酶联免疫法在农药残留检测中的应用

酶联免疫法(ELISA)是以酶标记抗体或抗原为主要试剂的一种标记免疫分析技术,其结合了抗原抗体反应的高度特异性和酶的高效催化作用,具有灵敏度高、特异性强、准确性好、检测成本低、迅速等优点,该方法近年来被广泛应用于食品安全中农药残留的检测。     

动物源性食品中小分子药物残留的酶联免疫学检测研究进展

基于酶联免疫学检测原理及分类,阐述了酶联免疫学测定方法的建立,包括半抗原的设计及合成,人工免疫全抗原的合成,特异性抗体的制备等方面,并论述了兽药残留免疫检测技术的应用进展.     

左氧氟沙星人工抗原间接ELISA检测方法的建立

为检测所制备的左氧氟沙星人工抗原品质,采用西北农林科技大学兽医药理实验室制备的左氧氟沙星人工抗原免疫BALB/c小鼠,制得鼠抗左氧氟沙星人工抗原的多克隆抗体.以采集的抗血清为一抗、辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG为二抗、四甲基联苯胺(TMB)为底物,建立左氧氟沙星人工抗原间接酶联免疫检测法( ELISA).试验结果表明,间接ELISA最佳反应条件为包被抗原质量浓度1 mg/L、4℃过夜、抗原抗体于37℃作用1h、酶标二抗稀释度为1∶2 000.该方法的灵敏度高,且具有良好的准确性和重复性,可以评价左氧氟沙星人工抗原的品质.     

氨苄青霉素人工完全抗原合成及多克隆抗体的制备

氨苄青霉素是一种广谱抗菌药物,但由于其在动物源性食品上的残留问题,会造成细菌的耐药性,导致人体免疫力的下降。因此,建立起一套快速有效的药物残留检测方法具有重要的社会意义。基于此,采用酶联免疫检测(ELISA)方法,开展氨苄青霉素人工完全抗原合成及多克隆抗体的制备试验。     

酶联免疫法快速检测食品中重金属含量的研究进展

重金属超标是食品安全的重要问题之一,因此,需通过严格的监测,确保食品中的重金属含量在限量范围之内.传统的重金属检测方法灵敏度高、重复性好,但操作较为复杂,检测费用高,不适用于大量样本的快速筛选.近年来,随着酶联免疫检测技术的快速发展,酶联免疫(ELISA)法已广泛应用于食品中重金属的检测.从样品前处理、重金属人工抗原及特异性抗体的制备、ELISA法的选择三个方面介绍了该法在重金属检测方面的最新研究成果,并对ELISA法的发展进行了展望.     

猪瘟PPA-ELISA和Dot-ELISA检测猪瘟抗体的比较及其应用

随着论断技术的快速发展,猪瘟的抗体检测方法也不断增多.血清中和试验、免疫琼脂扩散试验、对流免疫电泳、荧光抗体技术、聚合梅链式瓜等方法都已用于猪瘟的抗体检测,这些方法特异性强、敏感性高,但操作烦琐、费时,而且有些方法的技术和设备条件要求较高,在基层难以推广使用.尤其对于模化猪场大批样品的快速检测,更需要快速和操作简便的论断检测方法.酶免疫技术中的酶联免疫吸附试验(ELISA)被认为是目前检测猪瘟抗体较好的一种方法,该法简便、快速、敏感、特异快,并且试剂盒已商品化.因此我们选用了葡萄球菌A蛋白酶联免疫吸附试验(PPA-FLISA)和斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)技术在规模化猪场进行了抗体检测的比较试验和实际应用.现将试验情况报告如下.     

农业部948项目“新型农产品农药残留快速检测技术的引进”2004年1月通过验收

该项目由我校资源与环境学院李季教授主持,通过引进国外技术并经改进与创新,构建了农药残留快速检测技术研发平台,并自主制备了对硫磷、甲基对硫磷、克百威、甲萘威和2 ,4 -滴5种农药的抗体,开发出了对硫磷、甲基对硫磷和克百威的酶联免疫检测试剂盒以及克百威的检测试纸条,技术均达到国内领先水平。课题组已具备了小规模生产试剂盒和试纸条的能力,并成功地小批量推向了市场。此农药残留酶联免疫检测试剂盒及试纸条在我国食品安全检测和环境监测中具有良好的应用前景农业部948项目“新型农产品农药残留快速检测技术的引进”2004年1月通过验…     

检测猪肺炎支原体抗体间接ELISA方法的建立

选用猪肺炎支原体Mhp J株培养物制备抗原,建立检测猪肺炎支原体抗体的间接ELISA(酶联免疫吸附)方法.结果显示,ELISA试验的最佳反应条件为:抗原包被浓度为1.5 μg/ml,待检血清的最佳稀释浓度1∶100,2%明胶作封闭液,抗原抗体最佳结合时间为90 min,酶标抗体1∶10 000(体积比)稀释,最佳作用时间为60 min.对136份样品检测结果表明,建立的猪肺炎支原体间接ELISA抗体检测方法与美国IDEXX公司生产的猪肺炎支原体抗体检测试剂盒检测的符合率达到83.8%,假阴性率8.8%,假阳性率1.5%.     

农药残留快速检测技术及其应用

农药残留检测是确保农产品质量安全的一项重要措施，其重要性已引起了生产和销售者的注意．本文分析了酶抑制检测法．酶联免疫检测法和常规仪器检测法的原理及应用情况．提出了残留检测技术的发展方向．为进行农药残留检测提供参考．     

大白菜中拟除虫菊酯类农药残留半定量ELISA免疫检测方法的建立

为建立适合蔬菜中拟除虫菊酯类农药的半定量ELISA免疫检测方法,以实验室自制的针对拟除虫菊酯类农药的广谱性抗体为材料,以间苯氧基苯甲酸(PBA)为半抗原,分别用活性酯法、混合酸酐法和6-氨基己酸法偶联鸡卵清蛋白(OVA)制备3种包被抗原,开展了半定量酶联免疫分析法(ELISA)免疫检测试验。结果表明,采用6-氨基己酸法合成包被抗原效果最优;检测时无需将抗原抗体过夜提前预混,抗原抗体反应时间以45 min较佳;无净化步骤的大白菜基质对检测结果影响较小,该方法对63个大白菜样品的假阳性检出率和假阴性检出率分别为9.3%和2.7%,表明该方法具备对大量大白菜样品快速初筛的应用潜力。     

现代检测技术在食品安全中的应用

论述了现代检测技术在食品安全中的应用与发展,包括高效液相色谱、现代分子生物学技术的核酸探针检测技术、基因芯片检测技术、酶联免疫吸附技术(ELISA)以及作为快速检测的胶体金技术。     

酶联免疫吸附试验应用概况

<正> 自1971年Engvall和Van Weeman等建立酶联免疫吸附试验(ELISA)以来,已在医学界得到广泛的研究和应用,试验材料、技术等都在不断地改进和创新。兽医上ELISA起初只用于猪旋毛虫病的诊断,现在已用于多种病毒、细菌、霉形体和寄生虫抗原成分及相应抗体的检测。本文就ELISA的应用研究进展作一简要论述。一、酶联免疫吸附试验反应原理酶本身具有强大的催化性和高度的特异性。如辣根过氧化物酶能把500万分子H_2O_2     

猪脂肪细胞膜的检测及对小白鼠生长的影响

采用猪脂肪制备脂肪细胞膜抗原 ,免疫兔子制备抗血清 ,注射小白鼠 ,具有促进生长的作用。利用蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS -PAGE)可分离膜蛋白 ,用酶联免疫吸附试验 (ELISA)可快速、简单地检测到抗体。     

牛白血病免疫酶技术的研究

本文介绍用酶联免疫吸附检测法(ELISA)检测牛白血病病毒(BLV)的抗体。以FLK-BLV细胞培养液制备的免疫扩散(ID)用的粗提抗原,经ConA-Sepharose 4B亲和层析,或先经乙醚处理,再经Sephadex G-150层析等方法,分别提取了gp和p抗原。用gp抗原作ELISA,对91份牛血清样品进行检测,阳性共67份,比微量免疫扩散(MID)高14％,两者的符合率为85％。用p抗原作ELISA对240份牛血清样品进行检测,阳性占162份,比MID法高12％,两者的符合率为87％。用gP抗原对33份样品和用p抗原对160份样品进行三次重复试验,它们的变异系数在10％以内的分别为100％和92.5％。ELISA抑制试验表明,p抗原和gP抗原对BLV抗体的特异性良好。     

酶联免疫吸附测定法检测蜜蜂慢性麻痹病毒的研究

酶联免疫吸附测定法(ELISA)是七十年代发展起来的一项最新血清学技术,目前已在医学、兽医学以及植物学等领域应用。就蜜蜂病害而言,虽已有应用琼脂扩散、对流免疫电泳以及荧光抗体技术诊断的记载,但应用酶联免疫吸附测定法检测,尚未见报道。 本文报告酶联免疫吸附测定法检测蜜蜂慢性麻痹病毒(CBPV)及应用于蜂场检测蜜蜂麻痹病研究结果如下:     

ELISA技术在食品安全检测中的应用研究进展

介绍了酶联免疫吸附技术(ELISA)的原理和应用类型,从生物毒素、致病微生物、重金属污染、药物残留、转基因食品、食品中过敏原和食品中违法添加的非食用物质等方面综述了ELISA技术在食品安全检测中的应用,指出了该技术在应用过程中存在的问题,并对该技术的发展趋势与应用前景进行了分析与展望。     

禽白血病检测方法的建立和比较

提纯的禽成骨髓细胞增生病病毒(AMV)经用吐温-80和乙醚裂解后免疫兔,能获得抗禽白血病病毒(ALV)群特异性(gs)抗原的高特异性抗体,试验结果表明这种抗体能满意和有效地用于各种检测方法中。葡萄球菌 A 蛋白的酶联免疫吸附试验(PPA-ELISA),酶联免疫吸附访验(ELISA),免疫酶组化法(IHCA)和琼脂扩散沉淀试验(AGP)四种方法的比较结果为:PPA-ELISA 的检出率最高,ELISA 的检出率为略低,其次为 IHCA 的检出率,AGP 的敏感性为最低。综合评定为ELISA 是一较为理想和经济的检测方法。广东省部分鸡场抽样检查的结果表明,各鸡场的 gs 抗原的阳性率是很高的,蛋清和胚胎中 gs 抗原的阳性率也很高,显然 ALV 的先天性传递在本病的流行病学中是非常重要的。     

免疫学方法在重金属快速检测中的应用

免疫学方法检测重金属污染是新兴的技术手段,操作简便,检测灵敏、快速,具有较大的市场应用前景。本文对近些年免疫学检测手段,尤其是酶联免疫检测技术和胶体金免疫检测技术在重金属检测中的应用进行综述,对免疫学方法的优缺点进行分析,并对未来研究方向提出建议,为相关研究提供参考。     

小反刍兽疫防控知识问答(下)

<正>6.实验室诊断方法有哪些?如何确诊?血清学检测方法:抗体检测可采用竞争酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接酶联免疫吸附试验(ELISA)。病原学检测方法:病毒检测可采用琼脂凝胶免疫扩散、抗原捕获酶联免疫吸附试验(ELISA)、实时荧光反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、普通反转录聚合酶链式反应(RT-PCR),对PCR产物进行核酸序列测定可进行病毒分型。疑似患病动物的病料需经国家外来动物疫病研究中心进行确诊。(地址:山东省青岛市南京路369号,联系电话0532—85621552)     

环丙氨嗪人工抗原的合成与鉴定

本研究拟通过抗原合成、多克隆抗体制备等途径建立快速的环丙氨嗪酶联免疫检测方法.主要采用戊二醛桥连法,偶联半抗原环丙氨嗪和载体牛血清白蛋白(BSA)或卵清白蛋白(OVA),制备酶联检测的免疫抗原和包被抗原.经紫外光谱和气相-傅里叶-红外光谱鉴定,在紫外265 nm波长处得到环丙氨嗪-BSA吸收峰;在红外3 350～3 300 cm-1、1 660～1 500 cm-1和1 695～1 665 cm-1波长处分别得到环丙氨嗪-BSA和环丙氨嗪-OVA特征性偶联吸收峰,证实本试验人工合成的2对抗原均偶联成功.免疫抗原和包被抗原的偶联比分别达到25.9 ∶ 1、23.1 ∶ 1,为进一步制备抗血清和酶联检测方法的建立奠定了工作基础.