丝胶蛋白抗氧化肽的酶法制备及功能评价

为进一步开发利用废蚕丝,充分挖掘丝胶蛋白的可利用程度,该文研究了6种蛋白酶水解制备丝胶肽及产品的抗氧化活性。筛选出Alcalase碱性蛋白酶为制备丝胶抗氧化肽的理想蛋白酶,并以ABTS体系评价了丝胶肽的抗氧化活性。通过单因素试验研究了反应时间、底物浓度、反应温度、pH值、酶底物比对酶水解制备丝胶肽的影响;并通过回归正交旋转试验设计对水解条件进行优化,建立各因素与水解度和抗氧化活性的数学模型,确定Alcalase酶水解丝胶蛋白的最佳水解条件为:反应时间240min,底物浓度2%,反应温度55℃,pH8.5,酶底物比2.375%。最佳水解条件下水解度为33.35%,ABTS清除活性为43.19%。该研究为开发丝胶抗氧化肽功能产品提供了技术依据。     

鸡肉蛋白酶水解工艺条件的研究

为探索鸡肉酶水解工艺条件及其动力学特性，分别采用木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、中性蛋白酶、菠萝蛋白酶对鸡肉进行了水解试验，得出最优酶为木瓜蛋白酶；由此选用木瓜蛋白酶做正交试验，考察水解温度、时间、加酶量、pH值和固液比5个因素对酶水解的影响，并确定出最优水解条件为温度50℃，时间7 h，加酶量2.4%(以鸡肉的质量百分数计)，pH 7.0，固液比1∶4；在此条件下，水解度可达26.07%。在此基础上由试验数据推导出描述木瓜蛋白酶水解鸡肉的动力学方程，可为鸡肉酶解生化反应器的设计和鸡肉水解蛋白液或蛋白粉的开发提供一定的理论依据。     

酶解制备鱼鳞蛋白降血压肽的工艺优化

为有效利用鱼鳞制备降血压肽,以罗非鱼鱼鳞为原料,在121℃条件下进行热预处理15 min后,运用响应面分析法优化酶解制备鱼鳞蛋白ACE抑制肽的工艺条件。结果表明,以水解度和ACE抑制率为评价指标,筛选出碱性蛋白酶为最优酶。在单因素试验的基础上,根据Box-Behnken中心组合试验设计原理,最终确立最优的酶解工艺参数为:酶解时间2 h、酶解温度56.3℃、pH值8.0,酶底比1.1%,此条件下ACE抑制率理论值为87.95%,实际值为88.26%。最优条件下制得的酶解产物相对分子质量集中在300～3 000 Da之间,水解效果较好。本研究结果对酶解法制备鱼鳞蛋白降血压活性肽具有一定的实践参考价值。     

超声预处理微波辅助酶解生产猪血活性肽工艺优化

为了充分挖掘畜禽血液蛋白质资源及开发具有保健功能的血液深加工生物制品,以猪血细胞为原料,在超声波破碎细胞后,利用微波辅助技术,对Alcalase内切酶酶解猪血红蛋白的工艺条件进行了优化。结果表明：当水与血细胞体积比为5：1,超声波功率为300 W时,超声处理25 min后,在功率为500 W的微波中进行酶解,得出最佳酶解条件为：Alcalase内切酶加酶量体积比6.77%,酶解温度54℃,酶解时间11 min,得到血红蛋白的水解度为23.63%,酶解产物大部分为相对分子质量在635.7～1151.1 Da的短肽。该文提供了一种快速提取猪血活性肽的试验方法,在实际生产中具有较好的应用价值。     

Alcalase酶水解花生蛋白制备花生短肽的研究

对Alcalase水解花生蛋白制备花生短肽过程中,酶用量、底物浓度、pH值、反应温度、反应时间等影响因素进行了系统地研究,建立了短肽得率及水解度与各种影响因素的回归模型;在此基础上,结合实际生产确定出了Alcalase酶解花生蛋白的最适条件为pH值8.0,水解温度54℃,底物浓度4%,酶用量3480 U/g,水解时间106 min。在此条件作用下,体系中短肽得率为79.08%,水解度为17.08%,短肽平均链长为5.85,平均分子量为661.5。     

油菜花粉谷蛋白酶解物的制备(英)

以陈放1年的油菜蜂花粉为原料,对破壁脱脂后的花粉中各组分蛋白含量进行了研究,其中谷蛋白的含量约占总蛋白含量的55.7％,清蛋白为39.0％,球蛋白和醇蛋白只有3.2％和2.1％。以谷蛋白为原料,在单因素试验的基础上,利用响应面分析法对油菜花粉谷蛋白最佳酶解条件进行了研究。结果表明,Alcalase碱性蛋白酶水解油菜花粉谷蛋白的最佳水解条件为底物浓度6%,pH值9.0,水解温度60℃,酶底比1460 U/g,水解时间2 h,谷蛋白酶法改性后抗羟基自由基的活性能达到70.0%。     

分步酶解制备花生短肽的研究

为了高效制备花生短肽,在花生蛋白Alcalase酶水解的研究基础上,进一步采用N120P酶水解花生蛋白并对各种影响因素进行了系统地研究;建立了短肽得率与各种影响因素的回归模型;确定出了N120P继续酶解花生蛋白Alcalase酶解物制备花生短肽的最佳工艺参数为pH值6.0,水解时间65min,水解温度57℃,酶与底物比2061U/g,.在此条件作用下,体系中短肽得率为89.01%,比Alcalase单独酶解提高10.86个百分点;水解度为23.76%,平均肽链长度为4.21.经高效液相色谱测定,大部分水解产物的相对分子质量小于1000.     

油菜花粉谷蛋白酶解物的制备

以陈放1年的油菜蜂花粉为原料,对破壁脱脂后的花粉中各组分蛋白含量进行了研究,其中谷蛋白的含量约占总蛋白含量的55.7%,清蛋白为39.O%,球蛋白和醇蛋白只有3.2%和2.1%.以谷蛋白为原料,在单因素试验的基础上,利用响应面分析法对油菜花粉谷蛋白最佳酶解条件进行了研究.结果表明,Alcalase碱性蛋白酶水解油菜花粉谷蛋白的最佳水解条件为底物浓度6%,pH值9.0,水解温度60℃,酶底比1460U/g,水解时间2h,谷蛋白酶法改性后抗羟基自由基的活性能达到70.0%.     

亚硫酸盐预处理促进棉秆酶水解研究

为了提高棉秆的酶水解效率,论文研究 了棉秆亚硫酸盐预处理过程中亚硫酸氢钠用量、浓硫酸用量、预处理温度与时间对预处理效果的影响,同时比较了棉秆不同部位的亚硫酸盐预处理效果。结果表明：预处理时添加亚硫酸氢钠可提高棉杆酶水解效率,随着用量的增加,底物酶水解转化率升高,用量超过8%后基本不变;预处理液pH值可影响棉秆亚硫酸盐预处理效果,存在一个最佳pH值,本研究中预处理液pH值为2.65时,底物的酶水解转化率最高;当预处理温度由100℃升高至170℃时,底物酶水解转化率升高较少,但当预处理温度继续升高时,底物酶水解转化率明显升高,在预处理温度180℃并保温20min时底物酶水解转化率达到最高为70.10%,继续延长保温时间底物酶水解转化率无明显变化。亚硫酸盐预处理过程中,木素和戊聚糖不断从原料中溶出,有利于后续的酶水解,研究发现木素的溶出比戊聚糖的溶出对棉秆酶水解的影响更大。棉秆不同部位的亚硫酸盐预处理效果不同,酶水解从易到难的顺序是：棉秆皮>细枝>全棉秆>主干>棉秆芯。     

亚硫酸盐预处理对棉秆酶水解的影响

为了提高棉秆的酶水解效率,研究了棉秆亚硫酸盐预处理过程中亚硫酸氢钠用量、浓硫酸用量、预处理温度与时间对预处理效果的影响,同时比较了棉秆不同部位的亚硫酸盐预处理效果。结果表明：预处理时添加亚硫酸氢钠可提高棉秆酶水解效率,随着用量的增加,底物酶水解转化率升高,用量超过8%后基本不变;预处理液pH值可影响棉秆亚硫酸盐预处理效果,存在一个最佳pH值,研究中预处理液pH值为2.65时,底物的酶水解转化率最高;当预处理温度由100℃升高至170℃时,底物酶水解转化率升高较少,但当预处理温度继续升高时,底物酶水解转化率明显升高,在预处理温度180℃并保温20 min时底物酶水解转化率达到最高为70.10%,继续延长保温时间底物酶水解转化率无明显变化。亚硫酸盐预处理过程中,木素和戊聚糖不断从原料中溶出,有利于后续的酶水解,研究发现木素的溶出比戊聚糖的溶出对棉秆酶水解的影响更大。棉秆不同部位的亚硫酸盐预处理效果不同,酶水解从易到难的顺序是：棉秆皮>细枝>全棉秆>主干>棉秆芯。     

超声处理对菜籽蛋白酶解效果的影响

以双低菜籽饼粕蛋白为原料,以常规酶解为对照,以酶解产物的抑制活性为指标,分别考察了超声预处理蛋白酶、超声预处理蛋白原料和酶解过程前期施加超声3种超声处理方式对双低菜籽蛋白酶解制备ACEI 活性肽效果的影响。结果表明,3种超声辅助方式都能有效地促进菜籽饼粕蛋白的酶解,提高产物的ACE抑制活性,其中超声预处理蛋白原料效果最为明显。这种方式的最佳参数为：超声频率20 kHz、超声时间 30 min、超声功率1250 W、作用时间4 s、间歇时间2 s,该条件下酶解产物对ACE的抑制率从对照组的70.83%提高到92.97%,肽得率从29.6%提高到41.4%,半抑制浓度IC50从3.57 mg/mL降到2.48 mg/mL。这表明脉冲超声辅助酶解法是一种高效制备双低菜籽ACEI肽的方法。     

脉冲超声辅助酶解制备大蒜降压因子

为了开发安全无毒副作用的食源性降血压活性物质,采取逐步分离及超声辅助酶解的方法筛选大蒜中具有降血压活性的功能因子,并采用响应面设计对超声辅助酶解方法进行了优化。研究结果发现,大蒜的多级分离物均具有一定ACE（血管紧张素转化酶）抑制活性,其中大蒜粉直接酶解产物降压效果最佳。以大蒜粉直接酶解物为目标产物,在底物浓度8%、脉冲超声工作时间3?s、间歇时间2?s的条件下优化得到超声处理参数为：超声处理时间72?min、处理液温度45℃、处理液pH值8.2,此条件下酶解产物的ACE抑制率为67.78%,其IC50（半抑制浓度）值为7.57?mg/ml,比常规酶解（无超声处理）降低了45.03%,说明经超声辅助酶解后产物的活性有大幅度提高。对大蒜ACE抑制因子进行SHR（原发性高血压大鼠）大鼠试验,推荐剂量150?mg/kg下灌胃3?h后,SHR大鼠血压下降18.8?mmHg。     

生物—碱氧化预处理玉米秸秆酶解条件的优化

白腐菌生物—碱氧化预处理（BAO预处理）具有环境友好、低能耗的优势,是一项很有前景的生产纤维质乙醇预处理技术。为获得预处理后玉米秸秆的最优酶解条件,通过动力学研究评价了纤维素酶负荷、反应时间、基质浓度对还原糖产量的影响,并利用响应面分析法优化了酶解反应温度、pH值和转速。结果表明,最适的酶解糖化条件为：酶负荷30 FPU/g,基质浓度20 g/L,反应时间48 h,pH 4.8,转速200 r/min,反应温度49℃。在此条件下,秸秆的还原糖产量达到（0.479±0.012）g/g。     

乙二醇-氯化铁预处理对棉秆酶水解效率的影响

为提高棉秆的纤维素酶水解效率,该研究以乙二醇为预处理溶剂,氯化铁为催化剂对棉秆进行预处理,实现了棉秆木质素和半纤维素的有效去除,提高了酶水解效率。以木质素和半纤维素的去除率为指标,运用正交试验方法优化乙二醇-氯化铁预处理条件。结果表明,棉秆在90%乙二醇水溶液,0.1 mol/L氯化铁,固液比1∶15,160 ℃条件下处理20 min,木质素和半纤维素去除率分别为85.7%和88.9%。相较原料,预处理后棉秆酶解率提高了7.6倍,葡萄糖产率达到100%（基质浓度5%,酶载量8.3 FPU/g,水解72 h条件下）。通过结构表征发现乙二醇-氯化铁预处理使棉秆的比表面积增大,致密结构被破坏,有效提高了棉秆的纤维素酶可及性。     

Inhibition of trypsin by condensed tannins and wine

Phenolic compounds are abundant vegetable secondary metabolites in the human diet. The ability of procyanidin oligomers and wine polyphenols to inhibit trypsin activity was studied using a versatile and reliable in vitro method. The hydrolysis of the chromogenic substrate N-benzoyl-d,l-arginine-p-nitroanilide (BApNA) by trypsin was followed by spectrophotometry in the presence and absence of condensed tannins and wine. A clear relationship between the degree of polymerization of procyanidins and enzymatic inhibition was observed. Trypsin activity inhibition was also detected in several types of wine. In general, the inhibition increased with the concentration of phenolic compounds in wines. These results may be relevant when considering these compounds as antinutritional factors, thereby contributing to a reduced absorption of nutrients.     

酸-超声波预处理及糖化水解稻草研究

采用室内实验方法,研究了酸-超声联合预处理稻草对其化学组成以及糖化效果的影响,并与传统酸预处理法的效果进行了对比。结果表明,与未经处理的稻草相比,经酸-超声波处理的稻草其半纤维素、木质素含量最高分别减少了64．46％、62．19％,纤维素含量最高则上升了73．20％,而酸处理的稻草相应数值只能达到56．72％、59．90％及53．41％。同时分别对两种方法的稻草糖化的工艺条件通过正交试验进行了优化,得出两种方法的稻草最佳糖化条件均为：pH值为4．8,温度为45℃,酶浓度为20mg·g-1。在该条件下,对于酸一超声波预处理稻草,在糖化108h以后还原糖浓度稳定并达到最大值26．4g·L-1,而对于酸预处理稻草,在糖化120h以后还原糖浓度才稳定并达到最大值26．2g·L-1,且前者能比后者产生更多的葡萄糖以及更少的木糖,更有利于提高后续酒精发酵的效率。     

Kinetics of the surface hydrolysis of raw starch by glucoamylase

The hydrolysis of raw starch catalyzed by glucoamylase has been studied with starch granules of different sizes by use of an amperometric glucose sensor by which the direct and continuous observation of the concentration of glucose can be achieved even in a thick raw starch suspension. The initial rate of the enzymatic hydrolysis in the raw starch suspension increased with increasing concentration of the enzyme to approach a saturation value and was proportional to the amount of substrate. Also, the rate was proportional to the specific surface area of the substrate. The experimental results can be explained well by the rate equations derived from a three-step mechanism, which consists of adsorption of the free enzyme onto the surface of the substrate, reaction of the adsorbed enzyme with the substrate, and liberation of the product.     

Kinetic study on the changes in the susceptibility of egg white proteins to enzymatic hydrolysis induced by heat and high hydrostatic pressure pretreatment

A kinetic study was conducted on the effect of heat pretreatment in the temperature range of 50-85 degrees C at atmospheric pressure and of high hydrostatic pressure pretreatment (100-700 MPa) at four temperatures (10, 25, 40, and 60 degrees C) on the susceptibility of egg white solutions (10% v/v, pH 7.6) to subsequent enzymatic hydrolysis by a mixture of trypsin and alpha-chymotrypsin at 37 degrees C and pH 8.0. Both heat pretreatment at atmospheric pressure and high-pressure pretreatment resulted in an increase in degree of hydrolysis (DH) after 10 min of enzymatic reaction (DH10) of egg white solutions, as measured using the pH-stat method, which could be described by a fractional conversion model (based on an apparent first-order reaction kinetic model). The temperature dependence of the corresponding rate constants could be described by the Arrhenius equation. At elevated pressure, a negative apparent activation energy was obtained, implying an antagonistic effect of pressure and temperature. The pressure dependence of the rate constants could be described by the Eyring equation, and negative activation volumes were observed, which demonstrates the positive effect of pressure on the susceptibility of egg white solutions to subsequent enzymatic hydrolysis.     

Heat-induced changes in the susceptibility of egg white proteins to enzymatic hydrolysis: a kinetic study

A kinetic study was conducted on the effect of heating in the temperature range of 50-92 degrees C, on the susceptibility of ovalbumin and albumen solutions to enzymatic hydrolysis by a mixture of trypsin and alpha-chymotrypsin at 37 degrees C and pH 8.0. Heat treatment resulted in an increase in degree of hydrolysis after 10 min of enzymatic reaction of both ovalbumin and albumen, as measured using the pH-stat method. The time-dependent change in the susceptibility to enzymatic hydrolysis after heat treatment was described by a fractional conversion model (based on an apparent first-order reaction kinetic model). Different end levels of degree of hydrolysis were obtained after heating for a long time at different temperatures, which suggests that the final degree of unfolding of the protein is temperature dependent.