变异型鸡传染性支气管炎病毒的分离和疫苗免疫效力分析

1999年10月至2000年4月期间,某地区饲养的肉仔鸡批批都出现相同的临床症状,表现为新出壳不久的雏鸡散发性气管罗音.10日龄左右发病率明显升高或迅速蔓延全群,病鸡精神沉郁,畏寒怕冷,食欲下降,呼吸困难,张口喘气,咳嗽,甩鼻,并出现明显的气管罗音,但有些批次或鸡场中雏鸡的发病则为20～35日龄.由于继发性的细菌感染造成病鸡的死淘率明显上升,多种抗菌药物治疗无效,试用多种疫苗或改变免疫程序也没有明显的效果.这种现象持续了几个月,使该地区的肉仔鸡饲养者蒙受了极大的损失.由于出现上述表现的原因复杂、疫病种类繁多[4],因此必须对该地区鸡群进行全面调查取样和病原分离,以找到发病的病因及其控制的方法.现将试验过程和结果总结如下.     

鸡传染性支气管炎病毒（IBV）地方SF株弱毒疫苗免疫期检验

禽传染性支气管炎（IB）是由冠状病毒科禽传染性支气管病毒引起的一种常见多发的急性高度接触性传染病,本病由Schalk等首次在美国报道,其病原血清型众多,同毒株之间又有组织亲嗜性的差异,表现为呼吸型、肾型、肠型、腺胃型等阻”。自1982年以来,肾型传染性支气管炎在我国广泛流行,     

鸡沙门氏菌弱毒苗的安全性和免疫效力试验

把鸡沙门氏菌弱毒苗按不同剂量分别经口服和颈部皮下接种１日龄商品蛋鸡来进行安全性和免疫效力研究,结果表明：该疫苗对１日龄雏鸡有良好的安全性并能提供较强的保护力。     

鸡传染性支气管炎病毒弱毒苗研究

从广西13个有传染性支气管炎病史的鸡场采集病料,用9～10天龄鸡胚进行病毒的分离。分离物经接种鸡胚的病变特征以及分离物的电子显微镜形态学观察、复归易感鸡、病毒的耐热性试验、乙醚敏感试验、病毒的核酸类型鉴定,对新城疫病毒生长的干扰试验和鸡胚中试验共八项指标的检验,证实成功分离出4株传染性支气管炎病毒(分别命名为C、G、Z和Q株)。在18～20天龄鸡胚气管环培养物上与六种标准的IBV血清型的阳性血清作病毒中和试验,结果确定C株和G株属Holte型,Z株和Q株属Mass型.各毒经株9～10天龄鸡胚传代培养20或80代,对易感鸡的毒力已很微弱。经实验室免疫攻毒保护试验,发现一次免疫末能提供足够的保护力,而二次疫免能提供足够的保护力。根据此结果在五县市、11个鸡场、30群共103 761羽不同品种鸡的田间试验,确定了用C80株或C60株作一免(5日龄)、G20株作二免(15日龄)的效果最好,显著优于未免疫对照组(P<0.01)。     

QX基因型鸡传染性支气管炎病毒致弱研究

为了解QX基因型鸡传染性支气管炎病毒(QX-IBV)致弱的分子机制,本研究对SDZB0808分离株在鸡胚中连续传100代的子代病毒P100进行了致病性试验和全基因组测序分析。致病性试验结果显示P100对3日龄SPF鸡无明显致病性,而亲本株SDZB0808对3日龄SPF鸡致死率为40%。序列比对结果显示,以亲本株SDZB0808为参考株,P100基因组发生3个有义突变,导致ORF 1a编码的蛋白(I3 047L)、S蛋白(N76Y)、E蛋白(L29I)发生了氨基酸替换;此外,P100在第3 244 nt~3 273 nt位点连续性缺失30个核苷酸,导致ORF 1a编码的蛋白在906~915位缺失10个氨基酸。本研究结果表明QX-IBV分离株SDZB0808毒力致弱可能与其基因组序列突变和缺失有关。     

鸡传染性法氏囊病免疫复合物疫苗的安全性和免疫效力试验

用鸡法氏囊病免疫复合疫苗(IBDV-Icx)和常规IBD活疫苗分别免疫1日龄商品鸡和SPF鸡,进行疫苗的安全性及免疫效力比较.免疫后8d检测,IBDV-Icx免疫组鸡的法氏囊未见明显萎缩,而传统弱毒疫苗免疫组鸡的法氏囊萎缩明显;免疫后28d各组用IBDV标准强毒株进行攻击,IBDV-Icx免疫组鸡的攻毒保护率均为10/10,常规IBD活疫苗对照组分别为8/10及9/10.免疫后3个月,IBDV-Icx免疫组血清抗体可达AGP1∶32,攻击强毒仍为10/10保护,而常规IBD活疫苗免疫后2个月抗体AGP为0,攻毒保护率为1/10,免疫后3个月时攻毒10/10发病.     

国内外主要鸡传染性支气管炎弱毒疫苗与广东NIB野毒株交互免疫试验

鸡传染性支气管炎 ( IB)是由冠状病毒引起的一种急性、高度接触性传染病 ,据调查 ,广东省的发病死亡率可达 10 %～ 2 6 %,给养鸡业带来很大经济损失。鸡传染性支气管炎病毒 ( IBV)的血清型多 ,已知最少有 2 0种以上 ,不同血清型之间没有或有不完全的交互免疫。为了寻找一种广东     

牛传染性鼻气管炎病毒LNM株致弱疫苗免疫效力的研究

为检测牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)抗体在免疫牛体内的产生及其消长规律,评价IBRV LNM株致弱疫苗的保护效力,并确定免疫持续期,本实验对免疫试验组牛每头颈部肌肉接种制备的IBRV LNM株致弱疫苗104.5 TCID50/mL,监测血清抗体效价,进行免疫期的确定。在疫苗免疫后的6个月、9个月和12个月分别抽取3头免疫组和两头对照组牛采用IBRV-LN01/08强毒株进行攻毒试验,每头牛的攻毒剂量为107.0 TCID50/mL。结果显示疫苗免疫后12个月时,中和抗体效价仍维持在1∶11以上。攻毒结果显示3个时间点强毒攻击后,疫苗对免疫牛均具有良好的保护力。研究表明IBRV弱毒疫苗可有效地保护免疫牛抵抗IBRV强毒株的攻毒,其免疫持续期最少为12个月。     

几种鸡新城疫弱毒疫苗的免疫效力试验

鸡新城疫是我国养鸡业中危害最大的疾病之一,也是影响禽产品国际贸易最 重要的禽类传染病.长期的疫病防制工作中,我们发现不管是在规模化的养殖场,还是在农 村中的个体养殖户,新城疫的防制一旦失败,鸡场所遭受的损失都是非常大的,有时则是毁 灭性的.鸡新城疫除其本身能造成鸡群严重的发病和死亡外,还常常并发或继发其他疫病的感染,此时造成的经济损失比单独发生时更加严重 [1] ,因此人们对该病的防制极其重视.     

腺胃病变型鸡传染性支气管炎病毒（IBV—D971株）致弱的研究

将IBV-D971株病毒在SPF鸡胚上连续传至120代,培育出了一株毒力明显减弱,并且具有良好免疫原性的腺胃病变型鸡传染性支气管炎病毒弱毒株(IBV-D971株).IBV-D971 F105代毒力明显下降,以109.25EID50接种1日龄SPF鸡5/5无不良反应.IBV-D971 F105代毒连续通过1日龄SPF鸡体5代,未见毒力返强.以103EID50免疫1日龄SPF鸡,攻毒后5/5保护,对照5/5发病.     

Detection and isolation of QX-like infectious bronchitis virus in Japan

The antigenic variant QX-like infectious bronchitis virus (IBV) is endemic in several countries. In Japan, the QX-like genotype is classified as the JP-III genotype based on the partial S1 gene and as the GI-19 genotype based on the complete S1 gene. This study showed that QX-like IBVs and JP-III IBVs can be identified based on the amino acid polymorphism of the S1 glycoprotein. Furthermore, genetic analysis of several IBV field strains detected in commercial broiler farms across the Kyushu area in 2020 revealed Japanese QX-like IBVs, which are highly homologous to the QX-like IBVs recently detected in China and South Korea. Herein, QX-like IBV field strains were isolated for evaluating commercial vaccine efficacy in our future studies.     

Efficacy of a novel in ovo-attenuated live vaccine and recombinant vaccine against a very virulent infectious bursal disease virus in chickens

Infectious bursal disease (IBD) causes severe economic damage to the poultry industry worldwide. To prevent IBD virus (IBDV) infection, live virus vaccines have been widely used in chickens having wide-ranging levels of maternally derived antibodies. But, the risks of infection with other pathogens because of lesions related to atrophy of the bursa of Fabricius in vaccinated chickens are a concern. To resolve the problems, a recombinant turkey herpesvirus (HVT) vaccine expressing IBDV-VP2 protein (rHVT-IBD) has been developed. However, the induction of neutralizing antibodies by rHVT-IBD against a virulent IBDV might be delayed compared with that by the live IBD vaccine, leading to the high risks of IBDV infection for young chickens. To find the best selection of IBDV vaccine for the onset of immunity, we examine the protective efficacy of a novel in ovo-attenuated live IBDV (IBD-CA) vaccine and the rHVT-IBD vaccine in young chickens challenged with a very virulent IBDV (vvIBDV) strain. We show that the protective efficacy of IBD-CA vaccine was higher than that of the rHVT-IBD vaccine in 14-day-old chickens challenged with the vvIBDV strain, leading to the risk of IBDV infection for young chickens when vaccinated with rHVT-IBD. Our results suggest that farmers should select the best vaccines to maximize vaccine efficacy in consideration of the vaccine characteristics, prevalence levels of IBDV in the areas, and initial MDA levels of the chickens since the attenuated live and recombinant vaccines play a role in the different vaccine efficacies.     

马传染性贫血病毒疫苗致弱过程中不同代次毒株LTR序列变异

有研究认为病毒基因组长末端重复序列LTR与病毒的毒力和复制能力直接相关.中国马传染性贫血弱毒疫苗是由一株高致病力毒株经体外白细胞传代而致弱的疫苗.经过体外超过110代传代后,病毒丧失了对马高致死性毒力并保持了良好的免疫原性.本文对传代过程中的不同代次病毒基因LTR进行了克隆和序列测定,发现传代过程中LTR发生了一系列明确的变异,一是转录起始位点在64代之前均以GGAC为特征,64代之后则表现为不规律的GAAC,AAAC,AGAC或GGTC;二是TAR起始碱基在59代之前多数为A,而64代之后均为G;三是在45代之后(55代除外),poly(A)附加位点一致表现为AA,这种一致的核苷酸变化均发生在毒力明显降低的代次,提示这些突变引起的位点或结构变化很可能与病毒毒力减弱有直接关系.     

牛传染性鼻气管炎弱毒疫苗免疫抗体水平与保护效力的关系

利用微量血清中和试验和攻毒试验、牛传染性鼻气管炎弱毒活疫苗检测免疫后牛血清中牛传染性鼻气管炎病毒的抗体效价及其与保护效力的平衡关系。40头牛其中弱毒活疫苗免疫牛30头,对照牛（抗体阴性牛）10头,采用不同剂量免疫（10^3.5～10^6.5TCID50／mL）,按抗体效价高低将实验动物分,并用IBRV LN01／08强毒株攻击,将攻毒保护结果与攻毒时抗体效价结果平行比较分析,结果显示,当IBRV抗体效价高于1：6时,疫苗免疫可以对牛产生良好的保护效力,保护率在80％以上,低于1：6但高于1：3时,免疫苗抗体阳性牛攻毒后保护率近78％。试验结果显示牛传染性鼻气管炎活疫苗的抗体水平于保护效力之间存在一定的平行关系。     

Evaluation of the antigen relatedness and efficacy of a single vaccination with different infectious bronchitis virus strains against a challenge with Malaysian variant and QX-like IBV strains

BackgroundThe predominant infectious bronchitis virus (IBV) strains detected in chickens in Malaysia are the Malaysian variant (MV) and QX-like, which are associated with respiratory distress, nephropathy, and high mortality. On the other hand, the antigenic relatedness and efficacy of IBV vaccines against these 2 field IBV strains are not well characterized.ObjectivesThis study aimed to determine the antigen relatedness and efficacy of different IB vaccine strains against a challenge with MV and QX-like strains.MethodsThe antigen relatedness and the ability of different IB vaccine strains in conferring protection against MV and QX-like were assessed based on the clinical signs, macroscopic lesions, and ciliary activity.ResultsThe MV strain IBS037A/2014 showed minor antigenic subtype differences with the vaccine virus Mass H120 and 4/91 strains but showed major antigenic subtype differences with the K2 strain. The Malaysian QX-like strain IBS130/2015 showed major antigenic subtype differences with the MV strain IBS037A/2014 and the vaccine strains except for K2. Chickens vaccinated once with Mass (H120) or with non-Mass (4/91 and K2) developed antibody responses with the highest antibody titer detected in the groups vaccinated with H120 and 4/91. The mean ciliary activities of the vaccinated chickens were between 56 to 59% and 48 to 52% in chickens challenged with IBS037A/2014 and IBS130/2015, respectively. The vaccinated and challenged birds showed mild to severe lesions in the lungs and kidneys.ConclusionsDespite the minor antigenic subtype differences, a single inoculation with Mass or non-Mass vaccines could not protect against the MV IBS037A/2014 and QX-like IBS130/2015.     

用冷适应的方法致弱鸡肾型传染性支气管炎病毒

用冷适应的方法 (病毒经囊液接种鸡胚后于 32℃孵化 48h) ,将已鉴定的北京地区鸡肾型传染性支气管炎病毒 (IBV)分离株 Tu,Da,Xi和 Hu分别通过鸡胚传代减毒致弱 ,在一定代次时接种敏感鸡作毒力测定试验 ,结果表明 ,Tu株在传至 46代时 ,Xi株在传至 5 1代时对雏鸡的毒性已大为降低 ,并且分别回归 SPF雏鸡 5代和 3代后不出现返强现象。毒价测定 Tu46和 Xi51 的 EID50 值分别为 10 - 6.3 6/ 0 .2 m l和 10 - 6.70 / 0 .2 m l,而且 Tu株出现稳定增高的趋势。它抵抗同源强毒攻击的最小免疫剂量为 10 - 2 × 0 .5 m l。此外 ,对弱毒株免疫后的雏鸡用标准强毒株Gray攻击以衡量其免疫原性 ,结果 Tu46具有 90 %的保护率。间接 EL ISA对免疫后的抗体水平检测结果反映 ,Tu46免疫鸡体内血清抗体的消长呈规律性变化 ,并在免疫后 2 0天出现最高峰。综合结果表明 ,作者培育的 IBV- Tu46株具有对雏鸡安全、毒价高及较好的免疫原性的特点 ,有希望成为供生产使用的疫苗。     

鸡传染性支气管炎病毒CQ/01/2004株的分离与鉴定

2004年从重庆某肉用鸡场疑似鸡传染性支气管炎的病鸡中采集病料，按常规处理后接种9～10日龄鸡胚，通过鸡胚连续传代培养3代，并对该分离毒株的鸡胚致病性、血凝性和NDV的干扰特性进行检测．同时进行了动物回归试验。结果表明，该分离株具有IBV感染特征，可使鸡胚胚体出血、蜷缩、矮化；该分离毒株无直接血凝性，对NDV有明显的干扰作用；动物回归试验中有75％的感染鸡在10d内发病或死亡。剖检病死鸡可见肾苍白、肿胀，肾小管内充塞大量尿酸盐，支气管有出血点、有大量粘液。采用反转录．聚合酶链式反应（RT-PCR）技术对CQ／01／2004的纤突蛋白S1基因进行扩增、克隆和序列测定，结果表明该基因具有IBVSl基因的共有分子特征，将测序结果提交GenBank进行同源性检索，发现分离株CQ／01／2004和J株S1的同源性最高，核苷酸同源性为94％，氨基酸同源性为89．4％，与M41的核苷酸同源性为80．6％，氨基酸同源性为78．0％。试验结果表明，分离的病毒株CQ／01／2004为鸡传染性支气管炎病毒。