鸡传染性鼻炎单抗阻断ELISA诊断试剂盒的研究

本研究在单抗阻断ELISA方法的基础上成功地建立了鸡传染性鼻炎阻断ELISA诊断试剂盒,结果证明,本盒具有较子的敏感性、特异性和重复性,在对临床病鸡、人工感染鸡和免疫鸡的检测中,A型检出率可高达75％-90％,C型的检出率也可达到60％。试剂盒在37℃可保存7天以上,4℃可保存10个月,-20℃可保存1年以上。是一种适合推广应用的良好的鸡传染生鼻炎诊断产品。     

鸡传染性鼻炎的诊断与防制研究进展

鸡传染性鼻炎是由副鸡嗜血杆菌（Hpg)引起的一种鸡急性上呼吸道传染病，本病发生后可引起蛋鸡产蛋量下降，育成鸡生长发育受阻和淘汰率增加，肉鸡肉质下降，造成很大的经济损失，作者对本病目前国内外诊断与防制研究概况作一综述。     

鸡传染性鼻炎的诊断

鸡传染性鼻炎是由副鸡嗜血杆菌（Haemophilus paragallinanum,HPG）引起的一种急性呼吸系统传染病,主要特征为眼和鼻黏膜发生不同程度炎症,发病率很高,可以引起幼鸡生长停滞和蛋鸡产蛋量显著下降。8～12周龄的鸡和产蛋母鸡最常发生,病鸡和健康带菌鸡是主要传染源。本病由Beach于1920年首先发现并报道,在1932年,De Blieck分离到病原体,并将其命名为鸡鼻炎嗜血红蛋白杆菌。本病在世界范围内普遍存在,给养鸡业造成了很大的经济损失。该病的诊断方法有病原学诊断、病理学诊断及血清学诊断。     

鸡传染性鼻炎研究进展

鸡传染性鼻炎是由副鸡禽杆菌引起的一种鸡急性上呼吸道传染病.本文从鸡传染性鼻炎的病原学、诊断和防治三个方面进行了综述,介绍了国内副鸡禽杆菌新出现的血清型以及给疾病的预防和控制带来的影响,并对鸡传染性鼻炎诊断和疫苗的使用提出建议.     

鸡传染性鼻炎的防治

鸡传染性鼻炎是由副鸡嗜血杆菌(Hpg)引起的一种急性上呼吸道疾病，具有传染性强，发病率高，危害大等特点。主要侵害鸡的鼻腔、鼻窦、粘膜及眼粘膜，有时炎症可蔓延至气管、支气管和肺部。病鸡的主要症状表现为颜面肿胀，鼻腔和鼻窦内有浆液性分泌物，结膜炎，一侧或两侧眼眶周围组织肿胀，感染严重者造成失明，肉垂明显水肿，如气管和肺部发炎，则出现呼吸困难和啰音，不少鸡都是由于呼吸功能衰竭而死亡。     

鸡传染性鼻炎的诊断与防治

鸡传染性鼻炎是由鸡副嗜血杆菌引起的一种以鼻、眶下窦和气管上部卡他性炎症为特征的急性或亚急性呼吸道传染病。其主要特征为眼、鼻腔和眶下窦发炎，流水样鼻液，眼、面部、肉髯肿胀，打喷嚏，流泪，食欲不振。临床上主要用含A型和C型鸡副嗜血杆菌二价油乳剂灭活疫苗和氟苯尼考与沙星类药物进行预防和治疗。     

鸡传染性鼻炎研究概况

传染性鼻炎(IC)是由副鸡嗜血杆菌(Hsemophilus Paragallinarum)引起的鸡急性上呼吸道疾病。以鼻腔与窦发炎、流鼻涕、脸部肿胀和眼结膜发炎等为主要特征。由于本病常为混合感染,所以多年来忽略了对该病原体的检查。1931年,De Blieek分离出病原体,从而证实了IC是作为一种独立的临     

鸡传染性鼻炎的综合防治

鸡传染性鼻炎(IC)是由鸡副嗜血杆菌(HPG)引起的一种急性呼吸道病.本病以鼻腔和鼻窦发炎、流鼻涕、打喷嚏、面部水肿并发结膜炎为主要特征,传播迅速,以育成鸡和青年鸡发病为主.本病多发于春季及秋冬季,与气温变化剧烈、潮湿、寒冷、通风不良等因素有关.综合防治措施如下.     

间接ELISA检测鸡传染性鼻炎抗体的研究

用副鸡嗜血杆菌Hpg-8菌株制备ELISA抗原,与抗鸡Ig单抗1B7酶结合物建立了检测鸡血清抗体水平的间接ELISA方法.交叉试验、阻断试验、重复性试验等表明该方法重复性好、特异性强、灵敏度高.确立了检测FLISA效价(ET)的回归方程y=1.421+0.299x)(P＞0.05),可用于定量测定.间接凝集试验与间接ELISA方法的比较试验表明,ELJSA法比间接凝集试验敏感性高3倍以上.     

新霉素阻断ELISA试剂盒的研制与应用

本研究旨在建立新霉素(Neomycin,NEO)免疫学检测试剂盒.以制备的抗NEO单克隆抗体(NEO mAb)为基础,建立阻断ELISA分析方法,组装新霉素阻断ELISA试剂盒,并对试剂盒的性能进行鉴定.结果表明,NEO试剂盒(NEO-kit)标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,相关系数R2=0.990 3;检测范围为1.0～64.0μg·L-1,半数抑制浓度(IC50)为2.59 μg·L-1,灵敏度为0.75 μg·L-1,检测限为1.0 μg·L1.试剂盒除了和NEO阳性样品反应呈阳性外,与庆大霉素、链霉素、土霉素、沙丁胺醇、环丙沙星、二氟沙星、磺胺嘧啶及磺胺甲噁唑等其他药物均无交叉反应性.奶样、饲料样及肉样的平均添加回收率为89.50%、89.58%和87.92%;平均批内和批间变异系数均小于15%,而且批间变异系数小于批内变异系数;基质对NEO-Kit的检测结果影响比较小;NEO-Kit在4℃可保存6个月以上.试剂盒和HPLC-MS-MS对牛奶中新霉素回收率没有显著差异(P≥0.05).试剂盒和HPLC-MS-MS对饲料样检测结果也无显著差异(P≥0.05).本研究成功研制出敏感、特异、准确的NEO检测试剂盒.     

应用间接酶联免疫吸附试验检测鸡传染性鼻炎抗体

本文应用聚苯乙烯塑料微量滴定板作为固液载体，辣根过氧物酶标记的羊抗鸡IgG为第二抗体，邻苯二胺为底物建立检测鸡传染性鼻炎抗体的间接酶联免疫吸附试验。对大庆市A、B、C三个种禽场的鸡群抽样采血检测，结果在被检的154份血清样品中，IC抗体阳性血样为35份，阳性检出率为22．8％。该方法具有快速、简便、敏感、特异等优点，适合于临床诊断和大批量样品检验。     

氯霉素残留检测阻断ELISA试剂盒的研制及性能测定

在建立氯霉素单克隆抗体（CAP mAb）杂交瘤细胞株和阻断ELISA方法的基础上．研制出CAP残留快速检测试剂盒（CAP-kit），并对其性能进行了测定。结果表明，CAP-kit的标准曲线呈典型的S型，符合4参数logit曲线拟合，相关系数R^2=0．9953，检测范围为1．0μg/L～128．0μg/L，灵敏度为0．85μg／L，半数抑制浓度（IC50）为7．54μg/L，检测限为1．0μg/L；牛奶样、猪肉样的平均添加回收率为88．3％、82．5％，平均批内和批间变异系数均〈15％；CAP-kit与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应（CR％）为150％，与其它酰胺醇类和抗菌素药物无交叉反应；试剂盒在4℃可保存6个月。     

猪附红细胞体病间接ELISA诊断试剂盒的研制及初步应用

以纯化的猪附红细胞体特异性抗原为包被抗原,在建立猪附红细胞体病间接ELISA检测方法的基础上对各反应参数进行了优化,并初步组装成试剂盒。组装的试剂盒抗原最佳包被质量浓度为30 mg/L,被检血清稀释度为1∶100,酶标二抗的最适工作滴度为1∶4 000,底物TMB最适反应条件为室温15 min;检测血清的判定标准为D450值≥0.13定为阳性反应,D450值≤0.11定为阴性反应,0.11~0.13定为疑似反应;该试剂盒不与猪大肠杆菌病、猪弓形虫病及猪瘟等阳性血清发生交叉反应,具有较好的特异性;在不同时间对阴阳性样品重复检测8次,阴阳性血清的D450值变异系数均未超过10%,说明该试剂盒具有良好的重复性;通过对组装试剂盒中各组分的稳定性和保存时间的测定结果证实,该试剂盒的保质期暂定为6个月;应用保存6个月的试剂盒通过对吉林省延边地区的60份猪血清样本检测,并与间接ELISA比较,其阳性符合率达100%,说明该试剂盒具有较好的稳定性。     

可乐定ELISA检测试剂盒的研制及其性能评价

本研究通过制备可乐定完全抗原,免疫新西兰大白兔,得到特异性多克隆抗体,并和HRP标记的羊抗兔,构建间接ELISA检测法试剂盒,并进行性能测试评价。结果表明,吸光度百分比值与赛庚啶质量浓度的对数在0.1-8.1μg/L呈线性关系,相关系数R₂为0.977,半数抑制浓度(IC₅₀)为0.675μg/L,检测限为0.2μg/L,回收率为81% ～109%,具备良好的特异性,可用于动物尿样、血清和组织中的可乐定残留检测。     

单抗阻断ELISA检测副鸡嗜血杆菌血清型特异性抗体的研究

本研究在副鸡嗜血杆菌Ａ、Ｃ型特异性单克隆抗体的基础上成功地建立了能区分Ａ、Ｃ血清型抗体的阻断ＥＬＩＳ诊断方法,并应用此法对９种常见病原体阳性血清及多份免疫鸡。     

用PCR诊断鸡传染性鼻炎的进一步研究：Ⅰ.病料收集时间

研究鸡传染性鼻炎（ＩＣ）的ＰＣＲ临床诊断方法时,对人工感染鸡进行了ＰＣＲ样品收集时间的研究,并与几种常用的ＩＣ诊断方法进行了比较。结果表明,试验鸡在感染１５ｄ扑杀后,临床症状阳性的鸡数明显下降;眶下窦粘液检查和细菌分离比临床症状检查敏感;细菌分离易污染,尤其是活鸡取样;ＰＣＲ方法敏感、准确,但其检测能力也随病程的结束而下降。适宜的ＰＣＲ样品收集时间建议为感染后的１～３周内。     

猪流行性腹泻病毒N蛋白阻断ELISA抗体检测方法的建立及初步应用

旨在建立一种猪流行性腹泻病毒(PEDV)N蛋白阻断ELISA抗体检测方法.本研究将纯化的N蛋白作为包被抗原,通过棋盘滴定法优化ELISA反应条件,建立了检测PEDV抗体的阻断ELISA方法,并对其进行特异性、敏感性和重复性试验.对140份临床血清样品进行检测,并将检测结果与市售IDvet PEDV间接ELISA抗体检测...