陈旧褪色病理H.E.染色组织切片重新利用技术的探讨

在家畜病理学教学中和一些病理诊断中,常规H.E.染色切片质量的好坏直接影响病理评判结果。一些切片由于保存时间长久会逐渐褪色,使得显微镜下结构模糊、失真,影响病理疾病诊断的准确性。为了有效利用陈旧褪色病理H.E.染色组织切片,探讨陈旧褪色病理H.E.染色组织切片重新利用技术,采用4种方法(酸性高锰酸钾氧化-草酸漂白法、盐酸乙醇脱色法、氨水脱色法和常规H.E.染色法)对塔里木大学动物科学学院基础兽医实验室陈旧褪色的病理组织切片进行复染。结果表明:酸性高锰酸钾氧化-草酸漂白法复染的组织切片显微镜下细胞核呈蓝紫色,细胞质呈粉红色,复染效果最好;复染过程中酸性高锰酸钾氧化-草酸漂白法的掉片数最少,显著低于其他3种方法(P0.05);4种复染方法间组织完整率差异不显著(P0.05)。说明4种复染方法中酸性高锰酸钾氧化-草酸漂白法的复染效果最好。     

H.E.染色切片质量影响因素分析

H.E.切片染色是生物学和医学领域中组织学和细胞学等学科中最常见的切片染色方法。染色质量的好坏直接影响到细胞观察的科学性和病理学诊断的准确性。经过长时间的组织胚胎学 H.E.染色切片的制作实践 ,对影响石蜡切片 H.E.染色质量的因素进行了如下分析。1　取材固定　取材要新鲜、迅速、避免机械损伤、大小适宜、厚薄均匀。固定要及时、充分。固定液一般采用10 %中性缓冲福尔马林溶液和 Bonin氏液 ,但是检查糖元、黏液、尿酸结晶类物质最好用无水乙醇固定 ,固定 2 4～ 4 8h,最短不短于 30～ 6 0 min。固定时间应根据取材大小、性质以及…     

组织切片技术浅见

组织切片技术是兽医病理组织学诊断中常见方法之一.所谓组织切片,即取动物某一实体器官上的组织块用石蜡包埋,然后进行切片及染色的制片过程.在整个制片过程中,包括有取材与固定,脱水与透明,浸蜡与包埋,切片与粘片,染色与封固五大步骤.制作时,对每一步都必须认真对待,否则将达不到预期效果,甚至导致制片工作的彻底失败.笔者在多年的动物病理学教学和组织切片实践中体会到:组织切片技术必须把好以下6关.     

制作石蜡切片验证鸡胚盘显微注射外源DNA的效果

胚盘下腔是禽类胚胎发育到囊胚时出现的特有腔室,通过向禽类胚盘下腔注射外源细胞或基因是常用的制备嵌合体和转基因禽类的方法。本试验通过制备石蜡切片,验证胚盘下腔显微注射效果的方法。以白来航鸡种蛋为模型,向胚盘下腔中微注射少量的标记物,经过琼脂糖包埋脱水后制作石蜡切片,获得完整的鸡胚Ⅹ期胚盘切片。经过HE染色,可以观察到鸡胚Ⅹ期胚盘的上下胚层及胚盘下腔,鉴定标记物是否准确注入胚盘下腔中。结果表明利用本方法可以获取完整胚盘各个切面,准确检验胚盘显微注射效果,为改进显微注射方法和提高转基因禽类制备效率提供新的有利途径。     

意大利蜜蜂蜂王卵巢组织观察方法的探究

采用石蜡切片技术配合以光学显微镜观察,通过设置不同试验条件对适合意大利蜜蜂蜂王卵巢组织的石蜡切片制作及染色方法进行了探究。结果显示:用甲醛固定液常温固定8 h、水浸洗30 min的卵巢组织在58℃恒温箱条件下浸蜡,苏木精和伊红处理时间均为8 min时的切片效果最好,说明卵巢组织对固定剂以及浸蜡时的温度和染色时间是有选择的,只有在最佳的试验条件下制得的石蜡切片才能避免组织破碎,保证其染色效果良好从而更好的观察其组织结构。     

四氯联苯对鸡胚性腺原始生殖细胞的毒性影响

采用四氯联苯处理发育至Ⅹ期的白来航鸡种蛋,孵化5.5天后取出胚胎进行全固定,用石蜡切片和PAS染色(高碘酸希夫试剂)研究四氯联苯对鸡胚性腺原始生殖细胞(PGCs)的影响.结果表明,四氯联苯对发育至5.5日胚龄的鸡胚性腺PGCs数量和结构有明显影响,但雌二醇处理的5.5日胚龄鸡胚PGCs数量变化不显著,其结构无明显变化.表明四氯联苯对5.5日胚龄的鸡胚性腺PGCs的影响主要来自于其毒性作用.     

鸡传染性喉气管炎的病理组织学观察

目的:通过观察、分析鸡传染性喉气管炎在病理组织学上的变化,从而为鸡传染性喉气管炎的发病过程、组织学病例变化提供具有可靠性的研究依据。方法:随机选取6例患有鸡传染性喉气管炎症状的病鸡作为研究对象,采取常规实验室方法对病鸡的症状进行确诊。并随机选取6例健康鸡作为对照。对病鸡的喉结、气管进行采样并按照相关操作标准制作成石蜡切片。对石蜡切片进行染色时采用H.E.方法,观察并组织在病理学上的变化。对健康鸡的也采取如上方法制作切片。结果:在患上鸡传染性喉气管炎后,病鸡喉结黏膜上皮组织细胞间变得十分疏松,对原有腺体结构产生了破坏,其喉结组织结构、气管组织结构均会有比较明显的膨胀、肿大及脱落现象出现,还会伴有炎性浸润现象。     

动物组织块染色石蜡包埋制片法

动物组织块染色石蜡包埋制片法任成林（张家口农业高等专科学校河北张家口０７５１３１）组织块染色石蜡包埋制片法，是将组织的染色，改放在组织包埋切片之前进行，组织切片后不再染色，直接贴片至封固，即成永久标本。这种方法的优点是，简化了切片制作程序，节省药液。...     

动物组织块染色石蜡包埋制片法

动物组织切片的制作,是教学、科研和病理检验中的一项经常性工作。但在大批制作时,由于程序繁多,所以工作效率不高。为了简化制作过程,提高工作效率,笔者进行了组织块染色石蜡包埋制片法试验。是将组织的染色,改放在组织包埋切片之前进行,组织切片后不再染色,直接贴片至封固,即成永久标本。     

绵羊卵巢组织石蜡切片制作条件优化研究

为观察绵羊正常卵巢组织的形态结构，采用苏木精-伊红（hematoxylin-eosin ，HE）染色法制作绵羊卵巢组织石蜡切片。结果显示，在切片制作过程中存在的问题主要包括染色不均、染色对比不明显、过度染色、染色过浅和切片出现斑点等。在试验过程中可通过充分分化、蓝化、充分水洗等因素的控制来提高切片的染色效果，该方法可为动物卵巢及卵泡染色切片制作提供技术指导。     

畜禽肠道组织H.E.染色石蜡切片制作要点及关键技术

通过研究畜禽肠道的发育,能够更好地了解机体的生长发育状况,对研制科学的饲粮配方具有指导意义。而组织切片就是检验肠道发育的一种基础且常规的实验室技术。近年来,虽然研究者对传统组织切片技术进行了全面的研究,但是因为动物品种和组织的差异、取样方法的不同,不同人制作的切片质量参差不齐。笔者参考大量文献资料,结合在试验过程中积累的经验,对畜禽肠道组织苏木精-伊红(H.E.)染色石蜡切片制作程序及各程序的注意事项进行综述,以期提高肠道组织切片的质量。     

白花蛇舌草多糖对AA鸡免疫器官发育的影响

本试验旨在探讨白花蛇舌草多糖（OPS）对AA鸡免疫器官发育的影响。试验组在基础日粮中分别添加OPS 0．4g／kg、08g／kg、1．2g／kg,以在基础日粮中添加0．4g／kg黄芪多糖（APS）为阳性对照,饲喂7日龄AA鸡一周。分别在14日龄、28日龄与42日龄时采取胸腺、脾脏和法氏囊,制作常规石蜡切片、HE染色后观察。结果表明,实验组鸡脾脏淋巴小结增多,动脉周围淋巴组织鞘增宽;胸腺皮质增厚和法氏囊淋巴滤泡皮质增厚,淋巴细胞增多。随着OPS添加剂量增大,对AA鸡脾脏和法氏囊发育的促进作用增强。可见,白花蛇舌草多糖能促进AA鸡的脾脏、胸腺和法氏囊发育。     

组织切片技术在兽医诊断中的应用和常见问题的分析

正利用组织切片技术进行病理诊断是兽医学中最具权威性的诊断方法之一。所谓组织切片,即取动物某一实体器官上的组织块用石蜡包埋,然后进行切片及染色的制片过程。在整个制片过程中,包括有取材与固定,脱水与透明,浸蜡与包埋,切片与粘片,染色与封固五大步骤。制作时,对每一步都必须认真对待,否则将达不到预期效果,甚至导致制片工作的彻底失败。病理诊断的准确性,一方面取决于兽医师的技术水平,另一方面     

肉鸽法氏囊、脾脏和胸腺的形态学、组织学观察

[目的]为今后研究肉鸽免疫功能提供其免疫器官的形态学、组织学观察依据。[方法]选取40日龄的肉鸽,摘除法氏囊、脾脏和胸腺进行形态学观察;通过制作常规石蜡切片,苏木精—伊红染色,显微照相进行组织学观察。[结果]40日龄肉鸽法氏囊黏膜上皮完整,黏膜固有层腔上囊小结数量减少,体积变小,中间出现空泡,淋巴细胞减少;法氏囊小结中皮质和髓质界限不明显,小结周围有大量的结缔组织增生,导致法氏囊免疫功能降低。脾脏各组织结构发育趋于完善,细胞排列紧密。胸腺髓质中淋巴细胞较少,可见胸腺小体;皮质中淋巴细胞较多。[结论]40日龄的肉鸽法氏囊开始萎缩,免疫功能降低,而脾脏和胸腺免疫功能正常。     

动物组织H.E.染色中常见的问题及解决方法

高质量的H.E.染色切片可为临床病理诊断及动物(含人体)组织结构形态教学、科研提供可靠的依据。制作一张好的H.E.染色切片既要有熟练的技术、合格的标本,还要有良好的试剂等,在制作过程中组织标本的采集、固定、切片、展片、烤片、染色等工序都要严格操作。笔者从动物组织的采集、脱水、透明、切片、防脱片和染色等方面分析了制作高质量H.E.染色切片的常见问题及处理方法,以期为病理诊断、动物(含人体)组织学实验教学及医学药理研究提供可靠的依据。     

死亡番鸭胚中绿脓杆菌的分离鉴定及药敏试验

绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)也称铜绿假单胞菌,是假单胞菌属的代表菌种,是具有荚膜、鞭毛和无芽孢的革兰阴性杆菌.该菌广泛分布于自然界,对环境抵抗力较强,是常见的条件致病菌之一.随着家禽养殖业的不断规模化发展,绿脓杆菌感染家禽变得越来越常见,对养殖业造成一定的损失.近年来,本病在辽宁、北京、天津、河北、四川和福建等地均有发生,其主要原因是注射污染、环境恶劣、营养不良、运输等应激因素[1].在关于绿脓杆菌致死胚的报道中,最常见的是对鸡胚的侵害[2-4],其次是对鹅胚[5],但目前对番鸭胚的侵害未见报道.     

早期鸡胚血涂片制作方法的改进

传统的鸡胚血涂片制作方法是将体外孵化48-55 h鸡胚的胚盘取下,置于载玻片上,右手持一单面刀片,切断胚盘尾端的终窦区(即尾部边缘静脉区),胚血便流出到载玻片上,然后制作血涂片[1].这种方法的缺点是采血量少(采血量决定胚血涂片的数量)且胚血易被组织碎片、卵黄颗粒污染(污染程度决定胚血涂片的质量).为此,本试验对此方法进行了改进,以弥补其不足.     

镉致鸡胚胫骨软骨发育不良的研究

为了研究镉对鸡胚胫骨软骨发育的影响,选取体重相近的SPF鸡胚120枚随机分为4组,每组30枚,孵化6 d后在鸡胚气室打孔,其中对照组向卵黄囊注射PBS50μL,其他3组分别向卵黄囊注射0.05、0.1和0.2 mg/mL醋酸镉50 μL,处理10d,通过石蜡切片HE染色、阿利新蓝染色观察胫骨软骨发育情况;扫描电镜观察软...     

禽流感群特异性间接原位RT-PCR检测方法

从GenBank下载禽流感病毒(Auian in fluenza virus,AIV)NP基因序列,通过比对选取NP基因中较为保守的片段,设计1对引物,通过RT-PCR方法扩增270 bp的目的片段,经测序确认目的片段序列正确后,用地高辛标记扩增产物制备探针.在BSL-3实验室,用AIV人工感染鸡胚成纤维细胞和SPF鸡后,制作细胞涂片和组织石蜡切片,然后在经前处理后的细胞涂片和石蜡切片上进行原位RT-PCR,再与地高辛标记的探针进行原位杂交,对细胞和组织中的AIV进行检测和定位.研究结果表明,本方法能检测出约1μg/L质粒的DNA,并能特异性地在细胞涂片和石蜡组织切片中检测和定位AIV,且成纤维细胞感染病毒8 h后即可检测到阳性信号,具有良好的特异性和较高的敏感性,为动物组织中AIV的检测定位和致病机理研究提供了敏感、特异和更为直观的方法.     

鸽常规石蜡切片制作技术的体会及改良

为了使传统的石蜡切片技术满足病理研究与诊断的需要,针对鸽的石蜡切片制作过程中易出错的环节,探讨制作优良鸽石蜡切片的具体方法,对制作过程中取材、固定、修整、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色及封固等步骤进行改良,镜检结果表明获得了高质量的石蜡切片。