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山杏原生质体培养再生植株 总被引:22,自引:0,他引:22
对影响山杏原生质体分离和培养的因素进行了系统研究。以悬浮培养物为分离材料,在CPW+1.5%CelulaseOnzukaR-10+0.5%MacerozymeR-10+0.5%Hemicelulase+0.6mol/L甘露醇+1%PVP的酶解液中酶解10h,原生质体产量和活力分别达到8×106个/gFW和95%。以KM8P为基本培养基,在培养初期加2,4-D1.0、BA0.25mg/L,培养10d和30d后分别将BA调至0.5和1.0mg/L,以0.55mol/L山梨醇调节渗透压,培养过程中逐步降压,在0.5×105个/mL的植板密度下液体浅层培养60d后形成了微愈伤组织。将微愈伤组织转至固体培养基上继代培养,在分化培养基上分化出不定芽,在生根培养基上生根形成完整植株。 相似文献
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苹果原生质体分离培养及植株再生 总被引:22,自引:1,他引:21
以悬浮培养细胞及叶片作为分离原生质体的起始材料 ,对影响苹果原生质体分离和培养的因素进行了系统研究。优化的原生质体培养基为 :改良MT 维生素C 5mg/L BA0 .5~ 1mg/L 2 ,4 D 0 .2mg/L 蔗糖 0 .6 5mol/L 谷氨酰胺 50 0mg/L CH 10 0mg/L ME50 0mg/L ;以葡萄糖代替蔗糖作渗透压调节物质效果好 ,且在培养过程中不需降压 ;适宜的低密度培养 (0 .5× 10 5/mL)可减少褐变。悬浮系原生质体培养 5~ 6d出现第 1次细胞分裂 ,15~ 2 0d形成多细胞团 ,4 0~ 50d形成肉眼可见的小愈伤组织。经培养诱导出不定芽 ,并进一步诱导生根长成完整植株。获得了平邑甜茶、M2 6 、嘎啦 3种基因型的原生质体再生植株。 相似文献
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辣椒子叶原生质体培养和植株再生 总被引:14,自引:2,他引:14
辣椒子叶原生质体培养和植株再生何晓明1王鸣1王之2(1西北农业大学园艺系,陕西杨陵712100;2陕西师范大学生物系,西安710062)关键词辣椒;子叶;原生质体培养;植株再生ProtoplastCultureandPlantRegenera... 相似文献
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枇杷原生质体植株再生 总被引:15,自引:0,他引:15
以普通批粑(价iobotlya joponica Lindl.)‘解放钟’等品种的不同发育期胚为材料诱导愈伤组织。起源于鱼雷形胚的胚性愈伤组织是游离原生质体的合适材料。最合适的游离原生质体的酶混合液为:l%纤继素酶+2%果胶酶干!2%甘露醇,其原生质体得率高于L 07/g愈伤组织,原生质体成活率在 95%以上。原生质体经液体培养 4天后,出现第一次细胞分裂,并继续分裂,形成大量肉眼可见的小愈伤组织。愈伤组织在含3%山梨醇的培养基土培养3周后,其表面出现茎原基,并进一步发育成芽苗。芽苗移入生根培养基后生成完整植株。已获得解放钟和‘白梨’移栽成活的原生质体再生植株。 相似文献
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罗田甜柿原生质体分离、培养及植株再生 总被引:3,自引:2,他引:3
以‘罗田甜柿’休眠芽茎尖诱导的愈伤组织为试材, 对原生质体分离培养技术进行了研究。结果表明: ( 1) 继代10 d 的愈伤组织最适于分离原生质体; ( 2) 优化的酶解体系为CPW+ 0. 5% Cellulase Onoruka R-10+ 0. 03% Pectinase from Aspergillus Niger+ 0. 7 mol/ L Mannitol+ 1% PVP-10; ( 3) 原生质纯化方式以上浮法为好, 100×g 离心6 min; ( 4) 琼脂糖念珠培养5~ 6 d 观测到第1 次分裂, 多为不均等分裂, 60~70 d 形成肉眼可见的小愈伤组织, 愈伤组织增殖到5 mm 以上, 分化成苗, 转至生根培养基生根。 相似文献
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酿酒葡萄原生质体再生植株 总被引:14,自引:0,他引:14
将酿酒葡萄品种诗南,梅郁的花丝接种在含6BA2.0mg.1^-1,2,4-D0.5mg.1^-1的B5诱导培养荐,诱导产生胚性愈伤组织。胚性愈伤组织经液体悬浮培养形含大量胚性细胞团的悬浮培养物。 相似文献
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酿酒葡萄原生质体再生植株 总被引:1,自引:0,他引:1
将酿酒葡萄品种白诗南、梅郁的花丝接种在含6BA2.0mg·1-1、2,4-D0.5mg·1-1的B5诱导培养基上,诱导产生胚性愈伤组织。胚性愈伤组织经液体悬浮培养形成含大量胚性细胞团的悬浮培养物。用Cellulase Rs2%、Pectolyase Y230.3%,5mmol·1-1CaCl2·2H2O、0.6mol·1-1甘露醇、0.3%葡聚糖硫酸钾、pH5.6~5.8的酶混合液从胚性细胞团分离得到原生质体。原生质体培养到第5天出现第一次分裂,40d形成上百个细胞的大细胞团,50d形成0.5~1.0mm大小的小愈伤组织。这些小愈伤组织在含6BA0.5mg·1-1的B5分化培养基上分化出胚状体进而形成幼苗,在生根培养基上生根形成再生植株。 相似文献
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我国蔬菜原生质体培养研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
综述了国内学者对蔬菜原生质体培养包括原生质体的来源和预处理,原生质体的分离和培养,再生植株的获得以及原生质体融合等方面的研究进展。 相似文献
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粗柠檬(Citrus jambhiri Lush)叶肉原生质体与哈姆林甜橙(C.sinensis Osbeck)悬浮细胞系原生质经聚乙二醇(PEG)诱导融合、再生的植株中,除体细胞杂种外,发现两棵为二倍体,与其亲本一样,2n=2x=18。这两棵植株叶片形态似粗柠檬。GOT、SOD及POX 3种同工酶分析结果显示,其酶带与粗柠檬基本相同,但个别带纹有差异。本文就这类植株的来源问题作了讨论。 相似文献
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取不结球白菜OguCMS 5d苗龄的下胚轴 ,在 2 0mg/mL纤维素酶 (OnozukaR 10 ) ,10mg/mL果胶酶 (MecerozymeR 10 )及CaCl2 ·2H2 O 10mmol/L、KH2 PO4 0 .7mmol/L、甘露醇 0 .5mol/L的酶液中游离 36h ,50 0r/min下离心收集下胚轴原生质体。原生质体在KM8P1附加 2 ,4 D 0 .5mg/L、 6 BA 0 .2 5mg/L、NAA 1.0mg/L的培养基上培养 2 1d形成小愈伤组织 ,经MS附加 2 ,4 D 1.0mg/L增殖愈伤组织 ,在MS附加 6 BA 10 .0mg/L和NAA 0 .3mg/L培养基上进行芽分化培养 ,并在无任何激素的MS培养基上生根 ,14d后即可获得完整的再生植株。 相似文献
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番茄及其近缘野生种茎段原生质体培养的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
利用番茄茎段作为原生质体来源的外植仁,在适宜的培养基中,成功地获得了野生秘鲁番茄(Lycopersicon peruvianum Mill.)、栽培番茄‘粤农2号’(Lycopersicon esculentum ‘Yuenong No.2’)和番茄近缘里生种类番茄茄(Solanum lycoersicoides Dun.)的再生植株。3种材料的再生植侏移植到土壤中均能正常生长,植株性状与对照无差 相似文献
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木槿花托培养再生植株的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
木槿(Hibiscussyriacus)为韩国国花,在我国广大地区均有较好的适应性,花多而艳丽,花期长,且吸收大气污染物,抗病虫,故近年来作为绿化材料被广泛应用,该物种目前以扦插、分株繁殖为主,这些方法简单易行,但易被病毒感染引起物种老化,退化变质,故我们利用木槿花托进行了组织培养试验,以期获得无毒母本,进行扩繁,满足城市园林绿化需要。已有学者使用叶片作外植体进行过组培试验,本次使用花托作外植体旨在加强其愈伤组织分化能力,其方法如下:1材料、名称及来源木槿,宜春学院校园。2材料灭菌选择本校校园内含苞待放的木槿花,自来水冲洗干净,70%酒… 相似文献
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芹菜胚性细胞悬浮系原生质体分离及再生植株 总被引:1,自引:0,他引:1
利用芹菜胚性细胞悬浮系成功分离得到大量原生质体, 获得芹菜大量原生质体的最佳反应体系为: 酶液组成为3.0%纤维素酶Onozuka R210、1.0%离析酶R210、11%甘露醇、0.5% CaCl2 ·2H2O和0.1% MES; 摇床转速为80 r/min, 温度(25 ±2) ℃, 酶解时间5~6 h; 原生质体产量为25.00 ×106 /g, 原生质体活力83.41%。原生质体浅层培养, 培养基为1 /2 MS + 1 mg/L 2, 4-D + 0.5 mg/L KT + 11%甘露醇+ 500 mg/L水解络蛋白, 两天后, 重新再生细胞壁之后进行第1次分裂, 逐步降低渗透压至甘露醇3% ,大约30 d形成小细胞团。小愈伤组织经增殖培养后在1 /2MS + 500 mg/L CH + 0.25 mg/L KT固体分化培养基诱导出不定芽, 30 d后再转入MS基本培养基, 获得完整的再生植株。 相似文献