大豆疫霉菌单游动孢子囊的分离方法

对大豆疫霉菌单游动孢子囊的分离及游动孢子的获得技术进行了研究,成功获得了大豆疫霉菌单游动孢子囊及游动孢子,明确了该技术在实施过程中的注意事项。     

烟草疫霉菌的培养及大量产生游动孢子囊和游动孢子方法的研究

烟草疫霉菌(Phytophthora nicothianae)在燕麦培养基上生长良好 ,菌丝在滴加了土壤浸出液的皮氏培养液中 ,可在 3d内产生大量的游动孢子囊 ,游动孢子囊经低温处理后再培养 2 4h可产生大量游动孢子     

苎麻疫霉抗甲霜灵突变株对棉苗的致病力及其遗传

研究了苎麻疫霉抗甲霜灵(Mt^r)突变株对棉苗的致病力及其遗传,结果显示,抗性突变株对棉苗的致病力与其野生型亲本间无显著差异。而Mt^r突变株XC-6-2对棉苗的致病力在其无性第1代(ZG₁)单孢株间及其与亲本间均存在极显著差异,且XC-6-2对棉苗的致病力性状在单游动孢子第2代(ZG₂)持续发生分离;XC-6-2单卵孢第1代(OG₁)对棉苗的致病力间亦存在极显著差异。上述结果提示,抗甲霜灵突变株对棉苗的致病力在无性单孢和单卵孢子后代间均不能稳定遗传。对比研究发现,野生型亲本菌株XC-6对棉苗的致病力在单游动孢子和单卵孢后代有相似的遗传规律,且单游动孢子群体对棉苗致病力的变异系数较其单卵孢株间的变异系数大。     

海南植物疫霉菌种类鉴定

近年海南地区植物疫病发生普遍。 1997～ 1998年 ,对侵染海南地区植物各个部位 ,引起颈腐、果腐、根腐、树干溃疡、枝萎、叶斑 (包括病土 )等病样进行了较全面的调查研究 ,结果从其中 2 5种植物上分离到 14 0个疫霉菌株。根据孢子囊形态、脱落性、有性器官的形成、生长温度等 ,将其鉴定为烟草疫霉 (P.nicotianae van Breda de Hann) ,辣椒疫霉(P.capsici L eonian) ,樟疫霉 (P.cinnamomi Rands) ,棕榈疫霉 (P.palmivora(Butler) Butler) ,柑桔褐腐疫霉 [P.citrophthora(R & E Sm ith) L eonian],密色疫霉 (P.meadii Mc Rae) ,芋疫霉 (P.colocasiae Raciborski) ,橡胶疫霉 (P.heveaeThom pson)和莎草疫霉 [P.cyperi(Ideta Ito) ]9种疫霉。这些疫霉是造成海南省蔬菜、多种瓜果、果树以及花卉死亡和烂果的主要病原。本文简要报道植物上疫霉菌种的鉴定结果     

几种植物提取物诱导马铃薯对致病疫霉的抗性

 采用纤维素膜技术研究了大蒜、洋葱、芹菜、丁香、花椒、大黄等24种植物离体组织及其提取物(其中8种中草药为水煎剂,16种其它植物为水浸剂)对马铃薯晚疫病菌(Phytophthora infestans)静止胞萌发、附着胞形成及侵入丝形成的直接影响和提取物诱导块茎对晚疫病病菌侵入机构形成的影响,并在此基础上进一步就提取物免疫处理种薯、诱导成株期抗病性、增加块茎产量的影响做了初步探讨。在洋葱、葱、大蒜等12种植物组织表面,静止胞萌发率明显低于对照(擦镜纸),而且在6种植物组织表面未见附着胞形成,10种植物组织表面未见侵入丝形成;在大蒜、韭菜等13种植物组织提取液中,静止胞萌发率明显低于对照(擦镜纸),其中6种植物组织提取液中附着胞未见形成,7种植物组织提取液中侵入丝未见形成。经8种植物组织提取物诱导处理的块茎切片,不仅保鲜期长,而且表现出较强的诱导抗性;静止胞萌发率、附着胞形成率及侵入丝形成率均明显低于对照;经8种植物组织提取物诱导处理的种薯在出芽、早期生长、抗晚疫病及产量等各方面均优于对照,病害保护率达54%、增产率达31%。     

广州地区为害黄瓜的疫霉菌及其致病性的研究

从广州地区黄瓜植株表现不同症状的病部分离得到50个疫霉菌菌株,对其中较重要的4株之形态、培养性状及寄主范围进行了研究,结果有德雷疫霉(Phytophthora drechesleri Tucker.)和辣椒疫霉(Phytophthora capsici Leonion.)两种。前者分离到45株,此种出现的频率较高,危害性也较大,后者仅分离到3株。     

大豆疫霉根腐病菌游动孢子的产生因素

 本文对影响大豆疫霉根腐病菌游动孢子的产生因素进行了研究。8 d的菌丝体经蒸馏水浸泡,在25℃下培养72 h可以获得高浓度的游动孢子悬浮液,菌龄越短游动孢子浓度越大,偏酸性的环境有利于游动孢子产生,温度是影响游动孢子形成的重要因素,在0、35℃下均无游动孢子产生,游动孢子产生的适宜温度范围是20~30℃,最佳温度为25℃。     

新疆甜瓜对瓜类疫霉菌抗性的诱导

用弱致病的和灭活的瓜类疫霉菌 (Phytophthora melonis)培养物成功地诱导了新疆甜瓜对瓜类疫霉病的整体抗性 ,抗性持续可达 21d ,同时探讨了不同处理方法对甜瓜诱导抗性的影响     

新疆甜瓜对瓜类疫霉菌抗性的诱导

用弱致病的和灭活的瓜类疫霉菌 (Phytophthoramelonis)培养物成功地诱导了新疆甜瓜对瓜类疫霉病的整体抗性 ,抗性持续可达 2 1d ,同时探讨了不同处理方法对甜瓜诱导抗性的影响     

木霉菌和腐霉菌对棉铃疫菌的作用研究

用玻璃纸对峙法观察到4种木霉(S-327,BT-12,BT-95,T-594)和寡雄腐霉(P.O.)对棉铃疫霉的营养生长均有一定抑制作用,但没有看到明显的抑菌圈。生物测定试验表明,拮抗菌不仅对棉铃疫霉有直接作用,而且还可以保护棉铃不受疫菌侵染。在5种拮抗菌中,P.O.和BT-12可能是防治棉铃疫病比较有潜力的生防菌。     

几种不同来源的苎麻疫霉菌在棉花上的致病力测定

用菌丝块创伤接种测定分离自棉苗、棉铃、苎麻和构树上的苎麻疫霉菌对棉花致病力，结果表明来源于不同寄主的苎麻疫霉菌对棉苗和棉铃的致病力存在明显的分化。来自棉花（棉苗和棉铃）的菌株致病力较强，来自苎麻和构树的菌株对棉苗和棉铃的致病力较弱。来自棉花上的不同苎麻疫霉菌株对棉苗的致病力存在一定的差异，但对棉铃的致病力差异不明显。     

棉铃疫病菌(Phytophthora boeh meriae)对甲霜灵的抗性遗传研究

 本文在实验室条件下,经药物直接诱变,筛选获得棉铃疫病菌(Phytophthora boehmeriae Sawada)抗甲霜灵突变株,研究了其抗药性性状的遗传。结果表明,棉铃疫病菌易对甲霜灵产生抗性,抗性菌株对甲霜灵的抗性水平可高达其敏感亲本的5161.3倍以上;部分抗性菌株的抗药性性状在无性及有性单孢后代均可稳定遗传,另有部分抗性菌株的抗性性状在无性单孢后代出现分离甚至完全丧失。初步认为,供试棉铃疫病菌对甲霜灵的抗性遗传可能与细胞质遗传因子有关     

甲霜灵·霜霉威复配剂对棉疫病菌的联合毒力

在实验室条件下,测定了甲霜灵和霜霉威复配剂对棉疫病菌(Phytophthora boehmeriae)的联合毒力。结果表明,复配剂MPA、MPB、MPC对棉疫病菌的EC50分别为0.055 5、0.104 4μg/mL和0.084 5μg/mL,对照单剂甲霜灵和霜霉威对棉疫病菌的EC50分别为0.039 1μg/mL和10.618 3μg/mL;联合毒力分析表明,甲霜灵和霜霉威按1∶1.5复配有增效作用,按1∶1和1.5∶1复配有相减作用。     

疫霉蛋白激发子PB90对病原菌生长与致病力的影响

 激发子PB90是由棉疫病菌分泌的可诱发非寄主植物系统获得抗病性的一类新型蛋白激发子。本文就该激发子在棉疫病菌生长发育及致病过程中的作用进行了研究。采用胶体金标记发现该激发子主要分布在棉疫病菌的细胞壁上,该激发子可以分泌到细胞外;在离体条件下,PB90的多克隆抗体并不抑制棉疫病菌游动孢子的萌发和孢子萌发后形成菌落的能力,而且抗体包埋的游动孢子仍能激发非寄主植物烟草的过敏性坏死反应;但是,抗体的包埋处理可以使棉疫病菌的游动孢子丧失对棉花的致病力。结果表明,特异性存在于细胞壁上的疫霉蛋白激发子PB90是棉疫病菌的一种重要的毒性因子,在病菌对棉花的致病过程中具有重要作用;此外本研究结果还提示PB90并不是惟一能诱导非寄主烟草过敏性反应的棉疫病菌激发子,除了PB90之外,棉疫病菌还能产生其它的激发子诱导烟草的过敏性坏死反应。     

马铃薯晚疫病菌分子遗传及与寄主互作研究

近年来马铃薯晚疫病的重新暴发再次引起世界各国极大关注,特别对马铃薯晚疫病菌的分子遗传学的研究,包括病菌基因组遗传、转录和物理图谱的构建,病菌致病的分子机制以及马铃薯-马铃薯晚疫病菌互作分子机制等。本文就近几十年来对马铃薯晚疫病菌在生物学和病理学,分子遗传学等研究方面作简要综述,并对其研究趋势进行了展望。     

Suppressed germination and early death of Phytophthora infestans sporangia caused by pectin, inorganic phosphate, ion chelators and calcium-modulating treatments

In laboratory experiments, chemical treatments were applied to sporangia of Phytophthora infestans incubated at 12 °C, conducive to cytoplasmic cleavage and release of zoospores (indirect germination), and at 20 °C, conducive to germination by hyphal outgrowth (direct germination). Both types of germination were suppressed by applying increasing concentrations (1–5 mM) of CaCl₂ or MgCl₂, or by low concentrations of pectin, inorganic phosphate, chelators (EGTA, BAPTA), calcium channel-blockers (lanthanum, gadolinium, verapamil) or compounds that interfere with intracellular calcium-mediated processes (trifluoperazine, caffeine). The suppression by some treatments was partly overcome by adding Ca²⁺ or Mg²⁺ in the early stages of incubation, but Ca²⁺ was usually more effective than Mg²⁺, and suppression at 20 °C was more easily overcome than at 12 °C. Pectin (0.1%) or BAPTA (5 mM) caused rapid death of sporangia at both 12 ° and 20 °, whereas EGTA (5 mM) or Na₂HPO₄ (5 mM) caused rapid death only at 12 °. The findings indicate that germinability and viability of P. infestans sporangia are strongly affected by the external availability of Ca²⁺ or other divalent cations, especially during zoosporogenesis.     

Effects of temperature on germination of sporangia,infection and protein secretion by Phytophthora kernoviae

Phytophthora kernoviae is a pathogen on a wide range of plants, but little is known of optimal infection conditions. Rhododendron ponticum leaves were inoculated with six different isolates of P. kernoviae sporangia and incubated at different temperatures from 10 to 28 °C. After 1 week, lesion development and pathogen recovery were only observed from all isolates at 15 and 20 °C and a few isolates at 10 °C. In an experiment with temperatures ranging from 20 to 25 °C, lesion development and pathogen recovery on R. ponticum, Magnolia stellata and Viburnum tinus occurred consistently at 20 and 21 °C, was limited at 22 °C, and did not occur at 23 °C and above. There was no difference in sporangia and zoospore germination at 20–25 °C. In a temperature fluctuation experiment, the necrotic area of inoculated R. ponticum leaves increased with longer incubation at 20 °C and decreased with longer incubation at 24 °C. Crude extracts of secreted proteins from P. kernoviae cultures grown at 20 and 24 °C were compared to determine any effects of temperature on pathogenicity. When spot tested on R. ponticum leaves, crude protein suspensions from cultures grown at 20 °C induced necrosis, while proteins from cultures grown at 24 °C did not. Proteomic analysis confirmed that a 10 kDa protein secreted at both 20 and 24 °C shared sequence homology to the conserved domains of known elicitins of other Phytophthora spp. The protein secreted at 20 °C that was responsible for necrosis has not been identified.     

疫霉菌对霜脲氰抗性遗传及对霜脲氰和甲霜灵的交互抗性

就疫霉菌对霜脲氰抗性的产生和遗传，以及疫霉菌对霜脲氰和甲霜灵的交互抗性进行了研究。结果表明，苎麻疫霉容易对霜脲氰产生抗药性突变，但抗性在连续３代单游动孢子分离过程中逐渐丧失。大雄疫霉对霜脲氰不易产生抗性突变，恶疫霉、大雄疫霉和苎麻疫霉对甲霜灵和霜脲氰不存在交互抗性     

疫霉31kDa激发子的分离纯化及其诱导烟草细胞死亡机理的初步研究

 通过沸水浴、硫酸铵沉淀、非变性电泳、割胶电洗脱等方法,从一种疫霉的培养液中分离得到分子量约31kDa的蛋白类激发子。该激发子在低浓度下即可诱发烟草叶片发生过敏反应,处理烟草悬浮细胞12h能导致24.6%的细胞死亡,处理24h后细胞的死亡率达67.8%。用该激发子处理烟草悬浮细胞24h后细胞基因组受到明显降解,但无DNAlad-dering现象。用该激发子处理1h即可显著降低烟草悬浮细胞中的ATP水平,而用氧化磷酸化的解偶联剂CCCP处理在降低胞内ATP水平的同时也能显著诱导烟草悬浮细胞死亡,因此抑制胞内ATP合成可能是该激发子诱导烟草细胞死亡的重要机制之一。