亚急性瘤胃酸中毒耐受性不同的奶牛血浆和乳中脂肪酸及代谢物组成分析

为比较研究对亚急性瘤胃酸中毒（SARA）耐受性不同的奶牛血浆和乳中代谢组的差异，试验选用12头装有永久性瘤胃瘘管的泌乳中期荷斯坦奶牛［泌乳天数=（114±22） d］，饲喂精粗比为4∶6的全混合日粮。在试验期第20和21天晨饲后0、2、4、6、8和12 h监测瘤胃pH值，在早晚饲喂前收集奶样，晨饲6 h后采集颈静脉血，用于测定脂肪酸及代谢物组成。基于奶牛瘤胃平均pH值高低，将奶牛分为SARA易感组（SUS，瘤胃pH=5.76，n=4）和SARA耐受组（TOL，瘤胃pH=6.10，n=4）。脂肪酸测定结果分析显示，与TOL组相比，SUS组奶牛血液及乳中的碳链长度≤C16的脂肪酸含量显著增高（P<0.05），而>C16的脂肪酸的含量显著降低（P<0.05），乳中饱和脂肪酸及单不饱和脂肪酸含量均显著降低（P<0.05）。血浆代谢组结果显示， SUS组奶牛血浆中L-苯丙酮酸水平显著降低（P<0.05），而MG（18：0/0：0/0：0）、9-HODE、12（13） Ep-9-KODE、烟酰胺、异戊基肉碱、磷酸肌酸和L-谷氨酸水平显著升高（P<0.05）。乳代谢组分析结果显示，与TOL组比较，SUS组奶牛乳中的1-硬脂酰磷酸甘油丝氨酸和鞘氨醇水平显著升高（P<0.05），而甘油磷酰基乙醇胺、3-磷酸甘油和乳清酸等其他14个差异代谢物水平显著降低（P<0.05），这些差异代谢物主要涉及甘油磷脂代谢、甘油脂代谢及泛酸与辅酶A代谢等代谢途径。综上所述，SARA耐受性不同的奶牛的血浆和乳中脂肪酸及代谢物组成存在较大差异，SUS组奶牛血浆中氨基酸代谢活动增加，乳腺的乳脂从头合成能力较强，而从血液中摄取长链脂肪酸能力减弱，与此同时，易感奶牛乳中磷脂、乳清酸等营养物质水平下降，乳品质下降。     

高精料对泌乳奶山羊瘤胃上皮氧化应激和胆固醇代谢的影响

为了研究长期或短期饲喂高精料日粮对泌乳期奶山羊瘤胃上皮组织氧化应激和胆固醇代谢的影响,实验选用17只健康的经产泌乳中期关中奶山羊,随机分为3组:饲喂低精料组(对照组,LC,n=5);长期饲喂高精料组(HL, n=7),19周饲喂期;短期饲喂高精料组(HS,n=5),4周饲喂期。实验结束后采集瘤胃组织,用PBS反复清洗,于液氮中速冻后置于-80 ℃冰箱保存。结果显示,与对照组相比,HL和HS组山羊瘤胃上皮组织中细胞周期相关基因CDK2和CDK4 mRNA表达水平显著升高(P<0.05),且HS组p-ERK1/2蛋白表达显著升高(P<0.05),但GPR41和GPR43蛋白表达无显著变化(P>0.05);HL和HS组山羊瘤胃上皮组织促细胞凋亡基因Casepase9 mRNA表达显著升高(P<0.05),HS组抗凋亡Bcl-2/Bax mRNA表达比例呈下降趋势(0.050.05);HS组瘤胃上皮组织中胆固醇含量下降达显著水平(P<0.05),且HL组呈下降趋势(0.05+ ATPase mRNA表达显著升高(P<0.05),NHE2蛋白表达升高但未达显著差异水平(P>0.05)。与HL组相比,HS组山羊瘤胃上皮组织中总抗氧化能力T-AOC显著升高(P<0.05);且胆固醇含量显著下降(P<0.05)。以上结果说明,短期饲喂高精料日粮可加快泌乳期奶山羊瘤胃上皮组织的更新,提高组织总抗氧化能力;而长期饲喂高精料日粮未引起细胞增殖相关蛋白和总抗氧化能力的显著变化;饲喂高精料日粮可以加快瘤胃上皮组织对VFA的转运。此外,饲喂高精料日粮引起瘤胃上皮组织内胆固醇含量降低,胆固醇酰基转移酶基因表达的显著上调,提示其对瘤胃上皮组织更新的潜在影响。     

饲粮不同非纤维性碳水化合物/中性洗涤纤维对细毛羊氮代谢、瘤胃内环境及挥发性脂肪酸吸收的影响

本试验旨在研究饲粮不同非纤维性碳水化合物/中性洗涤纤维(NFC/NDF)对细毛羊氮代谢、瘤胃内环境及挥发性脂肪酸(VFA)吸收的影响。选用9只装有永久性瘤胃瘘管的内蒙古鄂尔多斯细毛羊半同胞羯羊,按体重随机分为3组,1组、2组和3组饲粮NFC/NDF分别为0.35、0.66和1.14,粗蛋白质含量均为13.50%。结果表明:1)饲粮NFC/NDF对摄入氮、粪氮、尿氮和沉积氮无显著影响(P>0.05),1组尿中尿素氮含量显著高于2组(P<0.05),极显著高于3组(P<0.01),并且2组显著高于3组(P<0.05)。2)采食1.5和3.0 h以后,1组氨态氮(NH_3-N)含量显著高于3组(P<0.05),采食4.5 h后,各组间NH_3-N含量无显著差异(P> 0.05)。pH均在6.0～6.8,1组pH显著高于3组(P <0. 05)。3)采食1. 5 h后,1组乙酸含量显著高于2组(P <0.05),极显著高于3组(P<0.01)。采食1.5、3.5和4.0 h后,1组和2组丙酸含量显著低于3组(P<0.05)。1组采食前及采食后丁酸含量均显著高于3组(P<0.05)。4) 2组和3组Na^+/H^+交换蛋白3(NHE3)和下调式腺瘤载体(DRA)基因表达量显著高于1组(P<0.05)。1组单羧酸转运蛋白4(MCT4)基因表达量显著高于2组和3组(P <0. 05)。而2组Na^+/H^+交换蛋白1(NHE1)和钠/钾ATP酶泵(Na^+/K^+ATPase)基因表达量显著高于1组和3组(P <0. 05)。综上所述,饲粮NFC/NDF为0.66时,对细毛羊瘤胃内环境和VFA吸收相关基因表达量有显著影响。     

奶牛亚急性瘤胃酸中毒（SARA）的易感因素及其对瘤胃功能的影响

在奶牛养殖中,亚急性瘤胃酸中毒（subacute ruminal acidosis,SARA）是一种高发的营养代谢病。随着我国奶牛养殖集约化程度的提高,为提升奶牛生产性能饲喂大量高能谷物饲料极易诱发SARA,导致瘤胃液pH值降低,瘤胃菌群发生改变,瘤胃上皮黏膜层受损,进而影响瘤胃代谢功能。分析了奶牛不同生理阶段、择食行为以及个体差异等SARA的易感因素,探讨了SARA对奶牛瘤胃菌群变化、瘤胃上皮细胞基因表达、瘤胃屏障功能的影响,以期为阐明SARA造成瘤胃功能损伤的机制、降低奶牛发生SARA的风险提供参考。     

亚急性瘤胃酸中毒奶山羊瘤胃上皮形态结构和通透性的变化

本试验旨在研究亚急性瘤胃酸中毒(SARA)对瘤胃上皮形态结构和通透性的影响。选用体况良好、体重相近的泌乳期萨能奶山羊9只,随机分为3组(对照组、SARA组、恢复组,n=3),对照组饲喂基础饲粮[非纤维性碳水化合物与中性洗涤纤维比(NFC/NDF)=1.40],SARA组和恢复组先后饲喂NFC/NDF为1.40、1.79、2.31、3.23的4种试验饲粮诱导SARA发生,每种饲喂15 d,恢复组奶山羊待SARA诱导成功后自由采食青干草30 d。对照组奶山羊分别在饲养30、60(与SARA组3只同时)和90 d(与恢复组3只同时)各屠宰1只。采集瘤胃腹囊部上皮组织用于石蜡切片、透射电子显微镜观察及尤斯灌流系统(Ussing chamber)研究。结果表明:1)组织切片结果显示,瘤胃上皮角质层厚度SARA组显著高于对照组和恢复组(P0.05),恢复组显著低于对照组(P0.05);颗粒层厚度对照组显著高于SARA组和恢复组(P0.05),但SARA组和恢复组之间无显著差异(P0.05);棘突层厚度3组之间无显著差异(P0.05);上皮总厚度恢复组显著低于对照组和SARA组(P0.05),但对照组与SARA组之间无显著差异(P0.05)。透射电子显微镜结果显示,SARA组瘤胃上皮紧密连接被破坏,细胞间隙增大,棘状层细胞线粒体出现降解并出现空泡。2)与对照组相比,SARA组和恢复组瘤胃上皮短路电流(Isc)、组织导电性(Gt)和辣根过氧化物酶(HRP)流速显著升高(P0.05),跨膜电位差(PD)显著降低(P0.05)。综合得出,SARA破坏了奶山羊瘤胃上皮形态结构的完整性,使瘤胃上皮通透性增加,导致瘤胃上皮屏障功能长期受损。     

亚急性瘤胃酸中毒对泌乳奶牛血浆生化指标及代谢组的影响研究

本试验旨在探究亚急性瘤胃酸中毒（subacute rumen acidosis, SARA）对泌乳奶牛血液生化指标和血浆代谢组的影响。试验选用8头装有永久性瘤胃瘘管的泌乳中期奶牛,随机分成对照组（CON）（n=4）和处理组（SARA）（n=4）,CON组与SARA组分别饲喂精粗比为4∶6和6∶4的全混合日粮,试验周期为3周。于试验期每周最后一天晨饲后0、2、4、6、8和12 h进行瘤胃pH的测定,同时在pH测定当天晨饲后6 h采集颈静脉血样,用于血液生化指标和代谢组的分析。结果表明,与CON组相比,SARA组的瘤胃pH显著降低（P=0.002）,两组干物质采食量没有显著差异（P=0.524）。血浆生化指标结果显示,与CON组比较,SARA组奶牛的β-羟丁酸浓度显著降低（P=0.007）,甘油三酯浓度显著升高（P=0.014）。采用液相-质谱（LC-MS）联用技术对血浆进行代谢组学分析,主成分分析（PCA）和偏最小二乘法分析（PLS-DA）结果显示,SARA组奶牛血浆代谢物组成较CON组发生明显变化,两组间共检测到26种差异代谢物（VIP>1 & FDR<0.05）,与CON组相比,SARA组奶牛血浆中的7-酮脱氧胆酸、脱氧胆酸、胆酸、12-酮脱氧胆酸、12（13）Ep-9-KODE、12,13-DHOME和L-天冬酰胺代谢物含量显著升高（FDR<0.05）,而十一烷二酸、十六烷二酸、9-HODE、血氧烷B3、PGE2、L-精氨酸、L-色氨酸、L-苏氨酸、异丁酰甘氨酸、异戊酰甘氨酸、马尿酸、4-羟基马尿酸和6-磷酸-2-脱氢-D-葡萄糖酸酯等代谢物含量显著降低（FDR<0.05）。综上,与CON组比较,SARA组奶牛的脂代谢、氨基酸代谢和糖代谢发生显著变化,这些物质可作为SARA潜在的生物标志物。     

SARA对泌乳奶牛NaHCO3摄入量的影响

SARA是一种普通却很有经济意义的奶牛代谢紊乱症。由于诊断SARA比较困难．因此这方面的文献资料较少。Oetzel等（1999）发现商业奶牛场产奶期间为1～120天的奶牛有20．1％存在SARA。SARA通常发生于产奶早期的奶牛。此时奶牛的瘤胃还没有适应从青粗料向浓缩料的转变。非结构性碳水化合物如淀粉和糖的发酵会导致大量VFA和乳酸盐的产生．乳酸盐在瘤胃中累积．结果降低瘤胃PH值。     

断奶前补饲不同直/支链淀粉比开食料对羔羊瘤胃上皮发育的影响

为了研究断奶前补饲不同直/支链淀粉比开食料对羔羊瘤胃上皮发育的影响,选取24只体况良好、胎次一致、体重相近的10日龄羔羊(湖羊),将其随机分为3组,在饲喂相同母乳的基础上,分别补饲以纯木薯(CS)、玉米(MS)和豌豆淀粉(PS)(直/支链淀粉比分别约为0.11,0.27和0.44)为唯一淀粉来源的开食料。试验期间,每天4:00-19:00将羔羊抱入补饲栏补饲不同直/支链淀粉比的开食料,并且在6:30, 10:30和15:30将羔羊抱回母羊舍哺乳1 h。羔羊自由饮水,单栏饲喂,自由采食燕麦干草。56日龄时屠宰采样,采集瘤胃组织样品制作石蜡切片进行瘤胃乳头形态测定,采集瘤胃上皮样品提取RNA测定相关基因表达。结果表明:CS组羔羊瘤胃乳头长度和表面积显著(P<0.001)高于MS和PS组,CS和MS组羔羊瘤胃乳头宽度显著(P=0.001)高于PS组。对瘤胃上皮各层厚度统计显示,CS和PS组羔羊瘤胃上皮角质层厚度显著(P=0.001)高于MS组;CS和MS组羔羊瘤胃上皮颗粒层厚度显著高于(P<0.001)PS组;CS组羔羊瘤胃上皮棘基层厚度和总厚度显著(P<0.001)高于MS和PS组。qRT-PCR结果显示:不同直/支链淀粉比开食料显著影响羔羊瘤胃上皮CDK2和CDK6的mRNA表达量(CS>MS>PS, P<0.001);CS组羔羊瘤胃上皮细胞cyclin A和CDK4的mRNA表达量显著(P<0.05)高于PS组,但与MS组无显著差异;CS组羔羊瘤胃上皮cyclin D1的mRNA表达量显著(P=0.012)低于PS组,但与MS组无显著差异。CS组羔羊瘤胃上皮类胰岛素生长因子-1(insulin like growth factor,IGF-1)的mRNA表达量显著(P<0.001)高于MS和PS组,CS和MS组羔羊瘤胃上皮IGF-1R的mRNA表达量显著(P=0.001)高于PS组。上述结果表明:较高支链淀粉比开食料与较高直链淀粉比开食料相比,在瘤胃中较易降解生成挥发性脂肪酸,促进瘤胃上皮IGF-1及细胞周期蛋白mRNA的表达,进而有利于断奶前羔羊瘤胃上皮的发育。研究结果对制订羔羊营养方案具有重要指导意义。     

椰子油对海南黑山羊羔羊瘤胃上皮发育的影响

为了探讨椰子油对羔羊瘤胃上皮发育的影响,该试验选用24只10日龄海南黑山羊羔羊,随机分成4个组,每组6个重复,在基础日粮中分别添加0(Ctrl组)、4 g/d(LCO组)、6 g/d(MCO组)和8 g/d(HCO组)椰子油,饲养周期90 d,集中屠宰采集瘤胃,分别测定瘤胃重量、体积,制备瘤胃上皮石蜡切片,光镜下检测瘤胃上皮发育情况。结果表明：MCO组羔羊瘤胃容积显著大于其它3组(P<0.05),瘤胃重和瘤胃指数无显著差异(P>0.05);LCO组和MCO组瘤胃上皮乳头表面积显著增加(P<0.05),HCO组上皮乳头密度与其它组相比极显著降低(P<0.01),椰子油对上皮乳头长度和厚度无显著影响(P>0.05);椰子油使羔羊瘤胃上皮乳头角质层(SB)细胞明显增多(P<0.05),LCO组和HCO组颗粒层(SG)细胞显著增多(P<0.05),MCO组和HCO组棘突层(SS)细胞显著增多(P<0.05)。结果提示,添加6 g/d的椰子油能使羔羊瘤胃的容积显著增加,一定程度刺激瘤胃上皮乳头细胞层的增生,促进羔羊瘤胃的发育。     

核黄素和包被核黄素对公牛生长性能和养分消化的影响

为研究核黄素（RF）和包被RF(CRF)对牛生长性能、瘤胃发酵和血液指标的影响,用9头瘤胃瘘管牛进行3×3拉丁方试验,对照组、RF组和CRF组分别添加0、0.06 g/kg的RF和CRF。结果表明,与对照组相比,添加RF或CRF使牛日增重和养分消化率显著提高（P<0.05）;料重比显著降低（P<0.05）,且CRF组显著低于RF组（P<0.05）。添加RF或CRF,瘤胃总挥发性脂肪酸（VFA）含量和菌群数量显著提高（P<0.05）,氨态氮含量显著减少（P<0.05）;RF组总VFA、瘤胃普雷沃氏菌和纤维分解菌数量显著高于CRF组（P<0.05）。添加RF或CRF牛的血液中葡萄糖、总蛋白、白蛋白、胰岛素样生长因子-1和RF浓度显著增加（P<0.05）;CRF组总蛋白、胰岛素样生长因子-1和RF浓度显著高于RF组（P<0.05）。说明RF或CRF均能提高公牛ADG和养分消化率;CRF对改善饲料效率和RF状态更有效。     

Responsive changes of rumen microbiome and metabolome in dairy cows with different susceptibility to subacute ruminal acidosis

Subacute ruminal acidosis(SARA)represents one of the most important digestive disorders in intensive dairy farms,and dairy cows are individually different in the severity of SARA risk.The objectives of the current study were to investigate differences in the ruminal bacterial community and metabolome in dairy cattle with different susceptibility to SARA.In the present study,12 cows were initially enrolled in the experiment.Based on average ruminal pH,4 cows with the lowest ruminal pH were assigned to the susceptible group(SUS,pH=5.76,n=4)and 4 cows with the highest ruminal pH assigned to the tolerant group(TOL,pH=6.10,n=4).Rumen contents from susceptible(SUS,n=4)and tolerant(TOL,n=4)dairy cows were collected through rumen fistula to systematically reveal the rumen microbial and metabolic alterations of dairy cows with different susceptibility to SARA using multi-omics approaches(16S and 18S rRNA gene sequencing and metabolome).The results showed that despite being fed the same diet,SUS cows had lower ruminal pH and higher concentrations of total volatile fatty acids(VFA)and propionate than TOL cows(P<0.05).No significant differences were observed in dry matter intake,milk yield,and other milk compositions between the SUS and TOL groups(P>0.05).The principal coordinates analysis based on the analysis of molecular variance indicated a significant difference in bacterial composition between the two groups(P=0.01).More specifically,the relative abundance of starch-degrading bacteria(Prevotella spp.)was greater(P<0.05),while the proportion of fiber-degrading bacteria(unclassified Ruminococcaceae spp.,Ruminococcus spp.,Papillibacter,and unclassified Family_-XIII)was lower in the rumen of SUS cows compared with TOL cows(P<0.05).Community analysis of protozoa showed that there were no significant differences in the diversity,richness,and community structure(P>0.05).Metabolomics analysis revealed that the concentrations of organic acids(such as lactic acid),biogenic amines(such as histamine),and bacterial degradation products(such as hypoxanthine)were significantly higher in the SUS group compared to the TOL group(P<0.05).These findings revealed that the higher proportion of starch-degrading bacteria/lower fiber-degrading bacteria in the rumen of SUS cows resulted in higher VFA-producing capacity,in particular propionate.This caused a disruption in metabolic homeostasis in the rumen which might be the reason for the higher susceptibility to SARA.Overall,these findings enhanced our understanding of the ruminal microbiome and metabolic changes in cows susceptible to SARA.     

添加亚油酸条件下不同剂量硝酸钠对水牛瘤胃体外发酵脂肪酸组成及相关微生物数量的影响

为了探究添加亚油酸条件下不同剂量硝酸钠对水牛瘤胃体外发酵脂肪酸组成及相关微生物数量的影响,本试验选用3头装有永久性瘤胃瘘管的母水牛,以精粗比40∶60为底物进行瘤胃液体外发酵试验。试验组硝酸钠的浓度分别为1、2、3 mg·mL^-1,对照组不加硝酸钠,每组均添加0.25 mg·mL^-1的亚油酸,每组各5个重复。在体外培养3、6、9、12、24 h时测定产气量和甲烷产量,24 h结束培养,测定瘤胃体外发酵参数、脂肪酸含量及瘤胃微生物数量。结果表明：1）添加硝酸钠显著降低了总产气量和甲烷产量（P<0.05）;2）添加硝酸钠pH值和氨态氮（NH₃-N）含量显著升高（P<0.05）,异丁酸和异戊酸含量显著降低（P<0.05）,而对总挥发性脂肪酸（TVFA）含量无显著性影响（P>0.05）;3）添加1 mg·mL^-1硝酸钠,C18：2cis-9,trans-11、C18：2trans-10,cis-12含量和不饱和脂肪酸/饱和脂肪酸（UFA/SFA）显著高于其他组（P<0.05）,且C20：5n3 （EPA）含量显著高于添加3 mg·mL^-1硝酸钠组（P<0.05）,添加2 mg·mL^-1硝酸钠C22：6n3 （DHA）含量显著高于其他组（P<0.05）;4）添加硝酸钠组原虫数量显著低于对照组（P<0.05）,添加2、3 mg·mL^-1硝酸钠产甲烷菌数量显著低于添加1 mg·mL^-1硝酸钠组（P<0.05）,添加1 mg·mL^-1硝酸钠总细菌、真菌、溶纤维丁酸弧菌、蛋白分解丁酸弧菌、非典型丁酸弧菌、亨氏丁酸弧菌数量显著高于其他组（P<0.05）。由此可得,体外法添加1~3 mg·mL^-1硝酸钠和0.25 mg·mL^-1亚油酸在维持水牛TVFA含量不变的情况下显著降低了甲烷含量,且1 mg·mL^-1硝酸钠能促进亚油酸生成共轭亚油酸（CLA）,优化脂肪酸组成,并能增加大多数瘤胃微生物的数量。     

精料补饲水平对暖季放牧牦牛瘤胃发酵和菌群结构的影响

为了研究精料补饲水平对暖季放牧牦牛瘤胃发酵和菌群结构的影响,试验选取体重相近、体况良好的公牦牛48头,随机分为4组,每组12头,以放牧为对照组,3个补饲组分别补饲0.5（Ⅰ）、1.5（Ⅱ）和2.5 kg·d^-1（Ⅲ）精料。预试期10 d,正式期60 d。结果表明：1）随着精料补饲水平的提高,瘤胃液pH值,乙酸浓度和乙酸/丙酸值呈线性和二次降低（P<0.05）;瘤胃总挥发性脂肪酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸和异戊酸浓度呈线性和二次提高（P<0.05）;其中补饲Ⅱ和Ⅲ组的微生物蛋白浓度显著高于其他两组（P<0.05）。2）4组共产生3138个OTU,其中共有OTU为1337个,占总OTU数目的42.61%,对照组与补饲Ⅲ组独有OTU分别为183和106个;瘤胃液细菌的物种数、Chao1指数和香农（Shannon）指数随精料补饲的提高呈线性和二次降低（P<0.05）。3）在门水平上,瘤胃拟杆菌门（Bacteroidetes）相对丰度呈线性和二次提高（P<0.05）;而厚壁菌门（Firmicutes）相对丰度随精料补饲水平提高呈线性和二次降低（P<0.05）;放线菌门（Actinobacteria）相对丰度随精料补饲水平的提高呈线性提高（P<0.05）。在属水平上,随精料补饲水平的提高,瘤胃普雷沃菌属_1（Prevotella_1）、克里斯滕森菌科_R-7（Christensenellaceae_R-7）及普雷沃氏菌科_UCG-001（Prevotellaceae_UCG-001）相对丰度呈线性和二次提高（P<0.05）;而解琥珀酸菌属（Succiniclasticum）和瘤胃球菌科_UCG-005（Ruminococcaceae_UCG-005）相对丰度随着精料补饲水平的提高呈线性和二次降低（P<0.05）。综上所述,适宜提高精料补饲水平能够促进暖季放牧牦牛瘤胃发酵,提高瘤胃部分淀粉相关降解菌的丰度。     

Effects of dietary concentrate level and chromium-methionine supplementation on ruminal fermentation,and ruminal bacterial and fatty acid composition in Tan lambs北大核心CSCD

This study evaluated the effects of dietary concentrate level and chromium methionine(Cr-Met)supplementation on ruminal fermentation and fatty acid composition, and ruminal bacteria abundance in Tan lambs. Forty male Tan lambs [(21.00±1.23) kg body weight, 5 months of age] were randomly assigned to four treatment groups with 10 lambs in each treatment. The treatments were: a low-concentrate (LC) diet (concentrate:forage, 35:65) without Cr-Met supplementation; a high-concentrate (HC) diet (concentrate:forage, 55:45) without Cr-Met supplementation; groups fed the HC diet with 0.75 or 1.50 g·d-1·lamb-1 Cr-Met (HCM and HCH, respectively). Ruminal fluid was collected on day 65 with an oral stomach tube about 3 h after the morning feed and samples used for fermentation analysis, fatty acid composition determination and bacterial DNA extraction. It was found that: 1) Ruminal pH, acetate proportion and acetate:propionate were greater (P<0.05) with the LC diet whereas microbial crude protein, propionate and valerate proportions were greater (P<0.05) with the HC diet. The acetate:propionate was greater (P<0.05) in the HCM group than in the HC group. 2) For the HC diet, the DNA abundances of Butyrivibrio fibrisolvens vaccenic acid subgroup (Butyrivibrio VA) and Ruminococcus flavefaciens were decreased (P<0.05), compared with the LC diet, whereas the DNA abundance of Anaerovibrio lipolytica was increased (P<0.05). For lambs fed the HC diet, DNA abundances of B. fibrisolvens stearic acid subgroup, Butyrivibrio VA, Butyrivibrio proteoclasticus, and A. lipolytica showed a linear decrease (P<0.05) with increasing Cr-Met supplementation level; However, the DNA abundance of R. flavefaciens showed a linear increase (P<0.05). 3) Compared with the LC group, the concentrations of t11 C18:1, trans C18:1, c9t11 CLA, t10c12 CLA, C18:2n6, and C18:3n3 were decreased by the HC diet without Cr-Met supplementation whereas the concentration of C18:0 was increased. There was a linear increase in t11 C18:1 and trans C18:1 with increasing Cr-Met supplementation level in lambs fed the HC diet. The results suggest that the HC diet inhibited the growth of ruminal bacteria involved in the ruminal biohydrogenation process, and the addition of Cr-Met had a potentially positive effect on conjugated linoleic acid (CLA) synthesis in body tissue. © 2022, Editorial Office of Acta Prataculturae Sinica. All rights reserved.     

酵母对亚急性瘤胃酸中毒绵羊缓解效果及作用机制研究

旨在探究一株酿酒酵母和两株瘤胃源褶皱假丝酵母对亚急性瘤胃酸中毒(subacute ruminal acidosis,SARA)绵羊的缓解作用及其机制,为研制防治SARA微生态制剂提供优良菌株和理论依据。选取60只2月龄同期断奶的杜泊羊(♂)×湖羊(♀)F₁代作为试验动物。通过逐步递增饲粮精粗比成功诱导40只绵羊发生SARA,将SARA绵羊随机分为4组,每组10只,分别为：SARA组、酿酒酵母组(Saccharomyces cerevisiae,SC)、褶皱假丝酵母一组(Diutina rugosa 1,DR1)、褶皱假丝酵母二组(Diutina rugosa 2,DR2),各组均饲喂精粗比为90∶10的日粮,酵母组于每天晨饲后分别灌服100 mL酿酒酵母ACCC 21162、褶皱假丝酵母N09、褶皱假丝酵母N07。对照组(Control,CON)饲喂50∶50饲粮。分别于第1、3、7、10天测定各组瘤胃液pH,第10天测定瘤胃与血液异常代谢产物、血气指标、瘤胃菌群。结果显示：1)灌服酵母组第3天后瘤胃液pH显著高于SARA组(P<0.05),灌服酵母可使SARA得有效缓解。2)瘤胃菌群相对丰度发生变化,SC组最优菌属为乳杆菌属,CON组最优菌属为普雷沃氏菌科未确定菌属,SARA、DR1、DR2组最优菌属为瘤胃菌科未确定属;灌服酵母组中,SC组丰富度指数最高,DR2组多样性指数最高。3)灌服酵母组瘤胃液和血液乳酸、瘤胃液组胺显著低于SARA组(P<0.05)。4)SC、DR2组血液pH、全血碱剩余极显著高于SARA组(P<0.01),灌服酵母组血液二氧化碳分压、二氧化碳总量、实际碳酸氢盐显著高于SARA组(P<0.05)。5)瘤胃液pH与血液实际碳酸氢盐呈现显著正相关(P<0.05),瘤胃液乳酸与瘤胃菌群Chao 1指标呈现显著负相关(P<0.05)。结果提示,3株酵母均可提升瘤胃菌群丰富度、降低瘤胃液和血液乳酸、减轻瘤胃炎症、缓解机体酸中毒。     

饲用甜高粱和全株玉米青贮对肉羊前胃微生态的影响

本试验旨在探究饲用甜高粱青贮（sweet sorghum silage, SS）和全株玉米青贮（whole-plant corn silage, CS）对肉羊前胃微生态的影响。选择健康的3~4月龄杜泊母羊［（33.40±1.68） kg］14只,随机分为2组,每组7只羊,每只羊为1个重复,分别喂甜高粱青贮（SS组）和玉米青贮（CS组）,单栏饲喂并自由饮水。预饲期15 d,正试期90 d,在正试期测定并计算生长性能指标,正试期结束后,每组选取4只羊进行屠宰,采集前胃（瘤胃、网胃和瓣胃）食糜和组织样品,对前胃发酵参数、微生物表达量、上皮颜色和组织结构进行观察和测定。结果表明：1）CS组肉羊的干物质采食量显著高于SS组（P<0.05）。2）甜高粱青贮和玉米青贮育肥肉羊90 d后,对前胃的pH值未产生显著影响（P>0.05）;在网胃内容物中,SS组肉羊氨氮浓度显著高于CS组（P<0.05）,CS组肉羊丁酸含量显著高于SS组（P<0.05）;SS组肉羊瘤胃总挥发性脂肪酸含量显著高于CS组（P<0.05）。3）SS组肉羊瘤胃内短普雷沃氏菌、栖普雷沃氏菌、产琥珀酸丝状杆菌和黄色瘤胃球菌的表达量显著高于CS组（P<0.05）。4）饲粮处理显著影响前胃颜色,CS组肉羊的前胃上皮颜色比SS组深（P<0.05）。5）SS组肉羊瘤胃乳头宽度显著高于CS组（P<0.05）,饲喂甜高粱青贮和玉米青贮对肉羊网胃黏膜厚度、黏膜下层厚度和肌层厚度并未产生显著影响（P>0.05）,CS组肉羊的瓣胃黏膜上皮厚度显著高于SS组（P<0.05）。综上所述,在本试验条件下,和饲用玉米青贮相比,饲用甜高粱青贮肉羊的采食量较低,且这两种青贮料饲喂对肉羊的微生态有影响,甜高粱青贮组肉羊的瘤胃总挥发性脂肪酸含量、前胃内纤维分解菌的表达量以及瘤胃乳头宽度等指标显著高于玉米青贮组,且甜高粱青贮组肉羊的前胃上皮颜色较浅,角质化程度低,有利于肉羊的胃肠道健康。     

青贮剂对再生稻头季全株青贮品质和体外瘤胃发酵特性的影响

旨在探究青贮剂对再生稻头季全株青贮品质和体外瘤胃发酵特性的影响。以再生稻头季全株为青贮原料,在青贮中分别添加植物乳杆菌（60%）+纤维素酶（30%）+木聚糖酶（10%）、植物乳杆菌（70%）+粪肠球菌（20%）+纤维素酶（5%）+半纤维素酶（5%）、植物乳杆菌（30%）+粪肠球菌（60%）+纤维素酶（5%）+半纤维素酶（5%）、等量水为对照（依次记为N₁、N₂、N₃和CK组,各组添加量为500 g·t^-1 鲜重）。青贮45 d后开包取样,分析其青贮品质和体外瘤胃发酵特性。结果表明：1）青贮结束后,N₁、N₂和N₃组的总能显著高于CK组（P<0.05）,中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量显著低于CK组（P<0.05）,且N₂组的中性洗涤纤维含量显著低于N₁和N₃组（P<0.05）,N₁、N₂和N₃组的总可消化养分含量和乙酸含量均显著高于CK组（P<0.05）,氨态氮/总氮显著低于CK组（P<0.05）。2）体外发酵24 h后,N₂组的24 h累积产气量和快速降解部分的产气量显著高于N₁、N₃和CK组（P<0.05）,N₂组的潜在产气量显著高于N₁、N₃和CK组（P<0.05）,且N₁组显著高于CK组（P<0.05）,N₁和N₂组的pH显著低于N₃和CK组（P<0.05）,N₂组的乙酸和氨态氮含量显著高于N₁、N₃和CK组（P<0.05）,N₁和N₂组的丙酸含量显著高于N₃和CK组（P<0.05）,N₂组乙酸/丙酸显著低于N₃和CK组（P<0.05）,N₂和N₃组的干物质降解率和粗蛋白质降解率显著高于N₁和CK组（P<0.05）,N₂组的有机物降解率、中性洗涤纤维降解率和酸性洗涤纤维降解率显著高于N₁、N₃和CK组（P<0.05）。综上所述,在实际生产中,建议青贮剂在以植物乳杆菌为主要添加剂的前提下,辅助添加粪肠球菌、纤维素酶和半纤维素酶,有利于获得营养价值较佳的再生稻头季全株青贮。     

复合维生素B对生长期山羊后段肠道菌群组成及肠黏膜的影响

本试验旨在研究日粮中添加复合维生素B对生长期山羊消化道微生物组成和肠黏膜结构的影响。试验选取10只4月龄波杂雌山羊（12.60±1.28） kg，随机分为对照组（control，CON）和复合维生素B处理组（vitamin B，VB），CON组饲喂基础日粮（n=5），VB组在基础日粮中添加复合维生素B（n=5），预饲期2周，试验期11周，试验期间自由饮水。试验结束后屠宰采样，16S rRNA测序分析盲肠和结肠内容物微生物组成，检测肠道上皮组织形态结构和相关基因与蛋白的表达。通过菌群分类学分析发现，与CON相比，VB组山羊盲肠和结肠内容物菌群的α多样性指数无显著变化（P>0.05）；在门水平上，盲肠和结肠内容物菌群中厚壁菌门（Firmicutes）和拟杆菌门（Bacteroidetes）为优势菌门，VB组盲肠拟杆菌门丰度有升高趋势（0.05<P<0.1），而螺旋菌门（Spirochaetes）丰度有降低趋势（0.05<P<0.1）；在目水平上，VB组盲肠Solirubrobacterales和Streptomycetales目菌群丰度显著下降（P<0.05）；在科水平上，VB组盲肠Christensenellaceae、Streptomycetaceae、Solirubrobacteraceae及结肠Christensenellaceae科菌群丰度显著下降（P<0.05）；在属水平上，VB组盲肠Lachnoclostridium属菌群丰度显著升高（P<0.05），盲肠Bacillus、Nocardioides及结肠unidentified_Christensenellaceae和unidentified_Gammaproteobacteria属菌群丰度显著下降（P<0.05）。与CON相比，VB组山羊空肠绒毛高度（P<0.01）、隐窝深度（P<0.05）和绒毛高度/隐窝深度（V/C，P<0.05）均显著增加；回肠隐窝深度显著降低（P<0.05），绒毛高度和V/C无显著变化（P>0.05）。实时荧光定量PCR结果显示，与CON相比，VB 组山羊盲肠上皮紧密连接和细胞增殖相关基因的表达均无显著变化（P>0.05）；而结肠黏膜上皮Occludin（P<0.05）、EGFR（P<0.01）、MIK67（P<0.05）和CCND（P<0.05）基因表达均显著上调；且VB组ZO-1蛋白表达显著上调（P<0.05）。综上表明，日粮中添加复合维生素B对生长期山羊肠道菌群多样性无显著影响，但可提高肠道中有益菌的丰度且降低有害菌的丰度，从而促进肠道绒毛的生长及紧密连接蛋白的表达，对山羊肠道健康和生长具有积极作用。