三角梅外植体消毒和愈伤组织诱导研究

[目的]探索三角梅的最佳消毒时间和最佳愈伤组织诱导培养基。[方法]采用不同消毒时间对三角梅的7种外植体进行灭菌,并用不同激素与浓度组合的培养基诱导愈伤。[结果]三角梅的最佳外植体为半木质化茎段;最佳消毒方法为先用浓度75%酒精溶液灭菌30 s,无菌水冲洗5次,再用浓度0.1%升汞溶液消毒9 min,最后用无菌水冲洗7~8次;最佳诱导培养基为MS＋2.0 mg/L 6-BA＋1.0 mg/L NAA。[结论]获得了三角梅外植体的最佳消毒方式和最佳愈伤组织诱导培养基,为三角梅组织培养体系的建立奠定了基础。     

虎舌红组织培养中有效无菌材料的获得研究(英文)

该研究以虎舌红为试材,探讨外植体母本的预处理、外植体的采集、灭菌、接种等处理方式对获得有效无菌材料的途径和方法的影响。结果表明:2月将母株移入室内,进行预处理,3月中旬取当年生枝条和萌蘖条上的茎尖,用去污剂(肥皂水或洗衣粉水)浸泡并刷洗后,流水冲洗1~2 h,用75%的酒精表面消毒30 s,无菌水冲洗2~3次后放入0.1%升汞中灭菌,先用升汞消毒4 min,无菌水冲洗3次,再用升汞消毒4 min,无菌水冲洗5~8次后进行有效接种,这种方法能有效降低污染率,提高成活率。     

宿根花卉组培技术研究

通过对毛地黄、金丝桃、马利筋、花葱等17种宿根花卉组织培养,筛选出适合宿根花卉生长的不同激素配比、栽培基质,为宿根花卉快速繁殖提供依据. 宿根花卉组织培养工艺流程:种子表面消毒→接种诱导培养基→茎尖生长→培养无根小植株→培养生根→完整小植株→炼苗8～10天→移栽成活. 一、无菌材料获取 选择颗粒饱满的种子做实验材料.用吐温20刷洗种子表面后,用水冲洗10分钟.在无菌条件下,用2％次氯酸钠灭菌10～15分钟,用无菌水冲洗6～8次,将种子接入培养基培养.     

亨利兜兰茎尖诱导与离体快繁试验

以亨利兜兰的侧芽为试验材料,选择适宜的灭菌方式及筛选出较佳培养基,提高茎尖诱导率。研究基本培养基及激素浓度对继代增殖的影响。结果表明：适合兜兰侧芽的灭菌方式是将75%酒精倒入小烧杯浸泡1 min,无菌水冲洗3次进行消毒处理;倒入0.1%升汞浸泡约5 min,放入0.1%克拉霉素的溶液中5 min,再次放入0.1%升汞浸5 min,用无菌水冲洗5次,然后剥去外层,把5～7 mm茎尖接入培养基中。茎尖诱导培养基以Heller＋6-BA 2 mg/L＋NAA 0.2 mg/L＋C 0.5在继代培养中,试管苗在培养基1/2 MS＋6-BA 0.2 mg/L｜＋NAA 2 mg/L＋10%yz＋C 2中,丛生芽增殖为佳,增殖倍数为3.50。壮苗生根以1/2 MS＋NAA 1＋10%土豆汁＋C 2为好。     

虎舌红组织培养中有效无菌材料的获得研究

[目的]探索获得虎舌红(Ardisia mamillata Hance)组织培养中有效无菌材料的途径和方法。[方法]以虎舌红为试材,研究了外植体母本的预处理和外植体的采集、灭菌、接种等处理方式对获得有效无菌材料的影响。[结果]2月将母株移入室内,进行预处理,3月中旬取当年生枝条和萌蘖条上的茎尖,用去污剂(肥皂水或洗衣粉水)浸泡并刷洗后,流水冲洗1～2 h,用75%乙醇表面消毒30 s,无菌水冲洗2～3次后放入0.1%升汞中灭菌(先用0.1%升汞消毒4 min,无菌水冲洗3次,再用0.1%升汞消毒4 min,无菌水冲洗5～8次)后进行有效接种,这种方法能有效降低污染率,提高成活率。[结论]该研究可为进一步研究和大规模生产虎舌红提供技术支持。     

美国山核桃组培中材料灭菌的研究

采用不同的灭菌措施,包括不同的灭菌剂、浓度和处理顺序,对美国山核桃带芽茎段进行灭菌处理,研究其污染率和污染速率的变化,寻找建立无菌培养系最适宜的方法.结果表明,外植体材料最适宜的灭菌处理方法为:先将外植体在70%酒精中浸30 s,再将其用0.2%升汞液(加数滴吐温80)浸15 min,无菌水冲洗10次,最后接种.培养基中添加适量活性炭,且前期暗培养是提高材料无菌率的有利保障.另外,培养基中加入青霉素、链霉素各100mg·L-1可明显提高材料的无菌率.     

棉花雄性不育材料的组织培养初探

利用组织培养方法繁殖棉花不育系。通过优化培养基组合程序研究,对污染较严重的棉花不育系单株材料,先用70%酒精浸泡10~15 s,倒出后马上用无菌水冲洗,加入0.1%升汞灭菌8 min,用无菌水冲洗5~6次。愈伤组织诱导培养基诱导效果最佳的是MSB 2,4-D 0.1 mg/L IAA 0.1 mg/L KT 0.1 mg/L,最适合愈伤组织分化的培养基为MSB IAA 0.1 mg/L 2-IP 3.0 mg/L CM 100 ml/L AC 2.5 g/L。     

垂枝樱花外植体灭菌及不定芽的诱导研究

[目的]探讨垂枝樱花外植体灭菌及不定芽诱导的相关技术.[方法]以垂枝樱花当年生带腋芽茎段为外植体,对其组织培养繁殖技术中外植体选择、灭菌方法与程序、不定芽的诱导等环节进行了初步研究.[结果]适宜外植体采集时间为晴天中午,采集部位为当年生枝条的中上部,适宜的表面灭菌程序为：洗衣粉中浸泡15 min,流水冲洗lh,70％乙醇浸泡30 s,0.1％ HgCl2浸泡10 min,最后无菌水冲洗5遍,成活率达68.3％.适宜垂枝樱花不定芽诱导的培养基为1/2MS ＋6-BA 0.5 mg/L＋ NAA 0.10 mg/L,分化率达68.3％.[结论]为垂枝樱花的组织培养提供相关技术支持.     

桃金娘组织培养初步研究

以桃金娘茎段、叶片、种子为外植体,研究0.1%Hg Cl2和2%Na Cl O单独消毒和组合消毒的消毒效果,探索出适合不同外植体消毒的有效方法和时间;并对最佳的诱导培养基和无菌系建立途径进行筛选。实验结果表明,组合消毒和消毒效率明显优于单一消毒剂消毒,其中单一消毒剂消毒时0.1%Hg Cl2的消毒效果又比2%Na Cl O好;桃金娘茎段、嫩叶、老叶、果实的最佳消毒方式分别为:2%Na Cl O浸泡10 min+0.1%Hg Cl2浸泡8 min、2%Na Cl O浸泡10 min+0.1%Hg Cl2浸泡6 min、0.1%Hg Cl2浸泡10 min+2%Na Cl O浸泡8 min、0.1%Hg Cl2浸泡16 min。嫩叶较老叶和茎段更易诱导出愈伤组织,最佳的诱导培养基为2号培养基,愈伤组织诱导率达77.7%。无菌播种是桃金娘无菌系建立的最佳方式,萌发率高达75.0%。     

魔芋苞片组织培养技术研究

用魔芋苞片进行组织培养,改善魔芋种质资源紧张的现状。[方法]以魔芋苞片为外植体,筛选魔芋苞片最佳消毒方法以及愈伤组织诱导最适宜培养基、6-BA和NAA的最优组合。[结果]三种不同消毒之间存在差异;九种组合愈伤组织诱导率差异显著。[结论]用洗衣粉剂浸泡5~10 min,自来水冲洗后,用75%酒精浸泡30 s,0.1%氯化汞浸泡8~10 min,无菌水冲洗3次效果最佳;MS+6-BA 3.0 mg·L~(-1)+NAA 1.0mg·L~(-1)为魔芋苞片愈伤组织诱导最优组合,愈伤组织诱导率达到72.67%。     

珍稀树种花榈木组培不同外植体的无菌繁殖体系构建

为构建花榈木组织培养的无菌繁殖体系,采用随机区组试验方法研究不同药剂组合对其籽苗茎段、幼苗茎段和叶片、成年植株茎段和嫩叶等外植体的消毒效果。结果表明:籽苗茎段以70%乙醇消毒30 s+0.1%升汞灭菌8 min+培养基中添加PPM 0.5 m L/L的消毒效果最好;幼苗外植体最佳采集时间为4月,茎段用70%乙醇浸泡30 s+(50 mg/L利福平+50 mg/L氯霉素)混合液浸泡30 min+0.1%升汞浸泡8 min消毒效果最好,叶片用70%乙醇浸泡30 s+(50 mg/L利福平+50 mg/L氯霉素)混合液浸泡30 min+0.1%升汞浸泡6 min消毒效果最好;成年植株叶片以4月采集较好,最佳消毒方法为70%乙醇浸泡30 s+(50 mg/L利福平+50 mg/L氯霉素)混合液浸泡30 min+0.1%升汞浸泡12 min,成年植株茎段尚未取得理想消毒效果。     

泥胡菜的组织培养及高效无性系建立

1材料与方法 1．1无菌材料获得 将泥胡菜（采自大连石门山）嫩茎和基生叶叶柄切成长4—5cm的茎段和柄段后,分别放入500ml的磨口广口瓶中,用清水冲洗约15min,再用0．05％的安利液振荡洗涤3次,接着用无菌水洗涤2次,然后将材料移到超净工作台上。在无菌条件下用70％～75％的乙醇灭菌30s后,用0．05％的HgCl2溶液振荡灭菌3min,再用0．03％的HgCl2溶液振荡灭菌13min,最后用无菌水振荡洗涤5次即获得无菌材料。     

维吾尔药材刺山柑组织快繁无菌系建立的初步研究

[目的]建立的刺山柑组织快繁无菌系.[方法]根据不同部位、不同采集时间等,确定刺山柑外植体的采集时间、部位、灭菌剂和灭菌时间.[结果]建立刺山柑的无菌体系时,选择晴天去采集外植体为好;带芽的茎段污染率高,腋芽的污染率低,选用腋芽作为外植体;操作台外的最佳消毒方法是饱和的洗洁精清洗后用自来水冲洗20 min;操作台内消毒对比10;次氯酸钠、2;双氧水、2;溴水、0.1;升汞,0.1;升汞灭菌效果好,而最佳操作台内最佳灭菌体系为75;酒精消毒10 s,以灭菌去离子水冲洗2次,后于0.1;升汞中浸泡9 min,以灭菌去离子水冲洗5次.[结论]对外植体的采集时间晴天相对雨天污染率低,腋芽出芽率高,酒精和升汞双灭菌效果最佳.     

种子处理及GA3浓度对诱导三七实生苗影响研究

以健康饱满成熟的三七种子为外植体,接种到不同处理的培养基上,诱导实生苗。结果表明,剥除三七种皮,用70％的乙醇浸泡1min,再用0．1％升汞消毒灭菌10min,无菌水冲洗4～5次,接种到MS＋2,4-D（1．0mg／L）＋KT（0．5mg／L）＋GA3（40mg／L）＋蔗糖（30g／L）＋琼脂粉（7g／L）的培养基（pH5．8）中,根、茎、叶生长表现良好,从而初步建立了三七实生苗组培体系。     

青薯10号茎尖脱毒及快繁技术研究

以马铃薯品种青薯10号为试材,研究不同消毒方法、不同浓度激素配比的诱导培养基、不同茎尖大小、不同培养条件对茎尖脱毒和成苗效果的影响。结果表明:自来水冲洗1~2min,0.05%次氯酸钠溶液浸泡10min后用无菌水冲洗3~5次,可达到理想的消毒效果;茎尖分生组织0.3~0.4 mm(带2个叶原基)、诱导培养基:MS+1.0 mg/l BA+0.05 mg/l NAA+30g/l蔗糖+7g/l琼脂、光照时长14 h/d、光照强度2000lx条件下培养温度28℃时成苗效果最好。     

文心兰花梗诱导及继代增殖培养试验

以文心兰的花梗腋芽为试验材料,选择适宜的灭菌方式,研究不同切割方式和激素浓度对继代增殖的影响。结果表明,适合文心兰花梗腋芽的灭菌方式是将70%酒精倒入小烧杯浸泡30 s,无菌水冲洗3次,倒入0.1%升汞浸泡约10 min,再用无菌水冲洗5次,然后剥去外层包叶,切成1～2 cm花梗腋芽接入培养基中。在继代培养中,只切去叶片2/3的情况下,培养基MS+6-BA 2 mg.L-1+NAA 1 mg.L-1为佳。从生长点纵切的方式培养基宜用MS+6-BA 2 mg.L-1。从生长点纵切的方法比只切去叶片2/3的方式增殖倍数较高。     

日本菟丝子茎段的离体培养

就不同消毒方法和不同培养基对日本菟丝子(Cuscuta japonica)茎段消毒与组培效果的影响进行了研究.结果表明,于100 mLφ(乙醇)=75%中浸泡20 s后用无菌水冲洗2次,500 mLω(HgCl2)=1%中加入0.2 mL吐温-80浸泡4 min后再用无菌水冲洗4次,对日本菟丝子茎段消毒的效果最佳;MS+NAA 1.0 mg/L+活性炭(Activated carbon,AC)0.1 mg/L或1/2 MS+NAA 1.0 mg/L+AC 0.1 mg/L是其茎段最佳培养基.利用该培养基组培获得的菟丝子藤蔓出现类似吸器的突起,在培养瓶内能开出正常的花朵,但未观察到有根的生成,也没有出现自然状态下的自身缠绕现象.     

马铃薯品种辽薯6号茎尖脱毒及快繁技术研究

以马铃薯品种辽薯6号为试材,研究不同消毒方法、不同浓度激素配比的诱导培养基、不同茎尖大小、不同培养条件对茎尖脱毒和成苗效果的影响。结果表明:自来水冲洗1~2 min,0.05%次氯酸钠溶液浸泡10min后用无菌水冲洗3~5次,可达到理想的消毒效果;茎尖分生组织0.3~0.4 mm(带2个叶原基)、诱导培养基:"MS+1.0 mg/L BA+0.05 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂"、光照时长14 h/d、光照强度2 000 lx条件下培养温度28℃时成苗效果最好。     

绵竹快繁灭菌及丛芽诱导研究

为了建立绵竹快速繁殖体系,选择绵竹当年生生长健壮的带芽茎段作为外植体,探讨其组织培养中的最佳灭菌方法,并通过正交试验筛选丛芽诱导的最适培养基。结果表明:将外植体加洗洁精清洗后,用自来水冲洗2h,然后用75%酒精浸泡30s,0.1%升汞溶液(加入3滴吐温)消毒2次,每次8min灭菌效果最好,污染率较低,成活率较高。最佳丛芽诱导培养基为:3/4MS+6-BA 3.0 mg·L-1+KT 0.5 mg·L-1+蔗糖20g·L-1+琼脂8g·L-1,丛芽诱导率可达到72.2%。     

鸡冠花离体培养优化的探讨

以鸡冠花种子为试材探讨鸡冠花离体快繁技术。结果表明,最适种子灭菌方法为洗涤剂浸泡10 min,自来水冲洗30 min,75%乙醇灭菌30 s,0.1%升汞灭菌10 min(滴加1～2滴1%的吐温 20),无菌水冲洗4～6次;初代诱导鸡冠花的芽分化最佳培养基为MS+6 BA 1.0 mg·L-1 + NAA 0.2 mg·L-1,增殖系数1.17;继代增殖以不定芽为材料的最佳培养基为MS+6 BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1,增殖系数为1.43;最适生根培养基为1/2MS+IBA 0.4 mg·L-1,生根率95%,移栽成活率达90%。