环氧乙烷对小麦矮腥黑穗病菌的杀灭效果

在室内相对湿度50%-60%的恒温条件下,研究了不同剂量、温度、处理时间和有、无载物情况下环氧乙烷(ethylene oxide,EO)对小麦矮腥黑穗病菌(Tilletia controversa Kühn,TCK)的杀灭效果.结果表明,EO对TCK冬孢子有极强的杀灭作用.EO对TCK病菌的杀灭效果随处理温度升高、剂量的增加和熏蒸时间的延长而增强.无载物情况下,15、20、25℃处理120 h条件下达到100%杀菌效果的临界浓度值分别为10.5、7.3和6.8 g.m-3.EO对TCK的杀菌临界浓度随熏蒸时间延长和温度升高而降低.80%装载量条件下,EO对TCK病菌的LD50较无载物条件下的高.     

松木包装板材的伞滑刃线虫种类鉴定

记述了输入福建省的松木包装板材中分离到的松材线虫(Bursaphelenchusxylophilus)和拟松材线虫(B.mucronatus),讨论了松材线虫对福建省林业构成的威胁.     

西加毒素细胞毒性检测方法的建立

小鼠神经母细胞瘤细胞经体外培养后,加入不同剂量的太平洋西加毒素(Pacific ciguatoxin-1,P-CTX-1)、箭毒苷和藜芦定,在不同时间点终止培养,以四甲基偶氮唑蓝(MTT)标定活细胞量,分析西加毒素剂量与细胞活性之间的线性关系.结果发现,细胞与毒素作用不同时间,西加毒素剂量(x)与光密度值(y)之间的线性关系呈现差异.在10 h、15 h及20 h等不同时间,其线性方程分别为y=-0.082 6x 0.923 0(R2=0.978 9)、y=-0.044 3x 0.601 5(R2=0.962 1)、y=-0.020 4x 0.323 7(R2=0.928 1).以10 h的检测效率最高及检测结果最准确,因此将其定为最佳检测时间.细胞病变观察也证实了以上结果.     

溴甲烷和磷化氢混用对花斑皮蠹幼虫的室内毒力测定

在温度为25℃,相对湿度75%条件下,研究了溴甲烷与磷化氢以100∶1、100∶2、100∶5、100∶10的比例熏蒸防治花斑皮蠹(Trogoderma variabile)3～4龄幼虫各5 h,结果表明:溴甲烷及4种比例混用的LD50分别为8.43、6.71、6.42、5.89 g.m-3和3.86 g.m-3,4种比例混用均能使溴甲烷增效,但以100∶5的比例使用最好。     

漳州出口水仙花的熏蒸处理技术研究

目的针对漳州出口的水仙花中可能携带危险性有害生物,采用溴甲烷熏蒸处理技术,使其能有效的杀灭水仙花中的害虫。方法以漳州用于出口的水仙花为研究对象,考察溴甲烷在不同熏蒸压力、浓度、熏蒸时间等条件下对水仙花检疫处理效果。结果在真空度为10、20kPa、熏蒸温度大于20℃,2种熏蒸剂量(32g·m-3和24g·m-3)的条件下熏蒸1h后,对不带土水仙花种球和雕刻好的商品球的杀虫效果均可达100%。当真空条件在5kPa时,仅熏蒸1h时,不能杀灭所有昆虫,将熏蒸时间延长至2h后,虽然杀灭不带土水仙花种球和雕刻好的商品球所携带昆虫的效果提高了,但是不能全部杀灭昆虫。结论在真空条件为10kPa、20kPa时,施用剂量为32g·m-3和24g·m-3的溴甲烷熏蒸1h均可全部杀死清洗后不带土种球和雕刻好的商品球里的昆虫。在真空条件为10kPa时采用较低的剂量24g·m-3溴甲烷熏蒸,熏蒸1h即可达到最佳理想效果。在真空熏蒸结束后对水仙花进行1个月时间观察,水仙花均未有表现出不良影响。     

成年贵宾犬蛋白质需要量的研究(简报)

采用单因子试验设计,将12只成年贵宾犬(♂,2岁)随机分为3组(每组4只),喂以不同蛋白质水平(1.15 NRC1、.25 NRC1、.35 NRC)的全价饲粮,利用氮平衡试验研究了成年贵宾犬对多种蛋白原料配合日粮中蛋白质的需要量.结果表明:食入氮与存留氮之间的回归关系为:y1=10.76+1.73x1(P=0.15),可消化氮与存留氮的回归关系为:y2=6.35+1.63x2(P=0.04).当x1=0时,y1=10.76,即成年贵宾犬每天总氮最低需要量为10.76g.只-1,蛋白质最低需要量为67.28 g.只-1.当x2=0时,y2=6.35,即成年贵宾犬每天最低可消化氮需要量为6.35 g.只-1,最低可消化蛋白质需要量为39.66 g.只-1.     

溴甲烷配合二氧化碳对朱砂叶螨的熏蒸作用

在25℃条件下,研究了溴甲烷20g/m3,25g/m3,30g/m3,35g/m3,40g/m35种剂量单独使用及分别配合10%,15%,25%,30%,40%二氧化碳对朱砂叶螨的熏蒸作用.试验结果表明,在处理时间恒定时,溴甲烷单剂对朱砂叶螨熏蒸作用随溴甲烷使用剂量的增加而增强,熏蒸处理1 h,1.5 h,2 h的LD50分别为27.8828g/m3,21.4533g/m3,18.8758g/m3.溴甲烷配合二氧化碳对朱砂叶螨熏蒸处理结果显示,在溴甲烷剂量一定的条件下,朱砂叶螨的死亡率随着二氧化碳浓度的增加表现为先增加后下降的趋势,在二氧化碳浓度为25%条件下熏蒸处理2 h,溴甲烷的LD50为16.0682g/m3,以剂量为40g/m3的溴甲烷与25%的二氧化碳配合对朱砂叶螨熏蒸作用效果最佳,死亡率达100%,表明在一定浓度范围内,二氧化碳对溴甲烷熏蒸处理朱砂叶螨的效果有增效作用.二氧化碳对朱砂叶螨有麻醉作用,熏蒸时间短于1 h或者二氧化碳浓度大于30%时,反而使溴甲烷的熏蒸效果下降.     

农田CO_2释放初步研究

通过对不同天气类型和夜间在不同深度的测定 ,初步研究了江淮地区农田土壤CO2 排放状况。利用Excel拟合得夜间不同深度土壤CO2 平均排放速率分布公式为 :y =-0 .0 0 62x4 -0 .0 3 42x3+0 .64 13x2 -1.5 80 8x +2 .3 9;阴天的白天为 :y =1.85 49ex+8.892 3 ;晴朗的白天为 :y =0 .3 2 2 7x4 -4 .15 63x3+18.684x2 -3 4.43 4x +2 8.3 5 8。利用地表 0cm的数据计算得江淮地区农田CO2 排放速率为 10 .5mg/(m2 ·h) ,计算得高温期间 ( 5～ 9月 ,共 15 3d)江淮地区农田 (面积约 5 8.2× 10 4 hm2 )土壤CO2 总排放量约2 .2 4× 10 1 1 g。     

杀松材线虫活性菌株筛选及活性成分分析

在室内条件下,测定了3株淡紫拟青霉菌(Paecilomyces lilacinus)和4株厚垣孢普可尼亚菌(Pochonia chlamydosporia)发酵液及7种不同溶剂萃取物对松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)的毒杀活性,并通过柱层析和气质联用对活性菌株的高效萃取物进行了分离和分析。结果表明:淡紫拟青霉PT1菌株的发酵液对松材线虫的毒杀作用最强,处理72 h后松材线虫的校正死亡率高达88.37%。从7种有机溶剂萃取物中筛选出乙酸乙酯是PT1菌株活性成分较合适的萃取溶剂,浸渍法测定结果表明PT1菌株乙酸乙酯萃取物处理松材线虫24 h和48 h的LC_(50)分别为36.001μg/mL和25.317μg/mL。乙酸乙酯萃取物经柱层析后,得到活性组分YZ-4。用GC-MS分析YZ-4组分,共鉴定出4种化合物,分别为假石榴皮碱、棕榈酸、邻苯二甲酸苯基丁基酯和油酸。推测活性菌株PT1发酵产物有望研发出新型微生物源杀虫剂。     

松材线虫RNA聚合酶基因的RNA干扰研究

克隆了松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)RNA聚合酶基因片段,构建大量表达松材线虫RNA聚合酶基因片段的特异双链RNA(dsRNA)表达载体,并用表达的双链RNA(dsRNA)对松材线虫进行了RNA干扰实验。结果表明,松材线虫浸泡在20℃的RNA聚合酶基因双链RNA(dsRNA)溶液中干扰24 h后再培养12 d,其繁殖倍数为73.2;对照处理的繁殖倍数为322.8,两者的繁殖倍数相差4.4倍;松材线虫浸泡在4℃的RNA聚合酶基因双链RNA(dsRNA)溶液中干扰24 h后再培养12 d,其繁殖倍数为120.8。RNA聚合酶基因的双链RNA(dsRNA)浸泡明显的抑制了松材线虫的繁殖;并且发现利用浸泡法对线虫进行干扰试验,双链RNA(dsRNA)20℃浸泡的干扰效果要好于前人报道4℃浸泡的干扰效果。     

杀灭松材线虫的高效药物筛选与毒性测定

为筛选出对松材线虫Bursaphelenchus xylophilus具有高效快速杀灭作用的药物,采用线虫悬浮液 + 农药的直接触杀法,选择了22种药物处理松材线虫1 h,测定了对松材线虫的半致死浓度（LC₅₀）。结果表明：不同药物对松材线虫表现出不同的杀灭作用,供试的22种药物中,甲基阿维菌素（甲维盐）杀灭效果最好,1 h 半致死浓度仅为0.3 mg·L^－1;杀螟丹效果最差,1 h 半致死浓度达21 053 mg·L^－1。另外,苦参碱、抑太保、溴氰菊酯和阿维菌素等4种药物对松材线虫具有很强的毒杀作用,其1 h半致死浓度分别为1.2,2.5,4.2和4.5 mg·L^－1。甲维盐和阿维菌素能高效快速杀灭松材线虫;这些对松材线虫高效敏感药物的筛选成功,为开发树干注射剂防治松材线虫病提供了基础。图1表3参25     

松材线虫两种实用分子检测技术

为检验已开发的SCAR标记与实时PCR两种分子检测方法鉴定松材线虫的可靠性,本文选用线虫未知种样品7个以及已知种样品3个为实验材料,采用上述两种分子检测方法进行检测,并且对7个线虫未知种样品进行形态鉴定。结果表明：1）运用SCAR标记检测,第2、3、4、7号4个未知种样品与8号松材线虫样品出现了一条清晰、明亮的860b...     

松材线虫及携带细菌对黑松复合的侵染

从不同松树上分离松材线虫、拟松材线虫、滑刃线虫和小杆线虫,并从松材线虫和小杆线虫体上分离细菌,将线虫无菌化处理后与从线虫体上分离到的荧光假单胞杆菌、产气肠杆菌混合接种无菌黑松苗和愈伤组织。结果表明,单独接种无菌线虫或细菌不能使黑松致病,无菌松材线虫、无菌拟松材线虫只有与有毒性的荧光假单胞杆菌混合接种时才能使黑松无菌苗和愈伤组织发病,细菌通过线虫携带在树体内传播扩散,使松树致病。研究进一步证明了线虫和细菌在松材线虫病致病过程中起协同作用。     

松材线虫快速检测技术方法的比较研究

为了获取准确、快速检测松材线虫的方法，利用纤维素酶活性、苯乙酸与苯甲酸含量和显色剂检测松材线虫的方法进行了比较研究．纤维素酶活性检测结果为病树与健树酶活性差异显著．病树的光吸收值与健树的光吸收值差异不显著，但测定结果不稳定．显色剂测定病树内与健树内的显色差异明显，病树的显色结果呈深红色至浅红色，线虫愈多色泽愈深；健康材呈无色，感染拟松材线虫的松材呈清白色或无色．显色剂检测是简单、快速和有应用价值的方法。     

松材线虫拮抗细菌的筛选

[目的]筛选对松材线虫(Bursaphelenchuh xylophilus)具有杀线活性的细菌。[方法]对来自松、杨林分的12株细菌进行了杀松材线虫活性测定。[结果]在植物体上共分离获得12株细菌,其中JK-SD001发酵液稀释4倍对松材线虫处理24 h后杀线率仍为100%,且松材线虫虫体出现消解现象,消解率为80.4%。[结论]为开发生物源杀线剂奠定了基础。     

28种植物提取物对松材线虫的毒杀作用

测定了采自广东、湖南、云南和新疆的骆驼蓬等15科28种植物提取物对松材线虫的生物活性。骆驼蓬、黄文江鱼藤、紫花山毛豆、厚果鸡血藤、雷公藤、了哥王、博落回等7种植物甲醇索氏提取物杀线虫活性强烈,以1000μg／mL处理后72h,校正死亡率均在88％以上。乙醇是骆驼蓬杀线虫活性成分较合适的提取溶剂。浸渍法测定结果表明,骆驼蓬种子乙醇提取物的石油醚萃取物、氯仿萃取物、正丁醇萃取物和水萃取物对松材线虫毒杀活性顺序强弱依次为：正丁醇〉氯仿〉水〉石油醚萃取物,其中正丁醇萃取物处理后24h和48h,LC50分别为33．98μg／mL和10．18μg／mL。松枝水培试验结果表明,骆驼蓬种子正丁醇萃取物能明显延缓松材线虫引致的松树萎蔫病的发展,以250μg／mL处理后12d病情指数仅0．17,显著低于“清水＋虫”处理的病情指数0．75。     

广东马尾松木中线虫种类的调查与鉴定

从广东乳源、封开、广州市郊采到276个马尾松松材线虫病死木样本,共分离鉴定出13种线虫:畸刺伞滑刃线虫(Bursaphelenchus teratospicularis),松材线虫(B.xylophilus)、拟松材线虫(B.mucronatus)、变异伞滑刃线虫(B.aberra-ns)、小角伞滑刃线虫(B.corneolus)、利昂伞滑刃线虫(B.leoni)、湖南伞滑刃线虫(B.hunanensis)、红松滑刃线虫(Aphelenchoides resinosi)、滑刃属线虫(Aphelenchoides sp.)、斯坦纳长尾线虫(Seinura steineri)、小茎线虫(Ditylenchus parvusZell)、剑尾齿杆双胃线虫(Odorhabdiplogaster xiphocaudatus)和寄生小杆属线虫(Parasitorhabditis sp.)。其中畸刺伞滑刃线虫为中国新记录种,畸刺伞滑刃线虫、斯坦纳长尾线虫和小茎线虫为马尾松上的新记录种。     

万寿菊提取物对松材线虫的毒杀作用

用乙醇提取万寿菊Tagetes erecta的不同部位的粗提物,然后用浸泡生测的方法测定对松材线虫Bursaphelenchus xylophilus的生物活性。结果表明,万寿菊的根、茎、花的乙醇粗提物对松材线虫的活性较强,0.010 g·L^－1质量浓度以上处理72 h后发现,校正死亡率都能达到60%以上,其中万寿菊根的乙醇粗提物的活性最强,校正死亡率超过90%。万寿菊的各部分粗提物的得率都达到5%以上,这为利用植物提取物来毒杀松材线虫提供了初步的理论依据。图1表1参13     

多次继代培养的松材线虫分离种致病力变异的研究

通过人工接种2年生黑松(Pinus thunbergii)苗测定松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)的致病力,分析经过多次继代培养的松材线虫致病力变异的原因,结果显示:多次继代培养的松材线虫繁殖速度比初代培养的要慢5~6 d,繁殖能力显著下降,保存时间短,显示出多次继代培养的松材线虫活力差。说明了松材线虫致病力与增殖和活力有着极大的关系,继代培养时15次之后致病力会急剧下降。     

松材线虫VAPs蛋白的原核表达、多抗制备及表达模式分析

[目的]类毒素过敏原蛋白(VAPs)是松材线虫侵染松树过程中分泌的一类蛋白.此类蛋白可通过抑制松树的防卫反应,从而利于松材线虫在松树内的定殖与扩散.本研究对4种类毒素过敏原蛋白进行原核表达、多抗制备和基因的表达模式分析,明确松材线虫Bx-VAPs蛋白的结构与功能,为阐明该类蛋白在松材线虫与寄主松树互作中的作用机理提供基...