猪精液冷冻技术的研究

以解冻后的精子活率、活力、质膜完整率、顶体完整率和人工授精结果为判定指标 ,比较了几种冷冻稀释液、解冻液及冷冻 -解冻程序对猪精液冷冻的效果 ,并对所筛选出的最佳稀释液和冷冻程序做了改进。结果如下 :(1) 号稀释液冷冻解冻后的精子活力 (32 .4± 7.3) %、活率 (4 2 .2± 3.2 ) %、顶体完整率 (6 2 .3± 0 .8) %和弯尾率 (4 2 .6± 7.5 ) %均显著高于 、 、 号稀释液 (P<0 .0 5 )。 (2 )在 号稀释液中添加 0 .5 %、1%和 2 %的 O.E.P(氨基 -钠 -十二烷硫酸酯 )使精子活率提高 5 %、弯尾率提高 6 %、顶体完整率提高近 10 % ,与对照组相比差异显著 (P<0 .0 5 )。 (3)应用改进的稀释液 ( 液加 1% O.E.P) ,细管法比颗粒法冷冻精子活率提高近 7个百分点 ,活力提高 6个百分点 (P<0 .0 5 )。(4 )室温预平衡 4h的精子活力和活率都比对照组 (0 h)有显著提高 (P<0 .0 5 ) ,而预平衡 2、6 h的精子活力和活率与对照组差异不显著 (P>0 .0 5 )。 (5 ) 号解冻液解冻后精子活力 (4 2 .9± 2 .6 ) %显著高于 、 、 号解冻液 (P<0 .0 5 )。 (6 )用 5 0℃水浴解冻精子的活力 (4 6 .3± 2 .6 ) %显著高于 39℃ (4 2 .9± 2 .6 ) %和 70℃水浴 (4 1.1± 5 .7) %解冻的精子活力 (P<0 .0 5 )。 (7)精清和 号解冻液     

种公牛精子耐冻性对比试验

精子耐冻性一般用冷冻精液解冻后精子的复苏率和精子顶体完整率来比较.对于种公牛,冷冻精液解冻后精子的复苏率和顶体完整率越高,其耐冻性越好.为探讨种公牛品种、年龄、个体等因素对耐冻性的影响,进行了试验观察.     

牛冷冻精液的制作程序

1采精与精液品质检查按照牛冷冻精液国家标准的要求选择公牛,并检疫无病。采得的精液,精子活率不低于0.6,精子密度不低于8亿/毫升,精子畸形率不超过15%。2精液的稀释用牛冷冻精液稀释液,以原精液的活率和密度确定稀释的比例。按国家标准,以解冻后每个输精剂     

波尔山羊冷冻精液质量现状与分析

山羊冷冻精液在国内 60年代就有研究 ,但初期因受胎率较低 ,生产上一直未能推广。 80年代绵羊冷冻精液的研究和推广取得了较好的效果 ,对山羊的冷冻精液技术研究和推广起到了推动作用 ,有的地区试验表明 ,情期受胎率可达 60 %左右。近年国内一些省区先后引进了波尔山羊 ,山羊杂交改良的势头发展很快 ,也促进了冷冻精液的推广和应用。但目前山羊的冷冻精液质量究竟如何 ,笔者作了一些调查和分析。1　材料与方法从陕西、江苏、安徽、山东等省 8个种羊场 (站 )中 ,随机抽查了 40只波尔山羊种公羊的冻精。其中 ,3 6只为颗粒冻精 ,4只为细管冻精…     

精子活率与精子完整率和质膜完整率的相关性分析

采用考马斯亮蓝（R250）染色法和低渗膨胀试验（HOST试验）检测精子顶体反应和质膜完整性,以检测和评价这2种方法在猪精液质量检测中的实际应用价值。结果表明,冷冻复苏后,精子活率为37.97%,精子平均速度为55.72μm/s,顶体完整率和质膜完整率分别为51.01%和39.95%。经相关性分析得出,猪精子顶体反应率和质膜完整性与精子活率相关系数为0.904 0和0.817 6,呈显著相关（P〈0.01）,而精子的平均游动速度与顶体反应率和质膜完整性相关系数为-0.056 2和-0.151 8,无明显相关性（P〉0.05）,精子活率与精子平均游动速度间也无明显相关性（P〉0.05）。     

不同精液稀释液对牛细管冻精效果的对比试验

本文对不同冻精稀释液配方进行了对比试验,结果表明,配方Ⅰ、配方Ⅱ和配方Ⅲ对荷斯坦牛和西门塔尔牛冻精的活力效果基本一致,差异不显著（P〉0.05）。在对冻精顶体完整率的对照试验中发现,荷斯坦牛和西门塔尔牛都表现出配方Ⅰ效果最好,且3种稀释液对西门塔尔牛冻后精子顶体影响都小于荷斯坦牛,但差异不显著（P〉0.05）。     

不同冷冻方法对种公牛冷冻精液质量的影响

<正>种公牛精液的冻后活力是评定冷冻精液品质好坏的重要指标之一,也是影响牛人工授精受胎率的重要因素。影响冻精解冻后活力的因素很多,其中冷冻速度,即精子通过对细胞产生致死性伤害的0～-60℃温度区的速度,是决定冷冻精液冻后品质好坏的关键所在。在实际生产中,人们对于冷冻速度主要持有两种观点:一是认为以每分钟降低40℃的冷冻速度冷冻效果最佳;二是认为每分钟下降60℃冷冻效果最好。为此本试验使用两种不同的冷冻速度对牛精液进行冷冻,比较解冻后精液的活力、复苏     

绵羊精液平衡过程中降温速率对精子品质的影响

本试验研究了河南大尾寒羊精液冷冻颗粒制作过程中,100、150、200和250 mL 4种不同体积水浴平衡降温速率对冻精精子品质的影响。结果表明：①4种水浴平衡处理的降温时间在2.2～3.9 h,以100 mL水浴降温速率最大,250 mL水浴降温速率最小,200和250 mL水浴处理降温速率较为接近。②精液冷冻水浴平衡降温速率前30 min,降温速率应控制在0.73～0.74 ℃/min之间;30～90 min降温速率应控制在0.11～0.12 ℃/min之间。③水浴平衡时的降温时间3 h较为适宜,250 mL水浴平衡降温的处理对精子造成的冷打击最小,制作的冻精解冻后的精子品质最高。④精子活率：250 和200 mL处理间差异不显著(P＞0.05);250、200 mL处理与150、100 mL处理间差异显著(P＜0.05)。⑤畸形率：250 mL水浴平衡条件下最低,100 mL水浴平衡条件下最高。250与200 mL处理间精子畸形率差异不显著(P＞0.05);250与150、100 mL处理间精子畸形率差异显著(P＜0.05)。⑥顶体完整率：250和200 mL较高,两处理间差异不显著(P＞0.05);250和200 mL处理与150及100 mL处理间精子顶体完整率差异显著(P＜0.05)。     

热应激对小鼠附睾内精子的形态学影响

用不同温度（42℃、37℃和33℃）,每天在固定时间对小鼠实施1h的热应激处理。在热应激持续到8d、13d、21d、35d时,颈椎脱臼处死小鼠,取附睾尾制备精子悬液并测定其密度,用改良巴氏染色法检测精子顶体完整率和畸形率。结果：42℃组热应激处理的小鼠附睾内精子密度和顶体完整率,随着热应激持续时间的延长而不断降低,畸形率则不断升高,且与对照组间有显著（P〈0．05）差异;37℃和33℃组热应激处理的小鼠附睾内精子密度、顶体完整率和畸形率,随着热应激持续时间的延长都不断的增加,但都显著（P〈0．05）低于或接近（P〉0．05）对照组的水平。     

降温方法对种公牛稀释精液冷冻效果的影响

本试验对荷斯坦种公牛精液经稀释、分装、平衡后,分成两份,分别采用两种冷冻方法冷冻,将解冻后的精液进行活力、畸形率和顶体完整率等指标检测。结果表明,两种方法冷冻后各项指标差异显著(P0.05),且以方法1进行精液冷冻效果理想,有利于牛细管冻精的长期保存。     

维生素B_（12）注射液解冻牛的冻精试验

用ＶＢ１２注射液解冻牛的冻精与用０．９％氯化钠溶液、复方氯化钠溶液和２．９％柠檬酸钠溶液解冻牛的冻精进行比较，精子活力提高１６．２３％（Ｐ＜０．０１）、１５．４３％（Ｐ＜０．０１）和１２．６７％（Ｐ＜０．０５）；顶体完整率提高１４．１２％（Ｐ＜０．０１）、１３．０３％（Ｐ＜０．０１）和１１．０７％（Ｐ＜０．０５）；而精子畸形率和精清中ＧＯＴ活性均明显地降低（Ｐ＜０．０５）；精子存活时间延长。试验结果表明，用ＶＢ１２注射液解冻牛的冻精对精子形态结构有保护作用．是一种较理想的解冻液。     

微量元素对乳用公牛精液品质的影响

在原日粮的基础上，每头公牛每1d添加微量元素锌、碘和硒，可显著提高精子活力和精子顶体完整率，特别是原精活力提高了10．99％，营养剂对降低原精畸形率和提高精量也有一定的益处，但对原精密度反而有所下降。还需要进一步研究改进。     

应用精子分析系统进行牛冷冻精液检测的研究

本研究比较了人工检测与CASA系统分析两种检测方法在牛精液密度和活力之间存在的差异,同时列出了本试验得到的CASA系统分析的各项参数范围。在密度检测方面,人工检测结果(11.9×106个/mL)与CASA系统检测结果(11.3×106个/mL)之间差异不显著,CASA系统牛冻精活力分析结果(53.75%)显著高于人工检测结果(43.70%)。CASA系统分析的各项参数值范围是,VAP为85.95±17.06μm/s,VSL为70.39±18.14μm/s,VCL为151.30±25.93μm/s,ALH为6.98±1.88μm,BCF为30.47±2.92Hz,这些参数值为今后牛冷冻精液的CASA系统分析提供了可靠的参考依据。     

牛精液的贮存、解冻及品质检查

1冷冻精液的贮存和解冻方法牛的冷冻精液是以液氮做冷源进行贮存的,需要时可随时取出。为防止温度变化对精液品质的影响,取放动作要迅速,尽量减少在空气中停留的时间。从贮存容器中提取冷冻精液时,精液不应超过液氮容器的颈基部,避免因温度的回升造成精液解冻活率的下降。冷冻精液的解冻过程会影响精子的活力,要注意解冻的温度和操作方法。最初世界各国对解冻温度的要求不同,大体可分为高温40℃、室温15￣20℃和冷水10℃,当前认为40℃左右解冻效果最好。随着解冻温度的降低,精子活率有逐渐降低的趋势。颗粒精液解冻多采用将颗粒精液投入一定…     

不同解冻方法对猪冷冻精液品质的影响

为优化猪冷冻精液解冻方法、提高精液利用效率,试验采用两种不同的解冻方法解冻0.5 mL猪细管冷冻精液,一种在38℃水浴直接解冻30 s(1组),另一种在50℃水浴解冻16 s后再放到30℃水浴中静置40 s(2组)。对解冻后的精液分别进行精子活力、生存时间、顶体完整率的测定和顶体形态观察。结果表明：2组解冻精液的精子活力、顶体完整率极显著高于1组(P<0.01),但两组的生存时间差异不显著(P>0.05);精子顶体形态学观察发现,两组冻精的精子顶体膨胀、缺损情况都较严重。说明与38℃慢速解冻冷冻精液相比,50℃快速解冻的猪细管冷冻精液的精子活力好而且顶体完整率高。     

用TG染色检测德国牧羊犬冷冻精子顶体形态的研究

本文用TG染色检测德国牧羊犬冷冻精子顶体的形态。根据染色结果可将精子分为四类:a.有正常顶体活精子;b.无正常顶体活精子;c.有正常顶体死精子;d.无正常顶体死精子。冷冻精液效果存在着个体差异。顶体损伤率过高是导致犬冷冻精液受胎率低的主要原因。     

添加褪黑素对牛精液品质的影响

为探讨褪黑素(melatonin,MLT)在牛精液保存中的抗氧化作用,本研究利用目测法、低渗膨胀法和考马斯亮兰染色法分析了不同MLT浓度(0、10^-3、10^-4和10^-5 mol/L)和不同孵育时间(1、4和8 h)对精子活力、质膜和顶体完整性的影响。结果发现,与对照组相比,在稀释液中分别添加10^-3和10^-4 mol/L MLT均可显著提高精子活力、质膜完整率和顶体完整率(P＜0.05),且10^-3 mol/L MLT添加效果最佳;MLT(10^-3 mol/L)组在27 ℃孵育1、4 h后,其精子的活力、质膜完整率和顶体完整率均显著高于对照组(P＜0.05)。因此,添加10^-3 mol/L MLT可明显改善牛精液品质,提高牛精液的保存时间和保存质量。     

牛细管精液冷冻温度曲线的研究

牛冷冻精液精子复苏率的高低与原精质量、精子耐冻性、稀释液种类、稀释方法及精液冷冻和解冻速度等因素有关。其中，精液在冷冻过程中温度变化曲线是影响精子复苏率高低的重要因素之一。研究细管精液在不同条件下冷冻，精液温度变化曲线及精子复苏率变化的规律，优选出细管精液最适宜的冷冻温度曲线，可以为提高牛冷冻精液质量提供重要保障。     

波尔山羊除精浆冷冻精液的试验研究

以波尔山羊精液为试验材料,通过二步稀释法在降温前以葡萄糖-卵黄液为洗涤液,应用离心洗涤法对波尔山羊精液进行1000 r/min离心处理,制作细管冻精,并进行活力、顶体完整率、存活时间以及超微结构的观察分析.结果表明,经离心处理的冻精精子活率显著优于对照组(P<0.05),精子顶体完整率显著高于对照组(P<0.05),精子存活时间处理间差异不显著,除精浆可使精子所受冷冻损伤大为减轻,显著提高冻后精子品质.