多房棘球绦虫-泡球蚴的体外培养研究

按照多房棘球绦虫幼虫-泡球蚴培养的培养基（RPMI-1640、M199和MEM）分为3组：Ⅰ组为含10％胎牛血清的RPMI-1640;Ⅱ组为含10％胎牛血清的MEM;HI组为含10％胎牛血清的M199。将泡球蚴在3种细胞培养液中进行培养,观察其存活、生长以及发育情况。结果显示,培养9d的泡球蚴的成活率分别为：Ⅰ组90．10％、Ⅱ组50．25％、Ⅲ组22．03％;成囊率分别为：Ⅰ组57．12％、Ⅱ组63．15％、Ⅲ组48．17％;头节外翻率分别为：Ⅰ组98．28％、Ⅱ组88．65％、Ⅲ组75．50％。可见,大多数虫体在早期向囊发育,一部分虫体头节外翻,并伴有规律的伸缩运动,但随时间的延长虫体运动减缓,又向囊蚴发育。通过对多房棘球绦虫泡球蚴的体外培养,初步表明合有10％小牛血清的细胞培养基RPMI-1640较适合泡球蚴的生长发育,为研究寄生虫发育提供了最基本的数据资料。     

多房棘球蚴诱导小鼠枯否氏细胞极化相关ceRNA调控网络的构建与分析

多房棘球蚴(Em)是一种危害严重的人畜共患寄生虫。为探索非编码RNA在多房棘球蚴感染诱导小鼠肝枯否氏细胞(KCs)极化中的作用机制,本研究用多房棘球蚴原头蚴感染BALB/c小鼠,分离感染2月小鼠肝KCs,通过RNA测序分析,构建与多房棘球蚴感染引起的KCs M2型极化相关的竞争性内源RNA (competing endogenous RNAs,ceRNA)调控网络,并通过qPCR和miRNA过表达进行验证。结果表明,多房棘球蚴感染小鼠2月后,KCs M1型标志分子均显著下调,而M2型标志分子均显著上调。5个circRNA和9个miRNA参与M2型标志分子IL10、IL13、Arg1基因的表达调控,而且其表达趋势与测序结果及circRNA-miRNA-mRNA调节关系基本一致。另外,miR-466c-5p过表达导致了circ_0000372和IL13的表达下调,说明可能存在circ_0000372-miR-466c-5p-IL13轴的调节关系,并在多房棘球蚴感染诱导小鼠肝KCs极化中发挥重要作用。本研究为进一步揭示多房棘球蚴调控宿主巨噬细胞极化的相关机制提供了重要理论依据。     

风柜斗草提取物通过调控脂质代谢改善小鼠肝脂质沉积症

旨在探究风柜斗草提取物(Sarcopyramis napalensis Wall extract,SNE)对蛋氨酸胆碱缺乏(MCD)饮食诱导的肝脏脂质沉积的作用与机制。本研究将60只雄性C57BL/6小鼠随机分为6组,每组10只,设置MCS组(MCD饲料的对照饲料组)、MCS+风柜斗草提取物组(400 mg·(kg·bw)^-1)、MCD组、MCD+风柜斗草提取物低、中、高剂量组(100、200、400 mg·(kg·bw)^-1),造模及药物干预6周。进行肝组织切片HE染色、天狼猩红染色,检测血清碱性磷酸酶(AKP)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT),肝组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活力水平及丙二醛(MDA)含量以评估肝脂质沉积、肝纤维化以及肝抗氧化情况。使用Western blot技术检测腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)蛋白的激活情况,使用qRT-PCR技术检测固醇调节元件结合蛋白-1C (SREBP-1c)、肝型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)、脂肪酸转运蛋白-3(FATP-3)、脂肪酸转运蛋白-4(FATP-4)、细胞间黏附分子-l (ICAM-1)、血管细胞黏附分子-l (VCAM-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、组织金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2) mRNA表达水平,同时采用LC-MS/MS技术进行肝组织非靶向脂质组学分析。结果表明,给予200、400 mg·(kg·bw)^-1剂量的风柜斗草提取物时均可显著改善MCD饲料饲喂的小鼠肝脂肪变性,减少炎症簇以及肝纤维化程度。给予风柜斗草提取物100、200、400 mg·(kg·bw)^-1时均可显著降低MCD饲料饲喂的小鼠血清中ALT和AKP的活力以及肝组织中MDA的含量,显著提高小鼠肝中GSH-Px的活力。Western blot及qRT-PCR检测结果显示,风柜斗草提取物显著激活MCD饲料饲喂的小鼠肝组织AMPK;显著抑制MCD饲料饲喂的小鼠肝组织SREBP-1c、L-FABP、FATP-3、FATP-4、ICAM-1、VCAM-1、MMP-2、TIMP-2的mRNA表达水平。肝脂质组学检测结果显示,风柜斗草提取物显著降低MCD饲料饲喂的小鼠肝中甘油三酯(TG)、磷脂酰甘油(PG)以及神经酰胺(Cer)的相对含量;显著提高鞘磷脂(SM)以及辅酶Q9相对含量。结果提示,风柜斗草提取物可通过AMPK/SREBP-1c途径抑制TG合成,以及通过抑制FATP与L-FABP表达来减少肝对脂肪酸的摄取,从而改善MCD饲料饲喂的小鼠肝脂肪变性;通过提高MCD饲料饲喂的小鼠肝组织中SM和辅酶Q9相对含量以及降低Cer相对含量,改善肝细胞氧化应激损伤情况,进而改善MCD饮食诱导的小鼠肝炎症和纤维化,最终达到改善肝脂质沉积症的作用。     

多房棘球蚴欧洲株与中国宁夏株在蒙古沙鼠肝组织内发育及病理损伤的比较

为观察多房棘球蚴不同地理株在蒙古沙鼠肝组织的发育状况及其对肝组织损伤情况的差异,本试验将欧洲株和中国宁夏株多房棘球蚴分别腹腔注射蒙古沙鼠,饲养并观察2个月,直至腹部出现明显肿大,然后对试验组和空白对照组蒙古沙鼠进行安乐死,剖检分离肝脏然后进行肝组织切片染色观察,并将不同地理株试验组和空白对照组进行比对分析。结果显示：2株不同地理株多房棘球蚴均能造成肝组织窦间隙增宽、新生血管增多并表现出不同程度的肝细胞损伤,但欧洲株多房棘球蚴肝组织窦间隙增宽较宁夏株明显,而宁夏株肝组织新生血管较欧洲株多;中国宁夏株棘球蚴生发层中有大量的原头蚴,欧洲株未见清晰的原头蚴。结果表明腹腔注射多房棘球蚴后,蒙古沙鼠肝组织受到破坏,不同地理株棘球蚴在感染后一定时期内对肝组织损害程度有差异,且中国宁夏株和欧洲株在蒙古沙鼠肝脏内的发育速度和原头蚴增殖能力有所不同。     

细粒棘球蚴感染对小鼠肝纤维化的影响

采用门静脉注射法建立细粒棘球蚴BALB/c小鼠高、低剂量(2 000、500原头蚴)肝脏模型,1、3及8个月后采集小鼠肝脏标本,Masson染色鉴定纤维化程度,免疫组化法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅲ型胶原蛋白(CollagenⅢ)的表达。Masson染色结果显示,病灶边缘带肝脏组织的胶原染色比正常肝脏组织明显增多并形成了致密的环状结构,在囊壁周围广泛分布,且与对照组相比,试验组纤维化程度具有统计学差异(P<0.01);免疫组化(α-SMA)染色显示,试验组小鼠肝脏中α-SMA主要表达在炎症浸润及肉芽组织增生区域,与对照组相比,试验组α-SMA的表达量具有统计学差异(P<0.01);免疫组化(CollagenⅢ)染色结果显示,正常肝脏组织中CollagenⅢ主要表达在血管周围,而在低剂量和高剂量细粒棘球蚴感染组小鼠肝脏中主要表达在病灶周围,且与对照组相比,不同时间点高剂量组和低剂量组具有统计学差异(P<0.001)。综上细粒棘球蚴感染小鼠可导致肝纤维化,且不同时间点不同剂量细粒棘球蚴感染小鼠肝脏中α-SMA、CollagenⅢ的表达水平随着胶原面积的增加而升...     

四种宠物鼠作为多房棘球绦虫的中间宿主的研究

用多房棘球绦虫(Echinococcus multilocularis,Em)原头蚴继发感染一线仓鼠(坎培尔仓鼠Dwarf Campbells RussianHamster)、冬白仓鼠(倭仓鼠Phodopus sungoris sungoris)、金丝熊仓鼠(黄金鼠Mesocricetus auratus)、松鼠(Sciurusvulgaris)4种宠物鼠各4只。接种70 d后剖解各种宠物鼠1只,一线仓鼠、金丝熊仓鼠、松鼠未发现包囊泡,冬白仓鼠分离出包囊泡4.37 g,占体重的7.23%;接种95 d后4种宠物鼠的平均湿包囊泡重和包囊泡重占体重的百分比分别为:冬白仓鼠13.05g和33.03%,金丝熊仓鼠2.22 g和1.98%,松鼠2.28 g和3.54%,冬白仓鼠、金丝熊仓鼠和松鼠都出现成熟原头蚴,一线仓鼠未发现包囊泡。试验证明冬白仓鼠、金丝熊仓鼠和松鼠对多房棘球绦虫原头蚴较敏感,可以作为Em的中间宿主。     

牛磺酸对蛋鸡脂质代谢的影响

将108只60周龄蛋用母鸡随机分为4组。每组3个重复,每个重复9只鸡。试验组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分别加入50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg 牛磺酸,对照组不加牛磺酸。结果表明,与对照组相比,试验组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ血清甘油三脂分别下降10．06％、13．03％、13．97％,差异极显著 (P<0．01);试验组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ血清总胆固醇分别下降9．95％、10．65％、 10．45％,差异极显著;血清高密度脂蛋白胆固醇,试验组Ⅰ下降 20．83％,差异显著(P<0．05);试验组Ⅱ、Ⅲ下降33．33％、29．19％,差异极显著(P<0．01);蛋黄总胆固醇,试验组Ⅰ下降3．17％,差异显著 (P<0．05);试验组Ⅱ、Ⅲ下降5．25％、6．76％,差异极显著(P<0．01)。     

四川石渠县犬多房棘球绦虫感染情况调查

为了解四川石渠地区犬只感染多房棘球绦虫的基本情况,采用巢式PCR对2016年采自该区的流浪犬粪样以及2016-2018年连续3年采集的家犬粪样进行检测,并测序分析。结果显示,流浪犬的感染率显著的高于家犬,其中流浪犬的总感染率为35.00%(35/100);而2016-2018年连续3年家犬的感染率呈明显下降的趋势,感染率分别为14.57%(37/254)、7.86%(24/305)、4.00%(12/300)。表明该地区犬多房棘球绦虫感染情况依然严峻,应继续重视和做好犬只的管理和驱虫工作。     

The first finding of Echinococcus multilocularis in dogs in Slovakia: an emerging risk for spreading of infection

Alveolar echinococcosis, caused by the metacestode Echinococcus multilocularis, is a zoonosis of public health significance. Apart from red foxes, other carnivore species can also serve as definitive hosts of this parasite. This study aimed to determine the occurrence of E. multilocularis in dogs in the Slovak Republic and identify risk factors for acquiring the infection. Out of 289 dogs examined, E. multilocularis was detected in eight samples (2.8%). Positive results were observed in shepherd dogs (12.5%), guard dogs (7.1%), hunting dogs (2.4%) and in one dog with unknown usage (2.5%). Catching rodents and feeding with raw viscera were confirmed to be the most important risk factors for E. multilocularis infection. On the contrary, the way of dog use, frequency of going to the rural areas, the age and gender of animals seem not to be risk factors for infection. No significant association was observed between the positivity of dogs coming from high endemic or non-endemic regions. This is the first report of E. multilocularis in dogs in the Slovak Republic that confirms substantial contribution of dogs to the transmission of the tapeworm in this territory and urges the necessity of prophylactic measures for dog owners.     

罗汉果皂苷对肥胖小鼠脂代谢的改善作用研究

【目的】 探讨罗汉果皂苷改善高脂喂养诱发肥胖的小鼠脂代谢异常的作用,并探讨其作用机制。【方法】 选取健康雄性昆明小鼠60只,以高脂饲料喂养4周后,随机分为6组：空白组、模型组、辛伐他汀组,以及罗汉果皂苷高（200 mg/（kg·d））、中（100 mg/（kg·d））、低（50 mg/（kg·d））剂量组,连续灌胃给药4周,同时维持高脂喂养。给药完成后,称量各组小鼠体重及脂肪组织重量,计算脂肪系数;检测小鼠血清和肝脏组织甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）及低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的含量,以及血清载脂蛋白A1（ApoA1）和载脂蛋白B （ApoB）含量,并测定肝脏中脂蛋白脂肪酶（LPL）和肝酯酶（HL）的活性。【结果】 与空白组相比,模型组小鼠体重、脂肪重量及脂肪系数均极显著升高（P<0.01）。与模型组相比,罗汉果皂苷高、中剂量组小鼠的脂肪重量及脂肪系数均显著降低（P<0.05）;高剂量罗汉果皂苷显著或极显著降低了小鼠血清及肝脏TC、LDL-C含量（P<0.05;P<0.01）,极显著升高了血清HDL-C含量（P<0.01）;高、中剂量罗汉果皂苷极显著降低了血清ApoB含量（P<0.01）,极显著或显著升高了小鼠肝脏LPL和HL的活性（P<0.01;P<0.05）。【结论】 罗汉果皂苷能预防高脂饲料诱导的肥胖小鼠血脂、肝脂和体脂的增加,其可能的作用机制是通过影响ApoB的合成及HL、LPL的活性。研究结果为将罗汉果皂苷开发为新的减肥降脂产品提供了依据。     

肝脏脂质代谢关键转录因子研究进展

目前发现的与肝脏脂质代谢相关的转录因子主要包括过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARs)、肝X受体(LXRs)和固醇调节元件结合蛋白(SREBPs)。这些转录因子通过对脂类代谢基因的调节,从而在维持机体的脂代谢平衡中起着重要作用。随着对转录因子的深入研究,以其为作用靶点的药物相继被开发出来,广泛应用于肥胖、高血脂、糖尿病等脂代谢障碍性疾病的防治,并表现出良好的临床效果和应用前景。论文通过综述肝脏脂质代谢关键转录因子的调控靶基因、调控机制和临床应用,旨在促进肝脏脂质代谢关键转录因子的进一步研究,以及临床新药的开发与应用。     

Spatial spreading of Echinococcus multilocularis in Red foxes (Vulpes vulpes) across nation borders in Western Europe

The occurrence of the fox tapeworm Echinococcus multilocularis in Red foxes was studied in Belgium and a neighbouring region in The Netherlands. A total number of 1202 foxes were analysed (1018 in Belgium and 184 in The Netherlands) of which 179 were infected with E. multilocularis (164 in Belgium and 15 in The Netherlands). Further, the spatial distribution of infection among sampled foxes was analysed with an ellipsoidal gradient, demonstrating a decreasing prevalence in northwestern direction. Using this gradient, we showed that the spatial patterns of infection in Belgium and the neighbouring region in The Netherlands correspond, indicating a continuous distribution of E. multilocularis across the nation borders. Part of the Belgian data allowed investigating temporal changes in the spatial distribution of E. multilocularis. This revealed a northwestern spread of E. multilocularis.     

饲粮中添加泛酸对生长獭兔肝脏脂肪代谢的影响

本试验旨在研究饲粮中添加泛酸对生长獭兔肝脏脂肪代谢的影响。试验选用体重相似的断奶獭兔160只,随机分为4组,每组40个重复,每个重复1只。对照组獭兔饲喂基础饲粮,试验组獭兔分别饲喂在基础饲粮中添加10、20和40 mg/kg泛酸的饲粮。预试期7 d,正试期56 d。结果表明:与对照组相比,饲粮中添加40 mg/kg泛酸显著降低了生长獭兔肩胛、胃周和肾周脂肪沉积率(P0.05);饲粮中添加10~20 mg/kg泛酸显著降低了生长獭兔肝脏中脂滴的含量(P0.05)。饲粮中泛酸添加水平对生长獭兔血浆中总胆固醇和白蛋白的含量无显著影响(P0.05);随着饲粮中泛酸添加水平的升高,生长獭兔血浆中甘油三酯的含量先降低后趋于稳定,20、40 mg/kg添加组显著低于对照组(P0.05);与对照组相比,饲粮中添加20~40 mg/kg泛酸显著升高了生长獭兔血浆中极低密度脂蛋白的含量(P0.05)。与对照组相比,饲粮中添加40 mg/kg泛酸显著增加了肝脏中激素敏感脂酶(HSL)和骨骼肌中脂肪酸转运蛋白(FATP)基因的表达量(P0.05);饲粮中添加20~40 mg/kg泛酸显著增加了肝脏中肉毒碱棕榈酰转移酶1(CPT1)基因的表达量(P0.05);饲粮中添加10~40 mg/kg泛酸显著增加了肝脏中脂肪酸合成酶(FAS)基因和骨骼肌中CPT1基因的表达量(P0.05)。综上所述,饲粮中添加泛酸影响生长獭兔肝脏内脂肪代谢,泛酸添加水平为40 mg/kg时可降低肝脏内脂肪的沉积,并能降低机体脂肪沉积率,增加骨骼肌对脂肪酸的摄取和利用。     

甘氨酰谷氨酰胺二肽对黄羽肉鸡肝脏脂肪代谢的影响及其机制的研究

选择360只1日龄优质黄羽肉鸡,随机分为4组,分别饮用凉开水配制的浓度为0、0．01、0．05和0．10mg／L的甘氨酰谷氨酰胺（Gly—Gin）二肽溶液,连续饮用41d。用甘油三酯试剂盒测定肝脏总甘油三酯的含量。采用相对定量RT—PCR的方法来检测ACC（acetyl—CoAcarboxylase）和PPAR0a（peroxisomeproliferator—activatedreceptorsa）mRNA的表达水平。试验结果表明：①Glv—Gln二肽能够呈现剂量依赖性的降低肝脏4CCmRNA的表达水平,0．10mg／LGly—Gin二肽处理组较对照组差异显著（P〈0．05）。②Glv—Gln二肽能够显著上调只附R仅基因mRNA的表达水平,其中0．05mg／LGly—Gln二肽处理组较对照组差异显著（P〈0．05）。③Gly—Gln二肽具有提高肝脏甘油三酯含量的趋势,但差异不显著（P〉0．05）。以上结果提示,Glv—Gln二肽能够通过降低肝脏甘油三酯的合成,促进代谢,从而减少脂肪沉积水平。     

饲粮中胆碱添加水平对3～5月龄獭兔肝脏脂肪代谢的影响

本试验旨在研究饲粮中胆碱添加水平对3~5月龄獭兔肝脏脂肪代谢的影响。选用200只体重相近的3月龄獭兔,随机分成5组(每组40个重复,每个重复1只),分别饲喂在基础饲粮基础上添加0(对照)、200、400、600和800 mg/kg的50%氯化胆碱(折算为胆碱的添加水平后分别为0、87、174、261和348 mg/kg)的试验饲粮,试验饲粮实测胆碱水平分别为812、902、993、1 086和1 170 mg/kg。预试期7 d,正试期53 d。结果表明:饲粮中胆碱添加水平显著影响肝脏中单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸的含量(P0.05)。与对照组相比,饲粮中添加87、174、261和348 mg/kg的胆碱显著增加血清中类胰岛素样生长因子1(IGF-1)和瘦素(LEP)的含量(P0.05),饲粮中添加174和261 mg/kg的胆碱显著增加血清中生长激素(GH)的含量(P0.05),饲粮中添加261和348 mg/kg的胆碱显著增加血清中脂蛋白酯酶(LPL)的活性和极低密度脂蛋白(VLDL)的含量(P0.05),饲粮中添加261 mg/kg的胆碱显著提高肝脏中肉碱棕榈酸转移酶1(CPT1)m RNA的表达水平(P0.05)。综上所述,饲粮中添加261 mg/kg的胆碱(饲粮实测胆碱水平为1 086 mg/kg)改变了獭兔肝脏中脂肪酸组成,促进了肝脏中脂肪酸氧化关键基因CPT1的表达,同时加强了肝脏中甘油三酯(TG)的输出过程。     

初生重对新生梅山仔猪肝脏发育和脂代谢的影响

本试验旨在研究初生重对新生梅山仔猪肝脏发育和脂代谢的影响。选取正常初生重(NBW)和低初生重(LBW)新生梅山仔猪各6头,不喂食母乳,出生6h内颈动脉放血致死。取仔猪血液测定血浆脂代谢指标,屠宰取样测定肝脏器官指数、肝脏脂代谢指标及相关基因的表达。结果表明:与NBW组相比,LBW组新生梅山仔猪的肝脏细胞粒径和面积极显著降低(P<0.01);血浆总胆固醇(TC)含量极显著升高(P<0.01),血浆低密度脂蛋白(LDL)含量显著升高(P<0.05),血浆甘油三酯(TG)含量极显著降低(P<0.01);肝脏TC含量显著降低(P<0.05),肝脏TG含量和脂蛋白脂酶(LPL)活性极显著降低(P<0.01),肝脏肝脂酶(HL)活性呈下降趋势(P=0.086);肝脏脂肪酸合成酶(FAS)和LPL的基因表达量极显著降低(P<0.01),肝脏激素敏感脂肪酶(HSL)的基因表达量显著降低(P<0.05)。上述结果显示,LBW会抑制新生梅山仔猪的肝脏发育,降低脂代谢功能。     

苜蓿草粉对肉兔脂质代谢和抗氧化性能的影响

本研究旨在探讨苜蓿草粉对肉兔脂质代谢和抗氧化性能的影响。采用随机区组试验设计将120只生长兔分为6组,即分别在日粮中添加0(对照组)、20%(试验Ⅰ组)、30%(试验Ⅱ组)、40%(试验Ⅲ组)、50%(试验Ⅳ组)和60%(试验Ⅴ组)的苜蓿草粉,试验期45 d。结果表明:①除试验Ⅴ组外,血液中的甘油三酯和总胆固醇含量随苜蓿草粉的增加而降低;②肝脏和肌肉中总胆固醇、甘油三酯含量随苜蓿草粉添加量的增加而降低,但只有肌肉中的总胆固醇含量在试验组间存在差异性,即试验Ⅳ组显著低于对照组(P<0.05),其余均不显著(P>0.05);③血清、肝脏及肌肉中超氧化物歧化物酶和谷胱甘肽过氧化酶含量随苜蓿草粉的增加而显著升高(P<0.05),丙二醛含量显著降低(P<0.05)。提示,在肉兔日粮中添加40%~50%苜蓿草粉能起到降低肉兔血液和肌肉中总胆固醇含量,提高兔体抗氧化性能的作用。