辣椒离体培养和植株再生体系建立

选3种不同基因型的辣椒(Capsicum annuum L.)材料,建立了辣椒高频离体再生体系,试验结果表明:芽分化的最适培养基为:MS 6-BA 5 mg/L I AA 0.2 mg/L;芽伸长的最适培养基为MS 6-BA 5 mg/L I AA 0.2 mg/L GA3 2 mg/L;生根的最适培养基为MS NAA 0.1mg/L,当植株长到10～12片叶时,进行移栽.     

红叶石楠离体培养与高效再生体系建立

以红叶石楠(Photinia×frasery)带芽茎段、叶片为外植体,对其启动培养、叶片愈伤诱导与分化、芽增殖、生根培养及试管苗驯化等技术进行了较为系统的研究,建立了红叶石楠离体培养的高效再生体系。结果表明,幼茎启动培养适宜培养基为MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L+GA0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,诱导率达63.3%;叶片愈伤诱导适宜的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+2,4-D1.0mg/L+NAA1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,愈伤诱导率达86.0%;愈伤分化不定芽的适宜培养基为N6+6-BA1.5mg/L+IAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,诱导率达21.6%,增殖率为1.4倍;芽增殖培养适宜的培养基为MS+6-BA3.0mg/L+KT0.5mg/L+NAA0.3mg/L+GA0.7mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,最高增殖率达6.1倍;生根培养方法为用25mg/LNAA溶液浸泡0.5～1.0h后接种于1/2MS培养基中,生根率达93.4%以上;试管苗驯化的适宜混合基质为泥炭∶珍珠岩=3∶1,成活率可达96.7%。     

贯叶金丝桃离体培养及植株再生体系的建立

[目的]研究贯叶金丝桃的组培快繁技术,以提高其繁殖率和生根率,并建立一套高效的离体培养再生体系。[方法]以贯叶金丝桃幼芽为外植体,对适宜的丛生芽繁殖和生根培养基进行了筛选。[结果]适宜的繁殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IAA 0.1 mg/L;适宜的生根培养基为1/2 MS+IAA 0.5 mg/L+ABT 0.2 mg/L。[结论]研究结果为贯叶金丝桃的种质保存和良种选育工作奠定了基础。     

辣木离体再生体系的建立

以辣木种子为外植体,诱导获得无菌苗,然后通过用无菌苗的嫩茎诱导愈伤组织分化不定芽,再将不定芽诱导生根,获得完整植株,建立辣木的离体再生体系。结果表明,适合辣木种子诱导无菌苗的培养基为MS_0,诱导率达95%;适合无菌苗茎段诱导愈伤组织的培养基为MS+2,4-D 0.8 mg/L+KT 0.2 mg/L,诱导率达87.03%;适合愈伤组织分化不定芽及不定芽增殖的培养基为改良MS+6-BA0.6 mg/L+IAA 0.2 mg/L,芽分化率达83.33%,芽增殖系数达4.2;适合不定芽生根的培养基为1/3MS+IBA0.5 mg/L+NAA0.2 mg/L,生根率达92.7%,平均根数达5.78。     

百合离体培养与植株再生体系的建立

以香水百合鳞叶为外植体,探讨不同外源激素水平对其小鳞茎分化、增殖与不定根形成的影响。结果表明:以MS+6-BA 0.5~1.0mg/L+IAA 0.1~0.3mg/L培养基的不定芽分化、增殖效果好,分化率达78.5%以上,增殖系数达5.6以上;1/2MS+6-BA 0.1mg/L+IAA 0.5mg/L或1/2MS+6-BA 0.1mg/L+NAA 0.1~0.3mg/L或1/2MS+6-BA 0.1mg/L+IBA 0.8mg/L的生根效果好,生根率可达96.0%以上;在泥炭∶珍珠岩=1∶1的基质中驯苗,成活率可达96.3%。     

姜花离体再生体系的建立

为建立姜花离体再生体系,对姜花离体培养过程中种子萌发诱导与不定芽增殖培养基的筛选,以及试管苗生根、移栽等关键技术进行了试验。结果表明:诱导外植体萌芽的最适培养基为MS;培养基MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L利于诱导丛芽及增殖,芽的增殖系数可达4.76,培养基1/2 MS+IBA 0.5 mg/L适宜再生苗的生根诱导。     

白木香离体培养及高频率植株的再生

以野生白木香Rosa banksiae var. Normalis茎段为外植体,探讨了不同生长调节物质对外植体分化、增殖和生根的影响,并对栽培基质与移栽技术进行研究.结果表明,利于白木香分化的诱导培养基为MS 2.0 mg·L-16-BA 0.1 mg·L-1NAA;MS 2.0 mg·L-16-BA 0.05 mg·L-1NAA作增殖培养基效果最好,增殖率为5.5;利于生根的培养基为1/2MS 0.2 mg·L-1IBA 0.2 mg·L-1NAA;移栽基质为蛭石 珍珠岩 腐叶土(1:1:1)效果最好,成活率98%,且苗生长健壮.建立了白木香高效再生体系.表4参10     

北五味子丰产株系离体培养及高效植株再生体系的建立

以北五味子新生嫩芽作为外植体,应用均匀设计法筛选其最适宜的基部直接再生芽苗和诱导芽苗生根的预处理培养基,结果表明:最适合基部直接再生芽苗的诱导培养基为ER+反式ZT2.20mg·L-1,芽苗诱导率为92%;茎段生根的预处理培养基为1/8MS+IAA0.80mg·L-1+KT0.50mg·L-1;以再生芽苗的节段为材料进行快繁,将节段在芽苗生根的预处理培养基上培养48h,取出后进行30d的砂培,其生根率达95%以上.     

蜡梅的离体培养与植株再生

以蜡梅种子无菌苗子叶作为外植体,以改良MS和MS作为基本培养基,添加不同激素组合,筛选出诱导蜡梅愈伤组织产生和分化的最佳培养基,建立蜡梅的再生体系.试验结果表明,改良MS＋6-BA 1.0 mg/L＋NAA0.5 mg/L＋KT 0.5 mg/L＋IBA 0.2 mg/L＋2.4-D 0.2 mg/L能诱导蜡梅愈伤组织的产生和分化,再生植株在改良MS＋6-BA 1.0 mg/L＋NAA 0.1 mg/上增殖系数最高,能达到2.7.1/2 MS＋NAA 0.1 mg/L能有效促进蜡梅生根,生根率在70%以上,而在未添加NAA的1/2 MS中生根率为10%.     

甘薯根倒置离体培养再生植株

以6个甘薯品种的根为外植体,研究了平铺和倒置培养对根分化成苗的影响。结果表明,粗根较细根易分化芽;根的倒置放置比平铺培养更利于芽的诱导,最高诱芽率达100%,平均诱芽率50%以上,较平铺放置方式诱芽率高出13.9个百分点。同时,倒置放置平均成芽数7个,而平铺培养只有3个。     

利用茎尖不定芽建立朝鲜蓟高效再生体系

为建立稳定、高效的朝鲜蓟植株再生无性繁殖体系，以农艺性状好、无病毒的朝鲜蓟茎尖为外植体，研究消毒方法、培养基、植物生长调节剂对朝鲜蓟组培苗增殖及生根的影响。结果表明：将朝鲜蓟的茎尖用70%乙醇消毒10 s，再用0.1% HgCl2(每1 000 mL该溶液加2滴吐温80)处理8 min的外植体消毒方式效果最好，接种污染较小；最适合朝鲜蓟离体培养的基本培养基为EM培养基，6–BA诱导朝鲜蓟丛芽增殖的效果比KT和2–ip好，在EM中添加1 mg/L 6–BA+0.5 mg/L NAA的培养基最适合朝鲜蓟茎尖初代培养；在丛生芽的继代培养中，以添加0.5 mg/L NAA的效果最佳，以GM为基本培养基，添加1.0 mg/L NAA+1.0 mg/L β–CD的生根效果好，生根率达99.3%，且移栽后成活率达90 %以上。     

香水百合鳞片组织培养再生体系的建立

为了建立稳定的百合组织培养再生体系,选用香水百合鳞茎的鳞片作为外植体,对激素的种类和浓度、鳞片在鳞茎中的部位等对小鳞茎诱导的影响进行研究.结果表明,植物激素的种类和浓度对鳞茎的诱导和生根有显著影响,诱导鳞茎和生根的最适培养基为l/2MS 2.O mg/L 2,4-D O.5 mg/L NAA O.5 nlg/L KT.,鳞片的部位对鳞茎和愈伤组织的诱导也有显著的影响,其中内部鳞片的分化能力大于中部和外部鳞片.     

文心兰高效再生体系的建立

[目的]建立文心兰高效再生体系,为利用转基因技术进行品种改良提供科学依据.[方法]以文心兰柠檬绿的无菌苗叶片为材料,探讨不同植物生长调节剂配比对其原球茎诱导的影响,开展增殖、生根及移栽研究,建立其高效稳定的再生体系.[结果]影响文心兰原球茎诱导的3种植物生长调节剂主次排序为萘乙酸(NAA)>噻苯隆(TDZ)>6-苄氨基嘌呤(6-BA),在1/2MS培养基中添加0.5 mg/L NAA、0.5 mg/L 6-BA和0.3 mg/L TDZ的诱导率最高,达48.0%.培养基中活性炭含量及碳水化合物种类对文心兰原球茎增殖的影响存在明显差异,不同活性炭含量处理间的原球茎增殖系数存在显著差异(P<0.05,下同),添加1.0 g/L活性炭较添加0.5 g/L活性炭的增殖系数显著升高,不同碳水化合物种类间的原球茎增殖系数排序为海藻糖>麦芽糖>蔗糖,最佳增殖和分化培养基为1/2MS+4.0 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA+1.0 g/L活性炭+20 g/L海藻糖.添加10%椰子水的文心兰幼苗生根数显著高于添加10%香蕉汁和10%苹果汁,每株平均生根量接近4.00条,即生根效果最佳的培养基为1/2MS+0.8 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+10%椰子水.移栽过程中根部用水苔包裹后再移至椰糠中,保证光照、水分适宜,适当添加缓释肥,移栽成活率可达100%.[结论]利用海藻糖或麦芽糖作为碳源的文心兰原球茎增殖效果较优,生根数和生根质量优势明显;不同植物生长调节剂配比、碳源和有机物的添加对文心兰组织培养具有明显的促进效果.     

二倍体马铃薯野生种高效再生体系的建立

以二倍体马铃薯野生种(Solanum cardiophyllum)的叶片和茎段为材料,进行离体再生体系的研究.结果表明,叶片和茎段愈伤组织最适诱导培养基分别为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L和MS+6-BA 2.0 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L,平均诱导率分别达93.75%和99.26%;来源于叶和茎段的愈伤组织不定芽分化的最适培养基分别为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA<,3> 2.5 mg/L和MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+GA<,3> 5.0 mg/L,不定芽平均分化率达96.43%和97.25%.生根培养基以MS+NAA 0.3 mg/L效果最好,平均生根率达100%.     

野生黄蔷薇离体培养再生体系的建立

就野生黄蔷薇的离体培养再生体系进行了研究,结果表明,适于黄蔷薇分化的诱导培养基为改良MS附加AgNO33.0 mg/L、6-BA1.5 mg/L、NAA0.5 mg/L、琼脂6.5g/L、蔗糖30 g/L,最高分化率达94%,以改良MS附加AgNO33.0 mg/L、6-BA1.5 mg/L、NAA0.05 mg/L、琼脂6.5 g/L、蔗糖30 g/L作增殖培养基效果最好,增殖倍数为4.5;适于生根的培养基为改良1/2MS附加AgNO34.5 mg/L、IBA 0.2 mg/L、0.2%活性炭、琼脂4.0 g/L、蔗糖20 g/L,生根率达90%。     

苋菜高效离体再生体系的建立

以苋菜种子为材料,进行苋菜离体繁殖研究.结果表明:苋菜种子经过75％酒精消毒1 min,再用升汞消毒8 min,在MS培养基上的萌发率可达87％以上;从无菌苗切取带2片子叶的下胚轴,在MS +3.0 mg·L-1 6-BA +0.2 mg·L-1 NAA培养基上诱导不定芽的效果最好;不定芽在MS +3.0 mg·L-1...     

Vertebrate regeneration system: culture in vitro

With standard tissue-culture techniques and media, various components of the lizard tail regenerate have been maintained in culture for 8 months. Differentiation of two cell types, melanophores and striated muscle, has been obtained. Myoblast proliferation and fusion can be selectively controlled by altering the culture medium.     

辣椒子叶高效再生体系的建立

以保加利亚尖椒(Capsicum annuum L.Bulgaria pointed pepper)为试验材料,探讨了有机成分、激素组合、辣椒幼苗提取物、AgNO3、脱落酸和亚精胺等因素对子叶离体培养的影响.结果表明,辣椒幼苗汁液对不定芽的诱导分化及伸长有明显的促进作用,添加脱落酸和亚精胺可促进不定芽的伸长;采用优化的培养基培养,不定芽诱导率达到100%,不定芽伸长率达83%,生根率达到100%.在此基础上建立了保加利亚尖椒的子叶离体高效再生体系.     

丰花月季再生体系的建立

分别以丰花月季叶片、叶柄和茎段为外植体,进行了愈伤组织的诱导及植株再生的研究。结果表明,丰花月季诱导愈伤组织最佳激素浓度配比是1/2MS+2,4D 5 mg.L-1+BA 1 mg.L-1;所得到的愈伤组织在MS+6-BA1 mg.L-1+2,4D 2.5 mg.L-1+GA3 1 mg.L-1的培养基上继代保存两个月后于MS+NAA 0.02 mg.L-1+TDZ 1.8 mg.L-1+KT1 mg.L-1上分化出不定芽;不定芽在1/2MS+IBA 0.5 mg.L-1上的生根率为91.25%。     

大白菜真叶高频再生体系的建立

【目的】建立大白菜真叶高效再生体系。【方法】选择‘06J28’、‘92S105’、‘06J30’、‘06J31’4种不同基因型大白菜作为试验材料,以刚长出第2片真叶的大白菜幼苗的第1片真叶为外植体,研究不同激素(6-BA、NAA、TDZ)组合、外植体切割与接种方式以及不同基因型对真叶不定芽再生的影响。【结果】在MS+4.0mg/L 6-BA+0.14mg/L NAA培养基上培养时,‘06J28’真叶不定芽再生率和再生系数达到最大分别为87.63%和2.62;在MS+0.3mg/L TDZ+0.14mg/L NAA培养基上培养时,‘06J28’真叶不定芽的再生率和再生系数分别为80.73%和1.89,表明TDZ的作用与6-BA相似。在真叶柄基部和下胚轴交接处横切,保留完整真叶作为外植体为最佳切割方式,以真叶柄的下端竖直向下插入培养基为最佳接种方式。在供试的4种基因型材料中,‘06J28’真叶的再生率最高,达87.63%;‘92S105’的再生系数最高,达3.76。【结论】建立了大白菜真叶高效再生体系,为大白菜转基因研究奠定了基础。