H9N2亚型禽流感病毒TJ1株的分离与鉴定

从发病蛋鸡群分离到H9N2亚型禽流感病毒TJ1株,对其进行了系统的生物学特性鉴定.结果表明,分离毒TJ1株具有血凝性,且凝集不被新城疫和产蛋下降综合征抗血清抑制,而被H9亚型禽流感病毒标准阳性血清抑制,禽流感琼扩试验结果为阳性,在电镜下呈典型的流感病毒粒子形态,证明该毒株为A型流感病毒;通过致病力试验,分离毒TJ1株对6周龄SPF鸡无致病性,为低致病性毒株;用其制备成油乳剂灭活疫苗免疫雏鸡,能很快产生对H9特异的血凝抑制抗体,于免疫后3周攻毒,可以保护雏鸡抵御同病毒攻击的感染,表明分离毒TJ1株具有良好的免疫原性.     

云南2株H4N6亚型禽流感病毒株的分离与鉴定

采集家禽喉气管作为检测样品,用甲型流感病毒M基因检测引物进行RT-PCR检测,确定样品为甲型流感病毒感染。用已建立的PCR法检测H5、H9亚型及新城疫结果为阴性。在9日龄鸡胚中进行病毒分离培养,收集48 h后死亡鸡胚尿囊液进行血凝和血凝抑制试验,有血凝效价但不能被H5、H7、H9和新城疫阳性血清抑制。为进一步确定病毒的亚型,用甲型流感病毒血凝素基因通用引物进行RT-PCR扩增、克隆及测序,将测得的HA基因序列与血凝素亚型标准序列进行比对,同源性为34.9%～87.3%,与H4亚型的同源性为87.3%;设计神经氨酸酶基因测序引物,将所测序列与神经氨酸酶亚型标准序列进行比对,同源性为47.7%～90.8%,与N6亚型的同源性高达90.8%。通过进行HA和NA基因序列比对,可以确定试验所分离到的2株甲型流感毒株为H4N6亚型禽流感病毒。     

不同检测抗原对H5亚型禽流感抗体检测结果的影响

禽流感（Avian Influenza,AI）是由A型流感病毒引起的禽类的一种急性高度致死性的传染病,尤其是高致病性禽流感（HPAI）,严重威胁着养禽业的生产。实行强制免疫是我国防控H5亚型禽流感的一项重要措施,血凝抑制试验（HI）检测禽流感抗体是对免疫效果进行评价的主要手段。随着H5亚型禽流感疫苗种毒株的不断更新,     

禽流感病毒检测方法标准比较及在国际能力验证上的应用

禽流感(AI)是由A型流感病毒引起的家禽和野禽的传染病,临床会出现各种各样的症状.因为受到感染的宿主、病毒毒株、免疫状态、继发感染和环境条件的影响,本病的常规诊断需进行病毒分离和鉴定.AI强毒株会引起高致病性禽流感(HPAI),目前发现的都属于H5或H7亚型,世界动物卫生组织(OIE)把这两个亚型的毒株均划分为通报性禽流感(NAI)病毒,可引起禽类烈性传染病.……     

鸭源禽流感病毒的分离鉴定及特性研究

从湖北某鸭场采集泄殖腔棉拭子20份,通过传统的禽流感病毒分离方法即鸡胚尿囊腔接种法分离到1株鸭源禽流感病毒(AIV).血清学试验表明,该病毒分离株为A型流感病毒,经血凝素亚型鉴定为H9型,与禽流感病毒H9亚型标准阳性血清的血凝抑制(HI)价为8 log2,电镜负染拍照后,可清楚观察到典型的流感病毒粒子形态;致病性试验表明,该流感病毒对鸡表现为较低的致病力.研究表明,水禽,特别是鸭,正日益成为禽流感的高度易感动物,是AIV生态循环中重要的一环.     

一株H9亚型禽流感病毒的分离鉴定及免疫试验

为了解养禽业禽病流行病毒株的基本情况,本研究对2014年从山东某鸡场采集的疑似流感的病料样品采用鸡胚尿囊腔接种进行病毒的分离,并经血凝试验(HA试验)、血凝抑制试验(HI试验)及分子生物学试验对其病原学进行鉴定。结果显示,分离鉴定到一株病毒分离株。HA试验结果表明该分离株具有血凝活性,经病毒亚型鉴定为一株H9亚型禽流感病毒(AIV),该病毒株为欧亚分支的BJ亚分支,将该病毒株筛选纯化后作为毒种,制备了禽流感油乳剂灭活疫苗,将该疫苗免疫SPF鸡,21 d后对其HI抗体效价进行检测,结果显示其平均效价达到9.1 log2,免疫后第35 d HI抗体平均效价达到峰值10.3 log2,至免疫后第10周,HI抗体平均效价仍达8.5 log2。本研究分离的病毒制备成疫苗后具有较好的免疫效果,可以作为疫苗候选株。     

禽流感的发病特征与防制措施

1病源特征禽流感病毒可分为A,B,C三型,其中B,C两型仅能对人致病,A型可对人、猪、马和禽致病。禽流感病毒属于A型流感病毒。A型流感病毒的血凝素已发现16种特异的血凝素亚型,分别以H1~H16命名。神经氨酸酶已发现10种亚型,分别以N1~N10命名。A型禽流感病毒对热的抵抗力较低,60℃10分     

禽流感实验室诊断监测方法的选择应用

<正>禽流感(avian influenza,AI)是由A型流感病毒引起的感染,可感染包括鸡、火鸡、鹅等家禽以及野鸟、海鸟等。因为其引起的疾病形式多样,可分为无致病性、低致病性和高致病性禽流感(HPAI)的。HPAI一旦暴发,将对当地的养禽业造成毁灭性的打击,农业部将此病列为一类动物传染病。禽流感病毒有众多亚型,其中按血凝素(HA)分有15种,神经氨酸酶(NA)有9种,各亚型之间抗原抗体存在交叉反应。目前已经建立了抗原检测方法如血凝/血凝抵制、免疫荧光、捕获ELISA、免疫     

高致病性禽流感及其防治

禽流感是由A型流感病毒引起的一种禽类传染病。从病原学角度看,病毒分为A、B、C三型,分别属于正粘病毒科下设的A型流感病毒属、B型流感病毒属、C型流感病毒属。B型和C型病毒属不易变异,A型病毒粒子呈多形性,容易变异,含有8个节段组成的单股RNA,呈螺旋对称,一种是血凝素(HA),另一种是神经氨酸酶(NA),现在已知的HA有16个亚型(H1￣H16),NA有9个亚型(N1￣N9),它们之间可以不同组成。其中,由H5和H7亚型毒株(以H5N1和H7N7为代表)所引起的疾病称为高致病性禽流感(HPAI)。1高致病性禽流感的临床症状高致病性禽流感潜伏期短(潜伏期几小…     

朗德鹅禽流感病毒的分离与鉴定

用禽流感病毒ELISA试剂盒对某朗德鹅养殖场的病鹅气管粘液进行了检测，发现5份粘液样本均呈禽流感阳性；随后取相应气管组织材料接种于9～11日龄鸡胚分离病毒．发现尿囊液能使鸡红细胞发生凝集，用禽流感病毒H5、H7、H9标准阳性血清和新城疫病毒、传染性支气管炎病毒、传染性喉气管炎病毒、传染性法氏囊炎病毒抗血清作HI试验，结果禽流感病毒H5亚型抗血清的血凝抑制滴度达到2^7，而禽流感病毒H7、H9亚型及其他病毒抗血清无血凝抑制滴度，说明从朗德鹅分离到的病毒为H5亚型禽流感病毒。     

要以科学的态度对待禽流感

<正> 禽流感是禽流行性感冒的简称,是由A型流感病毒引起的传染病。流感病毒根据核蛋白(NP)和膜蛋白(MP)抗原特性及其基因特性的不同,可分为A、B、C 3种血清型,其中A型流感病毒能感染多种动物,包括人、禽、猪、马、海豹等,B型和C型则主要感染人。A型流感病毒根据血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)的抗原性差异,可将其分为不同的亚型,分别以H1-H15、N1-N9命名。到目前为止,A型流感病毒已发现的15个血凝素亚型和9个神经氨酸酶亚型均属从禽中分离到,因此,有人认为禽是流感病毒的     

2017—2018年华东地区H9亚型禽流感病毒分离毒株的抗原差异分析

为掌握华东地区H9亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)的流行情况及变异程度,采集临床疑似病料和活禽交易市场家禽的棉拭子样品,通过鸡胚接种、HA和HI试验及RT-PCR等方法分离鉴定H9 AIV,对其中部分毒株进行测序和序列分析,筛选4个代表毒株免疫SPF鸡制备抗血清,利用交叉血凝抑制试验测定抗原差异性。结果如下:共分离鉴定出62株H9亚型禽流感病毒,分离率为2.02%(62/3 074)。对25株H9亚型禽流感病毒株序列分析发现,分离株属于h9.4.2.5谱系,并进一步细分为A和B亚系。 HA 基因裂解位点氨基酸为PSRSSR↓G,符合低致病性禽流感病毒的特征。与Y280代表株 HA 基因的推导氨基酸相比,分离株受体结合位点左侧臂全部变为NGLMGR。在抗原位点92位氨基酸出现R(64%)/K(36%)的变化。交叉血凝抑制试验结果表明分离株间的HI抗体滴度相差2~8 log2,可分为2类抗原型。因此,目前流行的H9亚型AIV发生了抗原变异,至少同时存在两种抗原型。     

家畜流感病毒的循环

A型流感毒株的起源和进化研究的还不充分。近十年来获得了能证明有利于人和动物流感病毒起源的共同性假说的某些事实。由人、马、猪和禽分离的所有A型流感病毒都具有共同的型别特异的核糖核酸抗原,其实它们的表面抗原(血凝素和神经氨酸酶)有着本质的区别。根据从每种宿主分离的毒株可分为许多亚型和抗原变异型。现在根据血凝素可将A型流感病毒分为16个亚型:H_0.H_1、H_2.H_3—人,Hsw—猪,Heql和Heq2—马,Hav1到Hav9—禽;根据神经氨酸酶则分为10个亚型:N_1和N_2—人,Neq1和Neq2—马,Hav1到Hav6—禽。等(1978)推测,不仅一定的病毒种,而且病毒的血凝素和神经氨酸酶编码的单个基因都能在哺乳动物和禽之间循环。当然,这些基因并不能独立生存,而是存在于相应的病毒重组体内。     

马流感病毒的分离及其亚型的初步鉴定

1994年春我国西宁市附近暴发了马流感。本试验从现地典型发病又未经治疗的马采集了鼻甲、鼻分泌物、脾、咽、血液,用9～11日龄SPF鸡胚尿囊腔接种、传代,进行病毒分离。最后从脾和鼻甲粘膜分离到2株病毒,经血凝试验和电镜检查,证明是马流感病毒,经标准毒株和抗标准毒株亚型抗血清以及现地采集的耐过马血清交叉进行血凝抑制试验证明该病毒为A型流感病毒A2亚型,命名为A/马-2/西宁/94。     

1株H3N8亚型马流感病毒的分离鉴定及全基因进化分析

2013年8月某养马厂出现疑似马流感疫情,经分离鉴定为H3N8亚型马流感病毒。为了了解该H3N8马流感分离株(A/equine/Xuzhou/01/2013(H3N8))的基因进化情况,本试验比较了该病毒株,我国已报道的H3N8马流感毒株以及目前全球所使用的疫苗株的病毒基因型,也比较了与抗原性相关的氨基酸的变化情况,为科学防控马流感提供参考依据。采集病死马的内脏样本,进行了A型禽流感病毒通用荧光RT-PCR检测,将荧光RT-PCR检测阳性样品处理后接种鸡胚尿囊腔,检测分离毒尿囊液血凝性及HA效价。参照已发表的扩增H3N8马流感病毒全基因引物,经RT-PCR扩增出该H3N8亚型马流感病毒(A/equine/Xuzhou/01/2013(H3N8))的8个基因片段,对其测序构建基因进化树,并进行分子特征分析。经过比较分析,该病毒株的HA基因在遗传进化上属于佛罗里达Ⅱ型马流感病毒,其余7个片段都属于马流感病毒中的美洲型。在5个公认的抗原位点中,A/equine/Xuzhou/01/2013与我国2007年的分离株(A/donkey/Xinjiang/2007),目前的疫苗株(Miami/63,Kentucky/81,Suffolk/89,Newmarket/2/93和Avesta/93)相比均发生了一些位点的变异。我国H3N8亚型马流感病毒存在抗原变异,需要进一步对其致病性、免疫原性等特性进行研究,同时还需加强马流感病毒分子流行病学监测。     

庄河市高致病性禽流感的抗体监测与免疫程序

高致病性禽流感(HPAI)是由正粘病毒科流感病毒属A型流感病毒引起的,不仅血清型多,而且自然界中带毒动物多,毒株易变异,防制困难大。为使我市高致病性禽流感得到有效控制,采用血凝与血凝抑制试验诊断技术方式,通过疫苗免疫对比试验     

蛋鸡流感和传染性支气管炎的防控

正禽流感是由正黏病毒科A型流感病毒属的禽流感病毒引起的各种综合征。传染性支气管炎由传染性支气管炎病毒引起,其特征是病鸡出现咳嗽、喷嚏和气管等呼吸道症状。1禽流感禽流感病毒的抗原性复杂,目前,已经鉴定出的血凝素亚型有16种(H1~H16),神经氨酸酶亚型有10种(N1~N10)。对鸡高致病性的禽流感病毒以H5亚型毒株最为常见,可引起严重的全身性、出血性败血症;而对鸡低致病性的     

同一禽流感疫苗在鸡和鸭体内免疫试验比较

禽流感是A型流感病毒引起的禽类烈性传染病，禽流感病毒的表面抗原分为16种不同的血凝素(H1～H16)和10种不同的神经氨酸酶(N1-N10)，它们以不同的配对组合形式对各种禽类产生治病作用。2004年1月我国广西隆安发生首例H5NI亚型高致病性禽流感疫情以来，全国普遍采用疫苗免疫来预防禽流感，而疫苗在不同禽体内的抗体产生时间、滴度高低、有效抗体维持时间是否一致无法确定。     

做好高致病性禽流感HI试验的几点建议

高致病性禽流感是由A型流感病毒引起的一种禽类的毁灭性传染病,被世界卫生组织(OIE)定为A类动物传染病,我国规定为一类传染病。在对高致病性禽流感进行检测中,分离病毒的血凝性、鉴定血凝素亚型及免疫抗体监测时,微量血凝抑制(HI)试验是最常用的方法之一。该方法操作相对简单、特异     

我国H9N2亚型禽流感病毒血凝素蛋白145和153位抗原位点变异分析

H9N2亚型禽流感病毒(AIV)血凝素蛋白(HA)易发生抗原漂移,但识别我国H9N2亚型AIV流行株抗原差异性的关键抗原位点还不清楚.选取两株血凝抑制(HI)效价高的H9N2亚型AIV单克隆抗体2E4与2D6对A/Chicken/Shanghai/F/1998(H9N2)毒株施加抗体压力制备单抗逃逸突变株,鉴定抗原位点...