苏云金芽胞杆菌剂型研究进展

苏云金杆菌(Bacillusthuringiensi,sBt)杀虫剂是目前世界上产量最大、应用最广、对人畜及天敌安全、不破坏生态平衡的微生物农药,广泛用于防治农业、林业、贮藏害虫以及环卫昆虫。然而,苏云金杆菌制剂存在持效期短,防治效果易受阳光、温度、湿度、雨水等外界气候和生态条件制约     

苏云金芽胞杆菌Cry毒素的研究现状

苏云金芽胞杆菌是应用最为成功的微生物杀虫剂,它产生的最大一类杀虫蛋白是Cry毒素,其田间应用是防治农业害虫和提高作物产量的重要手段。Cry毒素具有针对宿主生物速效、对非目标生物的影响低、对环境友好和可降解等优势。本研究简述了Cry毒素在投入农业使用中产生的昆虫抗性问题,归纳了Cry毒素结构和功能、作用机制、蛋白结构域、昆虫抗性等研究现状,总结了表观遗传机制、受体调控、原生肠道菌群促进抗性的三大特点,分析了对抗性昆虫的应对措施,认为人工选择新型耐药昆虫以预见可能的耐药途径、Cry毒素进行定向进化和田间交互使用策略是研究重点。本文旨在为Cry毒素在农业生物防治中的成功应用提供理论依据。     

我国科学家首次开展青藏高原芽胞杆菌科学考察

<正>笔者从福建省农业科学院获悉,近日,由中国科学家组成的资源微生物联合考察队,完成青藏高原芽胞杆菌野外样品采集,进入菌株分离与科学鉴定阶段,以期实现由中国独立自主建立的青藏高原芽胞杆菌资源库,造福人类社会。据了解,联合科考队由中国科学院微生物所发起,中科院青藏高原所、吉林农业大学、福建省农业科学院等近30位专家组成,于8月2～16日,分三路进入青藏高原羌塘无人区、可可西里、四川阿坝和青海班玛等地,系统开展青藏高原     

苏云金芽胞杆菌与线虫互作研究获进展

<正>近日,《Nucleic Acids Research》期刊在线发表了华中农业大学农业微生物学国家重点实验室微生物农药团队、生命科学技术学院孙明教授课题组的最新研究成果,题为Small RNAmediated Cry toxin silencing allows Bacillus thuringiensis to evade Caenorhabditis elegans avoidance behavior defenses。该研究以苏云金芽胞杆菌和线虫为模型,揭示了一种由small RNA介导的病原菌欺骗宿主趋避行为的新策略。生命科学技术学院彭东海副教授为该论文的第一作者,孙明     

苏云金芽胞杆菌CY1菌株的cry基因分析

通过醋酸钠-抗生素筛选法从河北省土壤中筛选得到了苏云金芽孢杆菌新菌株CY1。镜检可观察到伴孢晶体呈小菱形。SDS-PAGE分析结果表明菌株CY1表达的晶体蛋白分子量为130 kDa。利用25对通用引物检测cry1,cry1I,cry7,cry2,cry3,cry4/cry10,cry5,cry6,cry7,cry8,cry9,cry11,cry13/14,cry16/17,cry18,cry19,cry21,cry22,cry24/25,cry26/28,cry27/29,cry30,cry32,cry34/35,cry40基因,仅从CY1菌株中检测出cry7基因,该cry7基因N末端的1 215 bp片段所编码的氨基酸序列与已发表的Cry7Ab1(Acc No.:U04367)序列同源性达99%,仅有2个氨基酸的差异。用3对cry7Ab特异引物检测,进一步证实该菌株携带有cry7Ab基因。     

苏云金芽胞杆菌抗软腐病aiiA基因转花魔芋研究

采用农杆菌介导的遗传转化方法,将来自苏云金芽胞杆菌经密码子优化的人工合成酰基高丝氨酸环内酯酶aiiA基因导入花魔芋,以提高魔芋抗软腐病的能力.以花魔芋的茎为外植体,通过与含有植物双元表达载体pU1301的农杆菌EHA105共培养,将aiiA基因导入魔芋基因组.经过潮霉素两次筛选,得到9块独立的抗性愈伤组织,经分化,生根,移入温室盆栽成活的抗性再生苗34株.对不同抗性愈伤来源的T0代再生苗进行PCR检测得到的阳性植株比例为62.7%,斑点杂交进一步确认外源aiiA基因已成功地整合到魔芋基因组中.Western杂交显示,aiiA基因在魔芋植株中能正常表达,其最高表达量占魔芋叶片总可溶蛋白的0.02%～0.06%.酰基高丝氨酸环内酯酶活性检测表明转基因魔芋叶片的蛋白可以降解酰基高丝氨酸环内酯信号分子.     

苏云金芽孢杆菌伴孢晶体的形成及降解

【研究目的】研究苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis,Bt）伴孢晶体的形成及降解,为其生物学特性的系统研究和活性成分分析提供理论基础。【方法】将Bt菌株HD-1在牛肉膏蛋白胨固体培养基上30℃下培养24h,制成菌悬液后用日本电子JEM100-CX-II透射电子显微镜观察伴孢晶体的形成。采用五种溶解方法降解Bt菌株HD-1和LSZ9408伴孢晶体后,进行SDS-PAGE电泳。【结果】此研究的电镜观察表明Bt HD-1在分裂过程中形成芽孢和晶体,晶体为大菱形。Bt LSZ9408晶体含有130和65kDa的毒蛋白,HD-1晶体含有130、65和25kDa的毒蛋白。【结论】Bt LSZ9408和HD-1伴孢晶体都包含CryI和CryII蛋白质毒素。     

我国芽胞杆菌农用研究获新突破

正记者从福建省农业科学院获悉,芽胞杆菌新资源挖掘与生防菌剂创制应用研究通过院士专家组成果评审,该项成果在同类研究中居国际领先水平,表明我国芽胞杆菌农用研究获得新突破,将为减少化学农药、降低农业面源污染,增进食物安全与人类健康,提供科技保障。     

含cry7类基因的苏云金芽胞杆菌菌株的分析

对我室所保存的18株含cry7类基因的菌株进行晶体形状、生物活性和蛋白型基因型等进行分析.结果表明:这些菌株能产生菱形、小菱形和不规则形伴胞晶体,SDS-PAGE检测主要蛋白的分子量是130 kDa,PCR扩增得到1 300 bp条带.对马铃薯瓢虫二龄幼虫的生物活性测定结果表明,菌株WZ-9具有很高的杀虫率,72 h校正死亡率达到了93.1%;菌株WCG-10活性次之,72 h校正死亡率达到44.8%,而其他菌株杀虫活性低或没有活性.对杀虫活性最高的WZ-9菌株扩增全长基因,得到cry7Ab3基因(GenBank Number:BI 1015188).     

苏云金芽胞杆菌不同分化发育时期总RNA的有效分离

将苏云金芽胞杆菌（Bacillus thuringiensis,简称Bt）8010在LB液体培养基30℃、230r／min下振荡培养,通过生长曲线测定（OD600）和显微镜观察,分别在8、30、39、42h和46h取样得到营养生长期、孢子囊期和裂解期样品来提取总RNA。通过对试剂提取方法的改进,找到一种方法可以很有效的提取Bt3个不同分化发育时期（营养生长期、孢子囊期和裂解期）的总RNA。提取的总RNA质量很好,可以进行cDNA合成、RT-PCR和转录组学研究等下游实验。     

苏云金芽胞杆菌cry2Ac4基因在 大肠杆菌中的表达

在大肠杆菌中表达苏云金芽胞杆菌（Bacillus thuringiensis,简称Bt）cry2Ac4基因;笔者以含有Bt WB9菌株cry2Ac4基因的质粒pMD2Ac为模板,利用cry2Ac4基因的特异引物对(ET-F/ET-R)扩增获得该基因,进而将cry2Ac4基因与pET-29a原核表达载体连接;成功构建了重组表达载体并转化大肠杆菌JM109,从阳性转化子中提取重组表达质粒pET-29a-cry2Ac4,再转化大肠杆菌BL21（DE3）pLysS,经IPTG诱导后,对诱导表达产物进行了SDS-PAGE检测;cry2Ac4基因编码的约70kDa蛋白在大肠杆菌中得到了高效表达。     

加拿大拟批准登记苏云金芽胞杆菌aizawai亚种菌株ABTS-1857

<正>笔者从江苏省技术性贸易措施信息平台获悉,8月14日,加拿大卫生部发布PRD2014-17号咨询文件,有害生物管理局(PMRA)拟批准XenTari生物杀虫剂原药粉和XenTari WG生物杀虫剂销售和使用的正式登记,其中含有活性成分苏云金芽胞杆菌aizawai亚种菌株ABTS-1857(Bacillus thuringiensis subsp.aizawai Strain ABTS-1857),用于防治多种水果、蔬菜、油料作物和观赏     

在黏虫卵防治中推荐使用苏云金芽胞杆菌和苦参·印楝素

<正>为有效防控黏虫,西北农林科技大学植物保护学院选用灭多威、苦参·印楝素、苏云金芽胞杆菌、甲维盐和高效氯氟氰菊酯5种药剂对其卵进行室内触杀试验,比较这5种药剂对黏虫卵和初孵幼虫的触杀效果及对卵的毒力,测定不同药剂处理后黏虫卵初孵幼虫存活率、发育历期、化蛹率、蛹重和羽化率;并通过冷冻切片技术观察了不同药剂处理后黏虫卵的外部形态和胚胎发育情况。     

利用新鲜蓝藻藻泥发酵制备苏云金芽胞杆菌杀虫剂或成现实

<正>富营养化湖泊中蓝藻爆发已成为突出的环境问题。云南农业大学科技人员以昆明滇池蓝藻新鲜藻泥为培养基,通过接种苏云金芽胞(Bt)菌种,测定发酵过程中Bt的活菌数及芽胞数,观察其生长过程中形态变化,同时测定杀虫晶体蛋白     

芽胞杆菌菌体浓度的快速检测方法研究

为了快速检测芽胞杆菌的菌液浓度,采用分光光度法测定蜡状芽胞杆菌的菌液浓度,代替传统常规费时费力的生物细胞测定法。本研究以不同pH值下培养的模式菌株蜡状芽胞杆菌为例,通过可见光分光光度法测定不同pH值菌液的吸光度,分别以水和培养基作为空白对照,并与其对应的菌体浓度进行比较分析。利用生物统计软件DPS分析蜡状芽胞杆菌菌液浓度(Y)与其吸光度(X)（以水为空白对照）之间有着极好的相关性,其测定的吸光度可以作为快速地检测芽胞杆菌菌体浓度的指标。综上所述,本研究结果证明吸光度法可以代替细胞计数法作为芽胞杆菌的菌体浓度生长变化的指标,且此方法简便、快速、可靠。     

枯草芽胞杆菌信号分子的分离纯化

为了获得较高纯度的B. subtilis分泌的信号分子,采用离子交换层析的方法对其进行分离纯化。本文研究了洗脱液及其pH和流速对分离纯化效果的影响,得到最佳层析条件：离子交换层析洗脱液(B液)为pH 4.0的NaAc + NaCl溶液,平衡液(A液)为pH 4.0的NaAc溶液,洗脱流速为2 mL/min;SDS-PAGE验证表明在5 kDa左右出现单个条带,且抑菌试验结果表明层析液中的B. subtilis信号分子能促进L. paracasei HD1.7产细菌素。     

我国科学家发现澳洲棉抗病及腺体形成新机制

<正>近日,中国农业科学院棉花研究所野生棉研究团队领衔河南大学、河南科技学院、安阳工学院、南京农业大学等单位,联合公布了二倍体野生棉种澳洲棉高质量、从头组装的基因组精细图谱。在此基础上,他们对澳洲棉抗病和腺体延缓形成等优良性状的基因进行了挖掘分析,揭示了棉花抗病及腺体延缓形成的新机制。相关研究成果在线发表于《植物生物技术杂志》。     

我国芽胞杆菌农用研究获新突破将为减少化学农药提供保障

正记者从福建省农业科学院获悉,"芽胞杆菌新资源挖掘与生防菌剂创制应用"研究通过院士专家组成果评审,该项成果在同类研究中居国际领先水平,表明我国芽胞杆菌农用研究获得新突破,将为减少化学农药、降低农业面源污染,增进食物安全与人类健康,提供科技保障。     

芽胞杆菌对香蕉枯萎病的防效评价

为有效评价生防菌对香蕉尖孢镰刀菌古巴转化型(Fusarium oxysporum f.sp.cubense,FOC4)B2的防病能力,通过对收集的生防菌资源进行抗性筛选,对249个测试菌中筛选到的3株拮抗菌A5-6、D7-16和CL7进行了抑菌观察、抗病谱测定、土壤抑菌能力监测及盆栽苗拮抗能力测定,并对测试菌进行了形态观察和16S r DNA测序鉴定。显微观察显示:3个拮抗菌会导致病原菌B2的菌丝发育畸形、膨胀、胞壁增厚、部分形成泡状、内容物外渗生长以及抑制孢子的萌发。抑菌谱测试表明,菌株对包括FOC4以内的其他真菌性病害抑菌率在60%以上,但对尖孢镰刀菌其他专化型抑菌率较低,仅在40%~50%之间。土壤拮抗性能评价结果表明:拮抗菌单独处理对土壤中FOC数量的控制有限,只能降低1个数量级,但对处理盆栽苗中土壤FOC数量的控制能下降到2个数量级。盆栽实验表明,菌株A5-6以72.3%的防病效果较D7-16(45.4%)、CL7(50.0%)的防效之间差异达到了极显著。3个菌株经形态学和16S r DNA序列鉴定表明D7-16为短短芽胞杆菌(Brevibacillus brevis),A5-6和CL7也属于芽胞杆菌,3个菌株都是香蕉镰刀菌枯萎病潜在的良好生防资源,可作为生防菌做进一步的开发性研究。     

“芽胞杆菌资源库建设和应用”成果通过专家评审

<正>2014年12月9日,福建省农业科学院组织有关专家对农业生物资源研究所的科研成果芽孢杆菌资源库的建设和应用进行了评审。与会专家听取了项目组的汇报,认真审阅了相关资料,经质疑与讨论后认为,该项研究设计合理,技术先进,整体研究达到国内领先水平。农业生物资源研究所农业微生物创新团队长期致力于芽胞杆菌的资源收集、分析和应用研究。在实施该项目的过程中,项目组从全国各地及德国、巴西等14国采集8000余份土壤样