高效液相色谱-串联质谱法检测鸡蛋中呋喃唑酮代谢物的残留

鸡蛋经盐酸水解,将蛋白中结合的呋喃唑酮代谢物（AOZ）释放出来,经2-硝基苯甲醛37℃衍生过夜,调节pH值约为7.0,用乙酸乙酯萃取,有机相浓缩,用流动相溶解后过0.2 μm滤膜过滤后于液质联用仪上进行测定.采用电喷雾,选用反应监测模式检测,外标法定量.AOZ标准工作液在0.05～5.00μg/L范围内线性良好,其线性方程为Y=37 978.5＋1 490 123.9X,线性关系r=0.999 8.AOZ在0.5、1.0、2.0、4.0μg/kg的回收率基本都在60%以上,对于经过水解提取衍生过程,回收率良好,批内RSD（相对标准差）均小于16%,精密度良好;批间RSD均小于12%,再现性良好,最低检测限为0.05μg/L.     

超高效液相色谱法检测猪肉中乙酰甲喹及其主要代谢物

建立了猪肉中乙酰甲喹及其4种主要代谢物的超高效液相色谱检测方法。试样用二氯甲烷/正己烷混合溶液、超纯水、50mL/L三氯乙酸溶液提取3次,经有机溶剂提取完之后,在氮气下吹干,残渣以300mL/L甲醇水溶液溶解,之后和水相提取液合并,经Strata-X固相萃取小柱净化,用超高效液相色谱法检测猪肉中乙酰甲喹及其4种主要代谢物。选择甲醇-0.2 mL/L甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0.5mL/min,在241nm波长处检测。该方法检测的乙酰甲喹及其4种代谢物均在0.05μg/g～10μg/g范围内线性良好,相关系数均大于0.999;乙酰甲喹、M1、M2、M5和M10在0.1、1、10μg/g三水平加标回收率分别为80.5%～91.3%、79.3%～88.3%、86.1%～98.3%、77.9%～88.4%和82.9%～94.2%;批间变异系数分别为9.3%～9.6%、5.4%～8.6%、7.3%～9.2%、5.3%～8.3%和6.4%～8.9%。乙酰甲喹及其4种代谢物在猪肉中的检测限均为0.01μg/g,定量限均为0.04μg/g。本研究所建立的方法灵敏、准确、高效,可用于猪肉中乙酰甲喹及其主要代谢产物残留分析。     

呋喃妥因残留代谢物人工抗原的合成与鉴定

利用对醛基苯甲酸对呋喃妥因代谢物1-氨基乙内酰脲(1-Aminohydantoin hydrochloride,AHD)进行衍生化,衍生物1-氨基乙内酰脲-4-羧苯基肟(CPAHD)通过混合酸酐法与牛血清蛋白(bovine serum albumin,BSA)偶联,用紫外扫描(UV)和变性凝胶电泳(SDS-PAGE)对偶联物进行验证。将偶联成功的人工全抗原(CPAHD-BSA)免疫BALB/c小鼠,通过间接酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠血清抗体效价为1:32 000。用间接竞争ELISA鉴定抗体特性,结果显示:抗体对AHD与对硝基苯甲醛的衍生物(NPAHD)的灵敏度高,IC50为30.63μg/L,特异性好,与CPAHD有部分交叉反应外,与其他3类硝基呋喃类药物及代谢产物无交叉反应(交叉反应率<0.01%)。结果表明,用CPAHD-BSA作免疫原免疫小鼠可诱导产生针对AHD衍生物(NPAHD)的特异性抗体,为进一步制备AHD单克隆抗体和研制快速筛选检测试剂盒奠定了基础。     

高效液相色谱法测定猪肉组织中莱克多巴胺的残留

用乙酸乙酯-正丁醇混合液为提取剂提取猪肉组织中的莱克多巴胺,经固相萃取柱净化,浓缩后用2%乙酸溶液定容,用高效液相色谱-荧光检测法分离测定;色谱柱为C18柱,长250mm,内径4.6mm,粒度5μm;流动相为戊烷磺酸钠溶液:乙腈(78:22,V/V);激发波长为226nm,发射波长为306nm;流速1mL/min;进样量50μl;猪肉组织中莱克多巴胺的检测限为5μg/kg;莱克多巴胺的测定在2.5～25ng/mL范围内具有良好的线性关系,平均回收率在85.0%以上,RSD小于2.5%;方法简单,灵敏度高,可用于猪肉组织中莱克多巴胺残留的测定。     

牛肝中苯并咪唑类药物残留的高效液相色谱检测方法

建立了牛肝组织中苯并咪唑类药物(阿苯哒唑,噻苯哒唑和奥芬哒唑)多残留检测的高效液相色谱法.用乙酸乙酯提取牛肝组织样品中的药物,提取液浓缩后加入酸性乙醇和正己烷分配脱脂,过C18固相萃取柱净化.以甲醇-磷酸二氢铵缓冲液为流动相,反相高效液相色谱紫外检测法检测.方法的平均回收率为78.8%,平均变异系数为2.18%.3种药物的检测限为8 μg/kg,定量限为25 μg/kg.     

高效液相色谱法检测猪肉中4种氟喹诺酮类药物残留方法的优化

试验为建立1种采用高效液相色谱法检测猪肉组织中环丙沙星(CIP)、达氟沙星(DFLX)、恩诺沙星(ENR)、沙拉沙星(SAR)残留量的方法。按照农业农村部标准方法进行优化,猪肉样品经磷酸盐溶液提取,固相萃取柱浓缩净化,使用高效液相色谱分析,荧光检测器检测,外标法定量。结果表明:环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星在5～500μg/L浓度范围内,达氟沙星在1～100μg/L线性关系良好。猪肉中环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星检出限为5μg/L,达氟沙星检出限为1μg/L。在指定的高、中、低3个浓度添加水平下,4种药物在猪肉的回收率为66.1%～107.9%;批内变异系数为1.3%～6.4%,批间变异系数为2.8%～7.1%。研究表明,该方法操作简单、准确度和精密度较好、实用性强、灵敏度高,可以满足猪肉样品中氟喹诺酮类4种药物残留检测的需要。     

高效液相色谱-串联质谱法检测猪肝中苯并咪唑类药物及其代谢物残留

建立了猪肝中阿苯哒唑及其代谢物阿苯哒唑砜、阿苯哒唑亚砜、2-氨基阿苯哒唑砜,噻苯哒唑及其代谢物5-羟基噻苯哒唑,甲苯哒唑及其代谢物氨基甲苯哒唑、5-羟基甲苯哒唑,芬苯哒唑及其代谢物芬苯哒唑砜、等效物奥芬哒唑,氟苯哒唑及其代谢物2-氨基-氟苯哒唑共14种苯并咪唑类药物及其代谢物残留检测的高效液相色谱-串联质谱方法。样品用乙酸乙酯提取,MCX固相萃取柱净化。WatersXterraC18色谱柱（2．1mm×150mm,5μm）分离,流动相A相为0．1％甲酸乙腈溶液;B相为0．1％甲酸水溶液,梯度洗脱,外标法定量。结果表明,14种苯并咪唑类药物及其代谢物标准溶液在10～1000ng／mL的浓度范围内呈现良好的线性关系,尺。均大于0．99,方法检测限为5斗g／kg,定量限为10μg／kg,14种苯并咪唑类药物及其代谢物在10—200μg／kg添加浓度范围内回收率均70％～120％之间。批内、批间相对标准偏差均小于20％。本方法灵敏、准确,满足食品安全检测法规的要求。     

呋喃妥因代谢物化学发光酶联免疫检测方法的研究

对呋喃妥因代谢物1-氨基乙内酰脲(AHD)进行半抗原改造,采用活化酯法将半抗原与卵清蛋白(OVA)偶联为包被原,与标准品竞争AHD单克隆抗体的抗原结合位点,加入辣根过氧化物酶标记羊抗鼠二抗,建立了AHD间接竞争化学发光酶联免疫(CLEIA)检测法,并对化学发光液、包被原与抗体最优稀释度、包被条件、封闭液和竞争时间五项参数进行优化。结果表明:该方法具有良好的特异性,IC50为0.753 ng/m L,在鸡肉组织中的检测限为0.028μg/kg,添加回收率在80.54%~102.64%之间,变异系数均小于10%。与国标中液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)和我国出入境行业标准中酶联免疫检测法(ELISA)相比,不仅降低了检测限,而且操作简便,为动物源性食品中呋喃妥因代谢物的残留提供了准确、便捷的分析检测手段。     

猪肉中SM2的残留检测HPLC方法的研究

本试验采用高效液相色谱法(HPLC)测定猪肉中的SM2残留量。试验采用AgilentHP1100系统,Agilent ODS C18(150mm×4.6×5)柱,流动相选用乙腈—0.017 mol/L磷酸(3 2);检测波长为267 nm;进样量为20μl;柱温:室温。提取溶剂为二氯甲烷,该方法样品前处理简单,药物的线性关系好,相关系数达0.99999以上。检测限为0.01μg/g,平均回收率在85%以上,变异系数均小于7.0%。该法前处理简便,灵敏度高,结果准确、可靠。     

一种鸡肉中四环素类兽药残留高效液相色谱检测方法的建立

建立高效液相色谱检测方法测定鸡肉中土霉素、四环素和金霉素的残留。应用建立的高效液相色谱方法对来自2个鸡场的12羽乌骨鸡的胸肌、腿肌进行测定。结果表明样品中的土霉素、四环素和金霉素的标准曲线有良好的线性关系,相关系数R20.99;土霉素、四环素和金霉素的最低检出限分别为20μg·kg~(-1)、20μg·kg~(-1)、100μg·kg~(-1),加标回收率为84.33%～107%。结论建立一种鸡肉中四环素类兽药残留高效液相色谱检测方法,待检样品中未检测出四环素类兽药残留,表明2个鸡场严格执行抗生素使用。     

高效液相色谱法测定猪肉中土霉素残留

世界粮农组织、世界卫生组织、欧盟及我国政府对畜产品中土霉素的残留都做出了严格的规定,其残留限量不得高于100μg/kg。因此,控制土霉素的使用,在动物性食品中实施土霉素及有害代谢产物残留的检测十分重要。就目前动物性食品中土霉素残留分析方法进行研究,以期建立一种准确、     

HPLC法分析猪肉中泰乐菌素残留

建立猪肉中泰乐菌素残留量的高效液相检测方法,为保障食品安全提供数据支撑。试料中残留的泰乐菌素用二氯甲烷提取,离心分层净化,高效液相色谱(紫外检测器)测定,外标法定量。结果显示,泰乐菌素在0.20～1.00μg/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数r≥0.997 3;在100～500μg/kg浓度水平回收率范围为71.2%～86.2%;定量限为50μg/kg。经方法学验证,本方法专属性好、简便、快速、准确,适用于猪肉中泰乐菌素残留量的检测。     

超高效液相色谱串联质谱快速检测猪肉中的沃尼妙林残留

建立了检测猪肉样品中新型兽药盐酸沃尼妙林残留的快速超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）确证方法。样品使用乙腈提取,在提取过程中同时加入正己烷去除脂质杂质,离心后取乙腈提取液,浓缩至干,用1 mL 0.1%甲酸水∶乙腈（60∶40,V∶V）复溶上机。以反相C18柱作为分离柱,0.1%甲酸乙腈和0.1%甲酸水为流动相,进行梯度洗脱。方法的检测限为10μg/kg,定量限为20μg/kg;在三个浓度水平（20、50、100μg/kg）下进行添加实验,平均回收率均大于92.60%,批内相对标准偏差为1.31%~6.80%,批间相对标准偏差为3.02%~4.60%。此方法简便迅速且稳定有效,适合快速检测猪肌肉中的沃尼妙林残留。     

QuEChERS-液相色谱串联质谱仪检测猪肉中102种农兽药残留及非法添加物方法的研究

为建立猪肉中102种农兽药残留及非法添加物的QuEChERS-高效液相色谱串联质谱(HPLCMS/MS)定性定量检测方法,以测定猪肉中的102种目标物的残留量。采用样品在EDTA-2Na溶液中以乙腈提取,经QuEChERS法净化,多反应监测(SRM)模式下进行定性和定量检测。102种目标物的定量限为0.01~0.02mg·kg^-1,在0.01mg·L^-1~1.00mg·L^-1范围内呈现良好的线性关系,相关指数r2为0.9913~0.9994。方法的加标回收率为77.8%~101.7%,相对标准偏差为2.91%~9.53%。本试验建立的方法操作简单,灵敏度和重复性好,可用于肉及肉制品中102种农兽药残留及非法添加物含量检测。     

呋喃妥因代谢物AHD单抗的制备及鉴定

将呋喃妥因代谢物1-氨基-乙内酰胺脲(AHD)的衍生物1-氨基乙内酰脲-4-羧苯基肟(CPAHD)分别与牛血清蛋白(BSA)和Jeffamine修饰的卵清蛋白(OVA)偶联,经紫外光谱扫描鉴定,成功合成了免疫抗原CPAHD-BSA和包被抗原CPAHD-Jeffamine-OVA。应用杂交瘤技术将免疫鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,获得了稳定分泌抗4-NPAHD单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为B10E7。使用本细胞株制备的McAb对4-NPAHD的半数抑制质量浓度(IC50)为3.65 ng/mL,与同类抗生素及其代谢物未发现交叉反应,显示高度的灵敏性和特异性。本抗体的研制为建立间接竞争酶联免疫方法奠定了基础。     

酶联免疫法测定生猪肉中呋喃妥因代谢物的残留量

用竞争酶联免疫(ELISA)法测定生猪肉中呋喃妥因代谢物(AHD:1-氨基-2-内酰脲)残留量,本文概述了酶联免疫法检测的基本原理、步骤,并在我所长期进行酶联免疫法检测的基础上,提出了几点关键性的注意事项,本法操作简单快捷、灵敏准确、方便实用,可作为生猪肉中呋喃妥因代谢物残留量检测的快速筛选方法。     

犬血浆中非罗考昔高效液相色谱检测方法的建立

建立测定犬血浆中非罗考昔含量的高效液相色谱方法。以蛋白沉淀法处理血样,流动相为乙腈∶0.025%三氟乙酸(V∶V)=51∶49,检测波长为290 nm,柱温35℃,流速为1 mL/min,进样量为50μL,经ZORBAX Stable Bond-C₁₈(4.6 mm×150.0 mm,5μm)色谱柱分离,进行色谱分析。结果显示,本方法专属性良好,非罗考昔的血浆浓度在0.05～4.00μg/mL内线性关系良好,检测限为0.025μg/mL,定量限为0.050μg/mL,验证样品的回收率为81.81%～114.26%,批内变异系数在7.74%以下,批间平均变异系数在11.68%以下。本方法简单、准确、快速,可用于犬血浆中非罗考昔的检测分析以及该药物的药动学和相对生物利用度等研究。     

高效液相色谱-串联质谱法检测猪肝中苯并咪唑类药物及其代谢物的残留量

建立了猪肝中阿苯哒唑及其代谢物阿苯哒唑砜、阿苯哒唑亚砜、2-氨基阿苯哒唑砜,噻苯哒唑及其代谢物5-羟基噻苯哒唑,甲苯哒唑及其代谢物氨基甲苯哒唑、5-羟基甲苯哒唑,芬苯哒唑及其代谢物芬苯哒唑砜、等效物奥芬哒唑,氟苯哒唑及其代谢物2-氨基-氟苯哒唑共14种苯并咪唑类药物及其代谢物残留检测的高效液相色谱-串联质谱方法。样品用乙酸乙酯提取,MCX固相萃取柱净化。Waters Xterra C18色谱柱(2.1 mm×150 mm,5μm)分离,流动相A相为0.1%甲酸乙腈溶液;B相为0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,外标法定量。结果表明,14种苯并咪唑类药物及其代谢物标准溶液在10~1 000 ng/mL的浓度范围内呈现良好的线性关系,R2均大于0.99,方法检测限为5μg/kg,定量限为10μg/kg,14种苯并咪唑类药物及其代谢物在10~200μg/kg添加浓度范围内回收率均70%~120%之间。批内、批间相对标准偏差均小于20%。本方法灵敏、准确,满足食品安全检测法规的要求。     

超高效液相色谱串联质谱法测定畜产品中硝基呋喃类抗生素代谢物残留的研究

建立和发展了畜产品4种硝基呋喃类抗生素代谢物残留的超高效液相色谱串联质谱法（UPLC–MS/MS）快速检测方法。样品中与蛋白结合的代谢物经0.125moL盐酸水解,2-硝基苯甲醛（2-NAB）37℃衍生16小时(过夜)。上清夜调节pH=7.4,用乙酸乙酯提取,正己烷净化,流动相定容。采用电喷雾电离,正离子扫描,多反应检测模式（MRM）。外标法定量,在添加浓度为0.1～2.0μg/kg范围内,四种代谢物的平均回收率在67.3%～85.0%之间,10次测定结果的RSD平均值在2.5～9.7%之间。最低检出限均到达0.15μg/kg,在0.10～20.00ng/mL 的线性范围内,相关系数r均大于0.99,实现了样品检测的快速、高灵敏和高的选择性,适用于畜产品猪肉和猪肝中硝基呋喃类抗生素代谢物残留的检测。     

液相色谱检测饲料中三聚氰胺残留量的方法研究

试验建立了饲料中三聚氰胺残留检测的反相高效液相色谱方法。样品经乙腈水提取,离心分离,过0.2μm滤膜,采用RP-HPLC-UV法测定,外标法定量。试验对色谱分离条件进行了优化,三聚氰胺在1.0~50.0μg/mL范围内线性良好,相关系数为0.99996。在4.0~80.0mg/kg浓度范围内,平均加标回收率为87.0%~105.0%,相对标准偏差为2.86%~7.70%,最低检出限为1mg/kg。该方法简便、快速,满足食品中三聚氰胺残留量的检验工作需要。此外,试验还建立了三聚氰胺的液相色谱-串联质谱联用条件,以供确证之用。