水貂血液阿留申病病毒及其抗体的检测与分析

为了确定鉴定阿留申病的适宜方法,尤其在阿留申病毒高感染貂场,本试验联合应用对流免疫电泳(CIEP)和PCR方法,对1个貂场连续2年于11¹2月间检测1次貂血液的阿留申病毒及其抗体。用CIEP检测产仔(断乳成活数≥5只/窝)母貂及其仔貂。通过比较貂群的检测结果来分析2种检测方法鉴别阿留申病貂的适用性。2次检测结果显示各貂群CIEP阳性率为60%12月间检测1次貂血液的阿留申病毒及其抗体。用CIEP检测产仔(断乳成活数≥5只/窝)母貂及其仔貂。通过比较貂群的检测结果来分析2种检测方法鉴别阿留申病貂的适用性。2次检测结果显示各貂群CIEP阳性率为60%⁹7%,PCR阳性率为20%97%,PCR阳性率为20%⁶3%,水貂的CIEP与PCR检测阳性结果不完全匹配。根据CIEP和PCR联合检测结果,貂群被分为4个群体CIEP+PCR+、CIEP-PCR-、CIEP-PCR+和CIEP+PCR-。2次检测的CIEP+PCR-貂在当年母貂中分别占48%、39%,在老母貂中分别占43%、77%,在公貂中分别占21%、51%。2次检测的CIEP+PCR-貂在貂群所占比例大,而CIEP-PCR-和CIEP-PCR+貂在貂群中所占比例小。公貂、老母貂经PCR阳性淘汰间隔1年再次检测,CIEP+PCR-貂在群体中比例明显提高。产仔263%,水貂的CIEP与PCR检测阳性结果不完全匹配。根据CIEP和PCR联合检测结果,貂群被分为4个群体CIEP+PCR+、CIEP-PCR-、CIEP-PCR+和CIEP+PCR-。2次检测的CIEP+PCR-貂在当年母貂中分别占48%、39%,在老母貂中分别占43%、77%,在公貂中分别占21%、51%。2次检测的CIEP+PCR-貂在貂群所占比例大,而CIEP-PCR-和CIEP-PCR+貂在貂群中所占比例小。公貂、老母貂经PCR阳性淘汰间隔1年再次检测,CIEP+PCR-貂在群体中比例明显提高。产仔2⁴年龄母貂有72%4年龄母貂有72%⁸0%CIEP+貂,而其60日龄仔貂仅有11%80%CIEP+貂,而其60日龄仔貂仅有11%¹6%CIEP+貂。结果分析指出,中国阿留申病病毒高感染率养殖貂群不适宜单纯采用CIEP检测淘汰阳性貂净化阿留申病。发现每年11至12月用CIEP和PCR联合检测貂血样,易检出CIEP+PCR-的潜在阿留申病毒感染康复貂。     

水貂阿留申病的防制经验

<正> 水貂阿留申病能造成公貂性机能不全,无精子,利用率降低:母貂空怀,流产,死胎,产弱仔,感染子代,使产仔率、成活率大大降低.另外,阿留申病毒还能引起免疫抑制,影响其它疫苗的免疫形成,甚至会增强二次感染的敏感性.目前,对水貂阿留申病,一无疫苗预防,二无特异性药物治疗,必须采取综合性防制措施.一、消灭传染源(一)定期检疫,处杀阳性病貂:病貂和潜伏期带毒貂的病毒长期存在于病貂体内,每年10月份后结合综合选种、取皮,以碘凝集反应(简称IAT)或对流免疫电泳法(简称CIEP)诊断进行阿留申病检疫.     

应用对流免疫电泳检疫水貂阿留申病的报告

<正> 水貂阿留申病(AD)是一种慢性进行性病毒病。它造成大量貂繁殖机能下降、空怀、死胎、流产,秋冬季节大批死亡。为了尽快控制疫情传播,实现种貂群全面检疫和净化,我站在中国农科院特产研究所指导下,首次应用对流免疫电泳(CIEP)特异性诊断法,对两个貂场的5327只水貂进行了阿留申病检测。     

复方中草药对阿留申病水貂繁殖性能的影响

为了研究复方中草药对阿留申病水貂繁殖性能的影响,试验根据对流免疫电泳法(CIEP)对某水貂场400只水貂阿留申病毒抗体检测的结果,选取水貂母貂180只,分为3组,每组60只(包括20月龄、10月龄的标准色水貂和咖啡色水貂各15只),A、B组均为阿留申病毒阳性水貂,C组为阿留申病毒阴性水貂(为空白对照组)。于配种前1个月开始,B、C组水貂只饲喂基础日粮;A组水貂在基础日粮中添加复方中草药,每只5 g/d,并连续饲喂1个月至配种开始;母貂配种开始至仔貂断奶分窝期间记录和统计母貂的繁殖指标。结果表明:A组分别和B组、C组比较,不论水貂毛色和年龄,其妊娠天数、胎平均产仔数均差异不显著(P0.05);A组标准色水貂、咖啡色水貂和20月龄水貂的仔貂断奶成活数与B组比均差异显著(P0.05);A组20月龄水貂的仔貂断奶成活数与C组比较均差异显著(P0.05);A组咖啡色水貂的母貂产仔率、断奶仔貂成活率与B组比较均差异显著(P0.05),A组20月龄水貂的母貂产仔率、断奶仔貂成活率与C组比均差异显著(P0.05)。说明复方中草药能够提高阿留申病水貂的繁殖性能,不论毛色和年龄,复方中草药对阿留申病水貂的妊娠天数均没有影响;胎平均产仔数都有一定程度提高,但均不明显;阿留申病水貂仔貂断奶成活数、产仔率和仔貂成活率均有提高,其中咖啡色水貂和20月龄水貂效果较为明显。     

水貂阿留申病病毒猫肾传代细胞对流免疫电泳诊断抗原现场检疫结果初报

阿留申病是水貂的一种慢性病毒性传染病,每年给养貂业造成重大经济损失,是水貂的三大传染病之一,本病至今缺乏特异性防治方法。自1972年以来,国际上已普遍推广使用对流免疫电泳试验(CIEP)逐年检测貂群,早期检出病貂,严格淘汰,保留阴性健康貂,用作繁殖。这是目前世界上控制和净化阿留申病的唯一有效手段。我国是世界上中低档貂皮的主要生产国之一。全国现养有水貂约300—400万只左右。每年要花费大量外汇从国外引进5000—8000头种貂。但是,我国对于水貂阿留申病的检疫手段十分落后。在口岸检疫上,至今仍沿袭非特异性的碘凝集反应,使许多阳性病貂漏检,不断流入国内,以至国内各貂场阿留申病流行情况十分严重,这是我同貂业生产水平低下的主要原因之一。     

水貂阿留申病毒的微滴式数字PCR方法的建立及初步应用

为建立水貂阿留申病毒(AMDV)微滴式数字PCR (ddPCR)检测方法,本研究根据AMDV VP2基因的保守区设计特异性引物和探针,通过PCR扩增AMDV VP2基因并克隆至p MD19-T载体,构建重组质粒p MD19-T-AMDV,并经PCR和测序鉴定后利用该质粒标准品作为模板,通过各反应条件的优化,初步建立了检测AMDV的ddPCR方法。分别以AMDV、水貂肠炎细小病毒、犬瘟热病毒、犬细小病毒、水貂流感病毒基因组为模板,按照本研究建立的ddPCR方法检测,评估其特异性;将1.43×10⁷拷贝/μL～1.43×10⁰拷贝/μL的重组质粒标准品作为模板,采用优化后的ddPCR和文献中的荧光定量PCR (qPCR)检测,评估该方法的敏感性;分别以不同浓度的重组质粒标准品作为模板,采用优化后的ddPCR分别进行批内和批间重复性试验,以变异系数(CV)评估该方法的重复性。优化结果显示,该方法的最佳引物终浓度为400 nmol/L (1.2μL)、探针终浓度为200 nmol/L (0.6μL)、退火温度为60℃。特异性试验结果显示,该方法仅可检...     

改良型短毛黑水貂被毛品质的研究

为了探讨改良型短毛黑水貂(美国短毛黑水貂与原苏联标准貂杂交4代以上)被毛品质,试验于2012年12月份随机选取公貂、母貂各20只,在每只水貂背部、腹部、臀部分别取1 cm2的毛样,利用刻度尺和数显外径千分尺(型号为MSQ525)测量母貂的被毛密度及公貂和母貂针毛、绒毛的长度和细度,并将结果与其他品种水貂进行比较。结果表明:改良型短毛黑水貂母貂被毛密度为(21 543±303)根/cm2,比金州标准貂大;针毛和绒毛的长度、细度及针毛、绒毛长度比分别为:公貂(21.77±0.24)mm、(14.80±0.17)mm、(43.65±0.22)μm、(4.56±0.16)μm、1∶0.61;母貂(18.50±0.24)mm、(13.77±0.15)mm、(42.42±0.26)μm、(4.28±0.05)μm、1∶0.64;公貂针毛长度与母貂相比差异显著(P0.05),针毛细度、绒毛长度和细度间差异不显著(P0.05);绒毛长度与美国短毛黑水貂相比稍短,但与金州标准貂相比较长。说明改良型短毛黑水貂在被毛密度和绒毛长度方面与金州标准貂相比得到提高,但在针毛长度和针、绒毛细度方面与美国短毛黑水貂相比仍有选育提高空间。     

人工控光条件下不同品种水貂繁殖性能的研究

为了研究同一人工控光条件下不同品种水貂的繁殖性能,试验随机选择咖啡貂、红眼白貂、美国短毛黑水貂公貂各50只,设为A组、B组、C组,母貂各200只,设为D组、E组、F组,公貂于配种前38天有规律的延长光照时间至配种开始前一天结束,母貂在配种落点结束的第2天开始有规律的延长光照时间至50%的母貂产仔即停止光照;在配种期和产仔期内记录公貂的配种次数、母貂的受配日期、产仔日期、产仔数及断奶后仔貂成活数,并统计母貂的妊娠天数、胎平均产仔数等指标。结果表明:A组、B组、C组公貂平均配种次数分别为9.06次、8.64次、9.72次,公貂利用率分别为92%、86%、88%。说明同一控光条件下不同品种公貂配种次数和利用率不同,以咖啡貂效果最优,其次为美国短毛黑水貂,红眼白貂最低。母貂产仔率以D组最高为76.1%,其次为F组72.1%,E组最低为69.0%;胎平均产仔数以D组最高为5.47只,其次为E组5.27只,F组最低为4.83只;仔貂断奶成活率以E组最高为84.0%,其次为D组82.0%,F组最低为79.0%;仔貂群平均成活数以D组最高为3.07只,其次为E组2.81只,F组最低为2.62只;妊娠天数以F组最短为47.59 d,其次为D组48.84 d,E组最长为50.52 d。说明同一控光条件下不同品种母貂繁殖性能不同,以咖啡貂母貂最优,其次为红眼白貂,美国短毛黑水貂最差。     

水貂阿留申病毒最新检测方法研究进展

水貂阿留申病(AD)是一种在世界范围内广泛流行的、严重危害水貂养殖业的病毒性免疫抑制性传染病。该病尚无有效的疫苗预防,也无特效治疗方法,唯一可行的防治方法就是通过定期检疫和淘汰阳性貂,逐步净化貂群,从而达到最终控制和消灭该病的目的。本文综述了该病最新实验室检测方法研究进展,以期为防控本病提供参考。     

水貂阿留申病对流免疫电泳(CIEP)操作方法及结果判定

水貂阿留申病是水貂的主要传染病之一,每年给水貂养殖业造成巨大的经济损失。本病至今缺乏特异性防治方法。用对流免疫电泳试验逐年检测貂群,严格剔出阳性病貂,保留阴性水貂以作繁殖,是日前世界上防制本病,净化阿留申病阳性水貂场的最有效办法。农牧渔业部动物检疫所采用猫肾传代细胞(CRFK)和阿留中病毒Utah-1国际标准毒株,在国内首次研制成功阿留申病病毒传代细胞抗原。这种抗原具有成分单纯、特异性强、沉淀线清晰、检出率高和成本低、方法简便、适于大批量生产等特点,与国外同类产品相比,结果完全一致,是口岸检疫和貂场净化的理想试剂。     

水貂阿留申病的血清学诊断研究近展

<正>水貂阿留申病(AD)又称浆细胞增多症,是水貂特有的一种病理进展极为缓慢的病毒性疾病.它是目前养貂业中危害最严重的传染病之一.一般认为水貂AD是持续性病毒感染,既使水貂体内出现高价抗体,病毒也不被中和,并不能从宿主体内将其清除.病毒与抗体结合形成具有感染性的免疫复合物,使病貂终生带毒,形成危险的传染源,血清学上则表现为终生恒定或略有波动的阳性抗体反应,不会发生彻底的生物学康复.大量研究指出:该病的自动免疫和波动免疫均不能产生良好的抗体感染力,反而使病理过程加剧.因此,迄今尚无特异的防治方法.AD病貂不仅生长缓慢,而且母貂空怀率上升,毛皮质量下降,造成极为严重的经济损失.为了净化水貂场,建立无AD的貂场则主要依靠加强检疫,及时淘汰阳性貂.因此,目前AD的研究最多的还是检疫技术,以血清学诊断尤为重要.现简述如下:     

水貂阿留申病PPA-ELISA诊断方法的研究

用感染水貂阿留申病病毒G株(ADV-G)的猫肾传代细胞(CRFK)建立了检测水貂阿留申病病毒抗体的PPA-ELISA法。该方法敏感性高于CIEP 16倍,具有快速,准确的优点,可用于病原定位,是水貂阿留申病检疫和研究较为理想的方法.     

基于B细胞表位肽的水貂阿留申病毒抗体ELISA检测方法的建立及其在流行病学调查中的应用

为建立水貂阿留申病(AD)抗体间接ELISA检测方法,本研究通过生物信息学预测筛选多个阿留申病毒(ADV)VP2结构蛋白保守的B细胞表位,设计人工诊断抗原肽SD,经原核表达、纯化后作为ELISA的包被抗原,建立了间接ELISA检测方法。结果显示该方法特异性好、敏感性高,与对流免疫电泳(CIEP)方法的符合率达93.2%。利用该方法对我国主要养貂区域的2190份血清样品进行AD血清学调查,结果显示山东、大连、河南、吉林、黑龙江AD阳性率分别为80.41%、82.14%、69.81%、71.24%、78.41%,表明AD在我国已呈高发态势。本研究建立的ELISA方法显著提高了AD阳性检出率,对貂场AD的净化及养貂产业的健康发展具有重要意义。     

水貂出血性肺炎的诊治

(一)发病情况和临床症状2012年10月20日,该养貂场从外地购入种貂26只,进场后未采取任何防疫措施,直接与本场貂群混养,此次发病,先由购进种貂,随后传染给本场水貂。该水貂养殖场饲养水貂755只,其中仔貂534只,母貂149只,公貂72只;共发病54只,死亡19只,发病率为7%,致死率35%。发病水貂病初大多数体温升高,精神极度沉郁,鼻镜干燥,行动迟缓,流泪、流鼻液;继而出现呼吸困难,而且呈腹式呼吸,肺部可听到!音,咳血或鼻孔流出红色泡沫性液体,表现症状后1～2d死亡;有的出现异常尖叫,呈全身痉挛,很快死亡。     

水貂阿留申病的防诒

水貂阿留申病是一种病毒性传染病。以浆细胞增多、血清中丙种球蛋白增高、肾小球肾炎、动脉炎和肝炎为特征。我区中卫养殖场存在有本病,经检疫后采取综合防治措施,死亡率明显下降。一、流行情况我区中卫养殖场1988年10月份对1239只选留种貂(其中公貂318只,母貂921只),采用对流免疫电脉法进行了阿留申病检疫,共检出阳性貂517只,阳性率41.73%。二、临床症状病貂渐进性消瘦,被毛蓬乱无光。可见粘膜苍白,尤其鼻镜和爪垫灰白。口腔粘膜(口唇内侧、齿龈部)有出血或溃疡。食欲时好时坏,粪便呈煤焦油样。     

水貂阿留申病病毒研究进展

水貂阿留申病(Aleutian mink disease, AMD)是由水貂阿留申病病毒(Aleutian mink disease virus, AMDV)引起的水貂的重要传染性疾病之一,深入开展对AMDV的研究对于该病的防控有重要意义。AMDV基因组全长约为4.8 kb,主要编码2种结构蛋白和3种非结构蛋白,它们在病毒复制、增殖及致病过程中发挥重要作用。AMDV的复制依赖于代谢活跃的细胞,对于幼貂,病毒感染肺泡Ⅱ型细胞会造成急性致死性肺炎,感染巨噬细胞则会引起成年水貂患高丙种球蛋白血症和免疫复合物介导的肾小球肾炎等慢性进行性疾病。笔者从AMDV侵入细胞的受体途径、诱导细胞凋亡途径及病毒复制等方面对其致病机理进行阐述。AMDV在全世界范围内广泛流行,现有的检测方法主要分为血清学诊断方法和分子生物学诊断方法。目前,尚未开发出安全有效的针对AMDV的商品化疫苗,随着生物学技术的快速发展,在灭活疫苗、DNA疫苗和亚单位疫苗的研制上有所进展;抗病毒的新方法,如筛选AMDV耐受貂,提高水貂免疫力和靶向适配体技术为AMD的防控提供了新思路。文章从AMDV编码蛋白功能、病毒细胞嗜性与复制、临床表现...     

水貂阿留申病胶体金免疫层析试纸条与对流免疫电泳对比试验

水貂阿留申病是阻碍养貂业发展最严重的三大传染病之一。目前还没有有效防治办法,主要依靠定期的检测来淘汰病貂,逐步净化貂群。本试验随机采取河北某貂场192只水貂血液样本,采用对流免疫电泳试验(CEP)和胶体金免疫层析试纸条(GICA)对所采集的血清样本进行检测。结果表明,水貂阿留申病GICA检测阳性率为57.81%,CEP阳性率为56.25%,GICA阳性率和CEP检测结果基本相符。     

南方利用羊头肉、舌喂貂的经验

<正> 我自治区1972年开始饲养水貂,以鱼类为主要饲料。1979年以来,河池肉联厂貂场用羊头肉、羊舌喂貂,取得了很好的生产效果,现简介如下: 一、兽群情况 1979年该场从北海土畜产进出口公司和北海外贸貂场引入种貂98只,其中公貂19只,母貂79只。 配前:公貂平均体重4.3斤(3.6—5.1斤),母貂平均体重1.83斤(1.4—2.3斤),二者均略高于我自治区历年掌握的标准(公貂3.8—4.2斤;母貂1.6—1.8斤)。 二、饲料 以羊头肉、羊舌为主,搭配其他饲料。各生物学时期饲料单如下:     

水貂阿留申病的研究进展

水貂阿留申病(Aleutian disease of mink,ADM)是由水貂阿留申病细小病毒(Aleutian mink disease parvovirus,AD-MV)引起的一种慢性、进行性传染病,一直是危害世界养貂业健康发展最重要的疫病之一。到目前为止,还没有疫苗可成功用于ADM的预防,也没有特异有效的治疗方法,唯一可行的防治方法就是通过多次特异性检疫,淘汰病貂,净化貂群。笔者对阿留申病的病原学、发病机制、防治措施等方面进行概述,为临床防治水貂阿留申病提供了理论基础。     

水貂阿留申病导致繁殖失败的研究报告

<正> 江苏省某大型水貂场,在近十余年间,除了1980和1986年两次遭受水貂犬瘟热病的严重危害而更新貂群外,其他年份的胎平均成活均在3.5只上下,经济效益较好。该场在饲养管理上有一定经验,但在疫病防制上却存在很大的缺陷。1987年在更新的貂群中发生大批流产(吸收、死胎和弱仔等)造成了巨大损失。经调查研究证明,其原因是阿留申病所致。一、流行病学调查该场1987年度的新种貂群是由山东引进的156只公貂、辽宁引进的450只母貂、