猪附红细胞体DnaJ基因PCR诊断方法的建立及应用

为建立一种特异、敏感、准确的猪附红细胞体诊断技术,本试验根据GenBank上发表的猪附红细胞体全基因组(NC-015153.1)中的DnaJ基因序列设计合成了一对特异性引物,建立了猪附红细胞体DnaJ基因PCR诊断方法,进行了特异性和敏感性试验,并与姬姆萨染色镜检方法进行了临床应用比较.结果,猪附红细胞体DnaJ基因PCR诊断方法扩增片段大小为868 bp(GenBank登录号为;JN247670),与GenBank中(NC_015153.1)同源性为99％,该方法扩增不出犬新孢子虫、牛附红细胞体、犬附红细胞体等基因片段,最低检测猪附红细胞体DNA量为124 fg/μL,通过对53份猪血液样本的检测,并与血液涂片姬姆萨染色镜检比较,说明建立的PCR诊断方法具有特异、敏感、准确等优点,完全适用于猪附红细胞体的诊断.     

猪附红细胞体形态学研究

通过显微镜观察附红细胞体在血浆中的运动，再结合血液涂片瑞氏、姬氏染色，观察附红细胞体附着在红细胞上的状态；并通过对附红细胞体的透射电镜和扫描电镜观察，发现附红细胞体超微结构的特点，为诊断附红细胞体病和对附红细胞体进一步研究提供基础。     

猪附红细胞体病的流行特点及防控措施

<正>1病原特点猪附红细胞体呈椭圆型,平均直径为0.2~2μm,它能够黏附到红细胞膜的表面,被寄生的红细胞出现变形,细胞膜皱缩,呈现芒星状、齿轮状或者不规则状等,有的环绕在整个红细胞上。附红细胞体在红细胞上以直接分裂及出芽方式进行裂殖,不能用无细胞培养基培养,也不能在血液外组织繁殖。附红细胞体对苯胺染料易于着色,革兰氏染色阴性,姬姆萨染色呈紫红色,瑞氏染色为淡蓝色。在油镜下,调节微调螺旋时折光性较强,     

猪附红体病如何全方位预防

猪附红细胞体病是由附红细胞体寄生于猪红细胞表面及血浆中而引起的一种人畜共患病。本病对猪的感染率可高达90%,但一般多为隐性感染。在不利的气候、饲养条件或感染其他疾病时可引起发病,也可导致地方流行,大批死亡。猪附红体从病原学角度讲属于立克次氏体目无浆体科附红细胞体属。它是一种多形态微生物,多数为球形、环形和卵圆形,少数呈顿号形和杆形。直径为0.8～2.5微米。附红体对苯胺色素易于着色,革兰氏染色呈阴性,姬姆萨染色呈紫红色,瑞氏染色为淡蓝色,在红细胞上以二分裂方式进行增殖。临床症状潜伏期6～10天。体温40℃～42℃,呈稽留…     

内蒙古阿拉善盟附红细胞体感染情况调查

目的为了解内蒙古阿拉善盟人、动植物体及水、土等其它物质附红细胞体的感染情况。方法采人血静脉血和未梢血制作血片,染色后镜检。对于其他液体被检物,直接吸取一小滴镜检。对于固体被检物,需研碎后,吸取汗液进行镜检观察。结果在血片上检查到少量附红细胞体和大量附红细胞体空白痕迹,在血片染色液、水、土、草、树叶、瓜果、蔬菜、注射药物等中检查到附红细胞体。结论附红细胞体传染源多,抵抗力强,无处不在,目前没有特效消毒药和治疗药,也没有有效的防治方法。     

犬附红细胞体病PCR检测方法的建立及与应用

根据Genbank中已经发表的犬附红细胞体16sRNA基因序列设计合成一对特异性引物,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增出一条与目的片段大小一致,约630 bp的基因片段,建立了PCR快速检测方法。以PCR检测方法及瑞氏、姬姆萨、吖啶橙染色法为基础对20例犬附红细胞体病例进行检测,比较四种方法的检出率。结果表明,建立的PCR检测方法的检出率略高于吖啶橙染色,明显高于瑞氏、姬姆萨染色,可用于犬附红细胞体的快速诊断和流行病学调查。     

犬附红细胞体病PCR检测方法的建立及与应用

根据Genbank中已经发表的犬附红细胞体16sRNA基因序列设计合成一对特异性引物,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增出一条与目的片段大小一致,约630 bp的基因片段,建立了PCR快速检测方法.以PCR检测方法及瑞氏、姬姆萨、吖啶橙染色法为基础对20例犬附红细胞体病例进行检测,比较四种方法的检出率.结果表明,建立的PCR检测方法的检出率略高于吖啶橙染色,明显高于瑞氏、姬姆萨染色,可用于犬附红细胞体的快速诊断和流行病学调查.     

犬附红细胞体病的诊治

犬附红细胞体病是由附红细胞体游离寄生于犬血液或附着于红细胞表面而引起的一种血液寄生虫病。该病临床上以持续性高热、贫血、黄疸为主要特征[1]。附红体是一种多形态微生物,多在红细胞表面以单个或成团寄生,从而使红细胞呈现锯齿状、星芒状等形态。目前临床主要以患犬临床表现和鲜血压片或血涂片染色镜检为诊断依据。1发病情况     

猪附红细胞体的形态学观察方法的比较

本文通过鲜血压片镜检、瑞氏染色、姬姆萨氏染色对猪附红细胞体进行形态学方面的观察,并对三种形态学研究方法的优缺点进行评价。结果表明,鲜血压片镜检法易受温度影响,姬姆萨染色易受pH值和染色时间的影响,瑞氏染色法要防止颗粒沉积。     

猪附红细胞体生物学特性的实验室研究

文为进一步研究附红细胞体的形态结构、生殖方式与致病机理提供理论依据,有利于深入理解附红细胞体病的发病机制,也有利于附红细胞体病的治疗,特做此研究。1材料血液采自猪场附红细胞体病临床症状明显的患猪,从血液中提取猪附红细胞体。主要试剂有胰酶、链霉素、青霉素均为当地兽医站提供;瑞氏、姬姆萨、吖啶橙染色液均为畜牧局     

引发母猪生殖疾患的疾病及防治（五）

8附红细胞体 猪体内存在两种附红细胞体，一种是猪附红细胞体，另一种是小附红细胞体。后一种不发生致病作用，引起发病的是前一种，它能使猪发生一种热性病。     

附红细胞体简述

附红细胞体是寄生于红细胞表面,游离于血浆及骨髓的一群多形态微生物。介绍了附红细胞体的种类、形态结构、运动性、染色特性、分类、生活史、致病机理及其对药物的敏感性,以期为广大兽医工作者在确诊附红细胞体病时提供参考。     

附红细胞体简述

附红细胞体是寄生于红细胞表面,游离于血浆及骨髓的一群多形态微生物.介绍了附红细胞体的种类、形态结构、运动性、染色特性、分类、生活史、致病机理及其对药物的敏感性,以期为广大兽医工作者在确诊附红细胞体病时提供参考.     

猪附红细胞体单管巢式PCR诊断方法的建立及应用

根据GenBank上发表的猪附红细胞体16S rRNA基因序列(登录号U88565)设计合成2对引物,建立了猪附红细胞体单管巢式PCR诊断方法,经酶切分析、单管巢式PCR进一步鉴定后进行序列测定,并与血涂片染色镜检、常规PCR进行了比较。结果:扩增的猪附红细胞体基因序列与GenBank中发表的猪附红细胞体基因序列(U88565)同源性为96%;特异性试验表明,设计的引物不能扩增弓形虫、链球菌、大肠杆菌、葡萄球菌及羊附红细胞体等病原体;敏感性试验表明,单管巢式PCR诊断方法最低能够检测出0.116 fg的标准模板DNA。通过对75份血液样本的检测表明,建立的单管巢式PCR方法明显优于血涂片染色镜检法及常规PCR方法,具有较高的敏感性和实用性。本试验建立的单管巢式PCR诊断方法具有特异、敏感、实用等优点,为猪附红细胞体的检测提供了一种新型、可靠的诊断技术。     

夏秋季节严防羊附红细胞体病对羊只的侵害——护卫羊群安全的着力点——卫生的圈舍和围边环境清洁和减少人为制造的应激是关键

附红细胞体病(eperythrozoonsis)是由血液寄生物--附红细胞体引起的以发热、贫血、黄疸为主要特征的人畜共患疾病.本病的发生具有明显的季节性,主要发生于夏秋季节,每年的7～9月是该病的发病高峰期.附红细胞体种类很多,现已命名的大约有14种,常见的有绵羊附红细胞体、猪附红细胞体、山羊附红细胞体、小附红细胞体等,其中猪、绵羊的附红细胞体致病力较强.     

猪附红细胞体病的综合防治措施

附红细胞体在显微镜下观察，红细胞透光性增强，呈球形、逗点状、椭圆形、月牙形等多种形态，附于红细胞表面、或在血浆中做摇摆、扭转、翻滚等运动。虫体一旦附着于红细胞表面，就看不到其运动，也使红细胞变形为齿轮状、星芒状或不规则形状，瑞氏染色，虫体呈蓝黑色。此时多预后不良。     

猪附红细胞体病原特征及其致病性分析

为研究猪附红细胞体的病原形态学特征及其致病特性,给6只临床健康小鼠成功感染了猪附红细胞体病,对试验组小鼠感染后的不同时期采集的血样进行了鲜血压片、姬姆萨染色及扫描电子显微镜下的形态学检查,红细胞计数和以P1:5'-GCATGCCCAGTCCCCAAGGA-3'和P2:5'-TGCGGGGAGTACGTGGGAAGG-3'为特异性引物,利用2003年Ludwig E报道的方法对待检血样中附红细胞体DNA的PCR鉴定及测序.1 000倍油镜下观察到单个或连成线状的附红细胞体附着于红细胞表面,红细胞变成刺状、菠萝状或"口"字形等不规则形状;12 000倍扫描电镜下观察到了"逗点"状及以纤丝与红细胞膜相连的附红细胞体;红细胞计数结果显示:与对照组相比试验组小鼠在接种后第7、10、14天出现大量异型性红细胞,其中第10天严重变形红细胞数量最多.说明猪附红细胞体病发病明显期在感染后第7～14天,14 d以后逐渐消散;PCR扩增得到782 bp的DNA片段,经序列分析与序列号为AJ504999的相应片段同源性为99.74%.本试验为猪附红细胞体的病原特性的研究提供了科学依据,为猪附红细胞体病发病机理等方面更深入的研究奠定了基础.     

近年猪附红细胞体病流行情况及防治要点

<正>附红细胞体病是由一种附着在红细胞表面或游离于血浆中的单细胞原生物(附红细胞体)感染机体后,引起的人畜共患疾病,简称附红体病。在一般涂片标本中观察,附红细胞体的形态有球形、环形、盘形、哑铃形等,大小差异较大;附红细胞体的抵抗力较弱,在60℃的水中1min即停止运动,100℃的水中1min全部灭活;常用的消毒剂可迅速杀灭病原;但其在低温冷冻条件下可存活数年。附红体对宿主选择不严格,一般以寄生宿主命名,比如猪附红细胞体,犬附红细胞体,奶牛附红细胞体、绵羊附红细胞体等。     

一例奶牛附红细胞体病的诊疗体会

牛附红细胞体病是牛附红细胞体之立克次氏体寄生于牛、羊、猪、人等多种动物细胞表面或血浆及骨髓中引起的一种溶血性传染病。其特征为高热、贫血、黄疸、消瘦。病原是一种寄生于血浆和红细胞的血液寄生虫。在油镜下观察，可以看到单个、数个寄生在红细胞表面和血浆内。采集血液涂片，经姬姆萨染色，红细胞呈粉红色，附红细胞体呈淡蓝色，多数为半月状。牛附红细胞体对干燥和化学药物抵抗力较弱，耐低温，一般常见消毒药均可将其杀灭。该病常发生于夏秋温暖季节，寒冷季节较少发生。这种病是由蚊虫及吸血昆虫传播的奶牛发病后如果得不到及时治疗，易继发其它疾病甚至会造成死亡。现就一起奶牛附红细胞体病的诊治情况报告如下：     

犬附红细胞体PCR检测方法的建立及应用

通过将GenBank上报道的犬附红细胞体16S rRNA基因序列与其他物种同源序列进行比对,取其种间特异性和种内保守性较高区域设计1对引物,以吉林省延边地区犬附红细胞体基因组DNA为模板进行PCR扩增,并进行特异性、敏感性试验验证,建立犬附红细胞体PCR诊断方法,应用于临床检测。结果表明:该方法可成功扩增出大小为529 bp的犬附红细胞体片段,与GenBank中German no.1(AY150973.1)序列同源性为98.5%。其最低DNA检测量为25 fg/μL,不与犬巴贝斯虫、犬弓形虫及猪附红细胞体等病原体基因组产生交叉反应。同时通过对57份犬血液样本的检测结果说明,该方法检出率明显高于姬姆萨染色镜检法,且避免了假阳性。本试验所建立的PCR检测方法具有特异、敏感、准确等优点,为犬附红细胞体病的诊断提供了一种可靠的方法。