杨树上一株链格孢菌的分离、鉴定及室内防治药剂筛选

2010年以来新疆塔城地区杨树发生大面积杨树枝干病害,给杨树生产带来巨大损失。在研究俄罗斯杨枝干病害时,以5年生新疆塔城地区俄罗斯杨枝干为材料,采用组织分离法分离获得了一株链格孢属真菌,根据其菌丝及孢子形态结合ITS序列进行了菌种鉴定,因链格孢属真菌可引起多种植物病害,采用5种常用的杀菌剂对其进行室内抑菌试验。结果表明,分离获得的链格孢属真菌鉴定为链格孢菌(Alternaria alternata)。室内药剂筛选结果显示,10%多抗霉素对供试菌株毒力最强,EC50值为0. 035 1mg/m L,其他依次为80%代森锰锌、65%代森锌、50%多菌灵和70%甲基硫菌灵。     

黄蓝状菌一种几丁质酶的纯化、性质及抗菌活性

黄蓝状菌Talaromyces flavus在SMCS液体培养基中置于恒温摇床(200r/min,27．5℃)上培养13d，诱导产生大量的几丁质酶。培养滤液经硫酸铵分级沉淀，DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析、Phenyl-Sepharose Fast Flow疏水层析、Sephacvl S—100分子筛层析得到了凝肢电泳(SDS-PAGE)谱带单一的几丁质酶，其分子量为41kD。其最适反应温度为50℃，最适pH值是5。Mn^2 对其有明显的激活作用，Cu^2 、Fe^2 对其有强烈的抑制作用。抗菌活性显示，其对供试病原菌具有明显的抑菌作用。     

一株杨树灰霉病原菌的分离及鉴定

采用组织分离法对新林1号杨叶部病害的病原菌进行了分离、纯化,并利用柯赫氏法则验证及ITS序列分析鉴定病原菌种类。结果表明：从新林1号杨上分离获得病原菌XL-1,其菌丝白色,在PDA培养基上菌落平展,边缘整齐,不产生色素。经柯赫氏法验证XL-1是引起新林1号杨发病的病原菌。提取XL-1菌丝DNA,DNA质量较好,以ITS1/ITS4为引物进行PCR扩增,获得542bp目的条带,经BLAST比对序列与登录号为MH212236.1 Botrytis cinerea覆盖度为100%,相似性为100%。下载相似性序列及Botrytis属标准菌株ITS序列,经MEGA 7.0构建系统发育树,表明XL-1与B. cinerea聚为一支,XL-1被鉴定为B. cinerea,这为下一步研究杨树灰霉病致病机理及综合防控奠定了基础。     

纤维素分解菌的筛选及鉴定

从自然界中筛选分离获得具有高效分解纤维素功能的一组混合菌株,经分离纯化得3个菌株D1、D2和D3,利用16S rDNA测序鉴定,这些菌株分别是克雷伯氏菌、假单胞菌和嗜麦芽窄食单胞菌,比较各单个菌株及其相互混合的羧甲基纤维素(CMC)酶相对活性、以及它们对滤纸和香蕉杆的分解效果,发现各单一菌株对纤维素类物质均有一定的降解效果,但混合菌群效果最好,其CMC酶相对活性为0．93cm／d,说明多种微生物的协同作用有助于纤维素类物质分解。     

一株拟茎点霉(Phomopsis sp.)拮抗菌的筛选鉴定

为筛选出拟茎点霉(Phomopsis sp.)的生防菌,探索拟茎点霉病原菌的有效生物防治方法,从武威7个乡镇采集45个土样,采用土壤稀释平板法进行微生物分离和平板对峙培养法进行筛选,对选出的抑菌效果最好的菌株LKYHC-6采用形态学及分子生物相结合的方法进行鉴定。结果表明,筛选出的拮抗细菌LKYHC-6菌落在LB培养基上呈现乳白色、中间凹陷、边缘隆起、杆状、革兰氏染色呈阳性,16S rDNA序列分析得到该菌株的序列长度为1 493 bp,构建系统发育树结合形态学特征将拮抗细菌LKYHC-6鉴定为萎缩芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus);对LKYHC-6抑制效果分析时发现,该菌株对供试的拟茎点霉病原菌(枫香拟茎点霉、胡桃楸拟茎点霉、富士拟茎点霉、乌饭树拟茎点霉)都有抑制作用,抑菌带大小分别为11、15、13、16 mm。故拮抗菌株LKYHC-6在拟茎点霉引起的病害防治中具有极大的生防潜能。     

一株高效石油降解菌的筛选及降解能力初探

为了有效降解石油开采过程中产生的含油污泥中的石油,达到油泥资源再利用的目的,选育高效石油降解菌,为石油污染生物修复提供菌种资源和技术支持。通过连续富集传代培养,从页岩油泥中分离出一株高效石油降解菌YH1-1,经过形态学、生理生化以及16S rRNA序列分析,鉴定YH1-1为醋酸钙不动杆菌(Acinetobacter calcoaceticus)。该菌在温度30℃、初始培养pH值7.0条件下降解质量浓度50 g/L的油泥,经气相色谱(GC)分析,28 d降解率可达87%,说明该菌可有效降解石油烃。因此,醋酸钙不动杆菌YH1-1在开发研制石油污染生物修复菌剂方面有较好的应用前景。     

耐碱性木聚糖酶高产菌的分离、鉴定及其酶学性质的研究

从造纸废液中筛选得到一株耐用性木聚糖酶高产菌,经初步鉴定为类黄假单胞菌,其木聚糖酶活力达３８７ＩＵ／ｍＬ培养基。酶学性质的初步研究表明：酶作用最适温度为６０℃,６５℃和７０℃时的半衰期分别为１０５和１０ｍｉｎ,该日作用最适ｐＨ值为１０．０,酶的ｐＨ值稳定范围在８．０～１０．５之间。     

黄蓝状菌几丁质酶E2纯化、性质及抗菌活性研究

黄蓝状菌在SMCS液体培养基中置于恒温摇床（200r／min,27．5C）上培养13天,诱导产生大量的几丁质酶。培养滤液经硫酸铵分级沉淀,DEAE--Sepharose FastFlow阴离子交换层析、Phenyl—Sepharose Fast Flow疏水层析、Sephacryl S-100分子筛层析得到了凝胶电泳（SDS—PAGE）谱带单一的几丁质酶E2,其分子量为32KD。其最适反应温度为50℃,最适pH值是5。Mn^2＋对其有明显的激活作用,Cu^2＋、FeCu^2＋对其有强烈的抑制作用。抗菌活性显示．其对供试病原菌具有明显的抑菌作用。     

一株南方红壤区杉木根际高效解钾菌的筛选、鉴定及其培养条件优化

[目的]南方红壤区杉木人工林下根际土壤存在低钾胁迫环境,通过筛选、鉴定、优化培养高效解钾菌株,能够丰富解钾微生物资源库,为林木解钾工程菌的开发提供研究基础与数据支持.[方法]从不同林龄(2?,4,10?,15?a)杉木人工林下根际土壤中分离筛选出79株解钾菌,并根据其形态、生长特征选取20株优势菌株,通过测定发酵液可溶...     

一株绿僵菌的鉴定及其生物学特性

筛胸梳爪叩甲(Melanotus cribricollis)是浙江笋用林内昆虫的优势种群,其幼虫(即金针虫)是笋期主要害虫之一,在湖州市的德清和安吉、杭州市的余杭和临安等重要竹区的早园竹(Phyllostachys praecox)林中,鲜笋带虫率可达62%,种笋受害率更是高达80%以上,严重制约了当地竹产业的健康发展(徐天森,2004)。由于金针虫营地下生活,防治一直是竹笋生产管理的难点。化学防治会导致竹笋     

高产脂肪酶酵母菌株的分离筛选及紫外诱变

利用定向分离法从市场购得的苹果、梨、葡萄、面粉、酒糟、啤酒花等6个样品中分离出7株产脂肪酶菌株:曲霉1株,酵母6株.其中从面粉中分离出来的菌株MF具有较高的酶活力,粗酶活力达29.17 U·mL-1,经初步鉴定为假丝酵母(Candida sp.).对该菌株产酶条件进行优化可知:该菌的最佳碳源是1%的10: 1(m/V)的酵母膏+乳化液;最佳氮源为2%的3:1(m/m)玉米粉+蛋白胨;培养的最适初始pH值为8.0,最佳培养时间为72 h,最适反应温度为40℃,最佳反应时间为30 min.优化后的酶活力达41 U·mL-1,比优化前提高了40.5%.对MF菌株进行初步紫外诱变处理,突变菌株酶活力70.83 U·mL-1,比未处理的菌株的脂肪酶活力提高了105%.     

漆酶高产菌株筛选及漆酶基因片段的克隆

研究利用不同底物浓度、不同培养时间、不同培养基为优化因素,对漆酶产生菌株筛选条件进行了初步研究,从广泛4株食用真菌中筛选具有高产漆酶特性的真菌,双孢菇2796,并以双孢菇2796为供体菌,提取菌株RNA,运用RT-PCR方法对漆酶基因进行扩增,克隆后得到长度为160bp的漆酶基因片段。     

高产漆酶真菌菌株的筛选及酶学性质研究

从6株野生真菌和5株食用真菌中筛选出高产漆酶菌株,并对筛选出的野生菌株漆酶酶学性质进行初步探究。使用G-PDA确定菌株的产漆酶能力,然后通过液体发酵对产生的粗酶液进行酶活力测定,确定高产漆酶菌株,最后分别在不同pH和温度下进行酶学性质探究。初步筛选结果:第7天时,05号菌丝直径最大89.1mm,08号显色圈直径最大76.8mm,04号的显色圈颜色最深,09号显色反应最不明显。对于漆酶活力:04号活力最高262.7U/mL,其次是08号和05号分别为255.3U/mL、203.9U/mL。01和06号酶活力达到最大所需时间最短。酶学性质方面,08号的最适pH是3.2、最适温度是40℃;在不同pH、温度下分别保温2h,pH=4.0酶活力残余率为94.20%;温度在20~40℃内,酶活力残余率在99.00%以上。结果表明,0.04%G-PDA最适作为产漆酶真菌的初筛培养基;高产漆酶能力的菌株有04、05和08号菌株,且08号菌株漆酶的最适应用条件是pH=4.0、温度为40℃。     

一株拮抗树木褐根病菌的伯克霍尔德菌的分离及鉴定

树木褐根病是由有害木层孔菌(Phellinus noxius)引起的一类土壤传染性根部病害,为了实施对这类病害的生物防治,结合唯一氮源1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)为底物和平板对峙法,从澳门松山市政公园健康树木的根际分离得到1株对有害木层孔菌具有较强拮抗活性的菌株1583.采用一对细菌通用引物PCR扩增获得菌株1583的16S rDNA基因序列,其片段大小为1 496 bp,系统进化树显示菌株1583与Burkholderia seminalis的亲缘关系最近,综合结果鉴定该菌株为伯克霍尔德菌(Burkholderia sp.).拮抗性研究表明,菌株1583对油菜菌核病病原菌(Sclerotinia sclerotiorum)、黑松叶斑病病原菌(Pestalotiopsis sp.)、香蕉枯萎病病原菌(Fusarium oxysporumf.sp.cubense)、白蝴蝶炭疽病病原菌(Colletotrichum sp.)和美人蕉瘟病病原菌(Pyricularia cannaecola hashioka)等植物病原真菌均有明显的抑制作用.     

氧化乐果降解菌的筛选与鉴定

采用种子培养基对采自东北林业大学试验林场的土样进行初筛,获得11株能够降解氧化乐果的菌株;通过菌种生长速度与抑制率2项指标综合评价获得降解效果较好的真菌为DL04、DL16、DL11和DL03。最后对产生降解酶较高的菌株进行形态学鉴定,这4株菌种分别为哈茨木霉(Trichoderma harzianum)、木霉属(Trichoderma sp.)、绳状青霉(Penicilliumfuniculosum)和冻土毛霉(Mucorhiemalis)。该研究为植物氧化乐果残渣的资源化利用及氧化乐果的合理利用提供依据。     

一株具有杀松材线虫活性细菌的筛选和鉴定

为了筛选对松材线虫（Burrmphezen曲“5xylophilus）具有较高杀线活性的细菌,作者从腌制芥菜的表面分离出了一株对松材线虫具有较高杀灭活性的细菌,命名LZ～01。经形态学观察、生理生化分析及对该菌16SrDNA序列分析,将该茵鉴定为BacilluscereusLZ-01。利用该菌培养滤液对松材线虫的杀灭活性进行了检测,结果表明：处理10h时松材线虫的校正死亡率可达100％。     

陇南核桃黑斑病病原菌拮抗菌筛选及鉴定

为作物在生物防治方面提供理论依据,以陇南核桃黑斑病病原菌Xanthomonas campestris pv.Campestris为靶细菌,通过平板对峙法从核桃树根际土壤中筛选到拮抗效果较好的5株细菌。经16S r DNA分子鉴定,这5株细菌分属3个属,分别为节杆菌属Arthrobacter、八叠球菌属Sporosarcina及芽孢杆菌属Bacillus。其中节杆菌Arthrobacter sp.及莫海威芽孢杆菌Bacillus mojavensis拮抗效果最佳,其抑菌率分别达94.3%和92.3%,具有潜在的开发利用价值。     

新疆核桃腐烂病拮抗菌的筛选及鉴定

为给核桃促生菌群的构建提供菌株材料,通过对新疆核桃拮抗菌的分离纯化,筛选出对核桃腐烂病病原菌具有拮抗作用且能在其根际稳定定殖的优质高效菌株。从阿克苏、和田、喀什等新疆核桃主产区的根际土壤中分离出拮抗菌30株,采用对峙试验法对其拮抗能力进行测定,选出拮抗菌14株。经耐利福平诱导后剩余7株。将其进行大田定殖试验后,最终筛选出7株拮抗菌。经16S r DNA鉴定,这7株拮抗菌属于3个属,分别为假单胞菌属Pseudomonas、芽孢杆菌属Bacillus、链霉菌属Streptomyces,其中假单胞菌属为优势种属,且拮抗效果及稳定性最好。     

竹材木质素高效降解菌的分离筛选及鉴定

采用愈创木酚变色、苯胺蓝平板退色和酶活性测定筛选出高效降解竹材木质素的菌株。结果表明:通过腐烂的竹材等34份样品分离纯化出139株真菌;通过0.04%愈创木酚和0.1‰苯胺蓝平板初筛,从分离纯化的139株真菌中筛选出具有产木质素降解酶活性的7株降解菌;7株降解菌经液体产酶培养基复筛得到2株高效产降解木质素酶活的菌株:培养7 d,漆酶、木质素过氧化物酶和锰过氧化物酶活性分别达72.558、23.769、55.044和34.611、38.781、82.646 U/mL;2株降解菌FG-35和FG-98分别鉴定为革耳菌Panus lecomtei和烟管菌Bjerkandera adustus。