应用正交试验法筛选平板生产白僵菌孢子诸优因子

白僵菌纯孢子粉与稀释剂按一定比例混合,配成所需浓度,用于超低容量防治森林害虫,杀虫效果比常规喷粉高,成本低,是我省近几年推广应用防治松毛虫的主要手段。目前我省主要采用固体发酵机械分离的方法生产孢子粉,含孢量为1,200亿/g 左右,也曾用过平板培养生产白僵菌孢子粉,含孢量为2,200亿/g 左右。为了提高白僵菌孢子粉的纯度、产量和节约原材料,我们拟在原平板培养的基础上,开展平板机械化生产白僵菌孢子粉的研究。本文就着重介绍采用多因子正交试验法筛选较适合的接种菌龄、液体培养基的配方、平板载体厚度、平板载体培养基配方和单位面积接种量。因子与水平影响平板培养白僵菌孢子的产量和成本,除了采用优良的白僵菌菌种和控制最适温湿度外,还有与发酵的菌龄、液体培养基的配方,平板载体厚度、平板载体培养基的配方和单位面积接种量等五个因子有关,为     

白僵菌生产工艺规范化技术的研究

通过对白僵菌不同工艺技术生产菌粉产孢量比较研究 ,筛选出工艺规范化生产各环节的最优组合技术参数 ,提出二级液体 (7%麦皮煮出液 )和三级固体培养基 (麦皮∶谷壳 =9∶1)及其液固接种量 (1∶1)最适配方 ,并确定前 3d三级固体开放培养发酵最适温度为 18～ 2 2℃、相对湿度为 95 %～ 10 0 % ,还总结出以二级液体振荡培养 6 0h接种 ,三级固体发酵培养 7～10d ,可获得最优质的菌粉 ,平均含孢量达 2 0 0× 10 8个·g-1以上 ,缩短生产周期 1/3 ,降低生产成本 ,增加菌厂经济收益 ,为菌厂大量生产提供参数依据。     

杨树变色真菌生防细菌KLBMP033发酵条件优化

以内生解淀粉芽孢杆菌KLBMP 033对可可球二孢菌的拮抗活性为评价指标,采用单因素多浓度和响应面试验设计法,对其液体发酵培养基和培养条件进行了优化。优化结果表明,发酵培养基为玉米粉17.8g/L,黄豆粉13.7g/L,NaCl5.0g/L;发酵条件pH值7.5,培养温度28℃,转速为180r/min,种子液的接种量4%,装液量60mL/250mL,培养时间为60h;对可可球二孢的抑制率从起始的53.3%提高到83.2%。     

平沙绿僵菌wp08菌株固态发酵条件的优化

平沙绿僵菌是竹林金针虫的高效寄生真菌,具有广阔的应用前景。为了提高菌株的生长速率和产孢量,对平沙绿僵菌wp08菌株固态发酵条件进行优化。结果表明,蛭石和稻壳均可作为固态发酵的优良载体,大米、玉米粉、麦麸组合是该菌的良好营养源,与不同载体组合均可使产孢量达到2.7×109孢子/g以上,其中以大米和稻壳体积比1∶2组合时产孢量最大,为58×109孢子/g;接种量为10%(mL/g);培养基质相对湿度为70%;固态发酵周期为14 d;培养基质装入量为1/2培养瓶。     

厚壁轮枝菌摇瓶液体发酵培养的研究

厚壁轮枝菌对根结线虫虫卵有很强的寄生力,是线虫的生防菌,本文对其最适培养条件进行了研究.每12 h对其产孢情况进行跟踪,探讨了不同C、N源,初始pH值,无机盐对其产孢量的影响,确定了适宜的培养条件及发酵终止时间.结果显示,28 ℃下,在160 r·min-1 摇床上,以500 mL三角瓶200 mL的装量进行液体培养,筛选出的最佳复合培养基配方为:葡萄糖20 g·L-1,玉米粉20 g·L-1, 黄豆粉20 g·L-1,KH2PO4 0.5 g·L-1 ,MgSO4·7 H2O 0.5 g·L-1.最佳pH值范围5.0～7.0,最适发酵终止时间120～144 h.     

莱氏野村菌(Nomuraea rileyi)固液双相发酵配方研究

莱氏野村菌(Nomuraea rileyi)通过基础培养基基质、碳、氮、维生素筛选,玉米(50 g)、葡萄糖(1.5 g)、水解酪蛋白(1.5 g)、抗坏血酸(0.5 mg)、水50 m L为最佳固体培养基质(培养10 d),产孢量达4.78×1010cfu·m L-1。以SMY为液体培养基质,莱氏野村菌最适发酵条件:1.0×108cfu·m L-1接种浓度,25℃、p H=6、全天光照、180 r·min-1振荡培养7 d,菌丝干重为690.2 mg。固体发酵为复合粉炮生产提供基础配方,液体发酵缩短时间后可作为固体培养生产莱氏野村菌菌粉的二级种子,发酵产品为杜仲梦尼夜蛾粉炮防治重要生物制剂。     

白灵菇胞外多糖发酵条件研究

对白灵菇胞外多糖的发酵条件进行了优化筛选,结果表明,白灵菇液体菌种最适培养条件为：培养基为葡萄糖2.0%,玉米粉2.0%,酵母粉0.3%,黄豆粉1.5%,磷酸二氢钾0.2%,硫酸镁0.15%,硫酸钙0.2%,ZnSO40.002%;摇瓶装液量100ml,接种量10%,起始pH为6.5,摇瓶转速160r/min。     

粉拟青霉菌一级固体菌种的生产试验

通过对粉拟青霉菌在一级菌种生产过程中的培养基选择、培养时间与发芽率、产孢状况之间的关系等多项指标的试验研究 ,选择出最适合生长的一级固体培养基配方及最佳的培养时间 ,使一级固体菌种具备产孢早、产孢多、且投入二级进行固体发酵培养具备生长快速、产孢量高的特点。     

红绒盖牛肝菌发酵培养基筛选及液体培养条件

在摇瓶液体培养条件下,研究了14种不同成分培养基对红绒盖牛肝菌菌丝体生长的影响及液体培养条件,结果表明,红绒盖牛肝菌最适发酵培养基为:蔗糖2%、玉米粉2%、黄豆粉1.5%、酵母膏0.5%、MgSO40.05%、KH2PO40.1%。培养基中添加有机硅类消泡剂对红绒盖牛肝菌菌丝体生长没有影响;液体发酵的适宜初始pH为5～6;液体培养周期为10 d,菌丝体生物量可达5.7 g/L。     

响应面法优化印度梨形孢液体发酵培养基

为提高印度梨形孢（Serendipita indica）液体发酵的培养效率,对印度梨形孢液体发酵培养基进行优化。首先运用单因素试验筛选出基础液和影响因子;再通过最陡爬坡试验确定影响因子浓度;最后以印度梨形孢菌丝鲜重和干重为响应值建立二次回归方程,运用响应面中心组合设计进行液体发酵培养基成分优化。结果表明：印度梨形孢液体发酵培养基最佳配方为：马铃薯滤液100 mL（水100 mL,马铃薯20 g）,麦芽汁4.370 mL,酵母粉0.052 g,硫酸镁0.040 g。使用此配方,摇瓶培养3天后,获得菌丝平均鲜重为12.935 g,平均干重为0.262 g。与PDB培养基相比,鲜重和干重分别提高了300.023%和92.647%,极大的提高了印度梨形孢发酵培养效率。     

白僵菌纯孢生产研制

用大米做培养基生产白僵菌，经多次实验，成功地从大米培养基产品上得到了比较纯净的白僵菌孢子粉产品，即白僵菌纯孢产品。其每克纯孢含3000多亿个孢子，比常规白僵菌产品含100亿个孢子的质量显著高出。成本低廉，有利于包装和运输。     

打孔注菌防治光肩星天牛试验研究

用杨、柳、榆树的树皮和木质部浸出液为营养对球孢白僵菌进行生长试验,结果证明球孢白僵菌在3种树木的树皮和木质部的浸出液中都可生长;相同条件下,在树皮中比木质部中产量高,杨树树皮是木质部的3.37倍,柳树是4.73倍,榆树是3.86倍。林间试验证明打孔注菌可以防治光肩星天牛幼虫,含菌量4亿/mL～8亿/mL,每株注150 ...     

增效剂对球孢白僵菌产孢量及对光肩星天牛致死速率的影响

在应用昆虫病原菌防治光肩星天牛（Ａｎｏｐｌｏｐｈｏｒａ ｇｌａｂｒｉｐｅｎｎｉｓＭｏｔｓｃｈ）的试验中，筛选出一种增效剂，可使病原菌的产孢量增加，光肩星天牛的致死速率加快。在生产病原菌的培养基内加入０．０２％的增效剂培养５天，产孢量比对照增加一倍多。在含孢量１０＾８／ｍｌ的球孢白僵菌的菌悬液中加入０．０２％的增效剂，以每头光肩星天牛幼虫接种１ｍｌ菌悬液，使光肩星天牛幼虫第６天开始发病，第１６天死亡     

白僵菌对小蠹虫的致病力及持续控制作用的研究

在室内利用不同浓度的球孢白僵菌Z28菌悬液对小蠹的幼虫和成虫进行了感染,随浓度增加幼虫和成虫死亡率均随之增加.在相同条件下,白僵菌侵染幼虫能力高于成虫,侵染致死时间幼虫也短于成虫.在室外使用涂刷和注菌2种方式对小蠹虫进行了防治.浓度为0.1亿孢子/mL和1亿孢子/mL利用注菌方式防治小蠹效果明显高于涂刷;但当浓度达到10亿孢子/mL时,2种接菌方式之间无显著差异.经过连续3年监测发现,未防治区有虫株树和虫口密度相对比较稳定,虫口密度居高不下.化防区有虫株数和虫口密度波动性大,与化防区相比白僵菌防治区表现出持续有效控制的优势,但2年后控效基本消失.     

不同培养盘对白僵菌生产的影响

在白僵菌三级生产中,使用3种不同培养盘,研究其对原菌粉生产的影响。结果表明,多孔塑盘生产的原菌粉含孢量和活孢率最高,分别为122.25±2.17亿孢子/g和90.50±0.96%。多孔塑盘生产的原菌粉显著好于竹制簸箕和镀锌钢盘生产的原菌粉。而且多孔塑盘在通透性和操作性上具有优势,烘干所需时间最短。这说明多孔塑盘适合用于白僵菌的三级生产。     

应用球孢白僵菌防治北方越冬油松毛虫的研究

为在北方应用白僵菌防治油松毛虫,笔者采用从灵丘县干旱林区分离得到的油松毛虫病原球孢白僵菌菌株Beauveria bassiana CGMCC NO.1573制备的孢子悬浮液和营养型湿菌粉剂,分别在冬季和春季对越冬的油松毛虫幼虫进行防治。结果显示：用2×106个/mL孢子悬浮液的防治效果不好,校正死亡率只有21%～29%;冬季用菌粉防治效果较好,感染率达到70.4%～85.4%;春季施用菌粉15 d～20 d,感染率达47.1%～54.5%.结论认为,在树干基部和枯落物下撒施＂白僵菌营养型湿菌粉剂＂集中防治越冬幼虫是北方防治油松毛虫的有效方法。     

樟萤叶甲白僵菌的分离、培养及应用试验

试验表明：从樟萤叶甲虫尸上分离的白僵菌，经过室内扩大再培养，生产出含孢量１００亿／ｇ菌剂，制成手雷式粉炮，用菌量６ｋｇ／ｈｍ２，防治第１－２代樟萤叶甲幼虫，效果可达７２．５％－８７．７％；调成２亿／ｍｌ浓度的菌液喷雾防治第１代幼虫，效果可达８７％－８９％。     

利用玉米秆粉碎物生产白僵菌

以产孢量和活孢率为标志，研究了不同固体培养基质对白僵菌生长的影响，同时探讨了不同基质上生产的白僵菌对马尾松毛虫致病毒力和持效性的差异。结果显示，用低廉的玉米秆粉碎物、工业废弃液替代价高的麦麸及麸皮浸提液生产白僵菌，其产孢量优于四川常规麦麸生产，活孢率二者相当，且两者生产的白僵菌粉对越冬代马尾松毛虫的毒力和持效性基本一致，无显著差异。