用鸭红细胞悬液消除非特异性凝集因子对鸭禽流感HI试验的影响

禽流感自1878年在意大利首次发生以来,该病不断蔓延。近年来,在许多国家和地区出现暴发和流行,成为严重危害养禽业健康发展的一种主要家禽传染病。加强禽流感的监测是预防和控制禽流感的重要措施。目前,基层单位大都采用微量红细胞血凝抑制试验(简称HI试验)来检测家禽禽流感血清抗体。但在检测过程中,笔者发现依照国标的要求采用鸡红细胞悬液来检测水禽禽流感血清抗体时,常常存在非特异性凝集现象。本试验用鸭红细胞悬液替代鸡红细胞悬液来检测水禽禽流感血清HI抗体,探讨是否能消除非特异性凝集因子对鸭禽流感HI试验的影响,现报道如下。1…     

不同家禽红细胞悬液对禽流感血清抗体检测的影响

为探讨不同家禽红细胞对禽流感血清抗体检测的影响，对不同家禽的禽流感阳性血清分别经不同方法处理后，做了一系列对比试验。结果发现，经受体破坏酶(RDE)处理后，虽然可以消除异种家禽血清对异种家禽红细胞的非特异性凝集作用的影响，但因处理复杂，费用高，不宜推广应用；经鸡红细胞吸附处理，可明显降低水禽血清对异种红细胞的非特异性凝集作用，但处理费时；而用水禽红细胞检测同种水禽的禽流感血清抗体，可以有效去除血清非特异性凝集的影响．且更能准确地反映水禽经禽流感疫苗免疫后的抗体水平。因而，应选用与宿主来源相同的红细胞悬液检测水禽禽流感血清抗体。     

禽流感抗体检测中鸭血清非特异性凝集因子去除方法的研究

为探讨不同方法对血凝抑制试验中鸭血清非特异性凝集因子的去除效果,通过对同一批鸭血清分别经不同方法处理后进行一系列对比试验。结果发现,使用鸡红细胞吸附处理法比水浴前处理法（56℃,1min）,更能有效去除非特异反应。经20%、10%鸡红细胞悬液预处理同一批鸭血清,表明20%、10%鸡红细胞悬液吸附处理能明显降低血清中非特异凝集因子的影响,20%鸡红细胞吸附在去除非特异性凝集上整体效果最好。在消除非特异性凝集因子上,采用20%鸡红细胞能够获得理想效果。     

禽流感血凝抑制试验中鸭血清非特异性凝集因子去除方法研究

为解决在鸭禽流感血凝抑制试验中鸭血清与鸡红细胞的非特异性凝集,影响抗体效价的准确性,采用10 mL/L鸭红细胞直接测定法和50 mL/L鸡红细胞吸附法进行非特异性去除试验,并对结果加以比较。结果表明,10 mL/L鸭红细胞直接测定法检测血清无须前处理,具有操作简便、耗时短的优点,可用于大量样本的检测。在进行小样本、高精度要求的检测时,适宜使用50 mL/L鸡红细胞吸附+鸭细胞测定法,以更有效去除非特异性反应。     

消除鹅禽流感血凝抑制试验中的非特异性凝集的方法探讨

将20份性状良好、抗体水平较高的皖西白鹅待检血清分成A、B、C三组，A组不作任何处理为对照组；B组56℃水浴30min；C组加入红细胞。试验结果是：对照组待检血清的抗体水平稍高于B、C组，但A组全部出现非特异性凝集，90％凝集达到第5孔；B组10％消除非特异性凝集，其余90％都凝集至第2孔；C组90％消除非特异性凝集，其余10％凝集至第1孔。     

不同方法对消除水禽血清非特异性现象试验

在国家标准中,血凝抑制试验(HAI)是检测高致病性禽流感方法中的一种,该方法的特点是需要除去普遍存在于血清中的非特异性凝集素,同时需要在每次试验时进行抗原标准化,另外需要正确判读的技能。如何去除非特异性因子,参阅书籍有以下几种方法:灭能、红细胞吸附、同种禽种的红细胞     

禽流感微量红细胞凝集抑制试验探讨

禽流感微量红细胞凝集抑制试验（HI检测），因为其微量、快速、可靠，能够处理大量的样品，并能在短时间内报告禽类血样的禽流感抗体滴度水平，因此成为出入境检验检疫部门基层实验室常用的方法。禽流感HI检测结果的准确与否，对于出入境检验检疫部门及时掌握禽群的禽流感抗体水平，提高对辖区内注册活禽养殖场的禽流感疫病的监控，保证供港澳活禽的顺利出口至关重要。笔者在长期的禽流感HI检测中，积累了如下经验，愿与大家进行交流探讨。     

浅谈禽流感微量红细胞凝集抑制试验

禽流感微量红细胞凝集抑制试验(HI检测),因为其微量、快速、可靠,能够处理大量样品,并能在短时间内报告禽类血样的禽流感抗体滴度水平,因此成为出入境检验检疫部门基层实验室常用的方法。禽流感HI检测结果准确与否,对于出入境检验检疫部门及时掌握禽群的禽流感抗体水平,提高对辖区内注册活禽养殖场的禽流感疫病的监控,保证供港澳活禽顺利出口至关重要。笔者长期从事禽流感HI检测,积累了一些经验,与大家进行交流探讨:1不同效价工作抗原的影响由于禽流感微量红细胞凝集抑制试验的结果判定是以完全抑制4个HAU抗原的血清最高稀释倍数作为HI…     

异源红细胞对HI试验监测禽流感疫苗免疫抗体结果影响的研究

H5N1亚型高致病性禽流感是一种急性、热性和高度接触性传染病,呈世界范围流行,严重危害家禽养殖业生产安全、动物产品质量安全和公共卫生安全,在国际上被列为＂A类动物传染病＂,也是我国兽医主管部门规定的＂一类动物疫病＂之一。由于其造成的经济和社会危害十分严重,为加强防控,国家已将其纳入《国家动物疫病强制免疫计划》,在饲养的鸡、水禽、鸽子、鹌鹑等禽类群体中全面施行免疫。     

不同种禽类红细胞悬液对HI结果的影响

红细胞凝集抑制试验能够用于监测某些畜禽传染病,如新城疫、禽流感等的抗体水平,由于动物血清中存在某些非特异性血凝物质,致使血凝抑制试验的结果出现非特异性血凝现象。本实验采用鸡、鸭和鹅的红细胞分别与同一份血清进行血凝抑制实验,结果表明,用鸡红细胞来检测鸭、鹅血清抗体效价时,出现非特异性血凝的血清份数较少;而用鸭、鹅红细胞来检测鸡血清的抗体效价时,出现非特异性血凝的血清份数较多。     

鸭禽流感免疫抗体血凝检测及其应用

鸭是禽流感传播链中的一个重要环节,能否有效防控鸭禽流感的关键之一是使用科学的检测方法.目前,是参照禽流感血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验标准(GB/T18936-2003)[1],但是,鸭体内含有非特异性抑制因子,血清中的唾液酸残基会模拟红细胞受体,同红细胞受体竞争与流感病毒血凝素的结合,因而会导致非特异性抑制结果(假阳性)的出现,用鸡红细胞悬液检测水禽禽流感血清抗体时,常常存在非特异性凝集现象,出现前带和后带现象,有时能严重影响结果的判定.为此,本文采用不同种家禽的红细胞悬液做重复试验,探讨水禽血清的处理方法及不同种的家禽红细胞悬液对水禽禽流感血清抗体检测的影响, 在临床应用中,可为鸭禽流感免疫技术提供参考依据.     

祛除禽流感HI试验中鹅血清非特异反应现象的研究

目前禽流感抗体水平监测采用GBT18936-2003的方法,此方法中要求采用1%鸡红细胞来进行血凝和血凝抑制试验,以测定禽流感的抗体水平,此方法较适用于免疫鸡相应抗体水平的测定[1-3],用于鹅抗体检测时常出现非特异凝集现象,试验结果很难判定。鉴于此,在利用血凝抑制试验进行血清抗体检测之前,有必要对血清中非特异性血凝抑制因子与非特异性凝集因子(非病毒性凝集因子)加以祛除。本试验对免疫后的鹅血清HI抗体检测方法进行探讨,寻求适合鹅血清HI抗体检测的方法。     

异种家禽红细胞对禽流感抗体检测的影响

为提高家禽对禽流感的免疫力,防治各种兽禽类传染疫病对人体造成影响,加强家禽动物疫苗的检测工作具有重大意义.通过对家禽抗体的检测,了解家禽疫苗的效果,及时洞察家禽疫病状况,并作出反应,本文就是在了解家禽红细胞对禽流感抗体检测影响前提下,提高家禽群体保护能力,避免禽流感对家禽养殖生产和人们身体健康造成影响.     

豚鼠醛化红细胞的制备及其在新城疫和禽流感HA/HI试验中的应用

目前,在新城疫(ND)和高致病性禽流感(HPAI)的疫情免疫监测中,血凝/血凝抑制试验(HA/HI)依然是基层畜牧兽医部分最主要的检测方法,β-微量法以其操作简便、迅速、易判定、能准确表达结果等优点被广泛应用。在HA/HI试验中,需要使用1%鸡新鲜红细胞作指示剂。但鸡新鲜红细胞存在着以下几个缺点:一是健康非免疫公鸡较难获得,尤其是不同鸡或同一羽鸡不同时期采的红细胞,用于实验可能存在较大的差异;二是新鲜鸡红细胞质脆易碎,保存期短,需临用时现采现配;三是新鲜鸡红细胞易吸附免疫球蛋白等物质,洗涤不彻底易影响实验结果。由此导致了血凝/…     

红细胞浓度对禽流感血凝和血凝抑制试验(HA/HI)结果的影响

高致病性禽流感是由A型禽流行性感冒病毒引起的一种禽类(家禽和野禽)的急性、高度接触性的传染病。高致病性禽流感因其在禽类中传播快、危害大、病死率高,可以直接感染人类,被世界动物卫生组织列为A类动物疫病,我国将其列为一类动物疫病。由于高致病性禽流感对畜牧业和人     

禽流感血凝抑制试验的质量控制

禽流感血凝抑制试验（HI试验）的原理是禽流感病毒在适宜的条件下对鸡的红细胞具有凝集作用,这种凝集作用可被特异性抗体所抑制,抗体与病毒结合后,可使血凝素不能吸附于红细胞表面的受体上,红细胞将进行自然下落,利用这种特性检测血清中禽流感抗体的试验就叫禽流感血凝抑制试验。禽流感血凝抑制试验的方法是将受检血清与标定好的抗原发生充分反应,再加入红细胞作用,因为其快捷、成本较低、便于操作、能够处理大量的样品,所以成为基层动物疫病实验室对禽流感诊断及免疫状态监测的重要手段,但禽流感血凝抑制试验能否成功,影响因素很多,如果不加强质量控制,极易造成试验结果偏差,甚至误判,给禽流感的防止工作带来不便。笔者在长期的实验室检测中积累了一些经验,愿与大家分享探讨。 1试验器材的质量控制     

异种家禽红细胞对禽流感抗体检测的影响

通过抗体监测及时掌握动物疫病流行规律和疫情动态,检测疫苗的免疫效果,从而完善免疫程序,提高畜禽对疫病的抵抗力,为有针对性地开展动物疫病预防控制工作,更有效防制各种传染病提供有力的保证。为及时掌握禽流感免疫效果,提高群体保护能力,严防高致病性禽流感疫情发生,血凝、血凝抑制试验被广泛地应用于检测各种家禽的禽流感抗体。笔者在检测过程中,     

新城疫血凝和血凝抑制试验(HA/HI)中红细胞浓度对结果的影响

新城疫是由新城疫病毒引起禽的一种急性、热性、败血性和高度接触性传染病,具有很高的发病率和病死率。除家禽外,至少有200多种鸟类可以自然或实验感染新城疫病毒,此病是危害养禽业的一种主要传染病,被世界动物卫生组织列为A类动物疫病,我国将其列为一类动物疫病。由于新城疫对畜牧业的危害和对国家政治、经济的影响     

浅谈影响禽流感血凝抑制试验的因素

血凝抑制试验可用于测定免疫抗体效价、辅助诊断病毒性疾病等方面。在基层工作中血凝抑制试验(HI)最常用于新城疫、禽流感等免疫抗体的检测。血凝抑制试验由于特异性好、能进行大量样本的分析、节省试剂和易于操作等优点,对实际生产中     

生地提取物对接种H9亚型禽流感疫苗雏鸡非特异性免疫功能的影响

本试验旨在研究生地提取物对雏鸡非特异性免疫功能的影响,采用单因素分组设计,选用1日龄雏鸡随机分为6组饲喂基础日粮,于14日龄接种H9亚型禽流感疫苗,每组分别给予以下处理:生地提取物添加组(Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组),分别在基础日粮中添加1、2、3g/L生地提取物;黄芪多糖组(Ⅳ组),在基础日粮中添加0.4mL/L黄芪多糖;免疫不给药组(Ⅴ组),接种H9亚型禽流感疫苗并饲喂基础日粮,空白组(Ⅵ组),不免疫H9亚型禽流感疫苗只饲喂基础日粮。药物添加期为7d,对鸡群在14、21、28、35、42、49、56日龄进行心脏采血,进行白细胞计数、溶菌酶以及IFN-α、TNF-α含量测定。结果表明,在7周采样周期内,与空白组相比,黄芪多糖和生地提取物的添加能不同程度的促进雏鸡白细胞的增殖,提高溶菌酶和IFN-α、TNF-α的含量(P0.05)。其中,中药添加组(Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组)较空白组(Ⅵ组)的白细胞数目有显著增加(P0.05),而中剂量组(Ⅱ组)与黄芪组(Ⅳ组)无显著差异(P0.05),35日龄时中剂量组和黄芪组较高、低剂量组(Ⅰ组)能显著增加雏鸡溶菌酶和TNF-α的含量(P0.05),14日龄~28日龄,生地提取物中剂量组和高剂量组与黄芪组的IFN-α含量无显著差异(P0.05),与空白组(Ⅵ组)差异显著(P0.05)。综上所述,生地提取物具有增强雏鸡非特异性免疫功能的作用,可以作为一种新型的免疫增强剂,建议生地提取物在雏鸡日粮中的添加剂量以2g/L为宜。