中国对虾精子做载体将生长激素基因导入受精卵的研究

本实验采用卡介苗注射器将羊生长激素基因溶液注射到亲虾纳精囊中，以精子为载体，携带基因导入对虾受精卵，而达到转基因对虾的目的。经ＰＣＲ检测表明：１．经ＳＴＥ（ｐＨ８．０）第一次洗涤精子的洗涤液呈阳性信号；第２－４次的洗涤液呈阴性；２．多次洗涤后的精子抽提的ＤＮＡ呈阳性；３．检测１０个样品１００尾仔虾中有一个样品呈阳性结果，转基因比率在１％以上。同时斑点杂交结果也印证了上述结果。     

中国对虾（Penaeus chinensis）精子做载体将生长激素基因导入受精卵的研究

本实验采用卡介苗注射器将羊生长激素基因溶液注射到亲虾纳精囊中，以精子为载体，携带基因导入对虾受精卵，而达到转基因对虾的目的。经ＰＣＲ检测表明：１．经ＳＴＥ（ｐＨ８．０）第一次洗涤精子的洗涤液呈阳性信号；第２－４次的洗涤液呈阴性；２．多次洗涤后的精子抽提的ＤＮＡ呈阳性；３．检测 １０个样品１００尾仔虾中有一个样品呈阳性结果，转基因比率在 １％以上。同时斑点杂交结果也印证了上述结果。     

对精子作为动物转达基因载体的探讨

精子作为基因的载体制作转基因动物,以其简单、高速和广泛适用等特点而吸引众多的研究小组在不同水平上进行研究.本文就他们的研究成果作一系统综述.     

对精子作为动物转基因载体的探讨

精子作为基因的载体制作转基因动物,以其简单、高速和广泛适用等特点而吸引众多的研究小组在不同水平上进行研究。本文就他们的研究成果作一系统综述。     

用显微注射技术导入外源DNA对鲤鱼和虹鳟鱼受精卵孵化率的影响

本报道了利用显微注射技术导入外源基因分别对鲤鱼和虹鳟鱼授精卵孵化率影响的研究。从1993年－1996年4年中，我们用显微注射方法，将全鱼生长激素基因导入虹鳟鱼授精卵（包括囊胚期卵）5，676粒，孵出鱼苗364尾，孵化率为6.4%(4年平均，虹鳟鱼正常孵化率为80％）；而用这种方法，将全鱼生长激素基因导入鲤鱼授精卵12，196粒，孵出鱼苗4，290，孵化率为34．0％（4年平均，鲤鱼正常孵化率为70％左右）。实验结果：显微注射技术在虹鳟鱼和鲤鱼两种受精卵上的效果明显不同，斑点杂交和SouthernBlot杂交结果相近。     

精子载体转基因技术的研究进展

精子作为基因的载体制作转基因动物,其简单高效和广泛适用为研究者所重视,但这种方法又因稳定性差而受到争议。众多的研究小组在不同水平上对其进行研究,揭示了一些机制与原理。本文就目前在这方面的研究成果作了系统综述。     

精子载体法在转基因水产动物中的应用研究进展

精子载体法是以精子作为外源基因的载体,通过人工授精将外源基因导入动物胚胎,从而将外源基因带入子代的基因组中以实现基因转移。近年来,由于该法操作简单,并简化了基因导入过程等优点而逐步受到各国学者青睐。目前,精子载体法已应用在鱼类、甲壳类、贝类等水产动物的转基因研究上,并取得了一些成果。对精子载体法在转基因水产动物中的应用研究进展、存在问题、前景展望等作一综述。     

草鱼线粒体DNA限制性内切酶分析

本文报道了用ＢａｍＨⅠ，ＢｇｌⅠ，ＢｇｌⅡ，ＣｌａＩ，ＥｃｏＲＩ，ＨｉｎｄⅢ，ＰｖｕⅡ，ＳａｃⅠ，ＸｂａⅠ，ＸｈｏⅠ等十种限制性内切酶酶切草鱼线粒体ＤＮＡ，计算出各酶切片段长度及草鱼ｍｔＤＮＡ大小。其中六种酶有多个切点，在所检测的样品中未发现碱基替换。     

从草鱼肝细胞中分离大分子量的DNA的简便方法

DNA的分离是从事分子生物学、分子遗传学和基因工程研究所必须掌握的基本技术之一。在鱼基因库的构建中,首先就需要分离到大分子量(100 Kb以上)的鱼DNA作为克隆的材料。许多研究表明,真核生物的每个染色单体仅含有一条双螺旋DNA,其分子量平     

微载体规模化培养草鱼细胞与病毒的工艺及优化

研究了在悬浮培养系统中使用微载体Cephodex规模化培养草鱼肾脏组织细胞CIK和草鱼呼肠孤病毒(GCRV)的条件并进行了优化。结果表明,Cephodex是一种适合CIK细胞贴壁生长的微载体,搅拌方式(搅拌时间/静止时间)及血清浓度(0%、5%、10%、15%)对CIK细胞在Cephodex微载体上的贴附效率有影响。贴附期以转速35 r/min、每静置45 min搅拌2 min的间歇搅拌方式最佳,8 h后细胞贴附率可达90%以上;细胞贴附期培养基中的血清浓度为5%。当Cephodex微载体用量10 mg/mL、细胞初始接种密度2.5×105cells/mL、连续搅拌速度40 r/min时可获得最佳的细胞生长效能。用优化的最佳工艺条件大规模培养CIK细胞,接种感染复数为0.1的GCRV病毒3 d后,培养细胞出现典型细胞病变效应,病毒滴度(lgTCID50/mL)为8.5。本项研究为草鱼出血病疫苗规模化制备技术研究奠定了基础。     

兴国红鲤同草鱼杂交的受精细胞学研究

兴国红鲤与草鱼杂交虽属亚科间的远缘杂交,却符合鲤科鱼类一般的受精规律,精子由唯一的受精孔道进入卵内,单精入卵。受精的适当时间是在卵细胞第二次成熟分裂的中期。受精后7分钟形成精子星光。接着雄性原核、雌性原核先后形成,并逐渐靠拢;受精后40分钟两性原核结合(水温21℃);受精后45—50分钟出现新个体的第一次卵裂。说明草鱼精子对兴国红鲤成熟卵细胞不仅起激动作用,而且参与了遗传物质的组成。此系亚科间远缘杂交具有生活力的生物学基础。实验发现:在特定的条件下,同一批受精卵中,多倍体,单倍体,雌发育可能同时存在。本文还比较分析了常见的几种鲤科鱼类及其杂种受精的过程。