山杏原生质体培养再生植株

对影响山杏原生质体分离和培养的因素进行了系统研究。以悬浮培养物为分离材料,在ＣＰＷ＋１．５％ＣｅｌｕｌａｓｅＯｎｚｕｋａＲ－１０＋０．５％ＭａｃｅｒｏｚｙｍｅＲ－１０＋０．５％Ｈｅｍｉｃｅｌｕｌａｓｅ＋０．６ｍｏｌ／Ｌ甘露醇＋１％ＰＶＰ的酶解液中酶解１０ｈ,原生质体产量和活力分别达到８×１０６个／ｇＦＷ和９５％。以ＫＭ８Ｐ为基本培养基,在培养初期加２,４－Ｄ１．０、ＢＡ０．２５ｍｇ／Ｌ,培养１０ｄ和３０ｄ后分别将ＢＡ调至０．５和１．０ｍｇ／Ｌ,以０．５５ｍｏｌ／Ｌ山梨醇调节渗透压,培养过程中逐步降压,在０．５×１０５个／ｍＬ的植板密度下液体浅层培养６０ｄ后形成了微愈伤组织。将微愈伤组织转至固体培养基上继代培养,在分化培养基上分化出不定芽,在生根培养基上生根形成完整植株。     

苹果原生质体分离培养及植株再生

以悬浮培养细胞及叶片作为分离原生质体的起始材料 ,对影响苹果原生质体分离和培养的因素进行了系统研究。优化的原生质体培养基为 :改良MT 维生素C 5mg/L BA0 .5～ 1mg/L 2 ,4 D 0 .2mg/L 蔗糖 0 .6 5mol/L 谷氨酰胺 50 0mg/L CH 10 0mg/L ME50 0mg/L ;以葡萄糖代替蔗糖作渗透压调节物质效果好 ,且在培养过程中不需降压 ;适宜的低密度培养 (0 .5× 10 5/mL)可减少褐变。悬浮系原生质体培养 5～ 6d出现第 1次细胞分裂 ,15～ 2 0d形成多细胞团 ,4 0～ 50d形成肉眼可见的小愈伤组织。经培养诱导出不定芽 ,并进一步诱导生根长成完整植株。获得了平邑甜茶、M2 6 、嘎啦 3种基因型的原生质体再生植株。     

辣椒子叶原生质体培养和植株再生

辣椒子叶原生质体培养和植株再生何晓明１王鸣１王之２（１西北农业大学园艺系，陕西杨陵７１２１００；２陕西师范大学生物系，西安７１００６２）关键词辣椒；子叶；原生质体培养；植株再生ＰｒｏｔｏｐｌａｓｔＣｕｌｔｕｒｅａｎｄＰｌａｎｔＲｅｇｅｎｅｒａ...     

枇杷原生质体植株再生

以普通批粑（价iobotlya joponica Lindl．）‘解放钟’等品种的不同发育期胚为材料诱导愈伤组织。起源于鱼雷形胚的胚性愈伤组织是游离原生质体的合适材料。最合适的游离原生质体的酶混合液为：l％纤继素酶＋2％果胶酶干！2％甘露醇，其原生质体得率高于L 07／g愈伤组织，原生质体成活率在 95％以上。原生质体经液体培养 4天后，出现第一次细胞分裂，并继续分裂，形成大量肉眼可见的小愈伤组织。愈伤组织在含3％山梨醇的培养基土培养3周后，其表面出现茎原基，并进一步发育成芽苗。芽苗移入生根培养基后生成完整植株。已获得解放钟和‘白梨’移栽成活的原生质体再生植株。     

罗田甜柿原生质体分离、培养及植株再生

 以‘罗田甜柿’休眠芽茎尖诱导的愈伤组织为试材, 对原生质体分离培养技术进行了研究。结果表明: ( 1) 继代10 d 的愈伤组织最适于分离原生质体; ( 2) 优化的酶解体系为CPW+ 0. 5% Cellulase Onoruka R-10+ 0. 03% Pectinase from Aspergillus Niger+ 0. 7 mol/ L Mannitol+ 1% PVP-10; ( 3) 原生质纯化方式以上浮法为好, 100×g 离心6 min; ( 4) 琼脂糖念珠培养5~ 6 d 观测到第1 次分裂, 多为不均等分裂, 60~70 d 形成肉眼可见的小愈伤组织, 愈伤组织增殖到5 mm 以上, 分化成苗, 转至生根培养基生根。     

酿酒葡萄原生质体再生植株

将酿酒葡萄品种诗南,梅郁的花丝接种在含６ＢＡ２．０ｍｇ．１＾－１,２,４－Ｄ０．５ｍｇ．１＾－１的Ｂ５诱导培养荐,诱导产生胚性愈伤组织。胚性愈伤组织经液体悬浮培养形含大量胚性细胞团的悬浮培养物。     

酿酒葡萄原生质体再生植株

将酿酒葡萄品种白诗南、梅郁的花丝接种在含６ＢＡ２．０ｍｇ·１－１、２,４－Ｄ０．５ｍｇ·１－１的Ｂ５诱导培养基上,诱导产生胚性愈伤组织。胚性愈伤组织经液体悬浮培养形成含大量胚性细胞团的悬浮培养物。用Ｃｅｌｌｕｌａｓｅ　　Ｒｓ２％、Ｐｅｃｔｏｌｙａｓｅ　Ｙ２３０．３％,５ｍｍｏｌ·１－１ＣａＣｌ２·２Ｈ２Ｏ、０．６ｍｏｌ·１－１甘露醇、０．３％葡聚糖硫酸钾、ｐＨ５．６～５．８的酶混合液从胚性细胞团分离得到原生质体。原生质体培养到第５天出现第一次分裂,４０ｄ形成上百个细胞的大细胞团,５０ｄ形成０．５～１．０ｍｍ大小的小愈伤组织。这些小愈伤组织在含６ＢＡ０．５ｍｇ·１－１的Ｂ５分化培养基上分化出胚状体进而形成幼苗,在生根培养基上生根形成再生植株。     

我国蔬菜原生质体培养研究进展

综述了国内学者对蔬菜原生质体培养包括原生质体的来源和预处理,原生质体的分离和培养,再生植株的获得以及原生质体融合等方面的研究进展。     

柑桔原生质体融合再生出叶肉亲本类型植株

粗柠檬(Citrus jambhiri Lush)叶肉原生质体与哈姆林甜橙(C.sinensis Osbeck)悬浮细胞系原生质经聚乙二醇(PEG)诱导融合、再生的植株中,除体细胞杂种外,发现两棵为二倍体,与其亲本一样,2n=2x=18。这两棵植株叶片形态似粗柠檬。GOT、SOD及POX 3种同工酶分析结果显示,其酶带与粗柠檬基本相同,但个别带纹有差异。本文就这类植株的来源问题作了讨论。     

不结球白菜OguCMS下胚轴原生质体培养再生植株

取不结球白菜OguCMS 5d苗龄的下胚轴 ,在 2 0mg/mL纤维素酶 (OnozukaR 10 ) ,10mg/mL果胶酶 (MecerozymeR 10 )及CaCl2 ·2H2 O 10mmol/L、KH2 PO4 0 .7mmol/L、甘露醇 0 .5mol/L的酶液中游离 36h ,50 0r/min下离心收集下胚轴原生质体。原生质体在KM8P1附加 2 ,4 D 0 .5mg/L、 6 BA 0 .2 5mg/L、NAA 1.0mg/L的培养基上培养 2 1d形成小愈伤组织 ,经MS附加 2 ,4 D 1.0mg/L增殖愈伤组织 ,在MS附加 6 BA 10 .0mg/L和NAA 0 .3mg/L培养基上进行芽分化培养 ,并在无任何激素的MS培养基上生根 ,14d后即可获得完整的再生植株。     

‘翠秀’黄瓜子叶原生质体的高效培养及植株再生

 分离纯化的黄瓜子叶原生质体，以5.5×10～5.5×10⁵个/mL的不同密度培养于mKMSp液体培养基中，均获得不同程度的细胞分裂。当培养密度超过1.0×10³个/mL时，原生质体可持续分裂至愈伤组织形成，最高植板率为54%。原生质体来源的愈伤组织经诱导培养产生大量体胚并再生成植株。Ca²⁺ 浓度对黄瓜原生质体的稳定和细胞分裂有重要影响。     

甘蓝原生质体培养研究进展

综述了国内外学者对甘蓝原生质体的分离和培养、再生植株的获得、原生质体融合及其在育种上的应用等方面的研究 ,并对今后的研究进行了展望。     

番茄及其近缘野生种茎段原生质体培养的研究

利用番茄茎段作为原生质体来源的外植仁,在适宜的培养基中,成功地获得了野生秘鲁番茄（Ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｏｎ ｐｅｒｕｖｉａｎｕｍ Ｍｉｌｌ．）、栽培番茄‘粤农２号’（Ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｏｎ ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍ ‘Ｙｕｅｎｏｎｇ Ｎｏ．２’）和番茄近缘里生种类番茄茄（Ｓｏｌａｎｕｍ ｌｙｃｏｅｒｓｉｃｏｉｄｅｓ Ｄｕｎ．）的再生植株。３种材料的再生植侏移植到土壤中均能正常生长,植株性状与对照无差     

木槿花托培养再生植株的研究

木槿(Hibiscussyriacus)为韩国国花,在我国广大地区均有较好的适应性,花多而艳丽,花期长,且吸收大气污染物,抗病虫,故近年来作为绿化材料被广泛应用,该物种目前以扦插、分株繁殖为主,这些方法简单易行,但易被病毒感染引起物种老化,退化变质,故我们利用木槿花托进行了组织培养试验,以期获得无毒母本,进行扩繁,满足城市园林绿化需要。已有学者使用叶片作外植体进行过组培试验,本次使用花托作外植体旨在加强其愈伤组织分化能力,其方法如下:1材料、名称及来源木槿,宜春学院校园。2材料灭菌选择本校校园内含苞待放的木槿花,自来水冲洗干净,70%酒…     

芹菜胚性细胞悬浮系原生质体分离及再生植株

利用芹菜胚性细胞悬浮系成功分离得到大量原生质体, 获得芹菜大量原生质体的最佳反应体系为: 酶液组成为3.0%纤维素酶Onozuka R210、1.0%离析酶R210、11%甘露醇、0.5% CaCl₂ ·2H₂O和0.1% MES; 摇床转速为80 r/min, 温度(25 ±2) ℃, 酶解时间5～6 h; 原生质体产量为25.00 ×10⁶ /g, 原生质体活力83.41%。原生质体浅层培养, 培养基为1 /2 MS + 1 mg/L 2, 4-D + 0.5 mg/L KT + 11%甘露醇+ 500 mg/L水解络蛋白, 两天后, 重新再生细胞壁之后进行第1次分裂, 逐步降低渗透压至甘露醇3% ,大约30 d形成小细胞团。小愈伤组织经增殖培养后在1 /2MS + 500 mg/L CH + 0.25 mg/L KT固体分化培养基诱导出不定芽, 30 d后再转入MS基本培养基, 获得完整的再生植株。