猪瘟牛睾丸细胞苗的优化试验

本实验研究共生产猪瘟兔化弱毒细胞疫苗3批,以传统生产为基础,在原代细胞制备、病毒感染和收获3方面做了改进.试验证明,混合消化法、适当比例的脾毒与细胞毒混合接毒以及新维持液在带毒传代中的应用,能大大提高猪瘟细胞苗半成品的合格率.     

猪瘟活疫苗的特点及使用

1猪瘟活疫苗（Ⅰ） 1.1名称：通用名,猪瘟活疫苗（Ⅰ） 1.2简介：本品系用猪瘟兔化弱毒C株接种乳兔,收获感染乳兔实质脏器制成乳剂,加适宜稳定剂,经冷冻真空干燥制成,因此又称猪瘟兔化弱毒乳兔组织疫苗。每头份疫苗所含病毒稀释150倍后能引起兔体的热反应。     

猪常用疫苗基本特性及使用方法

(一)猪瘟疫苗免疫接种是预防和控制猪瘟的主要手段,目前我国瘟猪疫苗种毒均为猪瘟兔化弱毒,疫苗有组织苗和细胞苗2种类型。组织苗主要是利用猪瘟兔化弱毒接种3～5日龄乳兔,接种36小时后取乳兔的肝、脾及肌肉组织制成的疫苗。细胞苗是猪瘟兔化弱毒经犊牛睾丸细胞或ST细胞培养制成的疫苗,犊牛睾丸细胞有可能携带牛病毒性腹泻粘膜病病毒。生     

高效价猪瘟活疫苗的田间试验

1946年开始,国内外研究人员采用非猪源动物或用细胞传代驯化猪瘟病毒,培育猪瘟弱毒疫苗.1954年周泰冲等用猪瘟强毒经家兔传代减毒,并经继代纯化成功培育出一株能适应家兔的猪瘟病毒变异毒,该毒株对猪无致病性、遗传性能稳定[1-3]、具有良好的免疫原性,这就是国内外广泛使用的中国猪瘟兔化弱毒株(Chinese strain,简称“C株”).目前中国广泛使用C株来生产猪瘟活疫苗,按疫苗毒源类型为牛睾丸细胞源、兔源、传代细胞.本试验主要对高效价猪瘟活疫苗(STK克隆传代细胞源)进行田间应用效果跟踪,通过对收集到的数据进行对比分析,评估该疫苗的免疫效果.     

自疫苗瓶中分离获得一株猪瘟病毒的人工接种试验

<正> 作者在某厂生产的猪瘟兔化弱毒乳兔冻干疫苗中发现有猪瘟野毒污染(编号为63疫苗毒株),经人工接种易感猪和兔体交互免疫试验,证实为猪瘟病毒,这对用乳兔生产猪瘟弱毒疫苗是一个严重的潜在危险,不可掉以轻心,故报告如下,以引起同道们的重视。     

母猪猪瘟抗体监测报告

我国的猪瘟兔化弱毒疫苗为世界上公认的效果非常良好的疫苗，但由于保存或使用不当或受母源抗体的干扰，往往造成免疫失败或免疫不全，从而发生典型或非典型猪瘟。过去使用猪瘟兔化弱毒疫苗，而现在使用猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞苗，这两种疫苗每头份中的感染量不同。为了了解我县母猪猪瘟免疫的效果，从1995年起进行了猪瘟抗体监测工作，现将二年的结果总结如下，以供参考。1材料和方法1．1样本采集：母猪在猪瘟免疫后一个月左右采样，采样比例约为免疫母猪的10％。1．2监测方法：采用南京农业大学的PPA－ELISAHC诊断盒，并根据其提供…     

猪瘟兔化弱毒疫苗适应家兔的分子机制

正病毒经过多次传代后可以获得对体外培养细胞或异种宿主的适应性。例如,经过多次传代后获得了适应细胞的丙型肝炎病毒(HCV),其滴度比亲本病毒高约1 000倍。病毒的囊膜蛋白在病毒对细胞或异种宿主的适应性中起重要的作用,如HCV囊膜蛋白上3个位点的突变使其获得了对小鼠肝细胞的适应性。许多弱毒疫苗株是将病毒在细胞或异种宿主上多次传代培育而成的,如猪瘟兔化弱毒疫苗、山羊化兔化牛瘟弱毒疫苗和马传染性贫血弱毒疫苗等。这些疫苗为我国猪瘟的防控及牛瘟和马传染性贫血     

猪瘟兔化弱毒细胞疫苗的深液倾斜旋转培养与增液培养试验

1、用增加培养液量(3—4倍)旋转法培养猪瘟弱毒细胞疫苗,第一收、第二收病毒收获液的毒价均可达到普通旋转培养法的滴度。二收的绝大多数批次毒价用兔检5万倍通过,符合制苗要求。 2、用深液(培养液量增加7—8倍)倾斜旋转法培养猪瘟弱毒细胞疫苗。第一收与第二收的毒液或培养7天一次全收的毒液,其大多数试验批次毒价均可达到制苗标准。 3、用深液(培养液量增加8倍)倾斜旋转通气法培养猪瘟弱毒细胞疫苗,接毒后培养7天一次全收毒液,大多数批次试验毒价用兔检5万倍通过。符合制苗要求。以上三种培养方法所得资料说明提高猪肾细胞产毒量是明显的,工艺是简便的,在生产上是可行的。对细胞提高繁殖病毒能力的问题进行了某些探索。     

后海穴注射猪瘟兔化弱毒苗的试验研究

利用不同剂量的猪瘟兔化弱毒苗后海穴免疫生长肥育猪600头．用正向间接血凝试验(IHA)检测出抗猪瘟病毒抗体的水平．并与传统方法耳根部注射免疫进行比较。结果显示．后海穴注射2头份猪瘟兔化弱毒苗产生的抗体水平最高，维持时间最长。1头份疫苗后海穴注射效果也比2头份的肌肉注射效果明显。表明后海穴注射疫苗能提前坚强免疫产生的时间．提高疫苗的免疫效应．是提高疫苗保护率的有效免疫途径之一。     

猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株复合实时荧光定量RT-PCR鉴别方法的建立

根据GenBank中的猪瘟病毒强毒和弱毒株基因组序列设计了1对针对猪瘟病毒的通用引物和2条分别针对猪瘟病毒强毒和猪瘟兔化弱毒疫苗株的特异性TaqMan水解探针，建立了一种能区分猪瘟病毒强毒和兔化弱毒疫苗株的复合实时荧光定量RT—PCR检测方法。结果显示，该方法能将我国大陆流行的不同基因亚群的猪瘟病毒强毒株与猪瘟兔化弱毒疫苗株完全区分开来，而不与其他猪源病毒发生非特异反应，分别可检测到初始模板中41．8和81．5个拷贝的病毒RNA，与已建立的复合RT-套式PCR的敏感性相近，两种方法对152份样品检测的符合率达96．9％～100％。通过对8份猪瘟兔化细胞疫苗效价的检测，证实本方法与兔体反应热测定法有一定的相关性，可用于猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗的定量和鉴别检测。     

猪瘟乳兔疫苗的免疫效果实验

<正>猪瘟是由猪瘟病毒引起的猪的一种急性或慢性、热性和高度接触性传染病,严重危害我国养猪业,属于国家一类动物疫病。1956年我国猪瘟兔化弱毒苗培育成功,证明安全有效,至此,我国在猪瘟疫苗的研究中取得了重大突破。猪瘟兔化弱毒苗主要包括脾淋苗和乳兔苗,乳兔苗是通过向乳兔体内接种猪瘟兔化弱毒,选择发生正确病变的乳兔,解剖,取其肌肉和肝、肾,进行研磨、过滤,获得疫苗。本文选取某种猪瘟乳兔疫苗,对其进行     

猪瘟疫苗的种类及选择和使用方法

正猪瘟(CSF)以出血和发热为主要特征,呈急性或慢性经过,是一种高度接触性传染病,被世界动物卫生组织(OIE)列为A类动物传染病。我国列为一类动物疫病,主要通过疫苗接种控制该病。我国生产的猪瘟兔化弱毒疫苗性能稳定、安全、免疫效果良好,且无残留,是国际公认安全有效的弱毒疫苗。1疫苗种类目前我国生产的猪瘟疫苗主要有4种,即猪瘟兔化弱毒脾淋苗、猪瘟兔化弱毒组织苗、猪瘟细胞苗     

猪瘟疫苗及其合理使用

1猪瘟疫苗的制作与分类猪瘟疫苗系用猪瘟兔化弱毒株接种易感细胞,主要是家兔、乳兔和牛睾丸等细胞培养,收获感染家兔的脾脏及淋巴结或乳兔的肌肉及牛睾丸等实质脏     

猪瘟活疫苗(传代细胞源)对我国不同猪瘟病毒流行毒株的免疫保护研究

为再评价猪瘟兔化弱毒疫苗的免疫效力,采用近年在我国流行的不同临床致病力和不同基因亚型的9株猪瘟病毒流行毒株,进行免疫保护效力研究。结果表明,以C-株疫苗种毒生产的猪瘟活疫苗(传代细胞源)对我国目前流行的猪瘟病毒高、中、低致病力毒株及不同基因亚型(1.1、2.1、2.2)流行毒株均具有坚强的保护力,且免疫猪接种不同流行毒株毒后不排毒。研究结果为我国继续使用猪瘟兔化弱毒疫苗进行全面免疫提供了重要科学依据。     

猪瘟兔化弱毒疫苗株基因组的遗传变异分析

参照已发表的猪瘟病毒基因组序列设计了9对引物，用RT-PCR从猪瘟兔化弱毒疫苗株细胞培养物中扩增得到了覆盖猪瘟病毒基因组全长的9个cDNA片段，将所得cDNA片段分别克隆至pMD18-T载体中，经测序和拼接后，获得了猪瘟兔化弱毒疫苗株基因组全序列。序列分析表明，猪瘟兔化弱毒疫苗株基因组全长12310个碱基，其5’非编码区（5＇-NCR）和3＇-NCR分别由373和239个碱基组成，在3’末端有富含T的碱基插入，其间为1个大的开放阅读框架，编码3898个氨基酸残基的多聚蛋白，与国内外已发表的另外7个猪瘟兔化弱毒疫苗株基因组全序列相比，核苷酸同源性为98．7％～99．9％，氨基酸同源性为98．6％～99．9％。基因组全序列比较显示，猪瘟兔化弱毒疫苗株基因组在遗传上相当稳定。     

对稳定和提高猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞复制毒毒价的探讨

笔者1982年开始用犊牛睾丸细胞繁殖猪瘟兔化弱毒,7年来进行了各种对比试验,说明用犊牛睾丸细胞复制猪瘟兔化弱毒是成功的,为我国提供防治猪瘟病的疫苗开辟了新的制造手段。不但可以保证疫苗质量,并能确保安全,提高预防效果,降低成本。几年来,经过试产和扩大再生产,截至1988年底,共生产犊牛睾丸细胞苗5000万多头份     

如何选择猪瘟疫苗及免疫注意事项

猪瘟疫苗是发展最成熟的猪用疫苗,也是免疫效果最确切的猪用疫苗。目前可供养猪人选择的猪瘟疫苗主要有猪瘟兔化弱毒脾淋苗、猪瘟兔化弱毒组织苗、细胞苗以及猪瘟、猪丹毒、猪肺疫三联苗。对各种疫苗的选择及注意事项,做一介绍,以供参考。     

单层细胞培养对兔瘟病毒血凝价影响的观察

研究利用ＭＡ１０４、Ｌ９２９、ＲＫ三株传代细胞，对接种有相同剂量兔瘟病毒材料的有单层细胞和无单层细胞维持液中兔瘟病毒血凝价进行了观测。结果表明，有单层细胞的维持液中病毒血凝价较无单层细胞维持液中病毒血凝价下降缓慢。这说明此三株传代细胞能延缓维持液中兔瘟病毒血凝价的下降。     

用异源细胞(体外培养的羊睾丸与羊肾细胞)培养猪瘟病毒试验

针对目前使用猪肾细胞生产猪瘟弱毒疫苗存在来自组织本身污染带来的潜在致病危险的情况,我们试验了用羊羔睾丸与肾细胞来生产猪瘟病毒。结果表明:猪瘟兔化弱毒适应羊羔睾丸与肾细胞,呈温和感染而不致细胞病变,可连续收获多次,产毒较高,毒价稳定。将原代培养的羊羔睾丸、肾细胞传一代后,细胞更加适应体外环境,维持时间较长,经再接毒后产毒效果仍然很好,均可达生产要求。由此看来,用羊羔睾丸、肾细胞代替猪肾细胞生产猪瘟病毒苗头很好,若进一步试验成功,可考虑用于生产。     

猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞旋转培养制造猪瘟冻干苗的研究

为了克服猪瘟兔化弱毒乳免疫苗成本高,易污染的缺点,弥补采用常规猪肾细胞制造猪瘟弱毒疫苗的潜在致病危险性。本文成功的在犊牛睾丸细胞上连续增殖猪瘟化弱毒,特别是利用次代或二代细胞进行转瓶堵养,收获的猪瘟兔化弱毒其毒价稳定,细胞不易老化脱壁。现已制成猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞培养冻干疫苗,生产工艺简单,成本较低。疫苗对猪的免疫原性良好,免疫期一年以上。性能稳定,在-15℃可保存13个月,4℃保存半年以上,25℃也可保存14天。经7691头猪的免疫接种试验,证明本苗安全,无一死亡,个别猪有反应,其反应率仅为0.74%。