方百合‘索邦’鳞片为试材,研究鳞片扦插诱导小鳞茎形成的过程及其鳞片内部糖和蛋白质的分布特点。经石蜡切片PAS和汞溴酚兰组织化学染色观察发现：（1）小鳞茎起源于近轴基部8～14层薄壁细胞,为内起源;形态发生过程依次经过了启动、生长锥形成、叶原基形成和小鳞茎形成;小鳞茎的形成与分生细胞团所在位置有关。（2）小鳞茎发生过程中多糖主要以颗粒状存在于分裂旺盛的分生组织和维管组织周围,多糖含量高时有利于诱导形成维管组织;蛋白质主要集中于细胞核周围;多糖和蛋白质在分生组织及其周围细胞之间存在着浓度梯度,由顶端分生组织细胞到周围的薄壁细胞中,蛋白质含量由高到低,多糖含量则由低到高。     

水仙双鳞片切块繁殖的研究 Ⅰ.小鳞茎的形态发生和成苗过程

中国水仙用双鳞片切块繁殖法,一个切块可形成1～3个小鳞茎。小鳞茎发生于切块的两鳞片之间或外侧的茎盘上。组织学观察表明,培养前双鳞片切块基部内茎盘表层组织,除细胞略小外,与周围组织并无明显的细胞学差异。经培养后,双鳞片切块基部内、外侧茎盘组织的薄壁细胞,都能发生脱分化现象,通过细胞分裂而突起,形成1～2个腋芽原基。说明小鳞茎的形成是通过切割的创伤刺激,诱导形成的腋芽原基发展而来的,并非该处原来存在的腋芽原基。切块所带的鳞片是小鳞茎形成的营养基础,鳞片的大小和数目对小鳞茎的形成有明显的影响。不定根发生于切块或小鳞茎的茎盘上。有的小鳞茎在袋装培养中就发生1～3条不定根和1～2片绿叶。生根的小鳞茎容易移栽成苗,已生根、萌叶的小鳞茎移栽到花盆土壤中生长良好。     

观赏百合鳞片气培过程中器官分化

利用气培技术对观赏百合鳞片进行培养。结果表明：气培１４～１６天,鳞片基部形成愈伤组织,１６～１８天小鳞茎开始分化形成,２０～２７天,鳞茎分化率在９０％以上,７０天时,每片鳞片上小鳞茎数目为２～４个,最多的达７个,鳞茎直径０．２～１．２ｃｍ;小鳞茎分化一周后,鳞茎基部开始生根,以后出现根毛,根分化率在９０％以上;气培４０天时,小鳞茎顶部开始抽生叶片,叶片分化率为３０～６０％。母体鳞片总重量从气培开始即呈持续上升趋势,母球及鳞片质量,对气培过程中鳞片上器官的分化与生长影响极大。     

百合组培中鳞片处理及其颜色变化与鳞茎形成的关系

 研究了百合鳞片发育程度、切割段数、形态及生理变化、培养基的P 和K含量与鳞茎形成的关系。结果表明: 取中层鳞片、每片横切6 段的繁殖系数最高, 基部鳞片结鳞茎数最多, 且鳞茎发生最早。鳞片由基部向顶部繁殖系数递减。培养过程中鳞片颜色和形态变化依次为乳白色、浅黄、浅紫色、绿紫、鳞片干枯、鳞茎增大, 鳞片由浅黄变为绿紫色过程中叶绿素含量增加, 淀粉和可溶性糖含量下降。适当增加培养基中P、K的含量可提高鳞茎形成的数量和质量。     

GA3、IBA以及变温处理对东方百合鳞片扦插繁殖及淀粉降解的影响

以东方百合‘Sorbonne’为试材,研究了GA3、IBA以及温度处理对鳞片扦插繁殖以及碳水化合物代谢的影响。结果表明：GA3处理可在较短时间内促进小鳞茎膨大,IBA处理使小鳞茎形成的时间延后,但可提高繁殖系数和整齐度。GA3、IBA分别结合5 ℃预处理可使小鳞茎质量显著增加,在较短时间内促进小鳞茎膨大;其中IBA 100 mg · L-1,1 h结合5 ℃预处理的鳞片繁殖系数和小鳞茎整齐度依次高于25 ℃与15 ℃变温培养及25 ℃恒温培养;GA3 100 mg · L-1,2 h结合5 ℃预处理获得的小鳞茎品质最佳。鳞片繁殖过程中,GA3、IBA结合各温度处理鳞片淀粉及总可溶性糖含量均呈下降趋势,尤其鳞片下部在25 ℃培养初期（20 d）下降幅度最大;IBA促进淀粉降解,结合低温处理的母鳞片较无低温处理的总可溶性糖含量低,为小鳞茎的诱导和形成提供了营养;5 ℃低温预处理促进GA3处理母鳞片淀粉的降解。     

东方百合鳞片多层层积处理诱导小鳞茎的研究

以东方百合"索邦"、"白领"鳞片为试材,通过多层层积处理对小鳞茎的诱导、增殖、成球等因子进行研究.在相同的自然条件下,研究了不同基质之间、不同处理层之间以及同一鳞片上小鳞茎诱导的情况.结果表明:混合基质对小鳞茎的诱导倍数最高,分别较蛭石和草炭基质高出0.413和0.538倍;多层层积处理的处理层中,第1层的小鳞茎的诱导倍数最高,分别较第2层和第3层高出0.221和0.126倍;在同一鳞片上,基部再生的小鳞茎能力最强,边缘次之,凹面和背部再生小鳞茎能力最弱,在鳞片的顶部没有再生小鳞茎.     

观赏百合鳞片气培过程中器官分化

利用气培技术对观赏百合鳞片进行培养。结果表明：气培１４～１６天,鳞片基部形成愈伤组织,１６～１８天小鳞茎开始分化形成,２０～２７天,鳞茎分化率在９０％以上,７０天时,每片鳞片上小鳞茎数目为２～４个,最多的达７个,鳞茎直径０．２～１．２ｃｍ;小鳞茎分化一周后,鳞茎基部工始生根,以后出现根毛,根分化率在９０％以上;气培４０天时,小鳞茎顶部开始抽生叶片,叶片分化率为３０～６０％。母体鳞片总重量从气培开始     

外源蔗糖对离体条件下换锦花小鳞茎发生的影响

从形态学、组织细胞学、生理生化水平、分子水平等多层面探究外源蔗糖浓度对换锦花(Lycori sprengeri)离体小鳞茎发生的影响。结果表明,MS培养基中外源蔗糖缺失时,离体换锦花鳞茎无法产生小鳞茎,蔗糖浓度为30或60 g·L^-1时小鳞茎正常发生,但对小鳞茎发生数量影响不大。鳞片内的蔗糖及可溶性糖含量在腋芽形成前不断积累,且鳞片基部淀粉粒的积累为此处小鳞茎的发生提供物质基础。蔗糖促进了茉莉酸甲酯(MeJA)在植物体内的积累,抑制了LsWIP1、LsERS2和LsEIN2基因表达量的异常上升,表明蔗糖可能作为信号分子启动了相关损伤保护机制,并促进了小鳞茎的发生。     

东北百合无性繁殖研究

以东北百合的鳞片为材料进行扦插繁殖,比较了不同消毒剂、不同基质及鳞茎的不同层鳞片对扦插繁殖小鳞茎的影响.结果表明:在25℃避光条件下,用0.1% HgCl2处理鳞片,可有效防止鳞片腐烂,提高繁殖系数.以原生土、草炭+珍珠岩(1:1)这2种基质最好,诱导率达89.3%～93.3%,平均每鳞片繁殖小鳞茎数较高,达1.14～1.19个,产生的小鳞茎质量也较好,而且鳞片腐烂率低,生根效果也最好;草炭+河沙(2:1)及草炭+珍珠岩+蛭石(1:1:1)的扦插效果仅次于草炭+珍珠岩(1:1);河沙扦插鳞片时,平均每鳞片繁殖小鳞茎数最高,达1.38个,但诱导率最低(58.7%),易造成鳞片干萎,草炭则易造成鳞片大量腐烂,均不宜使用.鳞茎的外层鳞片比中、内层鳞片容易诱导出鳞茎,诱导率为100%,产生小鳞茎的数量最多,平均每鳞片繁殖小鳞茎数1.45个,小鳞茎平均直径也比中、内层的大.     

植物生长调节剂对百合鳞片繁殖效应的初步研究

以宜兴百合(Lilium lancifolium Thunb)和兰州百合(Lilium davidii var.unicolor)为试材,研究了赤霉素(GA)、萘乙酸(NAA)和吲哚丁酸(IBA)3种植物生长调节剂对鳞片繁殖小鳞茎的影响.结果表明,300 mg/kg(毫克/公斤)的IBA浸泡鳞片5 h(小时),最有利于宜兴百合鳞片形成小鳞茎,且鳞片不易腐烂,但所形成的鳞茎大多处于休眠状态.兰州百合以200 mg/kg(毫克/公斤)的IBA处理效果最好,并且形成的小鳞茎大多处于萌发状态.低温处理可有效提高鳞茎发生率、鳞茎级数、繁殖系数和鳞茎萌发率.NAA处理的鳞片腐烂率较高,其原因有待于进一步研究.     

光周期对野生卷丹试管苗鳞茎形成及糖代谢的影响

为了探索光周期对百合试管鳞茎生长发育的诱导效应,寻求试管鳞茎生产的最佳光照参数,以秦巴山区野生卷丹（Lilium lancifolium）试管苗为材料,采用5种不同光周期处理（每天分别暗处理0、8、12、16和24 h）,对试管小鳞茎的发生和膨大、糖含量、淀粉酶活性及其对培养基糖源利用情况进行了测定。研究结果表明：不同光周期处理对试管小苗的形态建成和生长发育影响显著,以16 h暗处理对小鳞茎的发生和膨大最为有利;不同培养时期测定表明,经不同光周期处理的小鳞茎可溶性总糖含量、淀粉含量及淀粉酶活性等呈现一定差异;经60 d培养,短光照和黑暗处理（黑暗12、16和24 h）的小鳞茎淀粉含量比全光照和长光照（0和8 h）处理的高;不同光周期处理下试管鳞茎对培养基蔗糖利用率不同,以短光照（黑暗16 h · d-1）处理的利用效率最高。     

郁金香器官离体培养再生小鳞茎的研究

 以4个郁金香品种‘凯氏奈丽斯’、‘风流寡妇’、‘检阅’和‘金色检阅’的叶、花茎、花托、子房、鳞片及腋芽等不同器官为外植体, 在MS + 2, 4-D 0.1 mg·L ^{- 1} , MS + 2, 4-D 0.5 mg·L ^{- 1} , MS +BA 1.0 mg·L ^{- 1} , MS +BA 5.0 mg·L ^{- 1} , MS +BA 2.0 mg·L ^{- 1} + IAA 0.5 mg·L ^{- 1} 5种培养基上进行离体培养。结果表明, 花托外植体直接诱导小鳞茎的频率最高, 在培养基MS + 2, 4-D 0.5 mg·L ^{- 1}上诱导率达56.7% , 平均每块外植体产生小鳞茎数达10.7个; 其次是花茎, 直接诱导小鳞茎的频率为33.3% , 平均每块外植体产生小鳞茎数达19.9个; 鳞片及鳞片中的腋芽诱导鳞茎较难且需时间较长; 叶和子房则未能诱导出小鳞茎。     

兰州百合鳞片子球繁育技术研究

从兰州百合鳞片的选取、扦插方式、放置方式、扦插方法及鳞片扦插的温度、基质、水肥、光照及调节剂等方面,详细介绍兰州百合鳞片子球繁殖的先进技术,建立兰州百合鳞片子球繁育技术体系。     

Tissue culture propagation of Lilium hybrids

We studied the effect of growth regulators-α-naphthyl-acetic acid (NAA) and 6-benzylaminopurine (BAP) on bulblet regeneration from bulb scale explants of Lilium oriental hybrid ‘Crimson Beauty’. The combination of 5 μM BAP and 1 μM NAA in the basal culture medium of Linsmaier and Skoog induced maximum bulblet formation per explant. On the same medium we succeeded in inducing bud differentiation on the ovary- and leaf-derived explants and in callus culture. A method is described for a continuous propagation of lily plants in vitro.     

Effects of growth regulators and activated charcoal on in vitro bulblet multiplication and growth in Galanthus nivalis ‘Flore Pleno’

Summary

The in vitro multiplication of Galanthus nivalis ‘Flore Pleno’ bulblet clumps was evaluated through three 16-week sub-culture passages on media supplemented with either 1.0 mg l^–1 6-benzylaminopurine (BA) and 0.1 mg l^–1 naphthaleneacetic acid [NAA; the plant growth regulator (PGR) control], 0.5 mg l^–1 BA and 0.05 mg l^–1 NAA (PGR/2), or 0.1 mg l^–1 BA and 0.01 mg l^–1 NAA (PGR/10). At the end of the second sub-culture passage, clumps of bulblets from each of the three PGR treatments were also transferred to conditions to promote bulblet growth (G medium without PGRs) supplemented with 60 g l^–1 sucrose and 5 g l^–1 activated charcoal (AC). Lowering the PGR concentration during the initial multiplication phase reduced bulblet multiplication and overall culture growth, but did not influence bulblet size, as indicated by the diameter of the largest bulblet. Lowering the PGR concentration during the multiplication phase also reduced the multiplication of bulblets, overall tissue fresh weight, and the production of roots in tissues transferred to bulblet growth conditions. The reduced growth of tissues previously multiplied on PGR/10 medium was not, however, reflected in the growth of individual bulblets, since these were not significantly smaller than bulblets initially multiplied at the higher PGR concentrations. Bulblet sprouting and root growth on the bulblet growth medium were unaffected by prior PGR status in the multiplication phase. The results are discussed in terms of the mode of action of AC on the promotion of bulblet growth.     

Growth regulator requirements for adventitious regeneration from Lilium bulb-scale tissue in vitro,in relation to duration of bulb storage and cultivar

Addition of NAA (1-naphthylacetic acid) to the nutrient medium strongly influenced the adventitious regeneration of plantlets from bulb-scale tissue of lilies in vitro. The percentage of regenerating explants, the number of plantlets per explant, and also the bulblet growth of the resulting plantlets were affected by the auxin, low concentrations being stimulatory and high concentrations inhibitory.The cytokinins BA (6-benzyladenine) and 2iP (N6-[Δ2-isopentenyl]-adenine) did not influence the adventitious regeneration, but caused aberrant growth of the regenerated plantlets.Prolonged cold storage of the mother bulbs decreased the demand for exogenous auxin for maximum adventitious regeneration. The optimum for bulblet growth was not affected.Results of experiments with cultivars ‘Pirate’, ‘Enchantment’ and ‘Connecticut King’ suggest an inverse relationship between the in vivo propagation rate by scaling and the NAA demand for optimal adventitious regeneration in vitro.     

生物调控剂对大蒜生物学特性的影响

利用盆栽和田间试验的方法,研究生物调控剂对大蒜生物学性状的影响。结果表明:生物调控剂处理使大蒜独头率显著提高,200 mg/kg处理阿城紫皮蒜独头率可达88.5%。生物调控剂可以使大蒜叶片变宽、假茎长变短、植株矮化,鲜重和根重增加、根冠比值增大,在苗期起到壮苗的作用。同时初步明确了生物调控剂的使用技术。     

食用百合试管苗原生质体制备条件的优化

以龙牙百合试管再生苗小鳞茎为试材,利用正交试验优化原生质体制备参数,并探讨酶解振荡速度、酶解时间、原生质体收获时离心速度和原生质体纯化媒介蔗糖浓度等对原生质体产量的影响。结果表明:1.0%纤维素酶、1.0%果胶酶酶解继代培养40d的试管再生苗鳞茎3h,酶解时振荡速度50r·min-1,收获原生质体时离心条件为700r·min-1、6min,获取的原生质体最后用25%蔗糖纯化的组合条件最佳,1g鳞茎能获得6.60×106个·m L-1活原生质体。