甜瓜抗病基因聚合体的分子标记辅助选择

【目的】为快速筛选出聚合抗白粉病、抗枯萎病基因的甜瓜材料。【方法】以抗白粉病基因（Pm-2、Pm-6）和抗枯萎病基因（Fom-1）的甜瓜材料与优质、高产甜瓜材料进行复合杂交,采用早代抗病性鉴定及分子标记抗病基因检测的方法。【结果】筛选出聚合Pm-2、Pm-6和Fom-1基因的材料2个（21T41、21T53）,聚合Pm-6、Fom-1基因的材料2个（21T33、21T50）,聚合Pm-2、Fom-1基因的材料1个（21T9）。【结论】旨在为解决本地主要病害,培育多抗、优质、高产新品种奠定基础。     

不同白粉病抗性甜瓜材料叶片组织病理学及接种后ROS代谢相关酶基因表达分析

为探究甜瓜叶片形态结构及ROS代谢相关酶基因表达与白粉病抗性之间关系,选择两份抗病和两份感病材料,分析叶片结构和表皮细胞紧密度在不同材料间差异,白粉菌侵染后不同材料ROS代谢相关酶活性变化及CAT、SOD、POD基因表达量变化。结果表明,与白粉病抗性显著相关的是叶片结构紧密程度以及表皮细胞排列方式;甜瓜叶片接种白粉菌后,高抗材料M4-125可明显观察到细胞积累大量H2O2,且抗病材料SOD和POD活性总体呈上升趋势,表明不同材料抗白粉病能力与叶片组织及ROS代谢相关酶密切相关。qRT-PCR结果表明,高抗材料M4-125在接种白粉菌后,其ROS代谢相关酶基因表达模式一致。     

高效液相色谱法测定不同甜瓜品种的糖含量

以春秋蜜17号、西州密25号、西州密1号、新蜜25号为试材,利用高效液相色谱法测定果实中葡萄糖、果糖、蔗糖含量并对不同品种糖含量进行差异分析。结果表明,不同甜瓜品种糖组分含量差异显著,果实甜度高低依次为西州密25号、春秋蜜17号、新蜜25号、西州密1号。     

甜瓜叶片高效再生体系的建立

为了建立高效稳定的甜瓜植株再生体系,为甜瓜的转基因技术提供受体材料,以薄皮甜瓜品种"西甜一号"叶片为外植体,通过器官发生途径诱导形成不定芽,研究了不同的激素组合、外植体放置方式、暗培养时间等条件对其再生的影响。结果表明,以新梢顶端展开的第2~3片叶在MS 6-BA1.0 mg/L的诱导培养基上,外植体远轴面向下接触培养基,直接转入正常光周期下培养再生频率可达100%,平均每个外植体上可诱导出11株健壮植株。在MS 6-BA 0.05 mg/L不定芽伸长培养基上,分化的不定芽(丛)能够伸长。在1/2MS IAA 0.2 mg/L的生根培养基上无根苗生根,生根率可达100%。     

甜瓜新选品系的抗病(白粉病)性鉴定

利用田间自然发病、苗期人工接种和同功酶的活性分析测定对新选甜瓜品系①(98-F-Y-4-16-7-7-1-1-3-3)的抗病性(白粉病)进行了重复鉴定。结果表明:品系①高抗白粉病,可作为抗病材料在甜瓜育种中加以利用;磷酸酯酶的活性与白粉病的抗性有关。     

海南薄皮甜瓜枯萎病病原菌鉴定及抗病砧木的筛选

海南冬春季薄皮甜瓜露地生产土传病害发生严重,严重影响产量。笔者从患病薄皮甜瓜茎组织分离病菌,经过病原菌形态、rDNA ITS序列鉴定为尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）,通过凯氏验证该病原菌为致病菌。接种病原菌孢子液,从致病性、形态学和分子生物学等方面进行了鉴定分析,并以‘美浓’品种为对照,对‘银光’、‘厦利’、‘广砧1号’、‘大白’、‘连大’、‘砧8’、‘大正’、‘壮士’和‘甬砧’等9种砧木的抗病性进行检测,以筛选出抗性好的薄皮甜瓜砧木品种。结果表明:‘广砧1号’、‘连大’、‘厦利’、‘甬砧’、“砧8’砧木的发病率为0,可以作为嫁接砧木的候选品种。     

特征波长筛选结合PCA-LSSVM 对甜瓜叶片SPAD值的预测

【目的】利用光谱技术对定量估测大田甜瓜冠层叶片叶绿素含量,为田间的水肥调控以及田间管理提供理论依据。【方法】采用一阶求导对400～1 100 nm的叶绿素可见近红外反射光谱数据进行预处理,对于冗余的光谱数据,先分别使用特征筛选中的竞争性自适应重加权采样法(CARS)、遗传算法(GA)、蒙特卡罗无信息变量消除法(MC-UVE),再分别与主成分分析(PCA)特征提取算法融合;分别建立极限学习机(ELM)、支持向量机(SVM)、最小二乘支持向量机(LS-SVM)对甜瓜叶片SPAD定量预测模型。【结果】单一的特征筛选下,最优预测模型为CARS+SVM,校正集相关系数为0.903 5,预测集相关系数为0.893 1;特征筛选和特征提取融合下,最优的预测模型为GA+PCA+LSSVM,校正集相关系数0.955 8,预测集相关系数为0.939 7。【结论】优化后的模型可用于定量分析的使用,精准测定甜瓜叶片叶绿素含量。     

叶果比对甜瓜叶片衰老的影响

露地栽培条件下,人为控制厚皮甜瓜单株留叶数,形成不同的叶果比,分析甜瓜叶片净光合速率、叶绿素、可溶性蛋白、可溶性糖和丙二醛含量变化,探讨叶果比对甜瓜叶片衰老的影响.结果表明,随着叶果比减小叶片生理活性增强,表明增加库的能力,可以增强叶片的生理活性,但叶果比减小到一定程度后,叶片的生理活性不仅不增强反而会减小,这是因为源的减少促进了叶片的早衰,黄河蜜、银峰、玉金香适宜叶果比分别为66、48、30,说明对一个特定品种来说,都有一个源库协调的问题,过多或不及,均不利于延缓叶片的衰老.相同叶果比下,叶片净光合速率、叶绿素、可溶性蛋白、可溶性糖下降幅度和丙二醛上升幅度,黄河蜜>银峰>玉金香,说明大果型品种对摘叶处理反应比银峰中果型和小果型更为敏感.生产实践中,通过整枝减小叶果比,对特定的品种形成适宜叶果比来延缓叶片的衰老,大果型品种叶果比>中果型>小果型.     

甜瓜不同品种叶表皮特性与光合速率的观测

对4个甜瓜品种进行叶表皮显微观察、叶绿素含量和光合速率测定,结果显示,甜瓜不同品种间叶表皮气孔、表皮毛数量、叶绿素含量有很大差别。其中气孔平均数量变化范围在519～805个/mm2、表皮毛数量在28.2～62.1个/mm2、统计分析达到极显著差异;叶绿素含量在22.0～39.8 靏/cm2之间;光补偿点品种间变化差异不显著,自然光照条件下3个品种的光合速率变化不明显,但“皇后”的光合速率显著的低于其它3个品种。进一步对气孔导度和胞间CO2浓度测定结果分析认为皇后光合速率低是由于低的气孔导度引起;比较叶绿素含量与光合速率结果表明在正常绿叶品种中二者变化无相关性。     

甜瓜抗白粉病基因的SSR标记

以甜瓜抗白粉病品种'PMR5'、感病品种'黄河蜜3号'及其杂交的F2代群体为材料,采用SSR标记和分离群体分组分析法(BSA)对抗病基因进行DNA分子标记.结果表明:引物CSAT425在抗、感亲本间和F2代抗、感基因池间能扩增出1条大小约为98 bp的多态性片段.经F2代180个单株验证后,该多态性条带与'PMR5'抗...     

甘肃甜瓜白粉病病原种及生理小种的鉴定

在甘肃省甜瓜主产区瓜州县、民勤县和皋兰县采集25份甜瓜白粉病病原菌,通过显微镜观察,利用引进的国际通用的甜瓜白粉病生理小种对本地区甜瓜白粉病病原菌的种及生理小种进行鉴定.结果表明:25份甜瓜白粉病病原菌均为单囊壳白粉菌(S.fuliginea)种,病原菌小种是S.fuliginea小种1和小种2US,其中小种1为优势生...     

甜瓜种质资源苗期抗白粉病鉴定

在明确甜瓜白粉病生理小种的基础上,对从国内外搜集的109份甜瓜种质材料进行苗期接种鉴定。子叶展平后,采用孢子悬浮液法接种S.fuliginea属的2F小种,接种12～15d充分发病后开始调查抗感反应。鉴定结果显示,供试甜瓜种质中,高抗材料19份,中抗材料37份,中感材料33份,感病材料20份。抗病材料中有6份美国的厚皮甜瓜,1份法国厚皮甜瓜,2份日本厚皮甜瓜,2份中国薄皮甜瓜。研究将为改良甜瓜白粉病抗性和甜瓜抗病育种提供有潜在利用价值的基因资源和基本技术支持。     

抗真菌转基因水稻种植对土壤有机氮组分的影响

【目的】探讨转基因水稻对土壤有机氮组分的影响,为评价转基因作物对土壤供氮能力的影响提供依据。【方法】采用田间小区试验,按抗真菌转基因水稻品种设转品1、转品8两个处理及其亲本非转基因水稻七丝软粘作对照处理,于水稻播种前及收获后采集土样测定分析土壤有机氮组分及真菌数目变化情况。【结果】转基因水稻转品1、转品8和亲本非转基因水稻七丝软粘的土壤有机氮组分在种植前和收获后均无明显差异,外源抗真菌基因的引入对水稻田土壤有机氮各组分含量及其所占全氮比例无明显的影响,土壤有机氮中酸解氮的各组分含量顺序为：氨基酸态氮〉酸解未知氮〉氨态氮〉氨基糖态氮。【结论】外源抗真菌基因的引入对土壤有机氮组分的影响差异不显著。     

几种化学诱导物对甜瓜白粉病抗性的诱导作用

采用5种化学物质分别对甜瓜叶片进行处理,研究了5种化学诱导剂对甜瓜抗白粉病的诱导作用以及对甜瓜白粉菌孢子萌发的抑制效果.结果表明:苯并噻重氮(BTH)、水杨酸(SA)、草酸(OAA)、硅酸钠(Na2SiO3)均能显著诱导甜瓜对白粉病的抗性.各种诱导剂的最适诱导浓度分别为BTH 0.35 mmol/L、SA 1.0 mmol/L、OAA30 mmol/L、Na2SiO310 mmol/L;适宜浓度下的诱导效果分别为:72.4%4、9.9%4、3.4%和34.9%.磷酸氢二钾(K2HPO4)在供试浓度范围内对甜瓜抗白粉病的诱导作用不显著.试验同时还表明,5种诱导剂在供试浓度范围内对甜瓜白粉菌无抑菌活性.     

葡萄抗、感白粉病植株叶片蛋白质组差异比较

【目的】运用蛋白质组学比较研究白粉病不同抗病性葡萄蛋白质组构成的差异,找出白粉病感病蛋白和抗病蛋白。【方法】以抗病葡萄植株“6-12-4”和感病植株“6-12-2”为材料,在人工接种白粉菌后0（接种前）,2,4 d取叶片样品,提取其总蛋白,通过双向电泳技术,找到不同抗病性葡萄接种白粉菌后不同时间表达有差异的蛋白质点,对其中表达差异明显的蛋白质点进行回收和纯化,并进行MALDI-TOF质谱鉴定。【结果】从供试样品中共获得26个差异表达的蛋白质点,其中10个表达有明显差异的蛋白质经质谱鉴定后有7个为阳性斑点,3个为阴性斑点。蛋白质肽质量指纹鉴定结果表明,7个阳性斑点中有2个是假定蛋白,2个是未命名蛋白,差异蛋白质点5411为33 ku光系统Ⅱ放氧复合体外周蛋白,差异蛋白质点5625为核酮糖1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶,差异蛋白质点7121为病程相关蛋白PR10。【结论】这些差异表达的蛋白可能与葡萄植株抗、感白粉病的特性有一定关联。     

外源表没食子儿茶素没食子酸酯对甜瓜幼苗白粉病抗性的影响

白粉病是甜瓜生产中常见的真菌病害,严重影响果实的产量和品质。以甜瓜品种甜宝为试验材料,通过外源表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)处理,探讨EGCG对甜瓜白粉病抗性的影响。通过二氨基联苯胺(DAB)染色和丙二醛(MDA)的测定结果表明,外源喷施EGCG能够减少白粉病侵染所引起的活性氧积累,MDA含量显著下降,甜瓜叶片细胞膜脂过氧化程度降低。甜瓜叶片抗氧化酶活性分析表明,外源EGCG预处理,过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)4种主要抗氧化酶活性都显著升高。抗氧化酶活性也受到白粉病入侵的诱导,但外源EGCG预处理进一步促进了抗氧化酶的提高。利用实时定量PCR技术进一步分析了相关基因的表达情况,结果显示,抗氧化酶相关基因CmCAT、CmAPX、CmSOD、CmPOD也均受到外源EGCG的诱导表达。上述研究结果表明,外源喷施EGCG可以通过调控甜瓜叶片的抗氧化酶系统,降低白粉病侵染所引起的活性氧爆发,从而提高了甜瓜对白粉病的抗性。     

苍耳抑菌成分提取工艺

用4种不同的溶剂和连续回流、冷浸以及振荡3种方法对苍耳抑菌成分的提取工艺进行了研究,并以番茄灰霉病菌、辣椒丝核病菌、黄瓜枯萎病菌、黄瓜黑星病菌和番茄早疫病菌为供试真菌进行了抑菌效果比较,.结果表明,丙酮、甲醇分别为苍耳茎叶和苍耳根的最佳提取溶剂,而连续回流提取法为最佳提取方法.     

春秋桑叶中黄酮类化合物总量及提取方法比较

以芦丁为标样，用分光光度法分析了２０个不同桑品种春秋叶的黄酮类化合物总量，不同品种桑叶中，春叶黄酮含量为１１．７１～２６．６１ｍｇ／ｇ，秋叶为９．８４～２９．６０ｍｇ／ｇ．鲜叶直接测定，风干和烘干３种预处理比较，鲜叶黄酮含量最高．热水、３０％乙醇水溶液经半小时回流，提取率大于９５％．用高效液相色谱法测定了桑叶黄酮类化合物的组成，结果表明，桑叶中至少含有４种黄酮化合物，其中２种分别为芦丁和槲皮素     

瑞香狼毒根中抑菌成分的初步研究

用5种不同的溶剂和连续回流、冷浸以及振荡3种方法对瑞香狼毒根中抑菌成分的提取工艺进行了研究,并对瑞香狼毒根最适溶剂和方法的提取物中抑菌成分进行了初步分离和分析。结果表明,乙醇为瑞香狼毒根抑菌活性物质提取的最佳溶剂,而连续回流提取法为最佳提取方法;瑞香狼毒根中含有1, 7, 7-三甲基-二环[2, 2, 1]-2-庚酮、N-苯基--萘胺、邻苯二甲酸二-(2-乙基)-己酯、邻苯二甲酸二辛酯等26种可能的抑菌成分。