鸡致病性大肠杆菌I型菌毛的研究进展

鸣致病性大肠杆菌I型菌毛是鸡大肠杆菌病的重要致病因子。本文对其生物学特性、在感染中的作用、分子生物学等8个不同方面的研究进展做了综述。     

致病性禽大肠杆菌菌毛研究进展

菌毛(Fimbriae)是大肠杆菌菌体表面的一种蛋白性突起,是致病性禽大肠杆菌(Avian pathogenic Es-cherichia Coli,APEC)致病的重要因素之一,对禽大肠杆菌在禽体内的定居、增殖,以及协作毒素释放等方面起着重要作用。它主要的功能是通过与其宿主组织表面相应的受体相互     

禽致病性大肠杆菌研究进展

禽大肠杆菌病是由不同血清型禽致病性大肠杆菌(avian pathogenic Escherichia.coli,APEC)引起的严重危害世界养禽业健康发展的重要细菌性传染病之一。作者对禽致病性大肠杆菌的最新亚群分类、病型、生境、毒力因子和致病机理作了综述,同时为有效防控禽大肠杆菌病的未来趋势进行了展望。     

禽源致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛亚单位蛋白的功能与基因控制

禽源致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛是禽大肠杆菌病的一种重要的致病因子,为一种蛋白质突起,具有良好的免疫原性。与人畜致病性大肠杆菌粘附素菌毛相比,禽源性大肠杆菌的菌毛研究起步稍晚,尤其对其亚单位（ＦｉｍＢ、ＦｉｍＥ、ＦｉｍＡ、ＦｉｍＩ、ＦｉｍＣ、ＦｉｍＤ、ＦｉｍＦ、ＦｉｍＧ、ＦｉｍＨ等）的功能及基因控制报道尚少,直到近年来,人们对此才有较多的了解。近年研究表明,ＦｉｍＡ是Ⅰ型菌毛的主要结构蛋白,ＦｉｍＡ的表     

鸡致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛的研究进展

鸡致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛是鸡大肠杆菌病的重要致病因子.本文对其生物学特性、在感染中的作用、分子生物学等8个不同方面的研究进展做了综述.     

大肠杆菌F1菌毛表达条件的初探

Ｆ１菌毛在体外表达受到许多因素的影响。为了对Ｆ１菌毛的进一步研究,本试验以只产Ｆ１菌毛的菌株Ｃ６００为对象,从培养基、温度、ｐＨ、通氧等条件进行了摸索,实验结果表明：培养条件的限制极为显著,在ＭＤ－１肉汤（ｐＨ６．８～７．２）中、３７℃、静止培养４８ｈ可使Ｆ１菌毛获得较好表达;通入氧气将有利于Ｆ１菌毛的表达。     

禽大肠杆菌菌毛粘附特性的研究

用透射电镜观察了鸡大肠杆菌的３个致病菌株ＧＬ７（Ｏ５０）、ＨＢ５（Ｏ７８）及ＴＧ１８（Ｏ８８），发现在营养肉汤中于３７℃培养均表达菌毛，但在１８℃培养不表达菌毛，用３７℃培养的大肠杆菌对鸡气管粘膜做粘附试验，并用扫描电镜观察，发现它们对体内体外的鸡气管均可粘附，但１８℃培养的大肠杆菌均缺乏这种粘附作用。采用粘附抑制试验测定这３种菌株对体外鸡气管节段粘附的特异性，结果是抗这３种细菌菌毛的抗体能显著抑制各自相应的菌株对气管上皮的粘附；Ｏ７８株和Ｏ８８株对气管上皮的粘附作用可被甘露糖显著抑制，表明甘露糖对介导菌体对气管粘膜上皮细胞受体起重作用。用甘露糖不能抑制Ｏ５０菌株对气管上皮的粘着，表明该菌体的粘附作用不由甘露糖介导。用高碘酸钠处理能抑制所有菌株的粘附作用，再次表明细菌对气管上皮的粘附作用是由单糖介导的     

鸡致病性大肠杆菌O1、O2和O78的I型菌毛结构基因表达载体的构建及表达产物的检测

用限制性内切酶SacI和BamHI双酶切克隆有鸡致病性大肠杆菌分离株O1、O2和O78的piliA基因的质粒pTFimO1、pTFimO2和pTFimO78，分别回收从此3质粒上切下的545bp的piliA基因片段，再将载体pET-28a( )用SacI和BamHI双酶切，最后将pET-28a( )DNA片段与545bp的piliA DNA片段进行连接，转化至受体菌BL21（DE3）中，经SacI和BamHI酶切反应鉴定重组子，得到了理想重组子质粒pETFimO1、pETFimO2和pETFimO78。重组菌株BL21（DE3），（pETFimO1)、BL21（DE3）（pETFimO2)和BL21（DE3）（pETFimO78)经IPTG诱导后，其表达产物经SDS－PAGE检测，结果表明重组菌株可以良好地表达鸡致病性大肠杆菌I型菌毛蛋白。     

禽病原性大肠杆菌I型菌毛单克隆抗体的研制及其对分离株的检测

从禽病原性大肠杆菌分离株ＴＫ３（Ｏ１）提取Ｉ型菌毛免疫ＢＡＩＢ／ｃ小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,获得４株能稳定分泌针对Ｉ型菌毛的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为ａＢ６、ｂＧ５、ｃＦ３和ｃＧ３。单克隆阻断甘露糖敏血凝试验,免疫胶体金和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ试验证明,单抗是Ｉ型菌毛特异的。这些单抗培养上清及腹水的ＥＬＩＳＡ效价为分别为１０＾－２～１０＾－３和１０＾－５～１０＾－６;腹水的平     

禽大肠杆菌毒力因子的研究进展

禽致病性大肠杆菌是毒力基因的贮存宿主,多种毒力因子的协同作用使其产生致病性,而耐药性的产生加大了对其防治的难度。本文主要对禽大肠杆菌毒力因子的种类、毒力特性及分子流行病学等研究进展进行了概述,为深入研究禽大肠杆菌病的致病机理和制定防控措施提供理论依据。     

禽大肠杆菌毒力因子研究进展

禽大肠杆菌是严重危害禽类的一种重要致病菌，该菌有多种毒力因子，较为重要的有菌毛，毒素，产气杆菌素及外膜蛋白等。在大肠杆菌侵袭宿主组织并引起其发病的过程中，这些毒力因子相互协调，对细菌对宿主定居，繁殖及病理性毒害 着至关重要的作用。本文仅就这些毒力因子的研究进展作一综述。     

鸡致病性大肠杆菌O1、O2和O78的Ⅰ型菌毛结构基因表达载体的构建及表达产物的检测

用限制性内切酶SacI和BamHI双酶切克隆有鸡致病性大肠杆菌分离株O1、O2和O78的piliA基因的质粒pTFimO1、pTFimO2和pTFimO78,分别回收从此3质粒上切下的545bp的piliA基因片段,再将载体pET-28a(+)用SacI和BamHI双酶切,最后将pET-28a(+)DNA片段与545bp的piliA DNA片段进行连接,转化至受体菌BL21(DE3)中,经SacI和BamHI酶切反应鉴定重组子,得到了理想重组子质粒pETFimO1、pETFimO2和pETFimO78.重组菌株BL21(DE3) (pETFimO1)、BL21(DE3)(pETFimO2)和BL21(DE3)(pETFimO78)经IPTG诱导后,其表达产物经SDS-PAGE检测,结果表明重组菌株可以良好地表达鸡致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛蛋白.     

单抗对禽病原性大肠杆菌菌毛粘附抑制的研究

应用８株鸡病原性大肠杆菌研究了菌毛作为分型抗原和共粘附特性,以抗Ⅰ型菌毛单克隆抗体（单抗）ｂＧ５和甘露糖进行了抑制作用试验。在血凝试验中、单抗和甘露糖都能抑制血凝反应,说明这些株都属于Ⅰ型,通过以单抗或甘露糖的粘附抑制程序这些Ｅｃｏｌｉ株对鸡气管上皮都不能特异粘附。     

禽致病性大肠杆菌clpV基因缺失株的构建及其对Ⅰ型菌毛主要基因表达的影响

为研究禽致病性大肠杆菌(APEC)六型分泌系统(typeⅥsecretion system,T6SS) clpV基因对Ⅰ型菌毛表达的影响,本研究利用Red同源重组系统构建了禽致病性大肠杆菌clpV基因缺失株TW-XM△clpV.将clpV基因克隆到表达载体pBR322中,构建相应回补株TW-XMC△clpV.通过PCR...     

鸡致病性大肠杆菌O1、O2和O78的I型菌毛结构基因的克隆、序列测定及同源性分析

提取鸡致病性大肠杆菌分离株O1，O2和O78的基因组DNA作为模板，用TD－PCR技术从其中分别扩增出了0．55kb的I型菌毛细菌基因（piliA)，将扩增得到的piliA基因片段，TA克隆的方法分别克隆进pGEM-T载体中，转化至受体菌JM109中，用Amp/IPTG/X-gal琼脂平板蓝白菌落筛选法，得到含阳性重组子的菌株，提取质粒用PstI单酶切及NcoI和PstI双酶切鉴定，结果证实，所构建的克隆质粒中均含有相应piliA基因，经DNA序列分析，其结果基因阅读框架大小为549bp，但其中O1菌株I型菌毛基因在第72位发生突变，有6个碱基插入，经DNA Star核酸分析软件分析，此3菌株的I型菌毛基因的同源性为89．9％－92％。     

鸡致病性大肠杆菌菌毛分型的初步研究

以鸡致病性大肠杆菌F1菌毛特异性单抗1F4－1、2C3、3H3和F11菌毛特异性单抗FA1、FB11作为检测试剂，将111株已知O抗原的鸡致病性大肠杆菌经MD液体培养基连续传代培养后，通过直接玻板凝集法对各菌毛进行初步分型。结果发现F1、F11菌毛与O78、O1及O2三种优势O抗原型菌株之间存在较为明显的相关性，即致病性大肠杆菌主要集中在上。F1、F11菌毛在这三种O抗原型上的总检出率分别为95．6％、75．4％及73．3％。另外，在所检测的111株鸡致病性大肠杆菌中，只表达F1菌毛的大肠杆菌占菌杆总数的33．3％。只表达F11菌毛的大肠杆菌占菌株总数的8．1％，两者都表达的占菌株总数的36％，F1、F11菌毛的总检出率为78．3％。     

禽致病性大肠杆菌实验感染模型研究进展

禽致病性大肠杆菌（avian pathogenic Escherichia coli,APEC）是导致不同日龄禽类局部和全身感染的重要病原菌,也是人肠外致病性大肠杆菌（extraintestinal pathogenic Escherichia coli,ExPEC）毒力基因的重要储存宿主或来源。为深入理解APEC的感染过程、致病机理、宿主免疫应答及遗传抵抗机制、评估药物和疫苗防治效果,研究者通过不同途径建立了多种评估APEC毒力的实验感染模型。根据所涉及的系统不同可分为呼吸系统、脉管系统、肌肉系统、皮肤系统、生殖系统、消化系统及鸡胚系统等。此外,尚有小鼠与大鼠感染试验及组织培养细胞和外植块感染试验等。作者重点介绍了不同APEC实验感染模型的建立、致病机制、宿主应答及应用。     

辽宁省禽大肠杆菌优势血清型菌株致病性试验研究

用2012年新分离5个血清型禽大肠杆菌对14日龄蛋鸡雏进行致病性试验,结果证明:O109型菌致病性占第一位;O78型菌致病性占第二位,其次是O92型菌、O131型菌。O65型菌对鸡无致病性。