用质粒DNA指纹图谱分析法研究鸡源大肠杆菌的流行病学特征

从北京市郊区数个集约化养鸡场的大肠杆菌感染鸡群的死鸡，毛蛋的心血中分离到３３株细菌，经形态、培养特性及生化反应鉴定为大肠埃希氏杆菌简称大肠杆菌。对其中１９株作本动物回归试验结果表明，全都为致病性大肠杆菌。从而证明从死鸡（毛蛋）心血中分离到的大肠杆菌与其致病性密切相关。质粒指纹图谱技术是目前医学界用于细菌性疾病流行病学调查，病原追踪的一项新技术，本试验３３株细菌的质粒指纹图谱结果表明，北京郊区数个集     

猪源大肠杆菌耐药性质粒的监测研究

在１１５株猪大肠杆菌耐药性监测的基础上,提取耐药类型最普遍的５株耐药菌的质粒进行质粒指纹图谱分析。结果表明：同一来源、耐药类型相同的菌株有相似的质粒图谱,来源不同者,酶切图谱有提示出它们之间的同源性,说明质粒指纹图谱可作为流行病学调查的工具。     

猪致病性大肠杆菌的质粒指纹图谱分析

在系统鉴定和药敏试验的基础上,对７０株致病性大肠杆菌进行了质粒指纹图谱分析。结果,菌株的质粒得率为１００％,可分为３２种质粒谱型。分离菌株在遗传距离０．１４０处聚成４类,在遗传距离０．２２４处聚成一大类。来源相同的菌株具有相同或非常相似的质粒图谱和质粒酶切图谱,来源不同的菌株具有不同的质粒图谱和质粒酶切图谱。来源相同菌株的质粒谱相同,而耐药谱可相同亦可不同,两者之间无明显规律。     

鸡源大肠杆菌的质粒及染色体DNA分析

为研究鸡源大肠杆菌分子流行病学规律,选用４０株鸡源大肠杆菌（均含有质粒）,应用指纹法对其质粒及染色体ＤＮＡ进行了分析。对菌株的质粒图谱比较表明,来源相同的菌株,其图谱相同或相似;来源不同的菌株,其图谱一般不同。选取ＨｉｎｄⅢ对质粒ＤＮＡ进行酶切,进一步证实了质粒图谱分析的结果。对菌株质粒型（ｐｌａｓｍｉｄｔｙｐｅ,ＰＴ）进行数值聚类分析,得出ＰＴｓ间的聚类树状图,更直观地反映出菌株间的遗传关系。试验中还发现,多数鸡源大肠杆菌含有大质粒,它们可能含有毒力相关基因。选用ＨｉｎｄⅢ、ＥｃｏＲＩ分别对染色体ＤＮＡ进行酶切,均能够产生较易于识别的酶切图谱,菌株的图谱与其来源也具有一致性     

两个家系猪的DNA指纹图谱遗传分析

本文用人源小卫星探针３３．６和３３．１５获得了两个家系猪的ＤＮＡ指纹图谱。通过对Ｆ１和Ｆ２代家系分析，证实ＤＮＡ指纹图带以孟德尔方式遗传。在家系２（探针３３．６）的１个后代中发现了一条新突变带。文中还对这两个探针检测到的位点数进行了估测     

猪源耐药大肠杆菌质粒及酶切图谱分析

为了解河北省猪源耐药大肠杆菌的质粒携带情况,追踪耐药菌株的同源性,试验对已经过系统鉴定及药敏试验的12株猪源大肠杆菌进行质粒提取并使用限制性内切酶HindⅢ酶切,进行质粒谱型分析,探讨大肠杆菌耐药性与质粒及其酶切图谱之间的关系。结果表明:分离菌株质粒的获得率为100%;来源相同的菌株一般有相同或相似的质粒酶切图谱,来源不同的菌株酶切图谱大多不同,但亦有相同的。说明河北省不同地区的大肠杆菌也有同源性菌株存在;大肠杆菌的质粒携带与细菌的耐药性之间并没有明显的对应关系。     

猪的水肿病

水肿病是猪场的一种常见疾病,病原体为大肠杆菌,根据感染轻重,症状分为急性型、慢性型和亚临床型。正确诊断是预防和治疗该病的关键。     

仔猪溶血性大肠杆菌水肿病的诊治

<正> 近年来,本市及邻县地区二月龄左右仔猪连续发生猪水肿病。经苏农专家对死仔猪的临床症状以及剖检变化和病原分离确诊,为溶血性大肠杆菌感染所致。1 临床诊断临床诊断根据流行病学、临床症状以及解剖变化来诊断。在发病猪群中,大多是二元杂交仔猪。一般在60日龄左右发病,发病率约70%,致死率达     

海安县猪水肿病的流行病学与病原特性研究

对江苏省海安县2003年5月～2004年5月各乡镇猪水肿病的发病和死亡情况进行了流行病学调查，发现猪水肿病在海安地区呈零星散发性发生，发病率为0.31％～1．84％，死亡率为0．07％—0．56％，病死率为16．0％～35．0％。水肿病主要侵害仔猪，育成猪也偶有发生，一般以气温比较高的季节多发。同时从疑似猪水肿病的病料中分离到12株大肠杆菌，经O血清型鉴定，5株为0139，2株为O45，O55、O93，O9、O101、O119各1株。经多重PCR检测毒素基因(STa，STb、LT、SLT-2e)和大肠杆菌粘附素单抗(F4、F5、F6、F41、F18)检测茵毛，共6个分离株带有SLT-2e基因，其中O139分离株5株，055分离株1株，其余6株均带STb基因。12个分离株中，单独表达F18菌毛的4株(O1392株，O45、O119各1株)，F5 F411株(O93)，F41 F181株(O139)，F5 F41 F182株(均为O139)。经药敏试验，多数分离株对壮观霉素和新霉素高度敏感。     

猪水肿病发病机理研究进展

猪水肿病主要发生于断奶后2周内的仔猪,是常见的一种急性致死性传染病。该病是由利用其菌毛(F18ab)黏附于小肠上皮细胞,并产生类志贺样毒素Ⅱ型变异体(SLT-Ⅱe)的产类志贺毒素大肠埃希菌引起的一种肠毒血症。仔猪断奶后的免疫能力,营养水平和遗传抗性是导致猪水肿病的主要影响因素。文章着重阐述了猪水肿病的致病机理,为该病的预防和治疗提供重要的理论依据。     

猪水肿病大肠杆菌分离、鉴定及药敏试验

本实验从疑似猪水肿病的病例分离到5株大肠杆菌,O抗原鉴定结果表明所有菌株均为O139血清型;应用F18ab菌毛单克隆抗体对这5株大肠杆菌能否表达F18ab菌毛进行了鉴定,结果表明其中2个菌株能表达F18ab菌毛;利用聚合酶链式反应(PCR)对志贺氏菌样毒素Ⅱ型变异体(SLT-Ⅱe)操纵子基因保守区进行了扩增,结果发现在能表达F18ab菌毛2个菌株中可扩增一段特异性序列。以上数据表明这2株大肠杆菌为致仔猪水肿病大肠杆菌。药敏试验表明这两株菌株均对氟哌酸、妥布霉素、庆大霉素、利福平等抗生素高度敏感。     

致猪水肿病大肠埃希菌多重PCR检测方法的建立及应用

本研究旨在建立一种快速鉴定致猪水肿病大肠埃希菌的多重PCR检测方法.分别针对大肠埃希菌16S rDNA、志贺毒素Stx2e A亚基和菌毛F18ab A亚基保守序列设计合成3对特异性引物,优化多重PCR反应条件,并进行特异性和敏感性检测.结果显示,阳性对照菌株扩增产物大小分别为1 062、733和313 bp.特异性和灵敏性检测结果表明,与肠炎沙门菌、多杀性巴氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、支气管败血波氏杆菌和猪链球菌等猪常见致病菌均无交叉反应;菌体直接扩增法最低检出量为1 875 CFU.利用建立的多重PCR检测方法对分离收集的128株大肠埃希菌进行鉴定,得到36株致猪水肿病大肠埃希菌,其中30株既有菌毛F18ab又产志贺毒素Stx2e,另外6株仅产志贺毒素Stx2e.结果表明,本试验所建立的多重PCR检测方法对致猪水肿病大肠埃希菌的快速诊断和流行病学调查具有一定的应用价值.     

致猪水肿病大肠杆菌F18ab菌毛单克隆抗体的研制及其初步应用

将致猪水肿病大肠杆菌 F18ab菌毛提纯 ,以其免疫 BAL B/ c小鼠 ,利用淋巴细胞杂交瘤技术 ,经 3次融合 ,共筛选出 4株能稳定分泌针对 F18ab菌毛的特异单克隆抗体的杂交瘤细胞株 4 G8、4 H11、4 A2和 3A12 ,腹水单抗的直接凝集价最高可达 1∶ 32 0 0。免疫印迹试验表明 ,4株腹水单抗均可特异识别 F18ab菌毛 Mr 15 0 0 0左右的主要亚单位多肽。应用所研制的单抗对 11株猪水肿病大肠杆菌分离株 F18ab菌毛表达情况进行了检测 ,结果显示 ,上述分离株中F18ab菌毛的出现率为 72 .7% (8/ 11) ,检出的 F18ab菌毛阳性分离株的 O血清型均为 O1 39。     

猪水疱病自杀性DNA疫苗的初步研究

利用RT—PCR技术，用保真酶扩增获得猪水疱病病毒外壳蛋白1BCD基因，克隆于DNA复制子载体pSCAl中，获得重组质粒pSCA／1BCD。将重组质粒转染BHK-21细胞，RT-PCR法和间接免疫荧光法检测显示，猪水疱病病毒外壳蛋白基因在转染细胞中表达。豚鼠免疫试验表明，自杀性DNA疫苗pSCA／1BCD可诱导SVDV特异性抗体和T淋巴细胞增殖。     

兔源高致病性大肠杆菌外膜蛋白型的差异性分析

从山东某地区大、中型兔场连续三年(2002-2004年)分离、鉴定的43株高致病性 大肠杆菌体内提取外膜蛋白(OMP),测定其外膜蛋白型(OMPs),通过SDS-PAGE分析,比 较不同年份间高致病性大肠杆菌分离株的外膜蛋白型。结果表明:三年共产生了三种OMP型 (A-C)。且在同年份内具有多样性,不同年份之间具有差异性。     

蛋鸡大肠杆菌感染症状特点与防治

蛋鸡养殖中大肠杆菌感染是一种常见疾病,主要是由于致病性大肠杆菌导致的一种接触传染性疾病,通常由于致病性大肠杆菌入侵蛋鸡不同的组织部位,造成的疾病症状有所不同。蛋雏鸡在感染了致病性大肠杆菌后容易出现急性败血症的情况,成年蛋鸡会出现关节滑膜炎症、腹腔膜炎症及输卵管炎症等。现阶段蛋鸡养殖中致病性大肠杆菌感染疾病的防治措施主要是疫苗免疫和药物治疗的防治,但还是存在一定的缺陷,导致部分蛋鸡出现大肠杆菌感染的情况。该文将对蛋鸡养殖中大肠杆菌感染疾病的流行病学特点、临床症状及相关的防治措施进行介绍。     

仔猪水肿病病原菌的分离鉴定

从江苏淮安某猪场具有典型水肿病临床症状和剖检变化的发病猪组织分离的菌株中挑选5株大肠杆菌,分别命名为JS0001、JS0002、JS0003、JS0004和JS0005。通过培养特性、菌体形态、染色特性、生化鉴定及血清学试验等一系列方法对其进行系统鉴定,并对这5株细菌进行抗药性、溶血性、Vero细胞毒性和小白鼠致病性等试验。试验结果表明,JS0001、JS0002、JS0004和JS0005表现β型溶血,腹腔接种小白鼠,JS0001、JS0002、JS0003、JS0004对其具有较高致病性;5株细菌药敏特性基本一致：对痢特灵（FR）、头孢噻肟（CTX）、阿米卡星（AN）敏感,对头孢曲松（CRO）敏感性最高,而对阿莫西林(AMX)、多西环素(DO)等药物具有耐药性。JS0002、JS0004能够分泌Vero细胞毒素,确定为产类志贺毒素大肠杆菌（SLTEC）。血清学试验结果表明,JS0002、JS0004的血清型为O₁₃₉,JS0001、JS0003为O₁₄₁。     

腹泻羔羊中大肠杆菌耐药性分析

从青海省达日县3个藏羊养殖场中采集到羔羊腹泻的粪便10份,将分离得到的细菌纯化培养后进行进一步的生化鉴定和药敏试验。研究结果表明,在10份粪便中共检测出大肠杆菌10株,发现分离得到的大肠杆菌对小鼠具有致病性。药敏试验发现分离得到的致病原对恩诺沙星、氟苯尼考2种抗生素高敏,对复方新诺明、头孢唑林、丁胺卡那霉素中敏,对常用的抗生素普遍具有耐药性,在疾病防治过程中,应指导养殖户科学用药,筛选出敏感抗生素对症治疗。该次所筛选的大肠杆菌具有致病性,筛选的敏感抗生素种类较少,对大多数抗生素都产生耐药性,在今后防控过程中需要指导养殖户科学用药、合理用药。