AMMS／13近交系小鼠的培育及其生物学特性

ＡＭＭＳ／１３近交系小鼠由本中心用ＡＭＭＳ／１与Ｃ３Ｈ／ＨｅＭｓ２种近交系小鼠杂交育成，现已繁殖至Ｆ４０多代。毛色为桂皮色，毛色基因为ＡＡｂｂＣＣＤＤ；经组织相容性基因、生化基因及染色体组型分析等遗传检测，符合近交系标准。其初孕期产仔数为６．５２±１．４３，离乳率为８８．８１％（１～６胎），成年雌鼠体重为（２２．８０±１．４７）ｇ，雄鼠为（２４．７７±１．６５）ｇ，经产母鼠乳腺癌发病率为５６．７％。血清ＩｇＧ含量随日龄而增加，相同条件下，雌性比雄性高。该系小鼠可作为莱姆螺旋体病的模型动物。     

猪链球菌2型与马链球菌兽疫亚种生物学特性的初步比较

１９９８年从病死猪分离了数株链球菌（其中２株编号为９８０１,９８０２）,经鉴定,９８０１株为猪链球菌２型,９８０２株为马链球菌兽疫亚种。９８０１株系从暴发流行地区的病猪中分离,同时在该流行地区还发生畜禽从业人员感染相同血清型的链球菌而死亡的病例;９８０２株系从散发病猪中分离。临床有共同点,又有各自特点。病理变化均呈现典型的败血症变化,但肝、脾、肺等病变上有一些差别,而染色镜检基本一致。对兔均敏感,对小鼠和猪的敏感性有所不同。９８０１株菌落灰色,中心浑浊,直径０．５ｍｍ,α溶血,有草绿色色素沉着;９８０２株菌落湿润,半透明,直径１．５－２ｍｍ,β溶血。９８０１株对氧哌嗪青霉素、头孢他啶、氨苄青霉素最敏感;９８０２株对氧哌嗪青霉素、复方磺胺、头孢哌酮、呋喃妥因最敏感。     

抗菌肽Thanatin转基因小鼠建立的初步研究

人工合成抗菌肽Thanatin基因的3条片段,利用重叠延伸PCR扩增技术得到完整的Thanatin基因,通过分子克隆方法构建出pIRES2-EGFP-Thanatin重组表达载体。然后与脂质体混合,采用睾丸打点注射将新构建的抗菌肽基因注入小鼠睾丸内,共注射公鼠5只。6周后与雌鼠交配,对新生仔鼠进行断尾,提取尾尖基因组DNA,利用PCR和Southern印迹方法对其进行检测。结果显示,得到的52只新生仔鼠中PCR检测阳性率为38.46%,Southern印迹检测阳性率为30.77%;在活体荧光成像系统下转基因小鼠呈现绿色荧光表达。通过睾丸注射法使Thanatin基因在小鼠的基因组中得到整合,为进一步研究抗菌肽的作用机理、培育抗病动物品种以及通过建立转基因动物生物反应器进行抗菌肽的大量生产奠定了基础。     

苦豆子特性的初步探讨

本文着重研究苦豆子的特性，指出苦豆子种子特性和提高发芽率的途径，观测苦豆子的生长发育的特点以及成龄植株地下器官发育特性，明确指出苦豆子是以无性繁殖为主的繁殖方式。     

猪链球菌2型与马链球菌兽疫亚种生物学特性的初步比较

1998年从病死猪分离了数株链球菌 ,其中 2株编号为 980 1,980 2。经鉴定 ,980 1株为猪链球菌 2型 ,980 2株为马链球菌兽疫亚种。 980 1株系从暴发流行地区的病猪中分离 ,同时在该流行地区还发生畜禽从业人员感染相同血清型的链球菌而死亡的病例 ;980 2株系从散发病猪中分离。临床有共同点 ,又有各自特点。病理变化均呈现典型的败血症变化 ,但肝、脾、肺等病变上有一些差别 ,而染色镜检基本一致。对兔均敏感 ,对小白鼠和猪的敏感性有所不同。 980 1株菌落灰色 ,中心浑浊 ,直径 0 5mm ,α溶血 ,有草绿色色素沉着 ;980 2株菌落湿润 ,半透明 ,直径 1 5～ 2mm ,β溶血。 980 1株对氧哌嗪青霉素、头孢他啶、氨苄青霉素最敏感 ;980 2株对氧哌嗪青霉素、复方磺胺、头孢哌酮、呋喃妥因最敏感     

天蚕的生物学特性初步观察

天蚕的生物学特性初步观察刘朝良（安徽农业大学蚕桑系）为了饲养、繁育天蚕提供科学依据，作者对天蚕的生活规律和特性进行了调查观察，报告如下。１材料和方法１．１材料供试天蚕卵分别是１９９０年从黑龙江省引进并逐年制种，继代饲育，１９９３年又从杭州引种作为对比...     

uPA基因敲除小鼠部分生物学特性的初步研究

为了解uPA基因敲除小鼠（UPA-/-）的生物学特性,为UPA-/-小鼠的推广与应用提供基础资料。研究定期测定UPA-/-小鼠体重、血液生理生化值以及脏器（心、肝、脾、肺等）的重量,统计其繁殖特性,并对两性的数值进行比较。结果：4~30周龄UPA-/-小鼠体重性别间差异有统计学意义（P〈0.05）,体重随周龄增加而增长,前期增长快,后期增重慢;UPA-/-小鼠繁殖性能平均产仔数为6.30±1.02只,平均妊娠期为20.5±1.9 d,UPA-/-小鼠脏器重量的测定结果显示心脏性别间差异显著（P〈0.05）、脾的脏器重量性别间差异极显著（P〈0.001）,其余脏器重量性别间差异不显著。8周龄uPA基因敲除小鼠血液生理指标中红细胞平均体积（MCV）、血小板平均体积（MPV）、红细胞分布宽度-CV（RDW-CV）、嗜酸性粒细胞绝对值（EO）性别间有显著性差异（P〈0.05）;血清生化指标中uPA基因敲除小鼠性别之间谷丙转氨酶ALT、血糖GLU、总胆固醇TC、胆碱脂酶CHE有显著差异（P〈0.05）,总蛋白TP、白蛋白ALB有极显著差异（P〈0.001）。结论：uPA基因敲除小鼠具有自身的生物学特性,部分指标两性间测定值有差异。     

猪链球菌2型JX分离株的生物学特性

从临床表现为脑膜炎、关节炎及败血症的发病猪分离到2株细菌，分别命名为JX02和JX03，经鉴定其形态、染色及培养特性均符合链球菌的特点，具α或β溶血，生化试验结果不稳定。用猪链球菌2型、1型和9型抗血清进行凝集试验，结果2株菌均能与猪链球2型抗血清凝集，其中1株菌对小鼠和家兔均有致病性，另1株菌只能致死家兔。PCR均能扩增2株菌的主要毒力因子基因。表明发病猪的病原不同于以往的C群链球菌，不是马链球菌兽疫亚种，而是属于R群的猪链球菌。     

大马勃生物学特性初步研究

以菌丝生物量和胞外多糖为考察内容对大马勃生物学特性进行的初步研究结果表明:大马勃菌丝可以多种碳氮源物质进行培养,其菌丝生长的温度范围较为广泛,最适生长温度为20～25℃左右;pH中性时生长较好;在菌丝体生长阶段光线对菌丝生长有抑制作用。     

转基因羊对体表吸血蜱的生物学特性影响

本文对转基因动物养殖基地的3种不同的转基因山羊(转人β-干扰素、人抗凝血酶Ⅲ和乙肝表面抗原基因)与野生型山羊体表吸血蜱的生物学特性进行比较研究,分析了蜱的种类、感染率、感染强度、饱血雌蜱的产卵量和幼蜱孵化率,以及第二代蜱实验条件下生长发育数据,从而探索转基因羊对环境生物的安全评估。结果发现,与野生型羊群比较,转基因羊群对体表吸血蜱的侵袭能力和吸血后各项生长发育的生物学特征无显著影响。     

A2a基因敲除小鼠生物学特性的初步研究

为了解A2a基因敲除小鼠的生物学物性,给研究心血管疾病及神经疾病提供部分基础资料,试验采用全自动生化分析仪及血细胞分析仪分别对60日龄C57BL/6、A2a雌雄小鼠的常用血液学指标及生化指标值进行检测,并测定了各小鼠的脏器。结果:C57BL/6和A2a小鼠血液的血小板计数、红细胞分布宽度差异显著(P0.05)。C57BL/6和A2a小鼠的丙氨酸转氨酶、肌酸激酶差异显著(P0.05),乳酸脱氢酶差异极显著(P0.01),脏器系数无显著差异(P0.05)。     

链脲佐菌素诱导小鼠Ⅱ型糖尿病模型的研究

通过注射链脲佐菌素(STZ)诱导建立与人类Ⅱ型糖尿病(NIDDM)相似的昆明鼠和C57鼠模型,比较两种鼠建模剂量和成模率的差异。将昆明鼠和C57小鼠随机分为正常对照组(A)及低、中、高剂量(每天50、70、90 mg/kg)用药组(B)(n=10)。正常对照组(A)饲喂普通饲料,用药组(B)饲喂高脂高糖饲料;第4周开始,A组腹腔注射柠檬酸缓冲液,B组腹腔注射STZ,连续4 d。测定给药前和给药后3、7、15 d空腹血糖和体重,观察小鼠饮食、饮水和排尿情况。给药前空腹血糖A、B组间无显著性差异(P0.05);昆明鼠用药3 d后中、高剂量组均升高并达到建模标准,C57鼠用药7 d后中、高剂量组达到建模标准。两种小鼠用药3 d后各组体重均减低,并与对照组间有极显著差异(P0.01)。C57鼠,STZ注射剂量越高,体重减轻幅度越大;并且自造模成功后,各用药组体重均出现逐日降低的趋势。诱导建立NIDDM模型的适宜STZ剂量昆明鼠为每天50 mg/kg和70 mg/kg,并以后者为佳;C57鼠为每天70 mg/kg。     

条件性子宫细胞剔除的研究

为了研究体内细胞的功能和各种细胞之间的相互作用,试验研究了可以特异性消除特定细胞的条件性细胞剔除新方法。通过PR^Cre/+工具鼠与pCAG-loxp-STOP-loxp-DTR-2A-EGFP转基因小鼠（DTR小鼠）交配获得子宫特异表达白喉毒素受体（DTR）的转基因小鼠,经过PCR和琼脂糖凝胶电泳鉴定基因后,筛选出PR^Cre/+/pCAG-loxp-STOP-loxp-DTR-2A-EGFP雌性小鼠（PR-DTR小鼠）。以DTR小鼠和野生型小鼠（WT小鼠）作为试验对照组,利用免疫组织化学和Western blotting检测子宫中绿色荧光蛋白（GFP）的表达。腹腔注射白喉毒素1 ng/d,连续2 d,观察PR-DTR小鼠、DTR小鼠和WT小鼠子宫的外部形态差异,并通过HE染色的方法观察子宫的内部形态。使用免疫组织化学方法检测注射白喉毒素后PR-DTR小鼠、DTR小鼠和WT小鼠子宫中叉头框蛋白A2（FOXA2）的表达。试验发现在小鼠子宫上皮、基质和肌层细胞中都有GFP的表达,注射白喉毒素后PR-DTR小鼠子宫红肿膨胀,DTR小鼠和WT小鼠子宫没有显著变化。HE染色试验结果发现,PR-DTR小鼠子宫中出现异常空腔,而DTR小鼠和WT小鼠子宫没有明显变化,并且对注射白喉毒素的PR-DTR小鼠子宫中FOXA2表达的检测结果表明,这些异常的空腔不属于腺体,说明白喉毒素使细胞死亡,证实在小鼠子宫中表达孕酮受体的细胞表达了DTR。试验结果表明,白喉毒素在PR-DTR小鼠子宫中可以条件性剔除子宫中表达孕酮受体的细胞,为研究子宫细胞的功能以及子宫细胞相互之间的作用提供了新方法。     

猪链球菌2型感染昆明小鼠模型的建立及评价

为建立稳定的猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)人工发病模型,本试验以天津某发病猪场分离的SS2 Y15293株为研究对象,经腹腔注射感染昆明小鼠,测定其LD₅₀,确定造模感染剂量,通过观察感染后小鼠的临床症状和病理变化,测定试验期间各组小鼠体重和采食量的变化及细菌回归等试验对模型进行评估。结果显示,SS2 Y15293株致昆明小鼠的LD₅₀为6.7×10~7 CFU/mL。以1个LD₅₀的剂量攻毒,与对照组相比,试验小鼠主要发病表现为攻菌后24 h出现精神沉郁、被毛逆立、眼睛有分泌物,72～96 h出现头颈歪斜、翻滚、震颤等神经症状,死亡高峰在48～72 h。3次重复试验中,试验组小鼠的发病率均为100%,死亡率为50%～70%,神经症状小鼠出现比率20%～30%。与对照组相比,试验组小鼠采食量和体重显著下降(P<0.05),临床症状分值显著升高(P<0.05)。组织病理检查发现,试验组小鼠心脏、肺脏组织均有不同程度出血、炎性细胞浸润;脑膜炎,脑室出血,充满炎性细胞。细菌回归试验结果表明,试验组死亡小鼠脑、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏均有细菌定植,且形态、染色和分子生物学特性与攻毒菌一致。以上结果证实,SS2 Y15293株能感染昆明小鼠并致其发病,感染动物发病规律性强,重复性好,临床症状典型,说明SS2 Y15293株感染昆明小鼠可作为SS2的候选人工感染模型。     

冷刺激小鼠脂肪组织差异表达长链非编码RNA的初步研究

脂肪组织主要有白色脂肪组织(WAT)和褐色脂肪组织(BAT)两种类型;WAT储存能量,BAT通过特异性表达解耦联蛋白1(uncoupling protein 1,UCP1)消耗能量产热。与BAT不同,WAT具有很强的可塑性,在寒冷刺激下,呈现褐色脂肪表型、获得褐色脂肪的产热活性("褐色化")。根据对冷刺激组(6℃)和对照组(28℃)小鼠的肩胛区褐色脂肪组织(iBAT)和皮下白色脂肪组织(sWAT)的RNA转录组测序分析结果,初步筛选出1个差异明显的长链非编码RNA (lncRNA-6030408B16Rik)。通过qRT-PCR检测lncRNA-6030408B16Rik在野生型小鼠的脾脏、肌肉、肾脏、十二指肠、大脑、肝脏、sWAT和iBAT中的表达;24只雄性C57BL/6野生型小鼠随机分成冷刺激组(6℃)和对照组(28℃),两组小鼠分别在6和28℃环境下处理10 d,分别采集两组的iBAT和sWAT;并分离出生1 d的野生型小鼠褐色前脂肪细胞,诱导分化后,收集0、1、3、5 d的细胞,检测UCP1基因和lncRNA-6030408B16Rik在分化过程中的时空表达。qRT-PCR结果显示iBAT和sWAT中lncRNA-6030408B16Rik的表达量均明显高于其他组织;与对照组相比,冷刺激组iBAT中lncRNA-6030408B16Rik的表达量极显著上调(P<0.01),冷刺激组sWAT中lncRNA-6030408B16Rik的表达量显著上调(P<0.05);前脂肪细胞诱导分化的过程中,lncRNA-6030408B16Rik的表达量呈先上调后下调的趋势。lncRNA-6030408B16Rik在脂肪组织中特异性高表达。lncRNA-6030408B16Rik可能对白色脂肪组织"褐色化"及褐色前脂肪细胞的分化具有重要的调控作用。     

体重和剂量对链脲佐菌素致糖尿病小鼠模型影响的研究

为了研究体重与剂量对链脲佐菌素致糖尿病小鼠模型的影响,采用不同体重范围的雄性小鼠,对其腹腔注射不同剂量的链脲佐菌素,剂量范围为:100～300mg/(kg·bw),分5次注射造模。在不同时间测量试验鼠的血糖值、死亡率及成模率,观察小鼠的糖尿病发展病程,确定链脲佐菌素最佳用药剂量。结果表明,当给雄性小鼠腹腔注射200mg/(kg·bw)的链脲佐菌素后,造模成功率最高为85%,小鼠表现出典型的糖尿病症状,且成模饲养1周后血糖、体重变化不大,为制备糖尿病小鼠模型的最佳剂量;同等剂量的情况下,低体重小鼠比高体重小鼠的成模率高、死亡率低。     

甜菜碱对瘦素缺陷小鼠肌肉组织中脂质沉积的影响初探

为探究甜菜碱对瘦素缺陷（ob/ob）小鼠肌肉组织中脂质沉积的影响和潜在机制,本研究将12只同批次6周龄雄性、健康、体重差异不超过1 g的ob/ob小鼠随机均分为两组,分别作为试验组和对照组。其中对照组小鼠饮用纯净水,试验组小鼠饮用的纯净水中含1%甜菜碱。1个月后脱颈处死,采集肌肉样本,利用油红O染色、甘油三酯含量测定检测ob/ob小鼠肌肉组织中脂质沉积情况;利用气象色谱-质谱联用系统分析肌肉组织中脂肪酸组成及含量;利用qRT-PCR方法检测肌肉组织中基因表达的变化。结果显示：与对照组相比,1）补饲甜菜碱后ob/ob小鼠的体重增加量、肌肉组织中脂质沉积、禁饲血糖水平显著降低（P<0.05）;2）补饲甜菜碱后,ob/ob小鼠肌肉中脂肪甘油三酯脂肪酶（adipose triacylglyceride lipase,ATGL）、激素敏感性甘油三酯脂肪酶（hormone-sensitive lipase,HSL）以及葡萄糖转运蛋白4（glucose transpoter 4,GLUT4）基因的表达量极显著升高（P<0.01）;3）补饲甜菜碱后,ob/ob小鼠肌肉中饱和脂肪酸（saturated fatty acids,SFA）和多不饱和脂肪酸（polyunsaturated fatty acids,PUFA）含量显著升高（P<0.05）;4）补饲甜菜碱后,ob/ob小鼠肌肉中脂肪酸合成基因：脂肪酸合成酶（fatty acid synthetase,FAS）表达量显著降低（P<0.05）,乙酰辅酶A合成酶（acetyl-CoA synthetase,ACS）表达量无显著性变化（P>0.05）;脂肪酸氧化基因：过氧化物酶体增殖物激活受体α（peroxisome proliferator activated receptor alpha,PPARα）、酰基辅酶A氧化酶（acyl-CoA oxidase2,ACOX2）、长链酰基辅酶A脱氢酶（long chain acyl-CoA dehydrogenase,ACADL）、脂肪酸转位酶（fatty acid transposase, CD36）表达量极显著升高（P<0.01）。结果表明,ob/ob小鼠补饲甜菜碱后,肌肉组织脂肪酸合成基因表达降低、脂肪酸氧化基因表达升高,同时肌肉组织脂肪酸含量发生改变,最终导致肌肉组织脂质减少。     

BALB/C近交系裸鼠的染色体研究

用骨髓细胞染色体直接制片技术,以及G分带、C分带、银染带技术,对昆明种小鼠、BALB/C近交系小鼠、BALB/C近交系裸鼠的染色体组型、G分带带型、结构性异染色质的分布、18S+28S rDNA的定位和数目进行了比较分析。结果,三种鼠二倍体染色体数为40,均为端着丝点;裸鼠的第3号染色体有明显的浅染色区,15号染色体也有浅染色区;各种小鼠的G带带型基本一致,与已报道的小鼠标准G带带型基本相符;C带分析结果,昆明种小鼠所有常染色体管丝点区包括X染色体均有结构性异染色质的分布;呈大小不等的浓染,而体臂着色浅淡,仅Y染色体的着丝点及体臂呈均一深染,极易辨认,需BALB/C近交系小鼠的第1、7,18号染色体浓染点缩小。裸鼠第3号染色体浓染点很大,而第1、7、11号染色体浓染点缩小。银染分析显示昆明种小鼠Ag-NOR数目众数为7条,分布范围为3～8条。BALB/C近交系小鼠、裸鼠的Ag一NOR众数均为5条,分布范围为2～7条。     

高能量膳食诱导食蟹猴2型糖尿病模型的研究

为构建食蟹猴T2DM进程序列模型,将36只食蟹猴分为4组,分别采用标准基础膳食和高能量膳食(高糖膳食、高脂膳食和高糖高脂膳食)进行诱导,每6个月测量体重、血液生化指标、口服糖耐量和尿检试验。结果显示,高能量膳食组的血糖、血脂水平与初期相比,都有显著升高。其中高糖组的T2DM发病进程较快,高糖高脂组的发病进程相对较慢,但发病进程大致相同。在T2DM临床期之前,不同膳食组在相同发病阶段血脂水平存在差异,至临床期差异消失。根据结果可得,不同膳食成分的高能量膳食均能诱发食蟹猴T2DM进程序列模型,该序列模型是模拟自发型糖尿病发病机理构建的较理想T2DM动物模型。