新城疫鹅胚化La Sota克隆毒株的生物学特性研究

用蚀斑克隆技术证明,新城疫鹅胚化 La Sota 疫苗株系由大、中、小三种蚀斑构成的异质性(?)毒群体.经鹅胚成纤维细胞(GFE)4～5次克隆后,获得了三个克隆株(LG LM 和 LS),在鹅胚及 GEF 上多次传代后,LM和 LS 克隆株的蚀斑形态保持稳定,而 LG 克隆株则出现大小不同的蚀斑.经最小致死量(MLD)、平均致死时间(MDT)等试验表明,此三株之间存在毒力差异.通过血凝素解脱速率等试验还表明,这三个克隆株在生物学特性上也有差异.     

新城疫CHR株与La Sota株2种疫苗近期免疫效力比较试验

鸡新城疫CHR 株冻干疫苗中试产品3 批以及La Sota 株冻干疫苗( 符合质量要求) , 以5 种免疫途径: 肌注、滴鼻、喷雾、饮水、拌料分别接种11 日龄雏鸡。每批疫苗每种途径接种1 组, 20 只/ 组, 共20 组。雏鸡群免疫前血凝抑制抗体(HI) 效价为1∶2-13 , 于14 d 、28 d 后再测HI抗体水平, 并分别用10 000 鸡胚半数致死量(ELD50) 新城疫标准强毒北京株攻击。从而检测2 种疫苗用5 种免疫途径免疫后在不同时间的近期免疫效力。结果表明, 近期内CHR 株疫苗HI抗体呈上升趋势, 而La Sota 株疫苗HI抗体先升高后下降; CHR 株疫苗以饮水和拌料途径效果较好, 其它3 种途径效果相似。接种后14 d 攻毒, 2 种疫苗均能较好保护强毒攻击; 28 d 后, CHR 株保护率高于La Sota 株。     

新城疫La Sota疫苗对山东分离株的免疫保护试验

用标准疫苗株La Sota活疫苗在隔离器中接种SPF鸡,进行免疫保护试验.免疫后,每7 d采血监测NDV抗体,免疫后2周,利用经过鉴定的新城疫病毒(NDV)潍坊毒SGM01、昌乐毒SCL03、东营毒HY、日照毒SRZ03、莘县毒SSX03和标准强度F48E9分别进行攻毒试验,同时设SPF鸡对照.每天观察,及时剖检发病鸡,检查鸡群病变,确定疫苗的保护性.结果表明,La Sota疫苗能对除SGM01和HY以外的病毒攻击的SPF鸡提供较好的保护.     

不同鸡传染性支气管炎疫苗毒株对新城疫La Sota株的增殖干扰试验

为观察IBV不同疫苗毒株H120、H52、4/91、28/86、Ma5及W93株对NDV增殖的干扰作用,采用不同浓度的IBV疫苗毒株与NDV La Sot a毒株分别按不同顺序接种,同胚增殖。利用血凝试验(HA)测定NDV效价,以判断IBV对NDV的干扰作用,为同胚增殖两种病毒提供参考数据。试验结果表明,IBV不同疫苗毒株能干扰NDV La Sot a增殖,干扰作用与其接种顺序、接种浓度及收毒时间有关。     

新城疫病毒弱毒株对鹅的免疫效力试验

用新城疫病毒(NDV)疫苗株La Sota和NDV基因Ⅶ型致弱株AND/Ⅶ为免疫原,分别以活苗和灭活苗的形式免疫2周龄试验鹅,免疫后第7、14天和21天采血分离血清用于抗体效价测定.免疫后3周以基因Ⅶ型强毒分离株JS2-06进行攻毒,攻毒后每天观察各组鹅的发病情况,并于第2、4天和7天分别采集喉气管和泄殖腔棉拭样品,用于病毒的分离.试验结果表明,活疫苗免疫后不能产生有效的免疫应答,而灭活苗免疫鹅对强毒的感染具有较强的抵抗能力,但基因Ⅶ型致弱株AND/Ⅶ能更有效抑制鹅体的排毒,其免疫效力明显高于疫苗株La Sota.     

新城疫La Sota疫苗免疫剂量对免疫效果的影响探讨

近年新城疫(ND)的发病出现新特点,大多发生在免疫鸡群,表现亚临床症状或非典型症状,发病率较低,在10%～30%,病死率为15%～45%[1～3].目前普遍认为,鸡群HI抗体平均值在7～9 log2以上才能有效地防制非典型ND.     

新鱼腥草素钠对新城疫La Sota疫苗免疫效果的影响

将96只非免疫健康三黄肉雏鸡随机分为4组,分别接种新城疫病毒La Sota株弱毒活疫苗,同时将新鱼腥草素钠按照不同的剂量皮下注射;在第二次免疫后的第7、14、21、28天分别测定各组动物的抗NDV血凝抑制抗体、免疫器官指数以及外周血CD4 /CD8 淋巴细胞比值.结果表明,新鱼腥草素钠对提高鸡体抗NDV血凝抑制抗体效价和外周血CD4 /CD8 淋巴细胞比值具有一定作用,且与对照组差异显著(P＜0.05);但不同给药剂量的新鱼腥草素钠影响不同,其中以中等剂量(2 mg/kg)效果最为明显.免疫器官指数的测定表明,新鱼腥草素钠对新城疫疫苗免疫效果的影响不是通过促进免疫器官发育实现的.     

鸭胚化小鹅瘟弱毒疫苗对晚期鹅胚及雏鹅安全性和免疫效力的研究

鸭胚化小鹅瘟弱毒疫苗对24曰龄鹅胚和1口龄雏鹅安全;对晚期鹅胚免疫力较差,对1日龄雏鵝,接种后10天可产生坚强的免疫力。木试验用鸭胚化小鹅瘟弱毒疫苗对24曰龄鹅胚和1日龄雏鹅免疫接种,检测对小鹅的安全性及免疫效力。现将结果报道如下。     

新城疫病毒La Sota株和鸡传染性支气管炎病毒M41株低免疫鸡胚同胚培养研究

为研究新城疫病毒(NDV)La Sota株和鸡传染性支气管炎病毒(IBV)M41株在低免疫鸡胚中进行同胚接种培养的可行性,通过将不同稀释倍数的La Sota株和M41株接种同一低免疫鸡胚,分别测定收获尿囊液La Sota株和M41株含量,确定最佳的稀释倍数以及适宜的培养温度和培养时间。结果显示:La Sota株和M41株以10 000∶5 000的比例稀释,培养96 h病毒含量和收获量最佳,La Sota株含量可达到109.17EID50/0.1 m L,HA效价为1∶1 024,M41株含量可达到106.50EID50/0.1 m L。接种后孵育温度为36.5℃时,每胚收获量比37℃培养增加了1.0～1.2 m L。按照此工艺生产病毒制备疫苗免疫SPF鸡,NDV和IBV抗体均符合国家标准要求。试验探索并优化了La Sota株和M41株在低免疫鸡胚中同胚接种的培养条件,为大规模抗原生产提供数据支持。     

动物狂犬病流行毒株的抗原性差异分析

利用9株抗狂犬病病毒（Rabies virus,RABV）核蛋白单克隆抗体,通过间接免疫荧光方法对分离的34株传至F6代N2A细胞适应株进行了抗原差异分析。结果表明：这些RABV分离株存在抗原差异,根据病毒与单抗反应的类型,将所分析的病毒株分为6个抗原变异型。根据N基因系统发生分析将所分析的病毒株分为4个进化群,结果表明不同进化群病毒间的遗传差异与抗原分型没有直接的联系。     

适应于牛胚肾细胞系增殖的新城疫病毒La Sota株的特性

新城疫病毒（ＮＤＶ）弱毒Ｌａ Ｓｏｔａ株适应于牛胚肾ＢＳ／ＢＥＫ细胞系中增殖，并产生与鸡胚中相似的感染滴度。连续在细胞系中传代后，在ＣＰＥ和蚀斑的大小、形态等生物学特性方面没有变化。相比之下，Ｌａ Ｓｏｔａ株对１日龄鸡脑内致病力指数细胞毒则低于鸡胚毒。但细胞培养适应毒的免疫原性在血清学反应和抵抗强度ＮＤＶ攻击方面并未显示出有何变化。换言之，在细胞系中增殖的Ｌａ Ｓｏｔａ株保持了它的生物学和免疫学特     

鸡传染性法氏囊病免疫复合物疫苗对新城疫La Sota疫苗免疫效果的影响

用鸡传染性法氏囊病(IBD)免疫复合物疫苗免疫1日龄SPF雏鸡和普通京粉雏鸡,间隔1、2周后免疫新城疫La Sota疫苗,以单独免疫新城疫La Sota疫苗为对照,免疫后2、3、4和5周对各组鸡采血测定新城疫HI效价,并在免疫5周后用新城疫强毒攻击,计算各组保护率。结果显示,1日龄时首免IBD免疫复合物疫苗间隔不同时间再免疫新城疫La Sota疫苗,与单独免疫新城疫La Sota疫苗相比,新城疫HI抗体水平均无显著差异(P0.05)。证明IBD免疫复合物疫苗在SPF雏鸡和普通雏鸡上对新城疫La Sota疫苗免疫均无免疫抑制作用。     

涂肛接种新城疫La Sota苗对塞北乌骨鸡免疫效果的影响

为研究新城疫La Sota苗涂肛接种对塞北乌骨鸡的免疫效果的影响,选择1日龄塞北乌骨鸡240只随机分为4组,每组60只,每组3个重复,每个重复20只。按常规免疫程序进行基础免疫,饲养到35日龄,分别按2,3,4,5倍剂量用新城疫La Sota苗涂肛免疫。结果表明:4倍剂量组雏鸡抗体水平最高,胸腺、脾脏、法氏囊等免疫器官指数最高。说明新城疫La Sota苗涂肛免疫塞北乌骨鸡以4倍剂量为宜。     

新城疫病毒La Sota株的溶肿瘤性特性评估

试验通过检测病毒对癌性(Hep2C)和非癌性(MRC-5)细胞系的影响来确定NDV的溶肿瘤效率。用NDV La Sota株感染这些细胞系。在两个细胞系中都观察到了CPE,但是Hep2C细胞系发现严重的细胞损伤。在不同的时间间隔进行细胞计数,大约有98%的Hep2C细胞不能存活。95h后,仅有40%的MRC-5细胞没有活力,将这些细胞进行重新传代,发现仍然会有吸附现象出现。     

鸡胚新城疫母源HI抗体及孵化条件对La Sota株病毒增殖的影响

将鸡新城疫La Sota株病毒接种于含有不同水平新城疫母源HI抗体的鸡胚中。在不同的孵化条件下孵育。测定母源抗体及孵化条件对病毒增殖的影响.结果表明,当免疫鸡胚的平均母源HI抗体为7.48log2时,平均病毒增殖滴度为10×7.32log2;而非免疫鸡胚平均母源HI抗体为2.55log_2(2.4～2.7log2)时,病毒增殖滴度平均可达10×8.25log_2。尽管后者比前者略高。但在统计学上无显著性差异.鸡胚接种后84～88小时病毒增殖滴度达到最高水平。在种毒1:40～1:200的稀释范围内,病毒的增殖滴度无明显影响.