半红树植物苦槛蓝内生真菌的分离及 抗植物病原菌活性研究

为寻找新的抗植物病原菌微生物资源,以苦槛蓝为对象开展了研究。从其叶、叶脉、茎、树皮、根共分离 到104 株内生真菌。经形态学初步鉴定,它们主要属于无孢类群、盘长孢属、青霉属、枝孢霉属和曲霉属。生物活性测 试表明,所分离到的苦槛蓝内生真菌中有77.9%对包括小麦赤霉、大豆疫霉、香蕉炭疽和柑橘青霉中至少1 种植物病 原菌显示抑制活性,42.3%和11.5%的菌株对上述植物病原菌中的至少1 种分别达到了中度抗菌和强烈抗菌。高效 液相测试显示苦槛蓝提取物与5 种具有强烈抗菌活性的苦槛蓝内生真菌提取物的谱图差异显著,表明这些内生真 菌产生了不同于原植物代谢产物的新的抗植物病原菌活性物质。     

1株红树内生真菌Fusarium sp.代谢产物的研究

【目的】研究红树林镰刀菌属真菌Fusarium sp.R5的代谢产物。【方法】采用硅胶柱层析分离纯化代谢产物,波谱技术鉴定结构,滤纸片扩散法测试抗植物病原真菌活性。【结果】分离鉴定5-羟甲基-2-呋喃甲醛(化合物1),(3R,4R)-顺-4-羟基蜂蜜曲菌素(化合物2),(3R,4R)-顺-4,7-二羟基蜂蜜曲菌素(化合物3),Clavatol(化合物4),酒渣碱(化合物5),麦角甾-4,6,8(14),22-四烯-3酮(化合物6),β-谷甾醇(化合物7)、3β-胆甾-5-烯-3-醇(化合物8)、丁二酸和顺丁烯二酸10个化合物。在250μg·m L~(-1)时,化合物5对香蕉炭疽菌Colletotrichum musae高度抗菌,化合物5和6对番茄枯萎菌F.oxysporum、小麦赤霉菌F.graminearum中度抗菌。【结论】从Fusarium属分离得到化合物1~8,其中,化合物5、6可作为相应农药抗菌先导化合物开展深入研究。     

一株南海木榄内生真菌 (Gloesporium sp.)代谢产物的研究

从1株木榄内生真菌(Gloesporium sp.)中分离得到4个化合物,利用波谱技术确定其结构分别为环(甘-苯丙)二肽(1)、环(苯丙-酪)二肽(2)、3-(2-甲基丙基)-2,5-哌嗪二酮 (3)、苯丙酸(4),其中化合物3、4为首次从海洋真菌中分离得到.     

1株高活性三尖杉内生真菌的筛选及代谢产物

为了获得抗菌活性较好的菌株,以9种植物病原真菌为指示菌,采用滤纸片法对分离自三尖杉茎、叶、种皮的61株内生真菌进行抗菌活性研究,分离得到抗真菌活性物质并对菌株发酵液的乙酸乙酯提取部分进行化学成分预试验.结果表明:筛选出1株高活性菌株Se01,经形态学鉴定和18S rDNA序列分析,确定为曲霉属(Aspergillus piperis),其代谢产物主要有生物碱、甾体、萜类、有机酸、内酯、蒽醌类、氨基酸、糖等成分.这些物质大多有较强的活性,能为植物抗病提供来源.     

苦槛蓝挥发油化学成分的研究

利用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术对苦槛蓝Myoporum bomiodes挥发油的化学成分进行了研究,利用GC分离出56个组分,按MS谱图初步确认了其中的47种成分,占挥发油总组分的89．98％．鉴定的化合物中,44．71％为倍半萜类,其他为单萜类、脂肪酸、醇类、酮类、醛类及醚类等．     

蒿属植物内生真菌Penicillium sp.抗癌活性产物的液体发酵工艺优化

编号为GZUCCZY0012的青霉属内生真菌Penicillium sp.代谢产物中的物质A疑似为青蒿素类化合物,体外抗癌实验表明物质A对人前列腺癌细胞PC3和人非小细胞肺癌细胞A549具有中等的细胞毒活力。本实验以物质A的含量为主要指标,通过单因素实验和正交实验的考察,并结合PB和中心组合设计,优化确定了适合物质A积累的GZUCCZY0012液体发酵培养基和培养条件。研究结果表明:GZUCCZY0012发酵生产物质A的最优培养基为麦芽糖47.52 g/L、NH4Cl 14.82 g/L、K2HPO41.5 g/L、MgSO42.0 g/L、KCl 2.0 g/L、ZnSO40.5 g/L、CaCl20.5g/L、FeSO40.5 g/L,pH 6.0,接种量4%(V/V),于26℃下摇瓶发酵14 d,物质A的产量可以达到(144.61±7.56)μg/mL,比优化前的含量(32.30±2.28)μg/mL提高了3.48倍。     

苦槛蓝抽提物对菜青虫生物活性的影响

报道了苦槛蓝油抽提物对菜粉蝶幼虫拒食、毒杀和影响生长发育作用的生物活性。试验表明ρ＝１０ｇ／Ｌ的苦槛蓝叶、茎浸提物对菜粉蝶３龄幼虫的非选择性拒食率均在９０％以上,对４龄和５龄幼虫的拒依率分别为８０％￣８６％和４６％￣６５％．Ｐｏｔｔｅｒ喷雾处理７２ｈ后,ρ＝１０ｇ／Ｌ叶甲醇浸提物对３龄幼虫的校正死亡率可达８６．１,而ρ＝１０ｇ＝／Ｌ叶石油醚浸提物对４龄幼虫的校正死亡率则为８８．５％。用苦槛蓝叶氯仿     

植物内生真菌次生代谢产物研究进展

综述了近5年来对植物内生真菌次生代谢产物的研究进展,对内生真菌次生代谢产物在抑菌、杀虫、抗肿瘤活性、对植物生长调节作用及其他活性等方面进行了概述,并就其研究中存在的问题和今后可能的研究方向做了一些探讨。     

内生真菌2K3代谢产物抗菌活性研究

研究了从苦皮藤根皮中分离的一株编号为2K3内生真菌代谢产物的杀菌活性。生物测定结果表明，2K3菌株菌丝体的甲醇和乙酸乙酯提取物对多种植物病原真菌具有较强的抑菌活性。其中，甲醇提取物的抑菌活性比乙酸乙酯提取物强，在1 000μg/mL浓度下对烟草赤星病菌、马铃薯干腐病菌、小麦赤霉病菌、苹果炭疽病菌、玉米大斑病菌的菌丝生长抑制率均大于90%；抑制孢子萌发法试验结果表明，2K3菌株菌丝体的甲醇提取物对烟草赤星病菌玉米大斑病菌和马铃薯干腐病菌的EC50分别为59.4μg/mL、96.5μg/mL和132.5μg/mL；管碟法生测结果表明，2K3菌株菌丝体的甲醇提取物对枯草芽孢杆菌和蜡状芽孢杆菌的抑菌圈直径分别为20 mm和27 mm；盆栽试验结果表明，2K3菌株菌丝体的甲醇提取物在2 000μg/mL浓度下对小麦白粉病的治疗和保护作用均在70%以上。     

两株红树林真菌共培养液抗植物病菌成分研究

从南海红树林内生真菌E33和K38混合发酵液提取物中寻找有抗植物病原菌活性的化合物,利用硅胶柱层析共分离得到6个化合物,用波谱技术分别鉴定后,确定为对苯二甲酸二甲酯、4-甲氧酰基苯甲酸乙二醇酯、4-甲基-2-甲酰基-3,5-二羟基苯甲酸乙酯、rubramin、对羟基乙酰苯乙胺和尿嘧啶。4-甲基-2甲酰基-3,5-=羟基苯甲酸乙酯首次以天然产物的形式被发现,并首次报道了其2D-NMR数据,生测结果表明其对小麦赤霉、大豆疫霉具有中等的抗菌活性。     

珍珠相思叶状柄水提物的化感效应研究

探讨不同浓度珍珠相思叶状柄的水提液对3 种茄科植物（番茄、茄子和辣椒）生长的影响。通过种子萌 发试验,测定不同浓度叶状柄水提液对受体植物的化感效应指数、萌发率和幼苗生长特性影响,分析是否存在化感 效应和潜在的生态风险。低浓度（0.02 g/mL）叶状柄水提液条件下,茄子种子萌发率的化感指数为0.06;番茄的芽长 化感效应指数和综合指数分别为0.37、0.09,而较低浓度（0.04 g/mL）下分别为0.30 和0.01,表现为一定的促进作用; 此外的其他指数均为负值,体现出较强的抑制作用。叶状柄水提液中所含的化感物质对3 种茄科植物种子萌发及幼 苗生长表现有所不同。不同浓度水提液对番茄幼苗生长具有低促高抑的双重浓度效应,而对辣椒和茄子幼苗生长均 具明显的抑制作用,且在其作用范围内具有浓度依赖性。     

AB-8大孔吸附树脂纯化苦槛 蓝黄酮的工艺研究

苦槛蓝中含有丰富的黄酮类化合物,极具开发利用价值。通过静态及动态吸附解吸试验,研究了苦槛蓝 黄酮的大孔树脂分离纯化工艺。结果表明,AB-8 型树脂对苦槛蓝黄酮有较好的吸附和分离效果,其最佳纯化条件 为：上样液浓度8 mg/mL,上样量35 mg/g 树脂,pH 值4.86,用20%、40%、60%乙醇梯度洗脱,洗脱剂用量为2、2、4 BV。40%洗脱液中苦槛蓝黄酮的含量达43.15%,黄酮回收率为79.00%。     

苦槛蓝提取物对芒果炭疽菌和香蕉尖孢镰刀菌的抑制作用

研究了苦槛蓝不同溶剂提取物对芒果炭疽菌抗药性菌株、敏感菌株及香蕉尖孢镰刀菌的抑制作用。结果表明,乙醇、乙酸乙酯、丙酮提取物的抑菌作用显著优于石油醚提取物,芒果炭疽病抗药性菌株对苦槛蓝不同溶剂提取物没有明显的抗药性。苦槛蓝丙酮提取物对芒果炭疽病菌敏感菌株(ZJS)、抗药性菌株(ZJR)及香蕉尖孢镰刀菌有效中浓度EC50分别为26.29 mg/mL、21.37 mg/mL和23.56 mg/mL。     

一株银杏内生炭角菌的抗氧化活性研究

采用正己烷、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、甲醇5种溶剂分别提取银杏内生炭角菌YX-28的子座粉末,测定各提取物中的总酚和总黄酮含量,并通过二苯基苦基苯肼(DPPH)和β-胡萝卜素/亚油酸模型评估其抗氧化活性,以期获得一种新型、高效、安全的抗氧化剂来源.结果表明提取物中总酚和总黄酮含量均与抗氧化活性存在正相关关系,甲醇提取物具有最高的总酚和总黄酮含量,分别为(54.51±1.05)mg·g-1(没食子酸当量)和(86.76±0.58)mg·g-1(芦丁当量).在β-胡萝卜素/亚油酸试验中,400 μg·L-1的YX-28甲醇粗提物具有72.90%的抑制活性,显著高于阳性对照二丁基羟基甲苯(BHT)和抗坏血酸(AsA);而在DPPH自由基清除试验中则显示中等活性.通过气相色谱-质谱联用法(GC/MS)分析鉴定了甲醇提取物中的41种物质,其占总提取物的64.65%.     

一株楸树内生真菌的鉴定及其发酵产物抗肿瘤特性研究

利用传统分类学方法、ITS序列测定和系统发育分析方法对一株分离自楸树抗肿瘤活性内生真菌FSNQ0023进行分类鉴定,并对其产物抗肿瘤活性及其细胞毒性进行了初步研究。结果表明,各种指标鉴定其为木霉属真菌(Trichoderma sp.)中的一种,该菌株经发酵培养120h,抗肿瘤活性最强;其对肝癌细胞HepG2的IC50约为正常肝细胞HL-7702的1/2;60℃处理2h后活性稳定。这些特性为活性产物的分离纯化提供了重要数据,也为抗肿瘤新药开发提供了依据。     

1株红树内生真菌高粱附球菌Epicoccum sorghinum的代谢产物及抗菌活性

【目的】研究红树内生真菌高粱附球菌Epicoccum sorghinum L28的代谢产物及其抗真菌活性。【方法】柱层析分离纯化代谢产物,波谱技术鉴定结构;二倍稀释法测试代谢产物对小麦赤霉菌Fusarium graminearum和番茄枯萎菌F. oxysporum的最小抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC)。【结果】分离鉴定出7-羟基-2,5-二甲基色原酮(化合物1)、Livistone A(化合物2)、Barceloneic acid A(化合物3)、Barceloneic lactone(化合物4)、2′-O-methylbarceloneate(化合物5)、Spirostaphylotrichin R(化合物6)、 Spirostaphylotrichin U(化合物7)、β-谷甾醇(化合物8)、β-胡萝卜苷(化合物9)和β-腺苷(化合物10)。化合物1能强烈抑制小麦赤霉菌和番茄枯萎菌的生长,MIC均为100μg/mL;化合物5对番茄枯萎菌的生长具有中等抑制作用,MIC为200μg/mL。【结论】化合物1和化合物5可作为相应抗菌农药...     

南海红树林内生真菌Gx—3c代谢产物研究

为研究南海红树林内生真菌Gx—3c的代谢产物,采用反复硅胶柱色谱法、Sephadex LH—20凝胶色谱法等进行分离纯化,并通过理化常数测定和光谱分析鉴定其化学结构。结果表明:从南海红树林内生真菌Gx—3c的菌体中分离得到6个代谢产物,经波谱解析鉴定,分别为:8—O—methylbostrycoidin(1),环(酪—亮)二肽(2),环(苯丙—丙)二肽(3),5,7—二羟基—2—甲基色原酮(4),环(脯—甘)二肽(5),麦角甾醇(6)。结论:所有化合物均首次从南海红树林内生真菌Gx—3c中分离得到。     

发光杆菌Photorhabdus sp.1029 发酵液抑菌活性研究

测定了发光杆菌1029发酵液对10种常见植物病原菌的抑菌活性,并初步研究了温度、pH值和紫外线对发酵液活性的影响.结果表明,发光杆菌1029发酵液的抑菌谱较广,其对拟茎点病菌、荔枝霜疫霉病菌、马铃薯环腐病菌和烟草青枯病菌抑制作用较强.发酵液活性组成中既有耐高温、紫外线的成分,也有对两者敏感的成分,但在pH7～8时抑菌作用最强.